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鸡内源性抗菌肽LEAP-2的生物信息学分析 被引量:7
1
作者 杭柏林 徐军 胡建和 《江苏农业科学》 2018年第6期46-50,共5页
为了解鸡内源性抗菌肽LEAP-2的基本信息,根据鸡LEAP-2的氨基酸序列,通过软件对鸡LEAP-2的生物信息学进行分析。结果表明,鸡LEAP-2由20种氨基酸构成,等电点为9.86,分子量为8 835.65 u,为不稳定的疏水蛋白,定位于细胞核内,有1个跨膜区和1... 为了解鸡内源性抗菌肽LEAP-2的基本信息,根据鸡LEAP-2的氨基酸序列,通过软件对鸡LEAP-2的生物信息学进行分析。结果表明,鸡LEAP-2由20种氨基酸构成,等电点为9.86,分子量为8 835.65 u,为不稳定的疏水蛋白,定位于细胞核内,有1个跨膜区和1个信号肽,有2个糖基化位点和8个磷酸化位点,二级结构由α螺旋、延伸链、β折叠和无规则卷曲组成,三级结构和功能结构域类似于人LEAP-2,存在多个抗原表位,根据系统进化树推测,鸡LEAP-2与日本鹌鹑LEAP-2进化关系最近。研究结果为鸡抗菌肽LEAP-2的深入研究提供了信息基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 Ⅱ型肝脏表达抗菌肽(leap-2) 生物信息学 氨基酸序列
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斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)肝脏表达的抗菌肽-2(LEAP-2)在E.coli中的融合表达 被引量:10
2
作者 张虹 陶妍 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2010年第1期70-75,96,共7页
抗菌肽是存在于生物细胞中的一类具有强抗菌作用的天然小分子多肽,它们在机体免疫系统中发挥了重要作用,被认为是抗生素的理想替代品。本文通过RT-PCR法从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)的肝脏中分离到抗菌肽-2(LEAP-2)基因,该基因编... 抗菌肽是存在于生物细胞中的一类具有强抗菌作用的天然小分子多肽,它们在机体免疫系统中发挥了重要作用,被认为是抗生素的理想替代品。本文通过RT-PCR法从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)的肝脏中分离到抗菌肽-2(LEAP-2)基因,该基因编码94个氨基酸残基组成的多肽;氨基端的信号肽由28个残基组成,成熟肽含有41个残基;对于鱼类和哺乳动物显示高度保守的4个半胱氨酸残基位于多肽的羧基端区域。通过对LEAP-2基因添加EcoRI和HindIII酶切位点和对pET32a进行双酶切处理,成功构建了"pET32a-IpL-2"重组表达质粒,并转化工程菌E.coliBL21(DE3)。在工程菌对数生长后期加入诱导剂IPTG、经25℃培养后,可溶性的"trxA-IpL-2"融合蛋白得到高程度的表达。Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析表明,获得了高纯度的目的蛋白。 展开更多
关键词 斑点叉尾鮰 RT-PCR 肝脏表达的抗菌肽-2(leap-2) 融合表达
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鸡Ⅱ型抗菌肽LEAP-2的原核表达及抑菌研究 被引量:1
3
作者 许冬梅 武晋孝 +6 位作者 田文霞 闫芳 高文伟 马海利 郑明学 程志学 赵宇军 《山西农业科学》 2017年第12期1998-2000,共3页
为了研究鸡Ⅱ型抗菌肽LEAP-2的体外表达产物的活性,试验进行了肝脏样品无菌采集,基因的克隆及密码子优化和表达,以表达产物对致病菌做纸片法药敏试验,判断其抑菌作用。结果表明,试验经低温处理获得了较好的肝脏总RNA,克隆并优化了鸡LEA... 为了研究鸡Ⅱ型抗菌肽LEAP-2的体外表达产物的活性,试验进行了肝脏样品无菌采集,基因的克隆及密码子优化和表达,以表达产物对致病菌做纸片法药敏试验,判断其抑菌作用。结果表明,试验经低温处理获得了较好的肝脏总RNA,克隆并优化了鸡LEAP-2基因;经诱导得到了表达产物,形式为包涵体;抑菌试验表明,表达产物对16株分离致病菌具有抑制作用。 展开更多
关键词 leap-2 抗菌肽 原核表达 抑菌试验
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褐鳟LEAP-2成熟肽在大肠杆菌中的融合表达 被引量:3
4
作者 刘晨斌 徐革锋 +5 位作者 黄天晴 谷伟 陈春生 程琳 史秀兰 王炳谦 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期70-77,共8页
开发抗菌肽作为饲料添加剂,可避免耐药性产生和药物残留等问题,对褐鳟养殖业健康绿色发展具有重要意义。通过原核表达途径获得褐鳟LEAP-2成熟肽融合表达蛋白,利用同源克隆方法,从褐鳟肝脏组织中克隆得到LEAP-2基因ORF序列,分析其氨基酸... 开发抗菌肽作为饲料添加剂,可避免耐药性产生和药物残留等问题,对褐鳟养殖业健康绿色发展具有重要意义。通过原核表达途径获得褐鳟LEAP-2成熟肽融合表达蛋白,利用同源克隆方法,从褐鳟肝脏组织中克隆得到LEAP-2基因ORF序列,分析其氨基酸序列和蛋白质结构,与其他物种比对并作同源性分析,构建重组表达质粒pET32a-mLEAP-2,原核表达。结果表明,褐鳟LEAP-2基因ORF全长291 bp,编码96个氨基酸,其中氨基端信号肽由27个残基组成,成熟肽含有41个残基;根据比对结果发现,在羧基端存在多个保守氨基酸残基,其中包括4个高度保守半胱氨酸残基,4个半胱氨酸残基之间可形成两对二硫键,推测其与LEAP-2抗菌活性有关;同源性分析显示褐鳟LEAP-2在进化上相对保守,氨基酸序列与大西洋鲑、虹鳟(LEAP-2A)、红点鲑同源性均在94%以上;SDS-PAGE电泳分析显示得到的重组蛋白分子质量约为22.61 ku,与预期一致。研究结果有利于进一步探究褐鳟LEAP-2基因功能,为抗菌肽在养殖上的应用提供理论基础。 展开更多
关键词 褐鳟 leap-2 基因克隆 原核表达
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乌苏里白鲑肝脏表达抗菌肽Leap-2基因的克隆及细菌感染后的组织表达分析 被引量:2
5
作者 刘恩慧 黄天晴 +4 位作者 谷伟 王炳谦 张艳萍 李春雨 徐革锋 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期420-427,共8页
为探究乌苏里白鲑Coregonus ussuriensis Berg肝脏表达抗菌肽Leap-2基因的分子结构和表达特征,采用PCR技术从乌苏里白鲑(体质量为30.0 g±1.2 g)肝脏组织中扩增Leap-2基因的开放阅读框(ORF),使用生物信息学软件对其编码的氨基酸序... 为探究乌苏里白鲑Coregonus ussuriensis Berg肝脏表达抗菌肽Leap-2基因的分子结构和表达特征,采用PCR技术从乌苏里白鲑(体质量为30.0 g±1.2 g)肝脏组织中扩增Leap-2基因的开放阅读框(ORF),使用生物信息学软件对其编码的氨基酸序列进行分析,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在健康组织及嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila、杀鲑气单胞菌Aeromonas salmonicida和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染后的组织表达变化。结果表明:采用PCR方法从乌苏里白鲑肝脏中克隆得到Leap-2基因的ORF区(GenBank:MZ170050),片段长度为276 bp,可编码91个氨基酸,其成熟肽区域包含4个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示,乌苏里白鲑的Leap-2氨基酸序列与银鲑Oncorhynchus kisutch的亲缘关系较近,且具有较高的同源性,一致性为96.7%;乌苏里白鲑肝脏中的Leap-2基因表达量最高,其次为肠和肾,肌肉中的基因表达量最低;3种细菌感染导致Leap-2在各组织中的表达均有所上调,Western blot检测也显示,Leap-2蛋白水平在24 h内表达上调。研究表明,Leap-2基因参与了乌苏里白鲑应对外源干扰的免疫反应,本研究结果可为解析乌苏里白鲑应对病原体的免疫应答机制提供科学参考。 展开更多
关键词 乌苏里白鲑 抗菌肽 leap-2基因 嗜水气单胞菌 杀鲑气单胞菌 金黄色葡萄球菌 荧光定量
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似鲇高原鳅LEAP-2基因序列特征及表达分析
6
作者 宋明江 陈叶雨 +3 位作者 吴晓雲 刘亚 龚全 赖见生 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第9期2050-2056,共7页
【目的】研究似鲇高原鳅抗菌肽的生物学功能。【方法】通过似鲇高原鳅转录组测序数据库,获得LEAP-2基因序列。【结果】cDNA序列为2253 bp,其中5’非编译区(UTR)为270 bp, 3’UTR为1698 bp,开放阅读框为285 bp,编码94个氨基酸。信号肽预... 【目的】研究似鲇高原鳅抗菌肽的生物学功能。【方法】通过似鲇高原鳅转录组测序数据库,获得LEAP-2基因序列。【结果】cDNA序列为2253 bp,其中5’非编译区(UTR)为270 bp, 3’UTR为1698 bp,开放阅读框为285 bp,编码94个氨基酸。信号肽预测结果显示LEAP-2信号肽包含28个氨基酸残基。似鲇高原鳅的LEAP-2与西藏高原鳅LEAP-2聚在一支,置信度为99%。组织分布结果表明,LEAP-2在健康似鲇高原鳅的鳃、肾脏、肝脏、肌肉、胃、脑、肠道、脾脏、皮肤、眼睛和心脏共11个组织中均有表达,其中,在似鲇高原鳅肝脏中的表达量最高,是鳃中表达量的2000多倍。在迟缓爱德华氏菌作用下,似鲇高原鳅LEAP-2 mRNA表达量在各免疫组织中呈现出不同的变化趋势。在粘膜相关组织皮肤、鳃和肠道中,细菌侵染后LEAP-2出现显著上调表达(P<0.05)。在系统性免疫组织脾脏、肝脏和肾脏中,肝脏中的LEAP-2在细菌侵染24 h时显著上调表达(P<0.05),随后下降;脾脏中LEAP-2先下降表达,随后显著上调表达(P<0.05),最终恢复到正常表达水平;肾脏中的LEAP-2在攻毒96 h上调表达(P<0.05)。【结论】似鲇高原鳅LEAP-2参与了机体对抗致病菌侵染的生物学过程。 展开更多
关键词 似鲇高原鳅 抗菌肽 leap-2 细菌侵染
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MOSPD2 is a receptor mediating the LEAP-2 effect on monocytes/macrophages in a teleost,Boleophthalmus pectinirostris 被引量:1
7
作者 Chang-Hong Li Jie Chen +1 位作者 Li Nie Jiong Chen 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第6期644-655,共12页
Liver-expressed antimicrobial peptide 2(LEAP-2)is a cationic peptide that plays an important role in a host’s innate immune system.We previously demonstrated that mudskipper(Boleophthalmus pectinirostris)LEAP-2(BpLEA... Liver-expressed antimicrobial peptide 2(LEAP-2)is a cationic peptide that plays an important role in a host’s innate immune system.We previously demonstrated that mudskipper(Boleophthalmus pectinirostris)LEAP-2(BpLEAP-2)induces chemotaxis and activation of monocytes/macrophages(MO/MΦ).However,the molecular mechanism by which BpLEAP-2 regulates MO/MΦ remains unclear.In this study,we used yeast twohybrid cDNA library screening to identify mudskipper protein(s)that interacted with BpLEAP-2,and characterized a sequence encoding motile sperm domain-containing protein 2(BpMOSPD2).The interaction between BpLEAP-2 and BpMOSPD2 was subsequently confirmed by co-immunoprecipitation(Co-IP).Sequence analyses revealed that the predicted BpMOSPD2 contained an N-terminal extracellular portion composed of a CRAL-TRIO domain and a motile sperm domain,a C-terminal transmembrane domain,and a short cytoplasmic tail.Phylogenetic tree analysis indicated that BpMOSPD2 grouped tightly with fish MOSPD2 homologs and was most closely related to that of the Nile tilapia(Oreochromis niloticus).The recombinant BpMOSPD2 was produced by prokaryotic expression and the corresponding antibody was prepared for protein concentration determination.RNA interference was used to knockdown BpMOSPD2 expression in the mudskipper MO/MΦ,and the knockdown efficiency was confirmed by quantitative real-time polymerase chain reaction(qRT-PCR)and western blotting.Knockdown of BpMOSPD2 significantly inhibited BpLEAP-2-induced chemotaxis of mudskipper MO/MΦand BpLEAP-2-induced bacterial killing activity.Furthermore,knockdown of BpMOSPD2 inhibited the effect of BpLEAP-2 on mRNA expression levels of BpIL-10,BpTNFα,BpIL-1β,and BpTGFβ in MO/MΦ.In general,BpMOSPD2 directly interacted with BpLEAP-2,and mediated the effects of BpLEAP-2 on chemotaxis and activation of mudskipper MO/MΦ.This is the first identification of MOSPD2 as a receptor for LEAP-2. 展开更多
关键词 leap-2 MONOCYTE/MACROPHAGE MOSPD2 RNA interference Yeast two-hybrid
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LEAP-2和Ghrelin在代谢相关疾病的研究进展
8
作者 李峰 霍宇琪 赵浩亮 《新医学》 CAS 2023年第7期475-479,共5页
肝表达抗菌肽-2(LEAP-2)最近被发现是生长激素促分泌素受体1α(GHSR1α)的内源性配体,可拮抗胃促生长素(Ghrelin)的激活作用,后续发现还可以反向激动GHSR1α,降低GHSR1α的基础活性。这种拮抗关系,不仅在调节生长激素分泌方面发挥关键作... 肝表达抗菌肽-2(LEAP-2)最近被发现是生长激素促分泌素受体1α(GHSR1α)的内源性配体,可拮抗胃促生长素(Ghrelin)的激活作用,后续发现还可以反向激动GHSR1α,降低GHSR1α的基础活性。这种拮抗关系,不仅在调节生长激素分泌方面发挥关键作用,还在调节食物摄入、肥胖、葡萄糖稳态等复杂功能方面发挥重要作用,并有望成为糖尿病、肥胖症、恶病质等代谢相关疾病诊断及治疗的新靶点。该文将结合Ghrelin来分析LEAP-2的作用,阐述其基本生物学功能和在相关疾病发生发展中的作用以及作为治疗靶点的潜力。 展开更多
关键词 肝表达抗菌肽-2 胃促生长素 GHSR1α信号转导通路 代谢相关疾病
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斑点叉尾鮰LEAP-2和NK-lysin抗菌肽在毕赤酵母中的串联表达 被引量:1
9
作者 宋长丰 李雯 陶妍 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期524-528,551,共6页
[目的]合成密码子优化的斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)LEAP-2与NK-lysin成熟肽的串联基因(LN),构建真核重组表达载体p PICZαA-LN,实现LN在毕赤酵母中的重组DNA表达并对其纯化。[方法]参考编码斑点叉尾鮰LEAP-2和NK-lysin成熟肽的c ... [目的]合成密码子优化的斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)LEAP-2与NK-lysin成熟肽的串联基因(LN),构建真核重组表达载体p PICZαA-LN,实现LN在毕赤酵母中的重组DNA表达并对其纯化。[方法]参考编码斑点叉尾鮰LEAP-2和NK-lysin成熟肽的c DNA序列,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏爱性,优化合成LEAP-2与NK-lysin成熟肽的串联基因LN,两者之间通过α因子信号肽酶切位点对应的核苷酸序列连接;选择表达载体p PICZαA,构建重组表达载体p PICZαA-LN;电转化至毕赤酵母X-33,29℃、p H 6.0条件下,采用1.0%甲醇诱导表达目的蛋白;采用阳离子交换层析对表达产物进行分离纯化。[结果]Tricine-SDS-PAGE分析显示,培养72 h的表达产物经阳离子交换层析,获得了重组体LEAP-2成熟肽、NK-lysin成熟肽和两者的串连表达物;LEAP-2成熟肽的分泌表达效率较NK-lysin成熟肽的高。[结论]实验构建了斑点叉尾鮰LEAP-2与NK-lysin串联基因的真核重组表达载体,并在毕赤酵母X-33中成功表达。 展开更多
关键词 斑点叉尾鮰 leap-2 NK-lysin 成熟肽 毕赤酵母
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鸡抗菌肽LEAP-2基因克隆及序列特征分析 被引量:1
10
作者 高荣琨 翟晓西 +1 位作者 白秀花 李慧锋 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第8期85-87,共3页
Ⅱ型肝表达抗菌肽(LEAP-2)是近年来在脊椎动物中发现的一种新型抗菌肽,并具有较强的抗微生物活性。本研究旨在以艾维茵肉鸡为实验材料,提取鸡全血DNA,通过PCR方法扩增抗菌肽LEAP-2基因,将PCR产物回收后,转化至克隆载体进行DNA测序,并将... Ⅱ型肝表达抗菌肽(LEAP-2)是近年来在脊椎动物中发现的一种新型抗菌肽,并具有较强的抗微生物活性。本研究旨在以艾维茵肉鸡为实验材料,提取鸡全血DNA,通过PCR方法扩增抗菌肽LEAP-2基因,将PCR产物回收后,转化至克隆载体进行DNA测序,并将测序结果与GenBank公布序列进行对比,用ScanProsite对其蛋白质序列进行生物学信息分析。结果表明:扩增产物为150 bp大小的片段,基因序列与Gen-Bank公布序列同源性高达100%,编码48个氨基酸残基,具有3个结构功能区7个功能位点。本研究为进一步探讨LEAP-2的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 leap-2 序列 PCR
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人Ⅱ型肝脏表达抗菌肽LEAP-2的生物信息学分析 被引量:3
11
作者 王珊珊 高琪 +3 位作者 任艳艳 路宏朝 王令 张涛 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期407-414,共8页
人Ⅱ型肝脏表达抗菌肽(LEAP-2)作为新型活性多肽,具有抑菌活性和调节体重的功能。为了深入认识人LEAP-2的基本信息,本研究利用在线生物软件和工具进行了全面系统的生物信息学分析。一级结构分析结果表明,人LEAP-2含有77个氨基酸残基,包... 人Ⅱ型肝脏表达抗菌肽(LEAP-2)作为新型活性多肽,具有抑菌活性和调节体重的功能。为了深入认识人LEAP-2的基本信息,本研究利用在线生物软件和工具进行了全面系统的生物信息学分析。一级结构分析结果表明,人LEAP-2含有77个氨基酸残基,包括18种氨基酸,分子量为8.81 kDa,理论等电点为10.31,为不稳定亲水性蛋白,由信号肽、前体肽和成熟肽三部分组成,有4个糖基化和7个磷酸化修饰位点。二级结构主要元件为α螺旋和无规则卷曲。成熟肽三维结构由N端疏水柔性区、中央刚性核心区和C端柔性区组成,两对二硫键稳定空间构象。多序列比对结果表明,不同物种LEAP-2的信号肽和前体肽序列差异较大,但成熟肽序列具有极高的相似度,在长期进化过程中高度保守。系统进化树分析表明,在不同物种中LEAP-2的分子进化过程与物种亲缘进化关系基本吻合。研究结果为LEAP-2生物学功能及其分子机制的深入研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 leap-2 生物信息学分析 成熟肽 三维结构 多序列比对
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抗菌肽LEAP-2在大肠杆菌中的表达
12
作者 于密密 张德勇 张陈晴子 《浙江树人大学学报(自然科学版)》 2012年第2期20-23,共4页
对GeneBank数据库中的抗菌肽LEAP-2基因进行分析和优化设计,并合成其DNA序列.将LEAP-2基因连接到GST融合表达载体pGEX-4T-1中并转化宿主菌大肠杆菌BL21,利用酶切和测序鉴定筛选到阳性重组工程菌.工程菌经过培养和IPTG诱导,成功表达了LEA... 对GeneBank数据库中的抗菌肽LEAP-2基因进行分析和优化设计,并合成其DNA序列.将LEAP-2基因连接到GST融合表达载体pGEX-4T-1中并转化宿主菌大肠杆菌BL21,利用酶切和测序鉴定筛选到阳性重组工程菌.工程菌经过培养和IPTG诱导,成功表达了LEAP-2融合蛋白.SDS-PAGE电泳分析证实了LEAP-2融合蛋白获得高效表达,软件分析进一步显示表达量约占菌体总蛋白的21%. 展开更多
关键词 抗菌肽 leap-2 GST 融合表达
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中国钢铁行业CO_(2)排放特征和减排路径研究——基于ARIMA-LEAP模型 被引量:2
13
作者 陈浩 胡静茹 +2 位作者 王寿兵 张挺峰 方锴 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期3531-3543,共13页
为了消除对于未来粗钢、钢材以及生铁产量预测主观性,基于时间序列中的ARIMA模型,对未来相关产量进行客观预测,构建了中国钢铁行业ARIMA-LEAP模型,并以2020年为基准年,每5a为时间节点,研究了2020~2030年中国钢铁行业不同情景下全流程及... 为了消除对于未来粗钢、钢材以及生铁产量预测主观性,基于时间序列中的ARIMA模型,对未来相关产量进行客观预测,构建了中国钢铁行业ARIMA-LEAP模型,并以2020年为基准年,每5a为时间节点,研究了2020~2030年中国钢铁行业不同情景下全流程及各工序的CO_(2)排放情况.在技术进步中考虑了氢还原炼铁技术,在能源结构调整中考虑了发电方式调整,在此基础上分别设置了4种单一情景和4种组合情景来研究其减排潜力.结果表明,4种组合情景下的含有规模减排的3种组合情景CO_(2)减排潜力均高于单一情景.其中SUR+TER、SUR+STR和综合减排情景可以在2030年实现达峰,达峰年均为2021年,达峰时CO_(2)排放量分别为13.225亿t、13.359亿t和13.289亿t.单一情景中相较于基准情景CO_(2)减排量由高到低依次为:规模减排情景(SUR)、结构减排情景(STR)、技术减排情景(TAR),在2030年相对于基准情景的减排量分别为493.1Mt、247.8Mt以及105.1Mt.借助LEAP模型的能源核算以及CO_(2)排放核算功能,研究了综合减排情景下2020~2030年不同工序,不同能源的CO_(2)排量,其中CO_(2)排放较多的3个工序为炼铁、轧钢以及烧结工序,产生CO_(2)较多的4种能源为洗精煤、喷煤粉、电力以及焦炭,其中洗精煤CO_(2)排放量更是达到10Bt级,而其余3种能源也达到Bt级.确定了中国钢铁行业CO_(2)排放特征.对技术减排以及结构减排成本进行简单比较,制定中国钢铁行业CO_(2)减排路径. 展开更多
关键词 LEAP模型 钢铁行业 CO_(2) 排放特征 减排路径 情景分析
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日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2基因的克隆与表达 被引量:7
14
作者 段明珠 黄贝 +3 位作者 梁英 张芳芳 聂品 黄文树 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期252-260,共9页
为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡(Anguilla japonica)肝脏表达抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450 bp,开放阅读框编码89个氨基酸。其... 为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡(Anguilla japonica)肝脏表达抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450 bp,开放阅读框编码89个氨基酸。其成熟肽含有LEAP-2保守基序"C-X5-C-X4-C-X4-C"。AJLEAP-2基因组结构与其他脊椎动物LEAP-2相同,都包含有三个外显子。利用荧光定量PCR检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡不同组织/器官中的表达,发现其转录子在肝脏中表达量最高,是内参基因(β-acHn)的6倍;其次是肠道,但其表达量仅为肝脏的1/130。此外,还检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡玻璃鳗(Glass eel)阶段的转录表达水平,结果显示,玻璃鳗中AJLEAP-2的转录表达量仅低于黑仔期的肝脏,为黑仔鳗肠道表达量的2倍。LPS和迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)刺激能显著上调鳗鲡血液中AJLEAP-2的转录表达,刺激16h后上调倍数最高,分别为对照组的86倍和12倍。此外,LPS刺激72h和E tarda刺激8h后,肠道中AJLEAP-2显著上调表达(P<0.05),为对照组的8倍。Poly I:C刺激24h后,血液中AJLEAP-2转录表达显著下调。结果表明,AJLEAP-2在日本鳗鲡抗细菌感染过程中起重要的作用。 展开更多
关键词 抗菌肽 leap-2 日本鳗鲡 迟缓爱德华氏菌
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俄罗斯鲟肝脏表达抗菌肽2基因的分子特征及抗菌活性分析 被引量:1
15
作者 徐倩 王宁宁 +2 位作者 白莉 史鲲鹏 沙珍霞 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第3期37-51,共15页
肝脏表达抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide 2,LEAP-2)在鱼类先天免疫系统中发挥重要作用。本研究通过RACE技术获得了俄罗斯鲟LEAP-2(Acipenser gueldenstaedti LEAP-2,AgLEAP-2)的全长c DNA序列,对其序列特征和表达水平... 肝脏表达抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide 2,LEAP-2)在鱼类先天免疫系统中发挥重要作用。本研究通过RACE技术获得了俄罗斯鲟LEAP-2(Acipenser gueldenstaedti LEAP-2,AgLEAP-2)的全长c DNA序列,对其序列特征和表达水平进行了分析;构建Ag LEAP-2原核表达载体并对重组蛋白进行纯化;进一步采用琼脂稀释法初步检测Ag LEAP-2蛋白的抑菌活性。结果显示,AgLEAP-2基因c DNA全长为622 bp,开放阅读框(ORF)为246 bp,预测编码81个氨基酸,分子量约为11.2 kDa,5′端非编码区为184 bp,3′端非编码区为192 bp。Ag LEAP-2包含一个信号肽(1~25 aa)和一个成熟肽(26~81 aa),成熟肽含有4个保守的半胱氨酸残基,在Cys58-Cys69和Cys64-Cys74的相对位置之间各形成一个二硫键的核心结构。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,AgLEAP-2在所有健康组织中广泛表达,在肝脏中表达水平最高,在肠道和肌肉中表达水平次之,在鳃中表达量最低。与0 h相比,Ag LEAP-2在感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)后的不同时间点的肝脏、脾脏、肠道、头肾、鳃和血液组织中均显著上调。此外,重组Ag LEAP-2蛋白(r Ag LEAP-2)在体外对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有抗菌活性并存在剂量效应。本研究表明,AgLEAP-2可能在俄罗斯鲟的先天免疫系统中发挥重要作用且对多种病原菌有一定的抗菌效果,本研究为开发新的抗菌制剂提供了依据。 展开更多
关键词 肝脏表达抗菌肽2(leap-2) 基因表达 抗菌活性 细菌感染 俄罗斯鲟
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大黄鱼肝表达抗菌肽2基因的克隆和原核表达 被引量:4
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作者 蔡灿 薛良义 孙爱飞 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期55-59,73,共6页
抗菌肽是在多种细胞中表达具有抗菌活性的肽类物质的总称,在免疫反应中发挥着非常重要的作用。通过同源克隆法克隆到大黄鱼肝脏表达的抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide-2,LEAP-2)基因的完整开放阅读框(Opening Reading Fr... 抗菌肽是在多种细胞中表达具有抗菌活性的肽类物质的总称,在免疫反应中发挥着非常重要的作用。通过同源克隆法克隆到大黄鱼肝脏表达的抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide-2,LEAP-2)基因的完整开放阅读框(Opening Reading Frame,ORF)。克隆到的大黄鱼LEAP-2全长2236 bp,包含外显子Ⅰ78 bp,内含子Ⅰ880 bp,外显子Ⅱ179 bp,内含子Ⅱ1044 bp,外显子Ⅲ55 bp,编码序列312 bp,编码103个氨基酸。推断的氨基酸序列羧基端区域存在高度保守的4个半胱氨酸残基,符合LEAP-2超家族的结构特征。同源性对比后显示LEAP-2基因在进化上高度保守,大黄鱼LEAP-2推断的氨基酸序列与牙鲆、黄颡鱼、蓝色鲶鱼和斑点叉尾鮰等鱼类之间的同源性均在95%以上。将大黄鱼LEAP-2 cDNA连接到pET-32a(+),构建了重组表达质粒pET-32a-LEAP-2,将其转化到大肠杆菌BL21上并用1.0 mmol/L IPTG诱导表达,获得了大小约为27 kDa的重组蛋白,与预期的一致。 展开更多
关键词 大黄鱼 肝表达抗菌肽2 基因克隆 原核表达
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竞技健美操剪式变身跳转体180°动作身体训练的研究 被引量:3
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作者 张海燕 《衡水学院学报》 2009年第1期93-95,共3页
通过采用文献资料法、调查法、特尔菲法等方法,就剪式变身跳转体180°动作的完成所需的身体素质及训练内容进行了深入细致的研究,集合专家意见,得出对此动作进行身体素质训练中柔韧素质训练最为重要,其次是速度素质、力量素质和协... 通过采用文献资料法、调查法、特尔菲法等方法,就剪式变身跳转体180°动作的完成所需的身体素质及训练内容进行了深入细致的研究,集合专家意见,得出对此动作进行身体素质训练中柔韧素质训练最为重要,其次是速度素质、力量素质和协调素质的训练. 展开更多
关键词 竞技健美操 剪式变身跳转体180° 身体训练
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Ⅱ型肝脏表达抗菌肽研究进展
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作者 高琪 刘阳 +3 位作者 张涛 路宏朝 王令 王珊珊 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期104-108,共5页
Ⅱ型肝脏表达抗菌肽(LEAP-2)是一种在脊椎动物肝脏中高度表达的抗菌肽,具有体外抗菌和体内免疫活性,作为胃饥饿素受体(GHS-R1a)的反向激动剂和拮抗剂,是研究肥胖和相关代谢性疾病预防和治疗的热点。论文介绍了不同物种LEAP-2的组织分布... Ⅱ型肝脏表达抗菌肽(LEAP-2)是一种在脊椎动物肝脏中高度表达的抗菌肽,具有体外抗菌和体内免疫活性,作为胃饥饿素受体(GHS-R1a)的反向激动剂和拮抗剂,是研究肥胖和相关代谢性疾病预防和治疗的热点。论文介绍了不同物种LEAP-2的组织分布和分子结构,并对其体外抗菌、体内免疫以及反向调控胃饥饿素诱导的生物效应的研究进展进行综述,以期为今后LEAP-2在养殖业抗菌肽类药物及治疗肥胖药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 Ⅱ型肝脏表达抗菌肽 抗菌活性 免疫功能 胃饥饿素受体 胃饥饿素 肥胖
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基于LEAP模型的省域货运物流碳达峰路径分析
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作者 王君 张萌萌 +2 位作者 付建村 解晓燕 徐畅 《山东交通学院学报》 CAS 2023年第2期49-56,88,共9页
为分析省域层面货运物流碳达峰路径,以某省为例,应用长期能源替代规划系统(long-range energy alternatives planning systems,LEAP)模型,预测基准情景和低碳情景下2019—2050年某省货运物流领域的能源需求、CO_(2)排放和减排潜力,并提... 为分析省域层面货运物流碳达峰路径,以某省为例,应用长期能源替代规划系统(long-range energy alternatives planning systems,LEAP)模型,预测基准情景和低碳情景下2019—2050年某省货运物流领域的能源需求、CO_(2)排放和减排潜力,并提出碳达峰路径方案。结果表明:基准情景下某省货运物流能源需求和CO_(2)排放均将于2038年左右达峰,低碳情景下达峰时间分别有望提前到2034年、2033年。公路货运的减排潜力巨大,应大力推进“公转铁”“公转水”,不断提高交通工具的能效水平及新能源、清洁能源的应用比例,配套建设新能源与清洁能源基础设施,加快低碳技术在货运物流中的创新应用。 展开更多
关键词 LEAP模型 货运物流 碳达峰路径 低碳
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东莞市低碳路径下加速电气化对CO_(2)和污染物协同减排影响 被引量:5
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作者 吴乐敏 陈丙寅 +5 位作者 欧林冲 白玉洁 刘可旋 王伟文 彭勃 王雪梅 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期6653-6663,共11页
城市是能源消耗的中心,电气化可以整合城市能源结构,实现清洁能源高效利用,探究城市低碳路径下加速电气化的协同减排影响对实现城市减污降碳至关重要.基于长期能源替代规划模型(LEAP-DG),设置了基准情景、低碳情景和加速电气化情景等3... 城市是能源消耗的中心,电气化可以整合城市能源结构,实现清洁能源高效利用,探究城市低碳路径下加速电气化的协同减排影响对实现城市减污降碳至关重要.基于长期能源替代规划模型(LEAP-DG),设置了基准情景、低碳情景和加速电气化情景等3类情景,评估电气化措施在不同电力结构下的减排潜力,量化重点部门的措施贡献,探讨广东省典型制造业城市东莞的协同减排效果.结果表明,电力结构优化促进了电气化措施的协同减排效果,低碳路径下加速电气化将进一步降低电力污染物排放强度,2050年,东莞市CO_(2)、 NO_(x)、 VOC和CO减排7.35×10^(6)、 1.28×10^(4)、 1.62×10^(4)和8.13×10^(4)t, SO_(2)和PM_(2.5)消费侧减排量和生产侧增排量达到平衡.电气化渗透速率和电力结构优化协调发展是电气化措施实现减排效益的关键,工业和交通部门加速电气化将同时降低CO_(2)和大气污染物排放,交通部门得益于燃油车和电动车的高转换效率,2050年CO_(2)、 CO、 VOC和NO_(x)分别削减5.42×10^(6)、 7.76×10^(4)、 1.43×10^(4)和1.06×10^(4)t.而高电气化率的建筑部门,额外电力中煤电较高,提高了CO_(2)和各项污染物排放.城市在供电结构优化下合理调整不同部门电气化力度可实现针对性的污染防控. 展开更多
关键词 加速电气化 LEAP模型 CO_(2) 大气污染物 协同减排
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