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LIMK1通过上调ROS/Src通路进而促进宫颈癌的进展
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作者 贾亚静 杜耐一 +2 位作者 赵炜 李永萍 刘雅坤 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期92-99,共8页
目的探究LIMK1对宫颈癌(cervical cancer)进展的影响。方法构建LIMK1过表达人宫颈癌HeLa细胞及C-33A细胞,将HeLa细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积并以Western blot实验检测其瘤体细胞中NOX2、NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白... 目的探究LIMK1对宫颈癌(cervical cancer)进展的影响。方法构建LIMK1过表达人宫颈癌HeLa细胞及C-33A细胞,将HeLa细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积并以Western blot实验检测其瘤体细胞中NOX2、NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白表达情况;将LIMK1过表达HeLa细胞及LIMK1过表达C-33A细胞培养于5%O 2条件下,并加入抗氧化剂,以Western blot实验检测细胞内LIMK1、NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白表达情况,以划痕实验检测细胞迁移能力,以Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,以单克隆增殖实验检测细胞增殖能力。结果接种LIMK1过表达HeLa细胞的裸鼠肿瘤体积明显增大,其NOX2、NOX4、p-Src、p-RUNX3以及MMP-9蛋白升高,而RUNX3蛋白表达降低;LIMK1过表达的HeLa细胞LIMK1、NOX4、p-Src、p-RUNX3以及MMP-9蛋白表达升高,RUNX3蛋白表达降低,同时LIMK1过表达的HeLa细胞及LIMK1过表达C-33A细胞的迁移和侵袭能力以及细胞增殖能力增强,而加入抗氧化剂后,细胞的NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白表达水平以及细胞迁移、侵袭和增殖能力与LIMK1正常表达的细胞无显著差异。结论LIMK1通过促进ROS/Src通路进而促进宫颈癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力,促进了宫颈癌的进展。 展开更多
关键词 limk1 ROS SRC 宫颈癌 RUNX3
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二烯丙基二硫通过LIMK1-Cofilin1通路抑制人胃癌细胞侵袭与上皮-间质转化
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作者 马艳华 夏红 +3 位作者 刘芳 苏坚 向姝霖 苏琦 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第21期3908-3913,共6页
目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响及其机制。方法:体内外实验分为MGC803细胞组与DADS处理组。MTT、划痕实验与侵袭实验检测DADS对增殖、迁移与侵... 目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响及其机制。方法:体内外实验分为MGC803细胞组与DADS处理组。MTT、划痕实验与侵袭实验检测DADS对增殖、迁移与侵袭的影响。Western Blot检测LIMK1-Cofilin1通路与EMT相关蛋白表达。相差显微镜观察MGC803细胞形态改变。裸鼠实验检测DADS对移植瘤的作用。结果:MTT显示,DADS可呈时间依赖性抑制MGC803细胞增殖(P<0.05)。划痕实验显示,DADS组细胞迁移距离(59.9±1.9)μm较MGC803组(127.1±2.0)μm明显缩短(P<0.01)。侵袭实验显示,DADS组穿膜细胞(30.0±2.6)个较MGC803组(48.3±2.5)个明显减少(P<0.01)。Western Blot显示,DADS作用6 h、12 h、24 h、48 h后,MGC803细胞LIMK1、p-LIMK1与p-Cofilin1(P<0.001),Vimentin(P<0.001)与MMP-9(P<0.001)分别呈时间依赖性下调,而E-cadherin(P=0.001)与TIMP-3明显上调(P<0.001)。相差显微镜显示,DADS处理后,纤维母细胞样细胞减少,异型性显著降低。裸鼠实验显示,DADS组移植瘤较MGC803细胞组生长缓慢(P<0.05),DADS组移植瘤重量较MGC803细胞组降低,抑瘤率为60.19%(P<0.001),Ki-67、Vimentin、Snail和CD34阳性表达均降低,E-cadherin表达增加。结论:DADS可通过LIMK1-Cofilin1通路体内外抑制MGC803细胞侵袭与EMT。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌MGC803细胞 limk1-Cofilin1通路 增殖 迁移 侵袭 上皮-间质转化
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miR-17-5p调控LIMK1/cofilin1通路对子宫内膜异位症发生发展的影响
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作者 李琳 贺冰 +2 位作者 张翼 马本玲 邢敏 《吉林医学》 CAS 2023年第7期1755-1759,共5页
目的:探究微小核糖核酸-17-5p(miR-17-5p)调控LIM激酶1(LIMK1)/丝切蛋白1(cofilin1)通路对子宫内膜异位症发生发展的影响。方法:选取行子宫切除术的30例子宫内膜异位症患者作为子宫内膜异位症在位内膜组,另选取30例非雌激素依赖性疾病... 目的:探究微小核糖核酸-17-5p(miR-17-5p)调控LIM激酶1(LIMK1)/丝切蛋白1(cofilin1)通路对子宫内膜异位症发生发展的影响。方法:选取行子宫切除术的30例子宫内膜异位症患者作为子宫内膜异位症在位内膜组,另选取30例非雌激素依赖性疾病患者作为正常子宫内膜组。对两组患者的在位内膜细胞中LIMK1、cofilin1表达量采用实时荧光定量PCR法检测,对所获取的在位内膜细胞进行转染,Transwell法检测细胞的侵袭能力;CCK-8法检测细胞的增殖能力;ELISA法检测子宫内膜细胞中细胞因子ICAM-1、VEGF、MMP-9表达。结果:在位内膜组患者的miR-17-5p表达水平低于正常子宫内膜组(P<0.05);在位内膜组的LIMK1蛋白及其mRNA、cofilin1蛋白及其mRNA相对表达水平均高于正常子宫内膜组(P<0.05);在位内膜组未转染组(EC组)及转染阴性对照(EC-C组)情况下细胞侵袭能力显著高于正常子宫内膜组(NC组),但转染情况下(EC-miR-17-5p-RNAi组)细胞侵袭能力显著低于正常子宫内膜组(NC-miR-17-5p-cDNA组),两组患者细胞转染阴性对照(EC-C组、NC-C组)与未转染状态(EC组、NC组)差异无统计学意义(P>0.05);转染情况在位内膜组患者(EC-miR-17-5p-RNAi组)细胞侵袭力低于未转染状态(EC组),但正常子宫内膜组(NC-miR-17-5p-cDNA组)高于未转染组(NC组,P>0.05)。EC组细胞增殖能力在24 h、48 h、72 h、96 h均高于NC组细胞(P<0.05);EC-miR-17-5p-RNAi组各时间段细胞增殖能力与EC组相比较均升高(P<0.05);EC组与EC-C组在各时间段的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);NC-miR-17-5p-cDNA组在各时间段的增殖能力均低于NC组(P<0.05);NC-C组各时间段的细胞增殖能力与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。基础状态下,EC组ICAM-1、MMP-9和VEGF水平高于NC组,EC-miR-17-5p-RNAi组与EC组比较明显升高(P<0.05);EC组与EC-C组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);NC组ICAM-1、MMP-9和VEGF水平明显高于NC-miR-17-5p-cDNA组(P<0.05),但与NC-C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-17-5p在内异症细胞中表达水平下调,通过负向调控LIMK1/cofilin1通路抑制细胞增殖、侵袭,在内异症发生及进展过程中发挥基因调节功能。 展开更多
关键词 miR-17-5p limk1/cofilin1通路 子宫内膜异位症
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探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化检测在前列腺诊断中的应用
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作者 陈咏梅 《系统医学》 2023年第11期10-13,共4页
目的 探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化技术检测在前列腺病理诊断中的应用价值。方法选取2021年2月—2022年2月南通市第二人民医院收治的202例行早期穿刺及电切的前列腺患者为研究对象,依照病理诊断进行分组,其中良性前列... 目的 探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化技术检测在前列腺病理诊断中的应用价值。方法选取2021年2月—2022年2月南通市第二人民医院收治的202例行早期穿刺及电切的前列腺患者为研究对象,依照病理诊断进行分组,其中良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia, BPH)组患者171例,前列腺癌(prostatic carcinoma,prostatic cancer, PCa)组患者31例,对两组样本中Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等前列腺标志物相应阳性表达情况进行比较,以病理确诊结果作为金标准,统计各免疫指标诊断效能以及联合诊断效能。结果 与BPH组患者相比,PCa组患者的Ki67、P504s、LIMK1及Cofilin指标的表达水平显著更高,而p63表达量显著更低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ki67、p63、LIMK13项指标单独检测PCa的灵敏度均达到90%以上;而P504s和Cofilin指标单独检测的灵敏度分别为83.87%、87.10%;Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin5项指标联合检测的灵敏度、特异度和准确度均较高,分别达到96.77%、98.24%和98.02%。结论 Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等各前列腺癌的标志物均具有一定的阳性及阴性检出率,各免疫指标联合检测对前列腺癌的鉴别和诊断具有一定的参考和指导价值。 展开更多
关键词 免疫组化 KI67 P63 P504S limk1 COFILIN 前列腺 病理诊断
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LIMK1过表达通过LIMK1/cofilin1通路促进人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭 被引量:3
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作者 周志刚 夏红 +3 位作者 刘芳 苏坚 曾颖 苏琦 《中国医药导刊》 2021年第5期364-370,共7页
目的:探讨LIMK1过表达对人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。方法:真核表达载体转染技术构建过表达LIMK1基因MGC803细胞;RT-PCR和Western blot检测LIMK1、Cofilin1、p-Cofilin1表达;MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测LI... 目的:探讨LIMK1过表达对人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。方法:真核表达载体转染技术构建过表达LIMK1基因MGC803细胞;RT-PCR和Western blot检测LIMK1、Cofilin1、p-Cofilin1表达;MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测LIMK1过表达对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移与侵袭能力的影响。结果:成功构建稳定过表达LIMK1基因MGC803细胞。MTT显示,LIMK1过表达组细胞的增殖活性呈时间依赖性,高于对照组和空载体组(P<0.001)。流式细胞术检测显示,LIMK1过表达组G2/M期细胞百分率8.36%,较MGC803组11.45%(P=0.0054)和空载体组11.59%降低(P=0.0056)。划痕实验显示,24 h后LIMK1过表达组迁移距离(163.9±1.5)mm分别高于MGC803组(127.1±2.0)mm(P<0.0001)和空载体组(124.1±3.1)mm(P<0.0001)。侵袭实验显示,LIMK1过表达组穿膜细胞(86.3±4.2)个分别明显多于MGC803组(48.3±2.5)个(P=0.0003)和空载体组(49.3±3.1)个(P=0.0003)。RT-PCR和Western blot显示,LIMK1过表达组LIMK1表达分别高于对照组(P<0.0001)和空载体组(P=0.0002),p-LIMK1表达分别高于对照组(P=0.0003)和空载体组(P=0.0004)。LIMK1过表达组Cofilin1 mRNA与蛋白表达较MGC803组和空载体组差异均无统计学意义(P>0.05),而p-Cofilin1表达分别高于对照组(P=0.0009)和空载体组(P=0.0018)。结论:LIMK1过表达可通过激活LIMK1/cofilin1通路促进MGC803细胞增殖与迁移侵袭。 展开更多
关键词 人胃癌MGC803细胞 limk1 真核表达载体转染 limk1/cofilin1通路 增殖 迁移 侵袭
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DADS通过Rac1/LIMK1/cofilin1通路增强沉默LIMK1抑制人胃癌BGC823细胞迁移侵袭 被引量:3
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作者 杨邦敏 刘芳 +3 位作者 夏红 苏坚 苏波 苏琦 《中南医学科学杂志》 CAS 2020年第3期238-243,共6页
探讨二烯丙基二硫(DADS)通过Rac1/LIMK1/cofilin1通路对沉默LIMK1抑制BGC823细胞迁移侵袭的影响。划痕实验和侵袭实验观察迁移和侵袭能力;RT-PCR、Western blot、免疫组化检测LIMK1、Rac1、Rock1、Pak1与Cofilin1和p-Cofilin1表达。结... 探讨二烯丙基二硫(DADS)通过Rac1/LIMK1/cofilin1通路对沉默LIMK1抑制BGC823细胞迁移侵袭的影响。划痕实验和侵袭实验观察迁移和侵袭能力;RT-PCR、Western blot、免疫组化检测LIMK1、Rac1、Rock1、Pak1与Cofilin1和p-Cofilin1表达。结果显示,DADS处理沉默组疤痕距离较对照组和沉默组增加(P<0.05)。DADS处理沉默组穿膜细胞低于对照组、空载体组与沉默组(P<0.05)。沉默组LIMK1表达低于对照组和空载体组,DADS后,各处理组低于处理前各组(P<0.05)。并且,沉默组、对照组和空载体组的Rac1、Rock1、Pak1与p-cofilin1表达下调(P<0.05)。表明DADS可增强沉默LIMK1抑制BGC823细胞迁移侵袭,机制可能与阻断Rac1/LIMK1/cofilin1通路有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌BGC823细胞 limk1沉默 Rac1/limk1/cofilin1通路
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二烯丙基二硫下调LIMK1抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭 被引量:14
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作者 史玲 苏坚 +3 位作者 廖前进 杨晶 夏红 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期200-205,共6页
目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人结肠癌SW480细胞LIMK1表达及迁移、侵袭能力的影响,阐明其抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学检测DADS对SW480细胞LIMK1表达的作用;划痕愈... 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人结肠癌SW480细胞LIMK1表达及迁移、侵袭能力的影响,阐明其抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学检测DADS对SW480细胞LIMK1表达的作用;划痕愈合和侵袭实验检测DADS对SW480细胞迁移、侵袭能力的影响。结果 RT-PCR结果显示,与对照组相比,DADS处理SW480细胞后其LIMK1 mR-NA表达明显下调。免疫细胞化学检测发现LIMK1蛋白在人结肠癌SW480细胞中高表达,DADS作用后LIMK1蛋白表达明显下调。Western blot检测显示,DADS呈时间浓度依赖性下调SW480细胞LIMK1蛋白表达。划痕愈合实验结果显示,随着DADS浓度增高,细胞划痕距离增宽,表明DADS呈浓度依赖性抑制SW480细胞迁移能力。Transwell侵袭实验结果表明,随着DADS浓度增高,细胞穿膜数逐渐减少,表明DADS呈浓度依赖性抑制SW480细胞侵袭能力。结论 DADS下调LIMK1表达可抑制人结肠癌SW480细胞迁移、侵袭,DADS抑制人结肠癌SW480细胞迁移、侵袭的分子机制可能与降低LIMK1蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 结肠癌 SW480细胞 limk1 迁移 侵袭
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大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路抑制卵巢癌细胞运动与侵袭 被引量:15
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作者 唐敏 李鸿 +3 位作者 周国梅 谢一泓 阮和云 黎丹戎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期366-372,共7页
目的探讨大黄酸对卵巢癌淋巴结高转移SKOV3-PM4细胞运动和侵袭能力的影响,揭示大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路与抑制卵巢癌细胞运动侵袭作用的机制。方法划痕实验观察大黄酸对卵巢癌细胞运动的影响,Matrigel-Transwell方法检测... 目的探讨大黄酸对卵巢癌淋巴结高转移SKOV3-PM4细胞运动和侵袭能力的影响,揭示大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路与抑制卵巢癌细胞运动侵袭作用的机制。方法划痕实验观察大黄酸对卵巢癌细胞运动的影响,Matrigel-Transwell方法检测细胞侵袭能力,激光共聚焦扫描显微镜和扫描电镜观察大黄酸对卵巢癌细胞形态和细胞骨架超微结构的影响,Western blot分别检测Rac1/LIMK1/cofilin通路上Rac1、LIMK1、PAK1、cofilin蛋白的表达。结果与空白对照组相比,大黄酸能抑制SKOV3-PM4细胞侵袭和迁移能力,浓度为8.8、17.60、26.40μmol·L^(-1)的大黄酸处理24 h后,细胞体外迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05);细胞出现伪足减少,细胞内微丝断裂、分布紊乱,质膜凹凸不平、细胞间的间隙变宽等超微结构改变;Western blot结果表明大黄酸能明显下调Rac1蛋白的表达水平,并呈浓度依赖性。卵巢癌细胞经大黄酸及Rac1抑制剂处理后,磷酸化LIMK1、cofilin、PAK1蛋白水平与空白对照组比较明显下降,且大黄酸联合Rac1抑制剂处理后的磷酸化蛋白下调更为明显(P<0.05);而Rac1激活剂联合大黄酸组比大黄酸组磷酸化蛋白上调明显(P<0.05)。结论大黄酸为潜在的Rac1小分子抑制剂,其作用机制可能是调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路,抑制卵巢癌淋巴结转移细胞运动和侵袭的能力。 展开更多
关键词 卵巢癌 大黄酸 Rac1/limk1/cofilin信号通路 细胞骨架 转移与侵袭 Rac1抑制剂 Rac1激活剂
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二烯丙基二硫下调LIMK1抑制人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭 被引量:5
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作者 马艳华 苏波 +5 位作者 向姝霖 姜浩 杨邦敏 章硕 夏红 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1714-1718,共5页
目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞迁移侵袭及LIMK1表达的影响。方法MTT、划痕愈合和侵袭实验分别检测DADS对MGC803细胞增殖、迁移与侵袭能力的作用;RT-PCR、Western blot与免疫细胞化学检测LIMK1表达。... 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞迁移侵袭及LIMK1表达的影响。方法MTT、划痕愈合和侵袭实验分别检测DADS对MGC803细胞增殖、迁移与侵袭能力的作用;RT-PCR、Western blot与免疫细胞化学检测LIMK1表达。结果 MTT显示,30 mg.L-1DADS作用MGC803细胞24、48、72、96 h后,增殖抑制率分别为31.8%、66.1%、83.6%、89.2%,呈明显的时间依赖关系(P<0.05)。划痕实验显示,10、20、30、40、50 mg.L-1DADS分别作用MGC803细胞,划痕愈合明显慢于对照组,呈剂量依赖关系(P<0.05)。侵袭实验显示,10、20、30、40、50 mg.L-1DADS作用MGC803细胞24 h后,穿过基质胶的细胞数分别为(35.8±3.74)、(34.1±2.02)、(31.7±4.81)、(17.2±3.08)、(13.2±3.36)个,较对照组(39.5±2.99)个数明显减少,呈剂量依赖性(P<0.05)。RT-PCR显示,30 mg.L-1DADS与MGC803细胞作用48 h后,LIMIK1mRNA明显下调(P<0.05)。Western blot与免疫细胞化学检测显示,30 mg.L-1DADS作用MGC803细胞6、12、24、48h后,LIMK1蛋白的表达水平呈时间依赖性下降(P<0.05)。结论 DADS可抑制人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭能力,其机制可能与下调LIMK1有关。 展开更多
关键词 胃癌 MGC803细胞 二烯丙基二硫 迁移 侵袭limk1
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LIMK1在结肠癌组织中表达的临床病理意义 被引量:5
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作者 颜鸿飞 苏坚 +3 位作者 廖前进 史玲 杨晶 苏琦 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期576-579,共4页
目的研究LIMK1表达与结肠癌发生、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期的关系。方法将87例结肠癌、26例腺瘤及34例正常结肠组织共147例结肠标本制成组织芯片,采用免疫组织化学技术检测结肠癌、腺瘤及正常组织中LIMK1表达。结果LI... 目的研究LIMK1表达与结肠癌发生、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期的关系。方法将87例结肠癌、26例腺瘤及34例正常结肠组织共147例结肠标本制成组织芯片,采用免疫组织化学技术检测结肠癌、腺瘤及正常组织中LIMK1表达。结果LIMK1在腺癌组织中表达[75.86%(66/87)]明显高于在腺瘤[38.46%(10/26)]与结肠正常黏膜[20.58%(7/34)]组织中的表达(P<0.05),而腺瘤组织中的表达高于正常黏膜组织(P<0.05)。高分化结肠癌组织中LIMK1表达率[40.00%(4/10)]明显高于中分化结肠癌组织中的表达率[70.21%(33/47)]与低分化腺癌结肠癌组织中的表达率[96.67%(29/30)](P<0.05),而中分化结肠癌组织中的表达率显著高于低分化腺癌(P<0.05)。体积<5.0cm结肠癌组织LIMK1表达[57.14%(20/35)]明显低于≥5.0cm的表达[88.46%(46/52)](P<0.05)。淋巴结转移表达97.78%(44/45)显著高于无淋巴结转移的表达[52.38%(22/42)](P<0.05)。Dukes分期A+B组LIMK1表达[60.98%(25/41)]明显低于C+D组[89.13%(41/46)](P<0.05)。结论LIMK1表达与结肠癌的发生、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期密切相关,其可能是结肠癌侵袭转移的重要标志。 展开更多
关键词 结肠癌 limk1 组织芯片 免疫组织化学
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沉默LIMK1促进DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭 被引量:4
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作者 苏坚 周钰娟 +3 位作者 廖前进 史玲 夏红 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期760-766,共7页
目的探讨LIMK1沉默对DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法 RNA干扰技术建立稳定LIMK1-miRNA/SW480细胞株;免疫组化和Western blot检测DADS对沉默LIMK1结肠癌SW480细胞LIMK1和磷酸化LIMK1蛋白表达的影响。划痕实验和侵袭实验检测LIM... 目的探讨LIMK1沉默对DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法 RNA干扰技术建立稳定LIMK1-miRNA/SW480细胞株;免疫组化和Western blot检测DADS对沉默LIMK1结肠癌SW480细胞LIMK1和磷酸化LIMK1蛋白表达的影响。划痕实验和侵袭实验检测LIMK1 RNA沉默与DADS对SW480细胞迁移与侵袭的影响。结果 RT-PCR与Western blot显示,LIMK1-miR/SW480细胞LIMK1mNRA与蛋白表达明显下调,表明成功构建稳定沉默LIMK1基因的SW480细胞株。免疫组化和Western blot显示,45 mg.L-1DADS处理和沉默LIMK1组较未转染组与空载体组SW480细胞LIMK1蛋白和磷酸化LIMK1明显下调(P<0.05)。划痕实验和侵袭实验发现,沉默LIMK1或DADS处理SW480细胞的迁移与侵袭能力较未转染组与空载体组明显抑制(P<0.05)。而DADS处理沉默组抑制SW480细胞迁移和侵袭能力更为明显(P<0.05)。结论沉默LIMK1基因可抑制SW480细胞迁移与侵袭,增强DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭作用。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 结肠癌SW480细胞 limk1 RNA干扰 迁移与侵袭
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胃癌中LIMK1的表达及其病理意义 被引量:6
12
作者 吴勇军 唐仪 +4 位作者 李筝 张漾 赵毅 伍镇江 苏琦 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期658-660,共3页
目的探讨LIMK1在胃癌中的表达及其临床病理意义。方法应用组织芯片与免疫组织化学SP法检测81例胃癌、26例不典型增生及34例正常组织中LIMK1的表达水平,分析其与胃癌临床分期、有无淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果 LIMK1在正常组... 目的探讨LIMK1在胃癌中的表达及其临床病理意义。方法应用组织芯片与免疫组织化学SP法检测81例胃癌、26例不典型增生及34例正常组织中LIMK1的表达水平,分析其与胃癌临床分期、有无淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果 LIMK1在正常组织、不典型增生与胃癌中表达呈递增趋势(P<0.05);弥漫型胃癌阳性率明显高于肠型胃癌(P<0.05)。肿瘤直径≤3.0 cm的胃癌中LIMK1的表达明显低于>3.0 cm的表达(P<0.05);淋巴结转移组表达明显高于未转移组(P<0.05)。TNM分期Ⅲ、Ⅳ期表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);LIMK1表达与患者性别差异无显著性(P>0.05)。结论 LIMK1与胃癌的分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期密切相关,可能是胃癌侵袭转移重要的生物标记物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 组织芯片 limk1 免疫组织化学
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沉默LIMK1抑制人结肠癌SW480细胞上皮-间质转化 被引量:4
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作者 史玲 苏坚 +3 位作者 孙晓勤 夏红 刘芳 苏琦 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第13期2183-2188,共6页
目的:研究沉默LIMK1对人结肠癌SW480细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:RT-PCR、Western blot、免疫荧光与免疫组化检测沉默LIMK1对EMT相关分子表达的影响。裸鼠实验检测沉默LIMK1对移植瘤生... 目的:研究沉默LIMK1对人结肠癌SW480细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:RT-PCR、Western blot、免疫荧光与免疫组化检测沉默LIMK1对EMT相关分子表达的影响。裸鼠实验检测沉默LIMK1对移植瘤生长的影响。结果:RT-PCR检测显示,沉默LIMK1可下调Vimentin和上调E-cadherin mRNA表达(P<0.05)。Western blot显示,沉默LIMK1可明显下调SW480细胞Snail及Vimentin蛋白表达和上调E-cadherin表达(P<0.05)。免疫荧光显示,LIMK1沉默细胞Snail与Vimentin阳性信号较对照组明显减弱,而E-cadherin阳性信号显著增强。裸鼠实验结果显示,沉默组肿瘤生长速度较SW480组明显减慢(P<0.05)。沉默组移植瘤瘤重(0.16±0.079)g较SW480组(0.86±0.165)g明显减少,瘤重抑制率为97.7%(P<0.05)。LIMK1沉默组移植瘤较对照组的Ki-67、Vimentin、Snail与CD 34阳性表达明显减弱,而E-cadherin表达明显增加。结论:沉默LIMK1可体外抑制人结肠癌SW480细胞EMT。 展开更多
关键词 limk1 人结肠癌SW480细胞 上皮-间质转化 SNAIL VIMENTIN E-CADHERIN
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LIMK1/Cofilin在瘦素诱导的结肠癌SW620细胞迁移中的作用 被引量:3
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作者 高硕徽 赵吉生 +1 位作者 李畅 苏妍卓 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1016-1018,共3页
目的观察瘦素对结肠癌迁移的影响,以及LIMK1/Cofilin信号通路的作用。方法贴壁培养SW620细胞,分别转染YFP-LIMK1及pSUPER-LIMK1。以浓度为1μmol/L的瘦素孵育细胞为实验组,通过Western印迹实验检测Cofilin磷酸化水平的变化;通过细胞迁... 目的观察瘦素对结肠癌迁移的影响,以及LIMK1/Cofilin信号通路的作用。方法贴壁培养SW620细胞,分别转染YFP-LIMK1及pSUPER-LIMK1。以浓度为1μmol/L的瘦素孵育细胞为实验组,通过Western印迹实验检测Cofilin磷酸化水平的变化;通过细胞迁移实验观察LIMK1在瘦素诱导的细胞迁移中的作用。结果经瘦素诱导可使SW620细胞中Cofilin磷酸化水平增加,被LIMK1调控;细胞迁移实验显示LIMK1参与瘦素诱导的细胞迁移。结论瘦素/LIMK1/Cofilin信号通路对结肠癌细胞的迁移具有明显的促进作用,可能与结肠癌的发生、发展相关。 展开更多
关键词 瘦素 结肠癌 limk1 COFILIN
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沉默LIMK1抑制人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭 被引量:2
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作者 章硕 夏红 +3 位作者 刘芳 周志刚 姜浩 苏琦 《中南医学科学杂志》 CAS 2020年第1期65-71,共7页
探讨沉默LIM激酶1(LIMK1)对人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭的影响。采用RNA干扰技术沉默MGC803细胞LIMK1基因,RT-PCR和Western blot检测干扰效率,MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测沉默LIMK1对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移... 探讨沉默LIM激酶1(LIMK1)对人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭的影响。采用RNA干扰技术沉默MGC803细胞LIMK1基因,RT-PCR和Western blot检测干扰效率,MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测沉默LIMK1对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移与侵袭能力的影响。结果显示,成功构建稳定沉默LIMK1基因MGC803细胞。MTT显示,LIMK1沉默组细胞在24、48、72、96 h分别较对照组与空载体组的抑制率为61.0%、36.9%、12.1%、1.6%和54.7%、46.2%、13.5%、1.5%(P<0.05)。流式细胞术显示,沉默组G2/M期17.96%明显高于MGC803组11.45%和空载体组11.68%(P<0.05)。划痕实验显示,24 h后,沉默组划痕距离(155.9±7.6)较对照组(65.9±11.0)和空载体组(73.2±5.1)明显增加(P<0.05)。侵袭实验显示,沉默组穿膜细胞(25.1±1.3)较对照组(42.4±2.8)和空载体组(45.2±3.0)明显减少(P<0.05)。沉默LIMK1可抑制MGC803细胞增殖、迁移与侵袭和阻滞G2/M期。 展开更多
关键词 人胃癌MGC803细胞 limk1 RNA干扰 增殖 迁移 侵袭
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LIMK1在结肠癌中表达与沉默对人结肠癌细胞迁移与侵袭的影响 被引量:2
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作者 苏坚 潘志兵 +5 位作者 史玲 向姝霖 夏红 董琳 廖爱军 苏琦 《中南医学科学杂志》 CAS 2014年第2期109-115,共7页
目的探讨LIMK1在结肠癌中的表达与临床病理参数的关系和沉默LIMK1对人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法免疫组化检测LIMK1在结肠癌表达;RNA干扰建立LIMK1-miR/SW480细胞株;RTPCR与Western blot分别检测LIMK1 mNRA与蛋白及磷酸化LI... 目的探讨LIMK1在结肠癌中的表达与临床病理参数的关系和沉默LIMK1对人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法免疫组化检测LIMK1在结肠癌表达;RNA干扰建立LIMK1-miR/SW480细胞株;RTPCR与Western blot分别检测LIMK1 mNRA与蛋白及磷酸化LIMK1表达;划痕实验和侵袭实验检测沉默LIMK1对SW480细胞迁移与侵袭的影响。结果免疫组化显示,LIMK1在结肠癌中表达明显高于结肠正常组织,高分化腺癌表达明显低于中分化与低分化腺癌,而低分化高于中分化腺癌;<5.0 cm的结肠癌表达明显低于≥5.0 cm;淋巴结转移显著高于无转移;Dukes分期A+B组表达明显低于C+D组(P<0.05)。RT-PCR与Western blot显示,LIMK1-miR/SW480细胞LIMK1 mNRA与蛋白表达明显下调,表明成功构建稳定沉默LIMK1基因的SW480细胞。免疫细胞化学证实,沉默组LIMK1表达较未转染组与空载体组明显降低。Western blot显示,沉默组LIMK1和磷酸化LIMK1较未转染组与空载体组明显下调(P<0.05)。划痕实验显示,沉默组癌细胞迁移率(22.53%)较对照组(76.50%)与空载体组(72.14%)明显降低(P<0.05)。侵袭实验发现,沉默组穿膜细胞(43.67±1.51个)较未处理组(143.33±1.52个)与空载体组(136.34±1.53个)明显减少(P<0.05)。结论 LIMK1表达与结肠癌发生、大小、淋巴结转移及Dukes分期有关。沉默LIMK1基因可抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭。 展开更多
关键词 结肠癌 SW480细胞 limk1 RNA干扰 迁移与侵袭
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LIMK1-siRNA真核载体的构建及在人软骨细胞中的蛋白表达 被引量:1
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作者 李振华 丁爽 +1 位作者 赵长伟 朱立国 《世界中西医结合杂志》 2014年第9期983-984,1013,共3页
目的构建LIMK1-siRNA真核表达载体,为骨关节发病机制的研究奠定基础。方法合成3条LIMK1的小RNA分子的寡聚脱氧核苷酸链,重组质粒测序,瞬时转染人软骨细胞,采用Western blot检测LIMK1表达情况。结果 Western blot检测LY3号质粒的细胞中LI... 目的构建LIMK1-siRNA真核表达载体,为骨关节发病机制的研究奠定基础。方法合成3条LIMK1的小RNA分子的寡聚脱氧核苷酸链,重组质粒测序,瞬时转染人软骨细胞,采用Western blot检测LIMK1表达情况。结果 Western blot检测LY3号质粒的细胞中LIMK1蛋白表达明显下调,经通用引物对LY3号重组质粒测序鉴定,与设计序列核对完全相符。结论成功构建LIMK1-siRNA真核表达载体,有效沉默了人软骨细胞中LIMK1蛋白表达。 展开更多
关键词 limk1 SIRNA 真核载体
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LIMK1表达与结肠癌患者临床病理特征的关系 被引量:1
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作者 王晓英 屈昌民 +4 位作者 梁淑文 李连勇 宫淑娟 翟静妤 王宝艳 《实用癌症杂志》 2014年第9期1082-1084,共3页
目的探讨LIMK1表达和结肠癌患者临床病理特征的关系。方法将68例结肠癌、17例上皮内瘤变及31例正常结肠组织共116例结肠标本制成组织芯片,采取免疫组织化学技术检测标本中LIMK1的表达水平。结果LIMK1在结肠癌中的表达水平显著高于健康... 目的探讨LIMK1表达和结肠癌患者临床病理特征的关系。方法将68例结肠癌、17例上皮内瘤变及31例正常结肠组织共116例结肠标本制成组织芯片,采取免疫组织化学技术检测标本中LIMK1的表达水平。结果LIMK1在结肠癌中的表达水平显著高于健康组织。LIMK1表达与结肠癌肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),但与患者的年龄、分化程度无关。结论 LIMK1表达与结肠癌的发生发展密切相关,可能是结肠癌侵袭转移的重要标志。 展开更多
关键词 limk1 结肠癌 免疫组织化学
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LIMK1与恶性肿瘤的研究现状 被引量:2
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作者 王红 王岩 《吉林医学》 CAS 2012年第7期1466-1468,共3页
LIMKl是LIM激酶(LIMkinase,LIMK)蛋白家族两大成员之一,生理功能主要是把Cofilin磷酸化使它成为失活的pCofilin,进而参与细胞肌动蛋白骨架的重新组合,体内有很多种机制调控着LIMKl的活化,活化的LIMKl起着桥梁的作用,是连接细胞... LIMKl是LIM激酶(LIMkinase,LIMK)蛋白家族两大成员之一,生理功能主要是把Cofilin磷酸化使它成为失活的pCofilin,进而参与细胞肌动蛋白骨架的重新组合,体内有很多种机制调控着LIMKl的活化,活化的LIMKl起着桥梁的作用,是连接细胞外刺激与细胞骨架稳定性的纽带[1]。 展开更多
关键词 limk1 恶性肿瘤 相关性
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老年结肠腺癌中LIMK1、血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9的表达 被引量:3
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作者 乌力吉白乙 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期5592-5593,共2页
目的检测老年结肠腺癌中LIM激酶-1(LIMK1)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达特征,三者的关系及临床意义。方法选择98例老年结肠腺癌术后留取的蜡块为观察组,70例结肠黏膜组织作为对照组,应用免疫组化方法检测两... 目的检测老年结肠腺癌中LIM激酶-1(LIMK1)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达特征,三者的关系及临床意义。方法选择98例老年结肠腺癌术后留取的蜡块为观察组,70例结肠黏膜组织作为对照组,应用免疫组化方法检测两组中LIMK1、VEGF和MMP-9的表达。结果观察组中LIMK1、VEGF和MMP-9蛋白表达的阳性率明显高于对照组,观察组中LIMK1、VEGF和MMP-9的表达与肿瘤的浸润深度、Dukes分期、淋巴结转移、脉管浸润密切相关;LIMK1、VEGF和MMP-9的表达具有正相关性。结论老年结肠腺癌中LIMK1、VEGF和MMP-9高表达,三者具有协同正向作用,对病变的进展具有重要作用。 展开更多
关键词 结肠腺癌 limk1 血管内皮生长因子(VEGF) 基质金属蛋白酶(MMP)-9 免疫组化
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