基于UPLC/Q-TOF MS/MS的稳心颗粒主要成分分析及鉴定

[目的]采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS/MS)技术,对稳心颗粒中的化学成分进行初步分析。[方法]采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-水(含体积比0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,电喷雾电离源,正/负离子双模式检测,通过UPLC/Q-TOF MS/MS所得到的化合物分子量以及MS/MS碰撞解离碎片,结合文献报道,对稳心颗粒的主要化学成分进行分析鉴定。[结果]结合文献报道和一级MS、二级MS/MS高分辨质谱数据,对其中68个化合物进行了初步鉴定,结果显示,稳心颗粒成分以糖类、皂苷类、黄酮类为主,其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1丰度较高。[结论]UPLC/Q-TOF MS/MS技术是鉴定中药复方成分的有效手段,本研究首次利用该技术对稳心颗粒的主要成分进行定性分析,为阐明该复方药效物质基础、探讨其作用机制及其质量控制提供了有效的科学依据。

基于UPLC/Q-TOF MS/MS的花生油成分分析

采用超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS/MS)联用仪对花生油甲醇提取液分离检测,分析花生油成分,并通过二级质谱图和标准品确定物质。结果表明:正离子模式下检出86种化合物,鉴定30种物质,其中芥酸、棕榈酰胺、硬酯酰胺、油酸酰胺、11Z-二十二碳二烯酸为已知的花生油成分,亚油酰乙醇胺、亚油酰胺、鞘氨醇、N-油酰乙醇胺、十八碳四烯酸、顺-4-癸二酸等26种物质均为首次被检出;在负离子模式下,共检出27种化合物,鉴定15种物质,其中包括花生油中常见的7种脂肪酸,首次检出(Z)-13-氧-9-十八烯酸、蓖麻油酸、烯油酸、13-羟基十八酸和2(R)-羟基海藻酸5种脂肪酸和其他3种物质。

基于UPLC/Q-TOF MS代谢组学技术研究远志不同品种间的化学差异性

目的:通过对远志不同品种-晋远1号(简称JY1)、汾远2号(简称FY2)及传统汾阳产远志(简称FY)的差异性研究,以期为筛选远志良种提供参考。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)对JY1、FY2、FY样品进行测定,采用主成分分析(PCA)等多种统计分析方法,进行代谢组学分析并找出差异代谢物。结果:与FY相比,JY1及FY2中的蔗糖酯(如sibiricoses A5、tenuifoliside B等)及低聚糖(如tenuifoliose K等)对PCA分类贡献较大;而与JY1相比,FY2中的蔗糖酯(如tenuifoliside B、tenuifoliside A等)及低聚糖(如tenuifoliose A等)对PCA分类也有较大贡献。此外,sibiricaxanthone A、3,6'-disinapoly sucrose及seneginⅢ在FY、JY1、FY2中的相对含量也有较大差异。结论:与FY相比,JY1与FY2作为远志的新品种,在化学物质基础上存在一定差异且各具优势,这为今后远志的良种定向选育(即以体内某种或某几种活性物质含量高低为依据)提供了数据支持。

基于UPLC/Q-TOF MS法分析生何首乌药材的化学成分

目的采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)对生何首乌药材的化学成分进行分析及鉴定。方法采用ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm×1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,进样量为5μL,柱温为30℃,ESI源负离子模式下采集数据,根据Masslynx4.1软件分析结果并结合文献报道与数据库信息对比,对其中的化学成分进行有效辨别。结果鉴定了生何首乌药材中的22种化学成分,包括蒽醌类化合物7个,二苯乙烯苷类化合物5个,黄酮类化合物3个,有机酸2个,其他类化合物5个;其中2种二聚体化学成分(峰18,tR=12.771 min,m/z=757.1793;峰22,tR=20.997 min,m/z=523.1379)为首次从生何首乌药材中发现。结论建立了一种快速、有效鉴定生何首乌药材化学成分的UPLC/Q-TOF MS分析方法。

山豆根和苦参生物碱类成分UPLC/Q-TOF MS^E比较研究

使用UPLC/Q-TOF MSE对山豆根和苦参的生物碱类成分进行详细的比较研究。色谱柱:Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相:乙腈-5 mmol/L甲酸铵水溶液;流速为0.5 m L/min;检测器:四极杆串联飞行时间质谱(Q-TOF),正离子检测模式。根据离子流色谱图中色谱峰的分子量及其二级质谱碎片离子的裂解规律,结合参考文献进行结构推定;利用主成分分析及正交偏最小二乘法进行聚类分析。结果从山豆根总生物碱中鉴定12个主要成分,从苦参生物碱中鉴定了11个主要成分,其中有10个是相同的结构,但相同成分在两种药材中的含量差异很大;聚类分析表明山豆根和苦参具有显著的差异。本研究表明山豆根和苦参的主要生物碱成分虽然结构相同,但含量差异很大,二者临床疗效差异,可能由于生物碱含量的差异,或生物碱以外的其他成分所引起。

UPLC/Q-TOF MS/MS负离子模式下环氧烷型环烯醚萜苷的结构表征

利用四极杆飞行时间串联质谱(Q-TOF MS/MS)研究4个环氧烷型环烯醚萜苷同系组分(胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡麻属苷、梓醇)的质谱裂解行为。在大气压化学电离源负离子(APCI^-)模式下,该类同系组分主要的裂解途径除了常见的母环上取代基的断裂,如中性丢失H_2O、CO_2和葡萄糖基等,生成^(1,6)F^-、^(1,4)F^-等特征碎片离子;另外还存在葡萄糖基环的断裂,生成^(0,4)A_1^-、^(1,4)A_1^-及^(2,4)A_1^-等碎片离子。通过对上述环氧烷型同系组分的质谱裂解行为进行归纳总结,依据其裂解规律,利用UPLC/Q-TOF MS/MS对胡黄连提取物中的环烯醚萜苷类化合物进行表征,共初步鉴定出10个环烯醚萜苷,其中包括8个环氧烷型环烯醚萜苷(胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅳ、黄金树苷、梓苷、婆婆纳苷和Piscroside B)和2个环戊烷型环烯醚萜(Boschnaloside和Mussaenosidic acid)。该方法有助于推动胡黄连在物质基础表征、质量控制和临床应用上的开发和利用。

基于UPLC/Q-TOF MS代谢组学技术分析影响远志商品药材质量的关键因素

目的针对性地分析了产地、生长方式、药用部位等因素对山西产远志商品药材质量的影响,并找出关键影响因素。方法首先将样品进行超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱分析,并采用主成分分析及聚类分析等多元统计学方法,分别比较了产地、生长方式、药用部位等因素对山西产远志商品药材质量的影响。结果 (1)产地因素是影响现有远志商品药材质量的关键因素,指标性成分3,6’-二芥子酰基蔗糖与远志口山酮Ⅲ的含量高低可以间接反映出远志药材整体质量。(2)山西石楼、静乐、盂县的野生远志质量较优,而襄汾、闻喜的栽培远志质量较好。(3)远志筒中化合物的相对含量高于根,根与筒间的主要差异物质为Sibiricoses A6,3,6’-二芥子酰基蔗糖,Tenuifoliose C,远志口山酮Ⅲ,远志根与筒的选择依据应充分考虑临床所治疗疾病的特性,而不能一概而论。结论产地因素是影响现有远志商品药材质量的关键因素,本研究为今后指导远志规范化种植以及产地粗加工和临床精确用药提供了科学依据。

基于UPLC/Q-TOF MS技术对延胡索醋法炮制前后化学成分的研究

建立了超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(ACQUITY UPLCTM I-Class Xevo G2-XS Q-TOF MS)法快速鉴定醋法炮制前后延胡索化学成分差异的影响,使用UNIFI软件对数据进行了分析,以多元统计分析VIP>1,P<0.05作为判断标准,共发现28个延胡索生物碱标记物,除黄连碱、隐品碱醋制后含量降低以外,其余生物碱类成分均有所升高,尤其是延胡索甲素、四氢黄连碱、小檗碱、二氢血根碱、去氢海罂粟碱等。结果表明,应用UPLC/Q-TOF MS技术能够快速检定炮制后延胡索药材的化学成分差异,通过比较化学成分差异为临床疗效研究提供重要的参考。

LC-Q-TOF/MS法用于伤科天芍凝胶中化学成分的研究

目的采用LC-Q-TOF/MS技术对伤科天芍凝胶的化学成分进行鉴定。方法以Agilent Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温30℃。在正、负离子全扫描模式下采集伤科天芍凝胶成分的质谱数据,结合对照品与文献数据信息进行主成分辨析。结果共鉴别出伤科天芍凝胶中103个化学成分,并对所有化合物的药材来源进行了归属,其中22个化合物来源于赤芍、33个化合物来源于大黄、20个化合物来源于白芷、23个化合物来源于黄柏、14个化合物来源于天花粉,共有成分9个。结论该方法快速鉴定了伤科天芍凝胶中的主要成分,为其质量控制指标和药效物质基础的深入研究提供依据。

基于UPLC/Q-TOF MS技术的天麻钩藤饮体外及大鼠血中移行成分的研究

目的通过同时测定天麻钩藤饮体外及大鼠血中移行成分,探讨其药效物质基础。方法制备天麻钩藤饮水煎液,采用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)对其进行定性分析。同时给予SD大鼠灌胃2ml,于给药0.5、1、1.5、2h后经眼球后静脉丛取静脉血0.5mL,同方法取空白大鼠血浆样品,采用已有的LC-MS方法,使用MassLynxV4.1软件进行对比分析,检测大鼠血中移行成分。结果体外共检测到41种物质,其中生物碱9个,黄酮12个,有机酸7个,其他类成分13个;含药血清中检测到30种物质,其中生物碱6个,黄酮11个,有机酸6个,其他类成分7个。结论该方法可靠、准确,为复方中药药效物质基础研究提供了方法学依据。

采用UPLC/Q-TOF MS与NMR代谢组学技术研究生长年限对远志药材质量的影响

生长年限是影响远志药材质量的重要因素之一。本文对陕西合阳1～3年生栽培远志中的初级和次级代谢物进行了比较。首先对上述样品分别进行超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱和核磁共振分析,采用主成分分析等多种统计分析方法,找出差异代谢物并对其含量及相关性进行分析。结果显示,1年与2、3年生远志可明显区分,而2年与3年生远志则区分不明显。随着远志生长年限的延长,初级代谢物中蔗糖、果糖、胆碱的含量减少,而甘氨酸、棉籽糖的含量则增加;次级代谢物中皂苷类成分（onjisaponin Fg、polygalasaponin XXVIII、polygalasaponin XXXII）的含量增加,而口山酮（polygalaxanthone III）及部分低聚糖酯（tenuifoliose A、tenuifoliose C、tenuifoliose C2、tenuifoliose H）的含量则减少。生长年限对远志药材质量会产生较大影响,而商品远志药材的现有生长年限有一定的科学依据。本研究为现有中药材质量评价方法提供了一种新的思路。

UPLC/Q-TOFMS对三七中皂苷类成分的快速化学表征

本文主要运用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)对三七中皂苷类成分进行快速分离和鉴定。以超高效液相为分离手段,飞行时间质谱仪为鉴定方法,水饱和正丁醇为提取溶剂,以0.05%甲酸水(A)-0.05%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,采用ESI负离子模式进行数据采集。根据实验结果,并结合相关参考文献,二级质谱裂解数据以及元素组成,分离、鉴定出17种皂苷类成分,并发现三七中含有姜糖酯B成分。实验结果表明经过超高效液相的分离,以及Q-TOF MS的二级负离子信息的鉴定,为分析三七中皂苷类成分提供了一种快速、简便、可靠的方法。

基于UHPLC/Q-TOF/MS分析羊耳菊有效组分的入血成分

目的应用UHPLC/Q-TOF/MS技术和血清药物化学研究手段,分析检测羊耳菊有效组分的入血成分。方法大鼠灌胃给予羊耳菊有效组分提取物后,腹主动脉抗凝采血,血浆经甲醇二次沉淀蛋白处理。采用Eclipse Plus C18RRHD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)做流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1。负离子检测模式,同时结合布鲁克道尔顿公司的Metabolite Tools软件,鉴定和表征其血中的移行成分。结果给药后,在大鼠血浆中共检测到16个代谢产物,包括9个原型成分和7个代谢物,代谢方式主要以咖啡酰基奎宁酸类化合物的异构化、甲基化及甲基葡萄糖醛酸化的复合反应为主。结论本研究较为全面地阐释了羊耳菊活性部位提取物在大鼠血中的入血成分,为进一步研究羊耳菊药材的体内过程和药效物质基础提供了一定的参考。

基于UPLC/Q-TOFMS的大鼠血浆磷脂成分的快速分析

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱(UPLC/Q-TOF MS)联用技术,对大鼠血浆磷脂提取液进行分析,建立了一种快速、简便、可靠的血浆磷脂鉴别方法。以经典的氯仿甲醇法为磷脂的提取方法,以10 mmol/L甲酸铵水溶液(A)-含10 mmol/L甲酸铵的乙腈-异丙醇(1∶1)混合溶液(B)为流动相,采用ESI源,分别在正、负离子模式下进行数据采集。根据实验结果,结合二级质谱裂解数据、元素组成、数据库匹配,鉴定出81个成分,其中包括7个PE、7个PI和1个SM,其余均为PC。所建立的液相色谱-质谱联用分析方法,可为大鼠血浆中磷脂成分的鉴别提供一种快速、简便、可靠的分析手段,以及为血浆磷脂代谢组学的研究奠定基础。

LC-Q-TOF和LC-MS/MS测定化妆品中地索奈德及甲基泼尼松龙醋酸酯同分异构体

运用LC-Q-TOF技术,研究了地索奈德和甲基泼尼松龙醋酸酯同分异构体的二级质谱特征信息;利用LC-MS/MS技术,优化了快速测定该组同分异构体的方法.样品经提取、净化后,使用C-18柱分离,以0.1%乙酸-水和0.1%乙酸-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱.6 min内实现了对该组同分异构体的快速测定.检出限为2μg/kg,定量限为6μg/kg;回收率为90.7%~101.1%,RSD为2.1%~6.8%,方法对该组同分异构体的基质效应分别为0.95和1.07.

UPLC-Q-TOF法分析双丹明目胶囊化学成分

目的通过超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法分析双丹明目胶囊化学成分。方法该胶囊内容物的分析采用Agilent Extend C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流动相0.1%甲酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱;体积流量0.4 m L/min。根据对照品的相对分子质量、质谱碎片离子信息,结合参考文献对成分进行鉴定。结果从中共鉴定出102种成分,包括酚酸、黄酮及其苷类、萜类、香豆素、木脂素等。其中,24种来自旱墨莲,13种来自女贞子,11种来自丹参,14种来自泽泻,9种来自山茱萸,9种来自茯苓,6种来自牛膝,6种来自三七,4种来自牡丹皮,3种来自红土茯苓,3种来自山药。结论该方法灵敏、可靠、快速,可为双丹明目胶囊药效物质基础及质量控制研究提供依据。

UHPLC-Q-TOF/MS法测定中药旱莲草中五种指标性化学成分的含量

目的建立不同产地旱莲草药材中的5个指标性成分含量测定方法。方法采用UHPLC—Q—TOF／MS技术，对桂林阳朔，广西荔蒲，湖南邵阳，广西南宁和湖北襄樊等5个产地旱莲草药材中的5个指标性成分进行含量测定与分析。结果旱莲草药材中芹菜素在2．012～402．4μg·ml～、十六烷酸在2．508~501．6lug·ml-1、木樨草素在1．252~250．4μg·ml-1、蟛蜞菊内酯在1．664～332．8μg·ml-1、木樨草苷在1．080～216．0μg·ml-1范围内，各待测成分的提取离子色谱峰面积和对应的浓度均具有良好的线性关系，方法的精密度及稳定性良好。结论不同产地的旱莲草药材在指标性成分的含量上存在一定差异。

人参皂苷Rd酸水解产物的RRLC-Q-TOFMS研究

利用高分离快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)联用技术对人参皂苷Rd酸水解产物进行了分析研究。通过化合物的保留时间、精确分子质量信息、串联质谱碎片信息,分析鉴定了7种Rd酸水解产物,分别为C-Y1、C-Y2、F2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1和Rg5。串联质谱分析水解产物获得了原人参二醇苷元特征离子m/z459(20(S)-Rg3,20(R)-Rg3,F2),Δ20(21)或Δ20(22)位脱水原人参二醇型苷元特征离子m/z441(Rk1,Rg5),C-24、C-25位水合原人参二醇苷元特征离子m/z 477(C-Y1和C-Y2)。研究表明,人参皂苷Rd在酸性条件下发生化学转化,包括取代糖基的水解反应,Δ20(21)或Δ20(22)位脱水反应和C-24,C-25位水合加成反应。本实验可为研究人参在配位方面的化学物质基础提供方法参考。

利用Q-TOFLC/MS建立二级谱图数据库快速检测187种药物的研究

目的建立187种药物的数据(含二级谱图)库,以对未知样品进行快速筛选和确认。方法优化一种Q-TOF LC/MS分析条件,将187种药物分别依次进行Q-TOF LC/MS-MS一、二级谱图分析,利用PCDL软件建立数据库(含二级谱图),快速筛选样品中是否含有187种目标物,然后可对目标物进行二级质谱检测;实验了血样中20种药物不同浓度(100ng/mL、500ng/mL)的添加实验。结果阳性识别率在85%以上。结论该方法简便灵敏、快速实用,能减少检测时间和提高工作效率。

利用Q-TOFLC/MS建立二级谱图数据库快速检测90种农药的初步研究

目的建立90种农药的数据库(含二级谱图),以达到快速筛选检验该范围内的未知样品目的。方法优化一种Q-TOF LC/MS分析条件,将90种农药分别依次进行Q-TOF LC/MS-MS二级谱图分析,利用PCDL软件建立数据库。并同时实验了血样中10种不同浓度农药(100ng/mL、500ng/mL)的添加实验,对建库方法进行了验证。结果阳性识别率在80%以上。结论本方法简便灵敏、快速实用。