短肽修饰的甲氨蝶呤的制备及细胞毒性作用

目的:制备促黄体激素释放激素-甲氨蝶呤(LH-RH-MTX)并考察其对表达有促黄体激素释放激素(LH-RH)受体的肿瘤细胞的毒性作用。方法:以临床抗恶性肿瘤药物甲氨蝶呤(MTX)为模型药物,以促黄体激素释放激素[D-Lys6]LH-RH为导向物,通过共价键连接制备LH-RH-MTX。应用MTT法分别考察游离MTX和LH-RH-MTX对鼻咽癌HNE-1及前列腺癌PC-3细胞株的细胞毒性作用。结果:MTT法结果表明游离MTX和LH-RH-MTX对2种细胞株均有生长抑制作用,对前列腺癌PC-3细胞的抑制率大于鼻咽癌HNE-1细胞;给药12h后抑制率达到最大;当药物质量浓度为200.0μg.L-1,作用12h后:LH-RH-MTX对前列腺癌PC-3细胞的抑制率可高达97.73%,游离MTX为49.90%;LH-RH-MTX对鼻咽癌HNE-1细胞的抑制率为38.92%,游离MTX为7.41%;在同一种细胞株上,LH-RH-MTX的IC50值小于游离MTX。结论:经过短肽修饰的化合物LH-RH-MTX可与表达有LH-RH受体的肿瘤细胞特异性结合并发挥抑制作用,抗肿瘤活性高于游离MTX。提示用LH-RH作为TDDS的导向物,实现药物的靶向释放,提高药物生物利用度是可行的。

肽修饰的甲氨蝶呤体外抗肿瘤作用初步研究

本文以人乳腺癌MCF-7细胞及人红白血病K562细胞作为受试细胞,分别采用MTT比色法、流式细胞仪、RT-PCR技术检测促黄体激素释放激素肽修饰的甲氨蝶呤(methotrexate modified by luteinizing hormone-releasing hormone peptide,LH-RH-MTX)对细胞增殖的抑制作用以及对细胞周期和凋亡、LHRHR mRNA表达量的影响。结果显示,LH-RH-MTX对MCF-7细胞增殖的抑制作用明显高于K562细胞;相同浓度的LH-RH-MTX对MCF-7细胞增殖的抑制作用明显高于游离MTX,对鼠骨髓单核细胞的抑制作用明显小于游离MTX;经LH-RH-MTX作用后,S期细胞明显增加,细胞凋亡率明显升高,LHRHR mRNA的相对表达量明显下降。LH-RH可作为导向分子将药物靶向递送到LHRHR高表达的肿瘤细胞,降低药物的毒副作用,提高治疗指数。