川芎嗪对骨髓移植后小鼠LFA-1和ICAM-1表达的影响

本研究探讨川芎嗪对骨髓移植 (BMT)后小鼠骨髓中LFA 1和ICAM 1表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。 15 0只BALB/c小鼠随机分为正常组、生理盐水组和川芎嗪组。正常组未作任何处理 ,生理盐水组和川芎嗪组在BMT后分别喂饲相同剂量的生理盐水 ( 0 .2毫升 /只 ,每天 2次 )和川芎嗪 ( 2毫克 /只 ,每天 2次 ) ,并分别于BMT后第 7,14 ,2 1,2 8天统计存活率 ,计数脾集落形成单位 (CFU S)、外周血细胞、骨髓单个核细胞 (BMM NC) ,分析骨髓组织学变化及LFA 1和ICAM 1表达水平。结果表明 :川芎嗪组小鼠在BMT后第 10天CFU S计数和BMT后第 7,14 ,2 1,2 8天存活率、外周血白细胞、血小板、BMMNC计数、骨髓造血组织容量以及LFA 1表达水平均显著高于生理盐水组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,成熟红细胞容量和ICAM 1表达水平均明显低于生理盐水组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。川芎嗪组小鼠脂肪组织容量在BMT后第 7、14天明显高于生理盐水组 (P <0 .0 1) ,在第 2 1,2 8天明显低于生理盐水组 (P <0 .0 1)。结论 :川芎嗪改善骨髓微环境 ,促进造血重建。

LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移

为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达。利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化。结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少。结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用。

高压芒刺静电场对小鼠LFA-1和ICAM-1表达的影响

采用不同电压高压芒刺静电场对小鼠进行全身辐射,荧光免疫流式细胞术检测蛋白表达量的变化.通过时程/量效研究不同电压高压芒刺静电场对细胞表面分子LFA 1和ICAM 1的影响.剂量效应结果表明,LFA 1和ICAM 1在10~20 kV之间处理组的表达量明显高于对照组(P<0.01);在30kV以上电压表达量明显降低(P<0.05);时间进程研究结果表明,处理后2 h开始实验组表达量与对照组相比差异显著,一直持续到24 h.不同电压高压芒刺静电场可引起ICAM 1和LFA 1不同的生物效应,二者的相互作用在免疫调节反应中发挥重要功能.

LFA-1基因敲除鼠胶原诱导风湿性关节炎发病率及程度的降低

淋巴细胞功能相关抗原(LFA-1)属于黏附分子家族,在细胞相互作用中发挥重要作用。通过观察LFA-1基因敲除小鼠的胶原诱导关节炎(CIA)发病率、放射线学及组织学变化,探讨LFA-1分子在CIA发病中的作用。实验采用100μg的二型胶原(CII)加弗氏完全佐剂充分混合,在LFA-1基因敲除小鼠及正常对照组小鼠尾根部皮内注射,21天后重复免疫一次,随后进行发病率、放射线学及组织学分析。研究结果显示,CII免疫后,正常对照组小鼠平均发病率为57%,临床可见明显的放射线及组织学的异常变化。而LFA-1基因敲除小鼠无发病,放射线及组织学检查亦无明显异常改变。上述结果提示LFA-1在胶原诱导的关节炎发病中起重要作用。

重症急性胰腺炎肺损伤大鼠ICAM-1和LFA-1变化及丹参注射液的干预作用

目的观察大鼠重症急性胰腺炎肺损伤时细胞间细胞黏附分子(ICAM)-1和淋巴细胞功能相关抗原(LFA)-1变化及丹参注射液的干预作用。方法SD大鼠随机分为假手术组,丹参治疗组,重症急性胰腺炎(SAP)组,制模后不同时相点取大鼠肺组织及血液标本测相应指标变化。结果SAP组随着大鼠肺脏病损的加重,ICAM-1及LFA-1表达逐渐升高;丹参治疗组肺脏病损较SAP组相同时相点低,ICAM-1及LFA-1表达低于SAP组。结论在大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中,ICAM-1及LFA-1起重要作用,而丹参注射液可起到抑制ICAM-1及LFA-1表达的作用。

ICAM-1/LFA-1在乳腺癌淋巴转移中表达的研究

目的通过观察人乳腺癌组织和癌旁"正常"乳腺组织中细胞间黏附分子-1(interce llular adhesion molecule-1,ICAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function association antigen-1,LFA-1)的表达,探讨ICAM-1和LFA-1对乳腺癌淋巴道转移的影响。方法取乳腺癌60例和癌旁"正常"乳腺组织60例,用免疫组化的方法分别对上述两种组织中的ICAM-1和LFA-1表达进行观察,分析ICAM-1和LFA-1与乳腺癌淋巴道转移之间的关系。结果乳腺癌组织中ICAM-1、LFA-1表达的阳性率明显高于癌旁"正常"乳腺组织(P<0.01),在乳腺癌组织中,淋巴结转移阳性组中ICAM-1和LFA-1的表达明显高于淋巴结转移阴性组(P<0.05);乳腺癌组织中ICAM-1和LFA-1的表达具有正相关性(P>0.05)。结论ICAM-1和LFA-1与乳腺癌的淋巴道转移有关,并且通过两者的协同作用促进了乳腺癌的淋巴道转移,通过分析两者在乳腺癌组织中的表达,有助于评价肿瘤的转移能力,从而为乳腺癌淋巴道转移的预防和治疗起到一定的指导作用。

重症急性胰腺炎时ICAM-1和LFA-1变化及丹参注射液干预的影响

目的观察大鼠重症急性胰腺炎胰腺ICAM-1和血液中LFA-1变化及丹参注射液干预的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组,治疗对照组,丹参治疗组,制模后不同时相点取大鼠胰腺及血液标本测相应指标变化。结果 SAP组随着大鼠胰腺病损的加重,ICAM-1及LFA-1表达逐渐升高;丹参治疗组胰腺病损均较SAP组相同时相点为低,ICAM-1及LFA-1的表达低于治疗对照组。结论在大鼠SAP时,ICAM-1及LFA-1起重要作用,而丹参注射液可起到抑制ICAM-1及LFA-1表达的作用。

LFA-1基因对胶原诱导小鼠关节炎关节局部引流淋巴结T细胞活性的影响

目的探讨淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)在类风湿性关节炎形成中的作用。方法采用Ⅱ型胶原诱导小鼠关节炎模型,观察LFA-1基因敲除小鼠引流淋巴结T细胞增殖和细胞因子水平。结果LFA-1基因敲除小鼠在应用Ⅱ型胶原免疫后,引流淋巴结和关节局部Th1型细胞因子IFN-γ和IL-12p40mRNA水平明显低于野生型对照小鼠,Th2型细胞因子IL-4mRNA水平无明显变化。LFA-1基因敲除小鼠引流淋巴结来源的CD4+T细胞在体外受Ⅱ型胶原刺激后,其特异性增殖和细胞因子IFN-γ的产生也明显低于野生型对照小鼠。结论LFA-1基因缺失抑制了辅助性T细胞的活化和向Th1方向的分化,进而抑制关节炎的发生。

健脾益肠散对溃疡性结肠炎大鼠CD80、LFA-1表达的影响

目的研究健脾益肠散对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠共刺激分子CD80、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)表达的影响。方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶组和健脾益肠散高、中、低剂量组,采用TNBS溶液灌肠法建立UC大鼠模型,给药21 d后取材,免疫组织化学法检测结肠组织中CD80、LFA-1的蛋白阳性表达,RT-PCR法检测结肠组织中CD80、LFA-1的mRNA表达。结果模型组大鼠结肠组织中CD80的蛋白阳性和mRNA表达均明显增加,LFA-1的蛋白阳性和mRNA表达均明显减少,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);健脾益肠散高、中、低剂量均可不同程度地降低CD80的蛋白阳性和mRNA表达、升高LFA-1的蛋白阳性和mRNA表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);且健脾益肠散高剂量组优于健脾益肠散中、低剂量组(P<0.05或P<0.01)。结论健脾益肠散对UC肠黏膜的免疫炎症抑制作用可能与调节结肠组织中CD80、LFA-1的表达有关。

人乳腺癌组织中ICAM-1、LFA-1和VEGFR-3的表达与癌淋巴转移关系的研究

目的观察不同时期,不同转移阶段的人乳腺癌组织中细胞间黏附分子(ICAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)的表达,探讨ICAM-1和LFA-1对乳腺癌淋巴道转移的影响,为乳腺癌淋巴道转移的分子机制提供理论依据。方法根据不同病变阶段的手术患者切除的乳腺癌标本进行HE染色和免疫组化染色,观察ICAM-1、LFA-1在乳腺癌组织和ICAM-1、LFA-1、VEGFR-3在癌旁组织淋巴管内皮的表达情况。结果随着临床分期的增高和淋巴结转移的发生,ICAM-1和LFA-1在乳腺癌癌细胞和癌巢中的表达阳性率逐渐增高,同时ICAM-1、LFA-1和VEGFR-3在癌旁组织淋巴管内皮细胞的表达阳性率也逐渐增高,具有正相关性,并且ICAM-1和LFA-1在癌旁组织淋巴管内皮细胞的表达之间具有正相关性(P<0.01)。同时发现无论是在乳腺癌癌细胞、癌巢还是在癌旁组织淋巴管内皮细胞,ICAM-1和LFA-1表达的高低都与癌的分化程度、性别、年龄不具有相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ICAM-1和LFA-1与乳腺癌的淋巴道转移有关,并且通过两者的协同作用促进了乳腺癌的淋巴道转移。两者在癌组织及癌旁组织淋巴管内皮细胞表达的高低,可以作为数据指标对乳腺癌淋巴道转移的预防和治疗起到一定的指导作用。随着肿瘤的进展,乳腺癌癌旁组织中的淋巴管数量随之增加,可能与乳腺癌的淋巴道转移有关。VEGFR-3在淋巴管内皮细胞的表达具有较高的特异性,可以作为淋巴管内皮细胞的特异性标志物来标志淋巴管。

砷剂治疗急性早幼粒细胞白血病高白细胞期LFA-1,Mac-1和ICAM-1

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3)和维甲酸 (ATRA)治疗急性早幼粒细胞白血病 (APL )患者高白细胞发生后 ,黏附分子 L FA- 1(淋巴细胞功能相关抗原 - 1)和 Mac- 1以及细胞间黏附分子 - 1(ICAM- 1)的表达。方法 :随机分两组 ,分别选用 0 .1% As2 O310 m L / d,静脉点滴 ;ATRA 2 5 mg· m- 2 · d- 1 ,分 3次口服。分别用流式细胞仪观察两组治疗前及治疗后白细胞增高期外周血白细胞上 L FA - 1和 Mac- 1的表达及其培养上清刺激内皮细胞 ICAM- 1的表达。结果 :As2 O3组和 ATRA组治疗后高白细胞时 L FA - 1分别为 (5 1.87± 17.6 5 ) %和 (4 8.32± 16 .98) % ,Mac- 1分别为 (4 5 .2 5± 19.12 ) %和 (4 3.4 5± 2 0 .6 5 ) % ,明显高于治疗前 ,两组间无明显差别。As2 O3组和 ATRA组高白细胞期 APL骨髓上清刺激内皮细胞表达 ICAM- 1增加分别为 (6 9.39± 18.4 6 ) %和 (6 4 .5 7± 7.2 4 ) % ,明显高于治疗前 (4 2 .35± 9.36 ) %和 (4 5 .5 6± 6 .86 ) %。结论 :As2 O3和 ATRA治疗 APL高白细胞的发生与诱导分化治疗过程中 APL细胞的黏附分子 L FA- 1和 Mac- 1表达增加 ,并刺激内皮细胞 ICAM- 1的增加有关 ,L FA - 1,Mac- 1和ICAM- 1互相作用 ,使 APL细胞与内皮细胞黏附增加 ,并释放入外周血增加。

ICAM-1/LFA-1在早期自然流产患者蜕膜组织中的表达

目的通过观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)在早期自然流产患者蜕膜组织中的表达,探讨ICAM-1/LFA-1与早期自然流产的关系。方法采用免疫组化方法检测33例早期自然流产患者和同期妊娠的30例健康妇女蜕膜组织中ICAM-1、LFA-1的表达,用激光共聚焦显微镜(CLSM)双标检测二者关系并加以分析。结果流产组患者蜕膜组织基质细胞ICAM-1和LFA-1蛋白表达强度高于对照组(t=-3.632,P=0.001;t=-3.839,P=0.001);流产组蜕膜腺体细胞ICAM-1和LFA-1蛋白表达强度明显低于对照组(t=-2.613,P=0.013;t=-2.266,P=0.027);共聚焦显微镜下ICAM-1和LFA-1在流产组和对照组的蜕膜组织均有大部分重叠表达,在蜕膜腺体细胞流产组比对照组重合表达明显。结论 ICAM-1和LFA-1在早期自然流产患者蜕膜组织基质细胞的高表达和腺体细胞的低表达可能与早期自然流产的发生有关。

细胞粘附分子LFA-1,MAC-1在大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤模型中白细胞表面表达的动态研究及其意义(英文)

目的:检测整合素家族细胞粘附分子LFA-1,Mac-1在大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤模型血中白细胞表面表达的动态变化,探讨其在急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤中的作用。方法:应用流式细胞仪,于多个时相点检测LFA-1,Mac-1在SD大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤模型血中白细胞表面表达的变化。结果:LFA-1,Mac-1在炎症组中各个时相点的表达均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:整合素家族细胞粘附分子LFA-1,Mac-1参与了急性坏死性胰腺炎继发多器官功能损伤的过程。

ICAM-1、LFA-1在正常胃黏膜中及胃癌组织中的表达及意义

目的探讨ICAM-1、LFA-1在正常胃黏膜中及胃癌组织中的表达。方法随机选取胃癌患者80例作为胃癌组,另随机选取同期胃溃疡或十二指肠溃疡患者80例作为正常组,统计分析两组患者的CD45RA、CD45RO、ICAM-1、LFA-1表达情况、胃癌组不同肿瘤淋巴结转移患者的CD45RA、CD45RO表达情况、胃癌组不同肿瘤原发灶深度、肿瘤淋巴结转移、肿瘤远处转移患者的ICAM-1表达情况。结果胃癌组患者的CD45RA、CD45RO、ICAM-1、LFA-1表达率均低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组肿瘤淋巴结转移N1+N2患者的CD45RA、CD45RO表达率(76.0%、32.0%)均低于N0患者(80.0%、66.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组肿瘤原发灶深度T1、T2、T3患者的ICAM-1表达率逐渐降低,肿瘤淋巴结转移N0、N1、N2患者的ICAM-1表达率逐渐降低,肿瘤远处转移M0、M1患者的ICAM-1表达逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ICAM-1、LFA-1在胃癌中的表达较正常胃黏膜低。

外周血LFA-1和ICAM-1在非小细胞肺癌中的临床意义及表达

目的:探讨非小细胞肺癌血清中LFA-1和ICAM-1的表达在肿瘤侵袭转移过程中的作用机制。方法:采用双抗体夹心ABC-EL ISA法测定。结果:(1)非小细胞肺癌患者血清中LFA-1和ICAM-1的含量明显高于对照组;差异具有显著性(P<0.01);(2)非小细胞肺癌患者LFA-1和ICAM-1间存在正相关性(P<0.05)。(3)肺癌的Ⅲ+Ⅳ期与Ⅰ+Ⅱ期相比血清LFA-1、ICAM-1均有显著差异(P<0.05)。(4)有淋巴结转移者血清LFA-1和ICAM-1含量较无淋巴结转移者增高,差异显著(P<0.05)。结论:LFA-1 ICAM-1可能是反映肺癌侵袭转移潜能的一个有效生物学指标。

LFA-1与抗CD3 mAb共刺激对狼疮肾炎PBMC增殖和IgG合成的影响

目的 :探讨LFA 1与抗CD3mAb共刺激对狼疮肾炎 (LN)患者外周血单个核细胞 (PBMC)增殖与免疫球蛋白 (IgG)合成的影响。方法 :分离LN患者及健康人 (正常对照 )的PBMC ,采用Ficoll梯度密度离心法。细胞增殖实验采用3 H TdR掺入法。IgG测定采用ELISA法。结果 :在抗CD3mAb诱导下 ,2 9例LN非活动期和活动期PBMC中 ,3 H TdR的掺入量和IgG的合成均增加 ,且活动期的增殖强于非活动期 (P <0 .0 1) ;而单纯用抗CD3mAb对 12例正常对照的PBMC没有影响 (P >0 .0 5 )。抗CD3mAb与抗LFA 1mAb共刺激 ,均可增加LN患者 (活动期和非活动期 )及正常对照PBMC3 H TdR掺入量和IgG合成 ,其中活动期增殖效应强于非活动期 (P <0 .0 1) ,后者又强于正常对照 (P <0 .0 1)。抗LFA 1中和抗体的加入 ,可明显抑制LFA 1诱导的共刺激效应 (P <0 .0 1)。结论 :LFA 1促进LN患者PBMC增殖和IgG合成 。

蕈样肉芽肿患者外周血单个核细胞LFA-1及ICAM-1分子表达的研究

目的：研究白细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）及细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）分子在蕈样肉芽肿（ＭＦ）患者外周血中的异常表达及意义。方法：应用间接荧光抗体标记及流式细胞术对１０例蕈样肉芽肿（ＭＦ）患者外周血进行检测。结果：ＭＦ患者外周血ＬＦＡ－１＋单个核细胞为（７９．３１±６．９９）％，高于正常对照的（６８．０３±８．６２）％，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）；患者外周血ＩＣＡＭ－１＋单个核细胞为（４６．１６±３．２３）％，高于正常对照的（３１．６９±１１．５６）％，差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。结论：ＭＦ患者体内粘附机制存在异常，与其发病有关。

Tg(CD4-EGFP);LFA-1^(-/-)基因工程小鼠模型的构建

目的构建并繁殖T细胞表达绿色荧光蛋白的LFA-1基因敲除小鼠[Tg(CD4-EGFP);LFA-1-/-]。方法将CD4-EGFP转基因小鼠与LFA-1基因敲除小鼠杂交并将其子代相互杂交,提取小鼠尾部DNA,用PCR法鉴定基因型。根据孟德尔定律,可得到Tg(CD4-EGFP;LFA-1-/-)小鼠。结果 Tg(CD4-EGFP);LFA-1-/-小鼠的构建、饲养繁殖均获得成功。结论成功获得了T细胞表达绿色荧光蛋白的LFA-1基因敲除小鼠。

大鼠皮肤移植后ICAM-1和LFA-1与排异反应的关系

目的 探讨细胞粘附分子和皮肤移植后排异反应之间的关系。方法 用ＨＥ及免疫组化方法观察２０例大鼠Ⅲ度烫伤异体－自体皮肤混合移植和１５例同种大鼠大张异体皮肤移植组织在移植后４～５，７，１４，２１和２８ｄ时细胞粘附分子ＩＣＡＭ－１和ＬＦＡ－１的表达情况。结果 大鼠Ⅲ度烫伤后异体－自体皮肤混合移植组织中ＬＦＡ－１＋淋巴细胞和ＩＣＡＭ－１＋细胞的表达均低于同种大张异体皮肤移植组织，与排异程度相一致，分别在移植后７和１４ｄ时差异显著（Ｐ＜０．０５）。结论 ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１不是主要促使皮肤混合移植排异反应中Ｔ细胞活化的共刺激信号，但ＩＣＡＭ－１＋细胞和ＬＦＡ－１＋淋巴细胞在介导同种大张异体皮移植排异反应中起主要作用。

猪LFA-1和CTLA-4实时荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立猪LFA—1和CTLA-4实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据GenBank中核苷酸序列设计猪淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）的特异性引物，经RT-PCR扩增、目的片段与载体连接转化以及重组质粒的鉴定，并对重组质粒标准品和样品cDNA进行检测，构建LFA－1和CTLA-4荧光定量RT-PCR标准曲线。【结果】以1×10^2～1×10^9拷贝／μl不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后，统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系（LFA—1：RSq=0．992；CTLA-4：RSq=0．994）；样品检测显示LFA－1与CTLA－4引物的扩增曲线图和熔解曲线图的特异性。【结论】所构建的质粒标准品具有线性关系好、重复性好、敏感性高等特点，以及其引物在样品检测中的可应用性，为分析猪免疫细胞在感染病毒前后LFA－1和CTLA－4表达的变化以及评估猪体免疫功能，提供必要的技术平台。