溃疡性结肠炎的IL-1β、IL-1RA、L MP2基因多态性研究

目的 :研究溃疡性结肠炎 (UC)病人的IL 1β、IL 1RA、LMP2基因多态性 ,并分析其与抗中性粒细胞胞浆抗体 (AN CA)及临床分型的关系。方法 :用PCR 限制性片段多态性 (PCR RFLP)方法和序列特异性引物 PCR(PCR SSP)方法分别对 81例UC病人和 114名健康者进行IL 1β、LMP2和IL 1RA基因多态性分析。结果 :UC病人和健康者之间IL 1β、IL 1RA和LMP2各基因型和基因频率比较均无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;当UC病人分为ANCA(+)组和ANCA(- )组后 ,发现ANCA(+)组IL 1RA等位基因 2频率高于ANCA(- )组 (13 7%对 3 3 % ,P <0 0 5 ) ,其它各基因型及基因频率比较 ,统计学上均无显著性差异 (P>0 0 5 )。结论 :中国汉族UC病人与IL 1β、IL 1RA、LMP2基因多态性无关联 ,但ANCA(+)UC病人IL 1RA等位基因 2频率明显增加。

EBV-LMP2蛋白的表达和初步纯化

目的 应用杆状病毒表达载体表达并纯化EB病毒LMP2蛋白.方法 利用杆状病毒Bac-to-Bae杆状病毒表达系统,将EBV-LMP2基因插入到质粒pFastBacTMHT B中,获得携带EBV-LMP2基因的重组杆状病毒Bac-LMP2.重组病毒感染Sf-9细胞,表达N端携带6个组氨酸（6 X His）的LMP2融合蛋白His-LMP2.经镍离子亲和层析纯化,获得纯化蛋白.结果 SDS-PAGE及Western-Blot检测表达的蛋白相对分子质量大小与预计结果一致.HPLC分析纯化后蛋白的纯度可达86%.结论 利用杆状病毒表达系统表达EB病毒LMP2基因并经过初步纯化后,可以获得较好纯度的LMP2蛋白.

云南汉族人群LMP基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性

目的探讨低分子量蛋白酶体（low molecular weight polypeptide, LMP）基因多态性与丙型肝炎病毒（hepatitis C virus , HCV）慢性感染的相关性。方法选择云南地区汉族人群HCV慢性感染患者427例，健康对照者412名，采用TaqMan探针基因分型方法对LMP2基因单核苷酸多态性（ single nucleotide polymorphism, SNP）rs1351383、rs17587、rs2127675和LMP7基因SNPrs2071543进行基因分型，并构建单倍型，统计LMP2和LMP7多态性位点的等位基因频率与基因型频率、单倍型频率，分析SNPs及单倍型与HCV慢性感染的相关性。结果病例组和对照组LMP2基因rs1351383和rs2127675的等位基因频率差异有统计学意义（P〈0．05），rs1351383／rs17587／rs2127675单倍型A-pA和C-G-G差异有统计学意义（P〈0．05）；其他位点基因型、等位基因型、单倍型频率在病例组和对照组中差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在云南汉族群体中，LMP2基因SNPrs1351383C等位基因和rs2127675G等位基因可能是HCV慢性感染的易感因素，rs1351383／rs17587／rs2127675单倍型A-GA可能是HCV慢性感染的保护因素，单倍型C-G-G可能是HCV慢性感染的危险因素。