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聚合物纤维载体对L929细胞的增殖及毒性研究
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作者 李长金 李杰 +3 位作者 李晓敏 张朝旭 张正 郭子芳 《现代塑料加工应用》 CAS 北大核心 2024年第2期5-8,共4页
研究了进口聚合物纤维载体(1#)与国产聚合物纤维载体(2#和3#)对L929细胞增殖与毒性的影响。用CCK-8法在不同浸提液含量、不同培养时间下检测L929细胞在聚合物纤维载体中的相对增殖率。按通用标准评价材料的细胞毒性,并对载体表面和内部... 研究了进口聚合物纤维载体(1#)与国产聚合物纤维载体(2#和3#)对L929细胞增殖与毒性的影响。用CCK-8法在不同浸提液含量、不同培养时间下检测L929细胞在聚合物纤维载体中的相对增殖率。按通用标准评价材料的细胞毒性,并对载体表面和内部的细胞黏附性进行表征。结果表明:浸提液质量分数在6.25%~100.00%时,1#组、2#组、3#组均没有潜在细胞毒性,1#组、2#组、3#组的细胞毒性级别分别为“1”“0”和“1”级。体外细胞培养试验表明:在24 h的培养时间内,2#组、3#组的细胞增殖率和1#组基本接近;48~72 h的培养时间内,2#组、3#组的细胞增殖率略低于1#组。细胞黏附试验表明:2#组、3#组的细胞增殖率高于1#组,且细胞倾向于在纤维载体的内部生长。国产聚合物纤维载体的生物相容性、细胞毒性以及细胞黏附性均达到理想效果,其中3#组聚合物纤维载体的细胞增殖和细胞黏附效果最理想。 展开更多
关键词 纤维载体 细胞毒性 l929细胞 CCK-8试验
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L929细胞无血清悬浮驯化及其在流产衣原体灭活疫苗中的应用研究
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作者 刘东慧 李兆才 +6 位作者 梁林 谭书敏 闫海全 白天俊 王淑芳 闫文军 周继章 《中国兽药杂志》 2024年第4期1-13,共13页
为通过悬浮细胞培养方法规模化生产流产衣原体抗原,采用逐步降血清悬浮驯化法使贴壁L929细胞逐步适应悬浮培养环境,最终获得了一株可无血清悬浮培养的L929细胞株。将流产衣原体接种于L929悬浮细胞上,研究不同的促感染试剂以提高收菌量,... 为通过悬浮细胞培养方法规模化生产流产衣原体抗原,采用逐步降血清悬浮驯化法使贴壁L929细胞逐步适应悬浮培养环境,最终获得了一株可无血清悬浮培养的L929细胞株。将流产衣原体接种于L929悬浮细胞上,研究不同的促感染试剂以提高收菌量,并选择出最佳的培养方法制备流产衣原体灭活疫苗。以25μL、50μL、100μL的剂量免疫Balb/c小鼠,攻毒后检测其免疫保护效果。结果显示,当该L929悬浮细胞初始接种密度为5×10^(5)/mL时,培养72 h后细胞浓度可达到约7×10^(6)/mL,细胞活力在95%以上;在细胞密度为6×10^(6)/mL,接菌量为5.5×10^(4) IFU/mL,加入脂质体2000的量为1.7μL/mL、放线菌酮浓度为0.4μg/mL时,菌量增殖倍数最大,48 h内约扩增了52倍。经流产衣原体悬浮培养细胞灭活疫苗免疫后,小鼠产生的抗体水平随免疫剂量的增加而提升;接种50μL、100μL疫苗组小鼠的脾淋巴细胞增殖水平、IFN-γ、IL-2的含量远高于接种25μL疫苗和注射PBS组的小鼠;对免疫后的小鼠进行攻毒,接种疫苗组小鼠的脾脏、十二指肠、子宫中的流产衣原体基因组含量远低于未接种疫苗组小鼠。注射PBS组及接种25μL疫苗组的小鼠子宫出现了不同程度的坏死及炎症,而其余两组小鼠的子宫无异常变化。结果表明,本试验成功驯化出1株L929悬浮培养细胞株,并且通过悬浮培养工艺制备的流产衣原体灭活疫苗免疫效果良好,接种50μL、100μL该灭活疫苗可以有效抑制流产衣原体的感染,该L929细胞全悬浮培养株的成功驯化为疫苗规模化生产提供了技术支持。 展开更多
关键词 l929贴壁细胞 悬浮培养驯化 流产衣原体 灭活疫苗 免疫评价
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载富血小板血浆水凝胶对L929细胞氧化损伤的保护作用
3
作者 王自林 牟秋菊 +2 位作者 刘宏杰 申玉雪 祝丽丽 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第4期771-779,共9页
背景:在慢性创面愈合过程中,活性氧的过量生成可能会损害L929成纤维细胞的功能,从而延缓创面修复,因此保护成纤维细胞免受氧化应激的影响对于促进创面愈合非常重要。目的:评估羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素/富血小板血浆(CMC-OCS/PRP)水... 背景:在慢性创面愈合过程中,活性氧的过量生成可能会损害L929成纤维细胞的功能,从而延缓创面修复,因此保护成纤维细胞免受氧化应激的影响对于促进创面愈合非常重要。目的:评估羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素/富血小板血浆(CMC-OCS/PRP)水凝胶对H2O2刺激下L929细胞的保护作用。方法:制备CMC-OCS/PRP水凝胶,表征水凝胶的微观形貌、降解性能、清除H2O2与羟基自由基的能力及生物相容性。取生长状态良好的L929细胞,分5组培养:对照组常规培养,H2O2组加入H2O2,CMC-OCS组加入羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素水凝胶浸提液+H2O2,PRP组加入富血小板血浆凝胶浸提液+H2O2,CMC-OCS/PRP组加入羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素/富血小板血浆水凝胶浸提液处理+H2O2,每组先加入水凝胶浸提液处理6 h,然后再加入H2O2处理24 h。培养结束后,检测细胞活性氧及丙二醛水平,细胞凋亡、胶原纤维Ⅰ蛋白表达。在加入H2O2的情况下,将上述水凝胶浸提液分别与L929成纤维细胞直接或间接共培养36 h,通过划痕实验、Transwell小室实验检测细胞的迁移能力。结果与结论:①CMC-OCS/PRP水凝胶具有均匀相互关联的多孔结构及良好的降解能力,体外可有效清除H2O2与羟基自由基,并且具有良好的生物相容性;②与对照组比较,H2O2组细胞凋亡率、细胞活性氧与丙二醛水平升高(P<0.05),细胞铺展面积减少(P<0.05),胶原纤维Ⅰ蛋白表达无明显变化(P>0.05);与H2O2组比较,CMC-OCS组、CMC-OCS/PRP组细胞活性氧水平降低(P<0.05),PRP组、CMC-OCS组、CMCOCS/PRP组丙二醛水平降低(P<0.05)、细胞铺展面积增加(P<0.05),CMC-OCS/PRP组细胞凋亡率降低(P<0.05),PRP组、CMC-OCS组、CMCOCS/PRP组胶原纤维Ⅰ蛋白表达增加(P<0.05);③与对照组比较,H2O2组细胞迁移数量减少(P<0.05),迁移面积无明显变化(P>0.05);与H2O2组比较,PRP组、CMC-OCS组、CMC-OCS/PRP组细胞迁移数量、迁移面积均增加(P<0.05),并且以CMC-OCS/PRP组增加最显著;④在氧化应激条件下,CMC-OCS/PRP水凝胶可改善成纤维细胞的迁移能力,抗细胞凋亡并保护细胞伸展功能。 展开更多
关键词 富血小板血浆 羧甲基壳聚糖 氧化硫酸软骨素 水凝胶 l929细胞 抗氧化
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L929细胞株生物学特性的初步研究 被引量:2
4
作者 王承龙 李卫民 王绮如 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第4期380-384,共5页
对L929细胞株的生物学特征进行了初步研究。结果表明,该L929细胞株是一株易于培养、集落清晰的雄性细胞。集落形态分为致密型与疏散型2种,集落生成数与血清浓度在1%~10%之间呈明显剂量依赖性,细胞倍增时间25.49小时。L929细胞株的生... 对L929细胞株的生物学特征进行了初步研究。结果表明,该L929细胞株是一株易于培养、集落清晰的雄性细胞。集落形态分为致密型与疏散型2种,集落生成数与血清浓度在1%~10%之间呈明显剂量依赖性,细胞倍增时间25.49小时。L929细胞株的生物学特征符合成纤维细胞的生物学特征。 展开更多
关键词 l929细胞株 l929-CM 细胞培养 染色体 融合状态
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磁性附着体中铁素体不锈钢引起小鼠成纤维细胞L929的死亡模式 被引量:25
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作者 战德松 吕娇 +2 位作者 赵奇 于学垠 徐孝荣 《金属学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期892-896,共5页
通过3种不同浓度的不锈钢浸提液处理体外培养的小鼠成纤维细胞L929,采用流式细胞术PI染色法检测L929细胞的凋亡率及细胞周期分布情况,并用电镜观察细胞凋亡的形态.同时应用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白结合碘化丙啶染色双参数技术对... 通过3种不同浓度的不锈钢浸提液处理体外培养的小鼠成纤维细胞L929,采用流式细胞术PI染色法检测L929细胞的凋亡率及细胞周期分布情况,并用电镜观察细胞凋亡的形态.同时应用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白结合碘化丙啶染色双参数技术对细胞死亡类型进行定量检测.与Tilite含钛医用合金、Co-Cr合金相比较的结果表明,26-1超纯铁素体不锈钢是以时间依赖的方式诱导L929细胞凋亡,凋亡率与浸提液呈浓度依赖关系.26-1超纯铁素体不锈钢符合临床应用材料的生物相容性要求,可以用于对磁性附着体的外包裹并可安全地应用于临床. 展开更多
关键词 磁性附着体 铁素体不锈钢 凋亡 成纤维细胞l929
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以L929细胞为滋养层的尿道黏膜上皮细胞体外培养 被引量:12
6
作者 翟弘峰 李森恺 +2 位作者 刘红 李养群 徐军 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第5期414-417,共4页
目的 探索尿道黏膜上皮细胞体外培养的技术和方法 ,为进一步采用组织工程技术构建尿道黏膜组织奠定基础 ,并为尿道黏膜的生理、药理、毒理学及微生态研究提供实验模型。 方法 取刚离乳的雄性新西兰幼兔尿道黏膜组织 ,分别以 Dispase... 目的 探索尿道黏膜上皮细胞体外培养的技术和方法 ,为进一步采用组织工程技术构建尿道黏膜组织奠定基础 ,并为尿道黏膜的生理、药理、毒理学及微生态研究提供实验模型。 方法 取刚离乳的雄性新西兰幼兔尿道黏膜组织 ,分别以 Dispase 消化液和混合消化液消化成单细胞悬液 ,以差速贴壁法排除成纤维细胞 ,接种后以 L92 9细胞为滋养层细胞进行培养 ,定期换液 ,细胞生长、增殖至 80 %~ 90 %融合时传代。细胞进行常规 HE染色、流式细胞仪检测 ,以扫描电镜、透射电镜观察其超微结构。再分别设立实验组 (n=2 0 )、阳性对照组 (正常尿道黏膜组织石蜡切片 ,n=2 0 )及阴性对照组 (成纤维细胞铺片 ,n=2 0 )行免疫组织化学染色。 结果 原代培养 10天左右细胞逐渐生长融合成片 ,如铺路石状 ,细胞大小均一。上皮细胞为二倍体细胞 ,生长期内均为单一的上皮细胞 ,无成纤维细胞混杂生长 ,细胞可传 11~ 13代 ,成活 5 0~ 6 0天。 结论 新西兰幼兔尿道黏膜上皮细胞可在体外进行培养 ,在一定时间内保持增殖活力 ,为构建组织工程化尿道奠定了基础 ,且为尿道黏膜的体外研究提供了实验模型。 展开更多
关键词 l929细胞 滋养层 尿道黏膜上皮细胞 体外培养 组织工程
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去甲斑蝥素诱导小鼠肺纤维瘤L929细胞凋亡 被引量:25
7
作者 安巍巍 薛莲 +3 位作者 王敏伟 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第1期22-25,共4页
   目的:研究去甲斑蝥素 (norcantharidin,NCTD)抑制小鼠肺纤维瘤 (L929)细胞的作用机制。方法:用MTT法测定细胞生长抑制率。采用Hoechst33258染色、DNA凝胶电泳和乳酸脱氢酶 (LDH)活力检测细胞凋亡。用免疫印迹法(Westernblot)分析...    目的:研究去甲斑蝥素 (norcantharidin,NCTD)抑制小鼠肺纤维瘤 (L929)细胞的作用机制。方法:用MTT法测定细胞生长抑制率。采用Hoechst33258染色、DNA凝胶电泳和乳酸脱氢酶 (LDH)活力检测细胞凋亡。用免疫印迹法(Westernblot)分析了细胞外信号调节激酶 (extracellularsignal regulatedkinase, ERK)和磷酸化ERK、c JunN 末端激酶 (C JunN terminalkinase, JNK)和磷酸化JNK蛋白表达的变化。结果:NCTD诱导L929细胞凋亡。JNK抑制剂 (SP600125)与ERK抑制剂(PD98059),可明显抑制NCTD对细胞的杀伤作用。同时磷酸化ERK和磷酸化JNK表达增加。结论:NCTD对L929细胞的细胞毒作用是通过诱导其凋亡而发生的,且呈时间剂量依赖性。这种作用可能与JNK,ERK通路激活有关。 展开更多
关键词 小鼠肺纤维瘤 l929细胞 去甲斑蝥素 凋亡 细胞外信号调节激酶 C-JUN N-末端激酶
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5种牙体修复材料对L929细胞凋亡及相关基因的影响 被引量:13
8
作者 王学 章非敏 +3 位作者 刘梅 殷雪萌 顾宁 光寒冰 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期250-253,共4页
目的研究新型硅藻土可切削陶瓷及临床常用口腔修复材料对L929细胞致凋亡作用。方法提取新型硅藻土可切削陶瓷及其他4种口腔材料的浸提液作用于细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程及诱导细胞凋亡作用;Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试... 目的研究新型硅藻土可切削陶瓷及临床常用口腔修复材料对L929细胞致凋亡作用。方法提取新型硅藻土可切削陶瓷及其他4种口腔材料的浸提液作用于细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程及诱导细胞凋亡作用;Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒对细胞死亡类型进行检测;逆转录聚合酶链反应检测Bcl-2和Bax基因的表达。结果各实验组对细胞周期均无特殊影响,新型陶瓷组凋亡率与阴性组接近(P>0.05)。树脂组凋亡率最高,细胞坏死水平也显著提高,与新型陶瓷组间差异有统计学意义(P<0.05)。新型陶瓷组Bcl-2和Bax mRNA表达水平与阴性组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论新型硅藻土可切削陶瓷无明显细胞毒性,符合临床应用要求。 展开更多
关键词 硅藻土可切削陶瓷 l929细胞 细胞凋亡
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氧化苦参碱对L929肿瘤细胞免疫抑制作用的影响 被引量:10
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作者 刘欣燕 王润田 +4 位作者 崔瀓 王智华 佟慧 邓郁青 张征峥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期216-220,共5页
目的:体外研究氧化苦参碱(MOX)对L929肿瘤细胞(L929)免疫抑制作用的影响。方法:获取经MOX作用后再培养的L929培养上清,以不经MOX作用同步培养的L929培养上清作对照,检测上清对小鼠脾细胞5项免疫功能的影响(包括NK杀伤和ConA诱导转化,MTT... 目的:体外研究氧化苦参碱(MOX)对L929肿瘤细胞(L929)免疫抑制作用的影响。方法:获取经MOX作用后再培养的L929培养上清,以不经MOX作用同步培养的L929培养上清作对照,检测上清对小鼠脾细胞5项免疫功能的影响(包括NK杀伤和ConA诱导转化,MTT法;细胞表面IL-2Rα、CD3ε+ζ+和CD3ε-ζ+表达水平,流式细胞术法)和上清中4种免疫抑制分子的浓度(包括TGF-β1、PGE2、VEGF和IL-10,定量ELISA法)。分析MOX影响L929免疫抑制作用与影响L929免疫抑制分子分泌之间的关系。结果:不经MOX作用同步对照培养的L929培养上清(C-S1、C-S2),可稳定地测到所测4种免疫抑制分子(以TGF-β1和PGE2浓度最高),和稳定地抑制所测小鼠脾细胞5项免疫功能(C-S1比C-S2,P>0.05)。经MOX作用后的L929,其第一次再培养上清(MOX-S1),4种免疫抑制分子的浓度及对5项免疫功能的抑制均明显低于对照上清(C-S1);其第二次再培养上清(MOX-S2)与MOX-S1相比,4种抑制分子浓度无明显变化(P>0.05),除对CD3ε+ζ+的抑制作用明显降低外(P<0.01),对其余4项免疫功能的抑制作用亦无明显变化(P>0.05)。相关分析显示,MOX下调L929对小鼠脾细胞ConA诱导转化及IL-2Rα和CD3ε-ζ+表达的抑制与下调TGF-β1和PGE2分泌显著正相关,下调对NK杀伤的抑制与下调TGF-β1分泌显著正相关。结论:氧化苦参碱可显著下调L929免疫抑制分子分泌而显著下调L929肿瘤细胞的免疫抑制作用,下调肿瘤细胞免疫抑制作用可能是其抗瘤新机制之一。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 免疫抑制分子 免疫抑制 l929
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4种牙科金属材料对成纤维细胞L929凋亡相关基因及蛋白表达的影响 被引量:6
10
作者 孟贺 丁洁 +2 位作者 李任 梁锐英 吴文慧 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期242-246,共5页
目的研究4种不同牙科金属材料(金合金、银钯合金、钴铬合金、镍铬合金)浸提液对小鼠成纤维细胞L929凋亡相关基因及蛋白表达的影响。方法以金合金(A组)、银钯合金(B组)、钴铬合金(C组)、镍铬合金(D组)的浸提液体外培养小鼠成纤维细胞L929... 目的研究4种不同牙科金属材料(金合金、银钯合金、钴铬合金、镍铬合金)浸提液对小鼠成纤维细胞L929凋亡相关基因及蛋白表达的影响。方法以金合金(A组)、银钯合金(B组)、钴铬合金(C组)、镍铬合金(D组)的浸提液体外培养小鼠成纤维细胞L929,并以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基作为阴性对照(E组)。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了4种牙科金属材料浸提液对L929细胞凋亡相关基因caspase-3、8、9 mRNA和蛋白表达的影响。结果 4种牙科金属材料浸提液培养小鼠L929细胞48 h后,除A组与E组间差异无统计学意义外,各组间caspase-3 mRNA及caspase-9 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。各组间caspase-8 mRNA差异无统计学意义。除A组与C组、B组与D组间差异无统计学意义外,caspase-3及caspase-9蛋白表达差异有统计学意义,各组间caspase-8蛋白差异无统计学意义。结论 4种牙科金属材料,除金合金外,均诱导小鼠成纤维细胞L929凋亡相关基因表达增加,金属离子可能通过线粒体通路诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 牙科金属 浸提液 成纤维细胞l929 凋亡 免疫组织化学
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吴茱萸碱在诱导小鼠纤维肉瘤L929细胞凋亡过程中对细胞周期的阻滞作用 被引量:7
11
作者 张莹 张起辉 +3 位作者 吴立军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第S1期169-172,共4页
目的研究吴茱萸碱体外诱导 L929细胞死亡的机制。方法用 MTT 法测定吴茱萸碱对 L929的细胞毒作用。通过倒置显微镜,荧光染色,观察 L929在吴茱萸碱作用下的形态学变化,用 LDH 活力测定法证明凋亡途径,用流式细胞分析技术研究昊茱萸碱对... 目的研究吴茱萸碱体外诱导 L929细胞死亡的机制。方法用 MTT 法测定吴茱萸碱对 L929的细胞毒作用。通过倒置显微镜,荧光染色,观察 L929在吴茱萸碱作用下的形态学变化,用 LDH 活力测定法证明凋亡途径,用流式细胞分析技术研究昊茱萸碱对细胞周期的影响。结果 MTT 法测定不同浓度吴茱萸碱明显抑制 L929生长,并具有剂量依赖性。吴茱萸碱可诱导 L929凋亡,呈现凋亡小体,亚二倍体峰出现,但无典型因凋亡引起的 DNA 梯状泳带。低剂量5μmol·L^(-1)吴茱萸碱可将细胞周期阻滞在 G_2/M 期,而高剂量20μmol·L^(-1)吴茱萸碱可将细胞周期阻滞在 G_0/G_1 期。结论在吴茱萸碱诱导 L929凋亡过程中低剂量将细胞周期阻滞在 G_2/M 期,而高剂量则引起 G_0/G_1期阻滞。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 小鼠纤维肉瘤 l929细胞 细胞凋亡 细胞周期
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羧甲基壳聚糖温敏凝胶对小鼠L929细胞增殖的影响 被引量:7
12
作者 穆玉 陈乃玲 +2 位作者 彭伟 来卫东 张俊梅 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第4期363-365,I0005,共4页
目的:研究自制羧甲基壳聚糖温敏凝胶对小鼠肺成纤维细胞(L929)增殖的影响及其组织相容性。方法:用羧甲基壳聚糖(CMCS)与甘油磷酸盐(GP)互配,制备羧甲基壳聚糖温敏凝胶,22只小鼠分为正常对照组1只、空白对照组3只,2%凝胶组和5%凝胶组各9... 目的:研究自制羧甲基壳聚糖温敏凝胶对小鼠肺成纤维细胞(L929)增殖的影响及其组织相容性。方法:用羧甲基壳聚糖(CMCS)与甘油磷酸盐(GP)互配,制备羧甲基壳聚糖温敏凝胶,22只小鼠分为正常对照组1只、空白对照组3只,2%凝胶组和5%凝胶组各9只。采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)分别测定质量浓度为50、10、2、0.4、0.08倍的羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对体外培养的L929细胞的增殖情况;分别将2%和5%的温敏凝胶植入小鼠皮下,于3、7、14d处死,常规组织切片,HE染色观察凝胶周围组织的炎症反应。结果:培养24h^96h,0.4倍及0.08倍浸提液组与阴性和阳性对照组的OD值差异有统计学意义(P<0.05);培养48、72、96h后,除50倍浸提液组外其余各实验组与阴性和阳性对照组的OD值差异有统计学意义(P<0.05),其中0.4倍浸提液促细胞增殖作用最为明显;凝胶植入后前3d,实验组以急性炎症为主,随着时间的延长各实验组炎症细胞逐渐减少至消失。结论:羧甲基壳聚糖温敏凝胶对L929细胞有明显的促进作用,且具有良好的组织相容性,在牙周病治疗中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 羧甲基壳聚糖 l929细胞 凝胶类 牙周病学 细胞增殖 组织工程 小鼠 近交BALBC疾病模型 动物
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青蒿琥酯逆转L929肿瘤细胞的免疫抑制作用 被引量:4
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作者 刘欣燕 王润田 +4 位作者 崔澂 王智华 佟慧 邓郁青 张征峥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期985-988,共4页
目的:体外研究青蒿琥酯(ART)逆转L929肿瘤细胞(L929)的免疫抑制作用。方法:获取经ART作用后再培养的L929培养上清和不经ART作用同步对照培养的L929培养上清,检测上清对小鼠脾细胞4项免疫功能的影响(包括NK杀伤和ConA诱导转化:MTT法;细... 目的:体外研究青蒿琥酯(ART)逆转L929肿瘤细胞(L929)的免疫抑制作用。方法:获取经ART作用后再培养的L929培养上清和不经ART作用同步对照培养的L929培养上清,检测上清对小鼠脾细胞4项免疫功能的影响(包括NK杀伤和ConA诱导转化:MTT法;细胞表面CD4+和CD8+表达水平:流式细胞术法)和上清中4种免疫抑制分子的浓度(包括TGF-β1、PGE2、VEGF和IL-10:定量ELISA法)。分析青蒿琥酯逆转L929的免疫抑制作用与其下调L929免疫抑制分子分泌之间的关系。结果:同步对照培养的L929的上清,可稳定地检测到所测4种免疫抑制分子(TGF-β1和PGE2浓度最高)和对所测小鼠脾细胞4项免疫功能的显著抑制作用(C-S1与C-S2相比,P>0.05)。对ART作用后的L929:其第一次再培养上清(ART-S1)与相应对照上清(C-S1)相比,4种免疫抑制分子的浓度及对小鼠脾细胞NK杀伤、ConA诱导转化和CD4+CD8-表达的抑制作用显著降低(P<0.01);其第二次再培养上清(ART-S2)与ART-S1相比,除IL-10浓度轻度上升(P<0.05)和对小鼠脾细胞CD4-CD8+表达的抑制作用轻度降低(P<0.05)外,余无显著变化(P>0.05)。相关分析显示,ART逆转L929对小鼠脾细胞NK杀伤、ConA诱导转化及CD4+CD8-表达的抑制,与其下调L929分泌TGF-β1(r=0.971、r=0.984、r=0.990,P<0.05)、PGE2(r=0.960、r=0.981、r=0.982,P<0.05)及VEGF(r=0.970、r=0.992、r=0.982,P<0.05)显著正相关。ART逆转L929对小鼠脾细胞CD4-CD8+表达的抑制,可能与其下调L929其它免疫抑制分子分泌有关。结论:ART可通过下调L929免疫抑制分子分泌而逆转其免疫抑制作用,逆转肿瘤免疫抑制应是ART抗瘤新机制之一。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 逆转 肿瘤 l929 免疫抑制 免疫抑制分子
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oridonin部分通过TNFα信号转导途径诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡 被引量:4
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作者 黄健 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期471-475,共5页
目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24&... 目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24·8±1·2)μmol·L-1和(20·9±1·9)μg·L-1。Oridonin和TNFα均能引起L929细胞凋亡形态学变化,TNFα处理过的细胞在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的凋亡DNA梯状条带,但是oridonin处理的细胞却不能,称之为非典型凋亡;caspase-3,-8抑制剂和caspase家族抑制剂能明显得促进25μmol·L-1oridonin和20μg·L-1TNFα诱导的L929细胞凋亡,caspase-9抑制剂只能促进oridonin诱导的L929细胞凋亡;ERK的抑制剂PD98059能明显的抑制oridonin和TNFα诱导的L929细胞凋亡,但是p38的抑制剂SB203580只能抑制TNFα诱导的L929细胞凋亡;在L929细胞中oridonin能促进内源性pro-TNFα的表达和其上游蛋白IκB的磷酸化。结论Oridonin通过激活转录因子NF-κB而促进内源性pro-TNFα的表达,并且部分通过细胞因子TNFα信号转到途径诱导L929细胞凋亡。 展开更多
关键词 ofidonin TNFΑ l929细胞 凋亡 CASPASE MAPK
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苯胺对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性评价 被引量:5
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作者 蒋伟 朱洪坤 清江 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期256-261,共6页
探讨不同浓度的苯胺化合物对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性作用,为满足危险化学品分类鉴定和风险评估需求、更好地预防环境化合物对人体健康的损害提供理论依据。体外培养L929细胞,分别将不同浓度的苯胺化合物(0、0.001、0.01、0.1、1... 探讨不同浓度的苯胺化合物对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性作用,为满足危险化学品分类鉴定和风险评估需求、更好地预防环境化合物对人体健康的损害提供理论依据。体外培养L929细胞,分别将不同浓度的苯胺化合物(0、0.001、0.01、0.1、1、10μg·mL^(-1))加入培养基中处理细胞,在不同时间点分别取材,MTT检测细胞增殖率,AO/PI染色检测细胞存活率,Annexin V-PI染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,相关检测试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)的含量及总谷胱甘肽的含量。结果表明,高浓度(1、10μg·mL^(-1))的苯胺化合物对L929细胞的生长和增殖具有显著的抑制效应。即使浓度降低至0.1μg·mL^(-1),在处理48 h后,细胞的存活数量显著下降,说明其对细胞增殖具有浓度和时间的累积效应和依赖性。同时,对各组细胞采用流式细胞仪测定细胞凋亡,发现低浓度的苯胺对细胞凋亡影响并不明显,但高浓度的苯胺处理后,细胞凋亡和坏死数量显著增加。ROS含量和GSH含量检测结果显示,较低浓度的苯胺对细胞氧化应激反应并无显著影响,但浓度至0.1μg·mL^(-1)时,细胞较对照组出现明显的氧化应激反应,说明细胞已受损,再继续培养将会导致细胞死亡。上述研究结果提示,高浓度苯胺化合物可显著影响L929细胞存活率,且具有时间和浓度累积效应。其毒性机制可能与细胞内活性氧增加、谷胱甘肽耗竭有关。 展开更多
关键词 苯胺 l929细胞 细胞毒性 细胞凋亡
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3种临床常用烤瓷合金对小鼠成纤维细胞L929的毒性评价 被引量:11
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作者 乔广艳 沈庆平 苏俭生 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2010年第1期72-76,共5页
目的:评价3种临床常用牙科烤瓷合金材料的细胞毒性。方法:采用一种能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的CCK-8比色法,检测镍铬合金(Ni,77.36%)、钴铬合金(Co,61.0%)、金合金(Au,58.0%)等3种烤瓷合金材料对小鼠成纤维细胞L929相对增殖率的影... 目的:评价3种临床常用牙科烤瓷合金材料的细胞毒性。方法:采用一种能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的CCK-8比色法,检测镍铬合金(Ni,77.36%)、钴铬合金(Co,61.0%)、金合金(Au,58.0%)等3种烤瓷合金材料对小鼠成纤维细胞L929相对增殖率的影响;应用单细胞凝胶电泳(彗星电泳),检测3种烤瓷合金材料对小鼠成纤维细胞L929 DNA的损伤情况。采用SAS9.0软件包对数据进行统计学分析。结果:镍铬合金组、钴铬合金组和金合金组细胞的相对增殖率分别为(75.9510±7.6244)%、(84.8920±8.2660)%和(88.5420±12.3611)%。镍铬合金组的细胞毒性显著高于钴铬合金组(P<0.05)和金合金组(P<0.05),而钴铬合金组与金合金组之间无显著差异(P>0.05),但3种材料的细胞毒性分级均为1级,表现为轻微毒性;镍铬合金组DNA损伤程度的彗星数目显著高于钴铬合金组(P<0.05)和金合金组(P<0.05),而钴铬合金组与金合金组无显著差异(P>0.05)。结论:钴铬烤瓷合金材料的细胞毒性显著低于镍铬烤瓷合金材料,而与58%金烤瓷合金材料的细胞毒性接近。临床上应尽可能选择钴铬烤瓷合金或58%金烤瓷合金等细胞毒性较低的烤瓷合金材料。 展开更多
关键词 牙科烤瓷合金 细胞毒性 CCK-8 小鼠成纤维细胞l929 DNA 彗星电泳
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麦胚凝集素诱导小鼠成纤维细胞L929发生凋亡的研究 被引量:4
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作者 孙荭 何贤辉 +3 位作者 黄柏炎 徐丽慧 程云华 曾耀英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期602-605,T001,共5页
目的 :研究麦胚凝集素 (WGA)是否能够诱导小鼠成纤维细胞L92 9发生凋亡及其可能的分子机制。方法 :分别收集以WGA或琥珀酰化WGA(sWGA)处理 2 4h的L92 9细胞 ,经碘化丙啶染色后 ,以流式细胞仪分析细胞凋亡百分率 ,同时以荧光显微镜观察... 目的 :研究麦胚凝集素 (WGA)是否能够诱导小鼠成纤维细胞L92 9发生凋亡及其可能的分子机制。方法 :分别收集以WGA或琥珀酰化WGA(sWGA)处理 2 4h的L92 9细胞 ,经碘化丙啶染色后 ,以流式细胞仪分析细胞凋亡百分率 ,同时以荧光显微镜观察吖啶橙染色细胞的形态。结果 :WGA处理过的细胞 ,其DNA亚二倍体峰 (Sub -G1)即凋亡峰的百分率明显升高 ,且与WGA剂量呈正相关 ;而sWGA处理的细胞则无此现象。同时 ,荧光显微镜观察发现WGA处理的细胞发生核碎裂 ,但sWGA无此作用。结论 :WGA能诱导L92 9细胞发生凋亡 ,而sWGA不能诱导该细胞凋亡 ,提示WGA结合至细胞表面唾液酸残基是其诱导凋亡所必需 ;WGA诱导细胞凋亡的能力可部分解释其细胞毒性。 展开更多
关键词 麦胚凝集素 小鼠 成纤维细胞l929 细胞凋亡 细胞形态
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应用L929细胞从患者血液中分离立克次体 被引量:2
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作者 林碧瑚 孙晓娟 +2 位作者 李文广 林英姿 詹志农 《海南医学院学报》 CAS 2003年第5期265-267,共3页
目的:从不明原因发热患者血液中分离立克次体。方法:应用L929细胞培养法分离立克次体,并用微量免疫荧光检测法(mIFA)、聚合酶链反应(PCR)技术进行鉴定。结果:从20份不明原因发热患者血液标本中分离出12株立克次体,鉴定结果,3株为恙虫病... 目的:从不明原因发热患者血液中分离立克次体。方法:应用L929细胞培养法分离立克次体,并用微量免疫荧光检测法(mIFA)、聚合酶链反应(PCR)技术进行鉴定。结果:从20份不明原因发热患者血液标本中分离出12株立克次体,鉴定结果,3株为恙虫病立克次体,2株为斑疹伤寒立克次体,7株为斑点热群立克次体。结论:应用L929细胞培养法可以直接从立克次体病患者血液中分离立克次体。 展开更多
关键词 立克次氏体 恙虫热 立克次氏体 斑疹伤寒 斑点热群 l929单层细胞培养法 海南岛
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肠上皮内淋巴细胞促L929细胞增殖活性的研究 被引量:2
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作者 祁赞梅 吕昌龙 +1 位作者 刘北星 刘冬妍 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期292-293,296,共3页
目的:了解应激性溃疡模型中肠上皮内淋巴细胞(iIEL)培养上清促L929细胞增殖活性的变化。方法:采用水浸限制刺激法制备小鼠应激性溃疡模型。分别提取iIEL和脾T淋巴细胞,在含ConA的培养液中培养。采用MTT法检测iIEL和脾T淋巴细胞培养上清... 目的:了解应激性溃疡模型中肠上皮内淋巴细胞(iIEL)培养上清促L929细胞增殖活性的变化。方法:采用水浸限制刺激法制备小鼠应激性溃疡模型。分别提取iIEL和脾T淋巴细胞,在含ConA的培养液中培养。采用MTT法检测iIEL和脾T淋巴细胞培养上清的促L929细胞增殖活性。结果:正常鼠iIEL培养上清促L929细胞增殖活性显著高于脾T细胞培养上清(P<0.05)。应激性溃疡发生后,iIEL培养上清促L929细胞增殖活性显著下降,于第4天降至最低(P<0.05),1周后恢复正常。结论:iIEL培养上清中可能含有高水平的促进L929细胞增殖的因子,这种因子的活性在应激性溃疡中可能发生变化。 展开更多
关键词 畅上皮内淋巴细胞 l929细胞 应激性溃疡
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红细胞分化调节因子对体外培养的L929和KB细胞的生长抑制作用 被引量:2
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作者 王瑞瑜 鲍家驹 +4 位作者 费仁仁 吴洪 刘惠英 赵华 薛社普 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期285-289,共5页
从兔网织红细胞提纯的红细胞分化调节因子(erythroid differentiation factor,EDF),能对体外培养的自发转化成纤维细胞系L929及人鼻咽癌细胞系KB产生作用。当EDF剂量为0.10μg/ml时,可引起L929细胞形态发生改变,并有细胞核固缩现象。第2... 从兔网织红细胞提纯的红细胞分化调节因子(erythroid differentiation factor,EDF),能对体外培养的自发转化成纤维细胞系L929及人鼻咽癌细胞系KB产生作用。当EDF剂量为0.10μg/ml时,可引起L929细胞形态发生改变,并有细胞核固缩现象。第2d的细胞生长抑制率为64.86%,软琼脂集落形成率为0;第5d时细胞增殖为负值。~3H-TdR掺入率明显降低。EDF剂量为0.15μg/ml时,对KB细胞生长已有抑制作用。EDF剂量达0.30μg/ml时,生长抑制明显。以上结果证明了EDF对恶性细胞具有增殖抑制作用。这种作用对不同种类细胞敏感性不同,并且与剂量呈正相关。 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞分化 l929细胞
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