利用RK2的parDE片段提高重组质粒在生防菌成团泛菌中的稳定性

用ＰＣＲ方法将广宿主范围质粒ＲＫ２中控制稳定性的片段ｐａｒＤＥ克隆到ｐＧＥＭ┐Ｔ载体上，然后插入到分泌表达载体ｐＥｘＳｅｃ１的ＢａｍＨＩ切点上，得到两个新载体ｐＺＬ２和ｐＺＬ３，其中ｐａｒＤＥ的转录方向分别与Ｔ７启动子相同和相反。经酶切物理图谱分析和ＰＣＲ扩增验证后，将ｐＺＬ２和ｐＺＬ３分别电击转化到成团泛菌３０８Ｒ中，在无抗生素的ＬＢ培养基中生长１００代后仍１００％地保留在细胞内。

3种液体培养基对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响

目的探讨胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、LB和M-H 3种肉汤培养基对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响。方法通过96孔和6孔板构建细菌生物膜,结晶紫染色对其进行半定量分析和显微镜观察生物膜形态,探讨TSB、LB和M-H肉汤培养基对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响;提取细菌总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR检测3种培养基对表皮葡萄球菌粘附基因表达量的影响。结果与LB(0.149±0.047)和M-H(0.323±0.003)培养基相比,TSB(2.954±0.287)培养基能显著促进表皮葡萄球菌生物膜的形成(TSB vs LB,t=16.706,P<0.01;TSB vs M-H,t=15.877,P<0.01);与LB培养基相比,TSB培养基可显著促进表皮葡萄球菌ica A基因的表达(t=9.667,P<0.01)并抑制icaR基因的表达(t=13.283,P<0.01)。结论与LB和M-H肉汤培养基相比,TSB培养基能显著促进表皮葡萄球菌生物膜的形成和粘附基因ica A的表达。

不同种类茶叶茶多酚对细菌生长的抑制作用

目的探讨不同种类茶叶中茶多酚对细菌生长的抑制作用。方法提取茶多酚,配成不同浓度的溶液;纸片法测定茶多酚(浓度为140mg/ml、120mg/ml、100 mg/ml、80 mg/ml、60 mg/ml、40mg/ml)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草杆菌的抑菌作用;比较抑菌效果。结果三种茶叶的茶多酚对供试细菌均有抑制作用,但不同茶叶的茶多酚对细菌的抑制作用不同,不同种类茶叶茶多酚对同一菌种的抑制作用亦不同。结论不同种类茶叶的茶多酚对细菌生长均有一定的作用。

微生物酶催化的不对称还原反应合成(S)-(+)-4-苯基-2-丁醇

以LB培养基培养Pseudomonas monteilii TA-5,将其整细胞作为生物催化剂(Cat),催化4-苯基-2-丁酮(1)的不对称还原反应,对映选择性地合成了(S)-(+)-4-苯基-2-丁醇。在最佳反应条件[1 10 mmol·L-1,c(Cat)30 g cdw·L-1,10%丙三醇,p H 8.0,300 r·min-1,于30℃反应24 h]下,转化率82%,ee值91%。

植物乳杆菌ST-Ⅲ高密度培养的研究

为制备高效浓缩的ST-Ⅲ发酵液,通过单因素试验、正交试验、化学中合法,对ST-Ⅲ的高密度培养进行研究。试验结果表明:在标准MRS培养基的基础上,调整其中主要营养组分-糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母粉的含量,接种量为2.5%,培养温度37℃,培养过程用15%Na2CO3溶液作中和剂,pH值控制在5.5,培养10h后,ST-Ⅲ的活菌数可以达到1010cfu/mL。

兴县选煤厂浮选药剂制度优化研究

根据兴县某选煤厂处理中高灰难浮煤的性质,针对当前浮选效果差、药剂制度不合理的情况对浮选工艺中药剂制度进行探讨研究,选取化工副产品LB-3-1作为捕收剂、杂醇260-T作为起泡剂,在合理的药剂制度下,获得浮选精煤产品,达到产率78%、灰分15%的工艺指标,符合企业要求。研究表明,此浮选药剂制度合理,生产指标理想,经济效益良好。

正交实验对植物乳杆菌Lb-30硒化的多因素条件筛选

目的为满足人们对于微量元素硒的日常膳食需求,通过将低级生物利用的无机硒代谢成高级生物可利用的有机硒,增加乳杆菌的硒含量,找出最佳培养方案。方法首次选用植物乳杆菌作为富硒载体。选用MRS液体培养基为基础培养基,探究不同接种量、碳源、氮源、pH值及发酵时间对OD值及富硒含量的影响,并对其培养条件进行优化。结果植物乳杆菌最优富硒方案为:亚硒酸钠添加量为5.0μg/mL,葡萄糖含量为20.0g/L,牛肉膏含量为24.0g/L,初始pH值为5.0,加硒时间为6h,接种量为4.0%,发酵时间为36h。优化后植物乳杆菌富硒含量达到842.118μg/g。结论通过单因素实验对富硒培养的条件进行优化,增加植物乳杆菌的硒含量,得出最佳富硒培养方案,实现将无机硒有机转化,为今后食品中安全且高效地添加有机硒元素提供可行性方案。

肠致病性大肠杆菌的生物膜形成对致病岛基因的影响

目的研究不同p H值条件对肠致病性大肠埃希菌生物膜形成能力及对致病岛基因的影响。方法将2株EPEC菌株（E11313和E11435）分别接种于p H值为7、9和11的LB培养基,用结晶紫染色半定量法检测2株菌株产生物膜能力,观察产生物膜菌株及非产生物膜菌株生物膜形成的差异,将2株菌株产生的生物膜溶解,提取总RNA,定量PCR检测不同p H浓度的生物膜与致病岛基因Esp A表达水平的关系。结果 E11435为生物膜阳性菌株,E11313为生物膜阴性菌株,p H为7~9之间,生物膜的形成变化不大,当p H值=11时,菌株形成生物膜更容易,E11435菌株形成的生物膜可影响EPEC致病岛Esp A基因的表达,且当p H=11时,Esp A表达水平明显提高（P〈0.05）。结论碱性环境可促进肠致病性大肠杆菌生物膜的形成。生物膜阳性肠致病性大肠杆菌可显著提高致病岛Esp A基因的表达水平。