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水稻类病斑早衰突变体lmps1的表型鉴定与基因定位 被引量:6
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作者 夏赛赛 崔玉 +4 位作者 李凤菲 谭佳 谢园华 桑贤春 凌英华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期46-54,共9页
经甲基磺酸乙酯(EMS)诱变优良籼型水稻恢复系缙恢10号,获得一个稳定遗传的水稻类病斑早衰突变体lmps1(lesion mimic and premature senescence 1)。该突变体苗期表型正常,分蘖早期出现褐色类病斑,且斑点数目随植株生长而增多,孕穗期叶... 经甲基磺酸乙酯(EMS)诱变优良籼型水稻恢复系缙恢10号,获得一个稳定遗传的水稻类病斑早衰突变体lmps1(lesion mimic and premature senescence 1)。该突变体苗期表型正常,分蘖早期出现褐色类病斑,且斑点数目随植株生长而增多,孕穗期叶片开始萎黄衰老。与野生型相比,突变体lmps1的每穗总粒数下降8%(P<0.05),株高、穗长、有效穗数、每穗实粒数、结实率以及千粒重分别下降14.3%、24.3%、27.2%、50%、45.7%与14.5%,差异均达极显著水平(P<0.01)。遮光处理表明,突变体lmps1的类病斑性状受光照诱导。孕穗期叶片光合色素含量下降且光合效率降低, H2O2含量增加,抗氧化酶SOD和CAT的活性显著降低。透射电镜观察结果显示,突变体lmps1叶肉细胞中叶绿体数目减少,叶绿体的类囊体片层结构损伤降解。qRT-PCR结果显示,突变体lmps1中防卫反应相关基因除POX22.3表达量降低外,POC1、PAL、PBZ1、PR1、NPR1、PR5表达量均极显著高于野生型。遗传分析表明突变体lmps1的类病斑早衰性状受1对隐性核基因控制,利用西农1A与突变体lmps1杂交所得F2群体中的突变株,将目标基因定位于第7染色体长臂端粒附近约167.3 kb的物理区段内。 展开更多
关键词 水稻(Oryza SATIVA L.) 类病斑早衰突变体 (lmps1) 表型鉴定 基因定位
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Low-fat microwaved peanut snacks production:Effect of defatting treatment on structural characteristics,texture,color,and nutrition
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作者 Bo Jiao Xin Guo +6 位作者 Yiying Chen Shah Faisal Wenchao Liu Xiaojie Ma Bicong Wu Guangyue Ren Qiang Wang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第7期2491-2502,共12页
This study develops low-fat microwaved peanut snacks(LMPS)using partially defatted peanuts(PDP)with different defatting ratios,catering to people’s pursuit of healthy,low-fat cuisine.The effects of defatting treatmen... This study develops low-fat microwaved peanut snacks(LMPS)using partially defatted peanuts(PDP)with different defatting ratios,catering to people’s pursuit of healthy,low-fat cuisine.The effects of defatting treatment on the structural characteristics,texture,color,and nutrient composition of LMPS were comprehensively explored.The structural characteristics of LMPS were characterized using X-ray micro-computed tomography(Micro-CT)and scanning electron microscope(SEM).The results demonstrated that the porosity,pore number,pore volume,brightness,brittleness,protein content,and total sugar content of LMPS all significantly increased(P<0.05)with the increase in the defatting ratio.At the micro level,porous structure,cell wall rupture,and loss of intracellular material could be observed in LMPS after defatting treatments.LMPS made from PDP with a defatting ratio of 64.44%had the highest internal pore structural parameters(porosity 59%,pore number 85.3×10^(5),pore volume 68.23 mm3),the brightest color(L^(*) 78.39±0.39),the best brittleness(3.64±0.21)mm^(–1)),and the best nutrition(high protein content,(34.02±0.38)%;high total sugar content,(17.45±0.59)%;low-fat content,(27.58±0.85)%).The study provides a theoretical basis for the quality improvement of LMPS. 展开更多
关键词 low-fat microwaved peanut snacks(lmps) X-ray micro-computed tomography(Micro-CT) porosity TEXTURE COLOR NUTRITION
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基于鲁棒优化的自发电计划 被引量:7
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作者 童小娇 文强 +2 位作者 周任军 王兆云 聂跃昆 《长沙理工大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第2期58-65,共8页
考虑边际电价(LMPs)的不确定性,在处理优化问题时,利用鲁棒优化理论,采用"盒式"不确定集合表示LMPs的不确定性,将预测LMPs的波动量控制在某一范围,建立价格不确定性下的自发电计划模型.运用优化对偶理论化简此模型,使得该模... 考虑边际电价(LMPs)的不确定性,在处理优化问题时,利用鲁棒优化理论,采用"盒式"不确定集合表示LMPs的不确定性,将预测LMPs的波动量控制在某一范围,建立价格不确定性下的自发电计划模型.运用优化对偶理论化简此模型,使得该模型将目标函数中的不确定量转变为确定量,便于求解可行解.此方法较其他方法,具有易操作、易求解,较保守,可保证所求解的可行性的优点.进一步,调用MATLAB中提供的Quadprog二次规划方法,在IEEE-30节点的系统中进行计算,其结果表明了该模型和计算方法的可行性和有效性. 展开更多
关键词 电力系统 节点边际电价(lmps) 自发电计划 鲁棒优化
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电力现货市场定价机制研究及应用探索
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作者 罗慧 《中国核电》 2024年第4期598-603,共6页
本论文旨在研究电力现货市场的定价机制,并探索其应用的相关问题。电力现货市场作为能源市场中重要的一环,对于电力供求平衡、价格形成和市场稳定具有重要作用。本文将从理论和实践两个层面,结合国内外相关研究成果,分析电力现货市场的... 本论文旨在研究电力现货市场的定价机制,并探索其应用的相关问题。电力现货市场作为能源市场中重要的一环,对于电力供求平衡、价格形成和市场稳定具有重要作用。本文将从理论和实践两个层面,结合国内外相关研究成果,分析电力现货市场的定价机制,讨论其优势、挑战以及未来发展方向。 展开更多
关键词 能源市场 容量市场 辅助服务市场 系统边际电价(SMP) 分区边际电价(ZMP) 节点边际电价(LMP)
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鼻咽癌组织中EB病毒LMP1的表达与癌细胞增殖和凋亡的关系 被引量:20
5
作者 刘克拉 宗永生 +2 位作者 张昌卿 张锋 冯凯涛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期23-26,共4页
目的:探讨EB病毒编码的LMP1在体内鼻咽癌细胞中,是否可能通过影响鼻咽癌细胞增殖和凋亡的生物学过程,而在鼻咽癌的发展演进过程中起作用。方法:采用TUNEL法原位检测癌细胞的调亡程度,用免疫组化LSAB法检测LMP1、PCNA、p53和bcl-2... 目的:探讨EB病毒编码的LMP1在体内鼻咽癌细胞中,是否可能通过影响鼻咽癌细胞增殖和凋亡的生物学过程,而在鼻咽癌的发展演进过程中起作用。方法:采用TUNEL法原位检测癌细胞的调亡程度,用免疫组化LSAB法检测LMP1、PCNA、p53和bcl-2蛋白表达Z分析LMP1的表达与癌细胞增殖、凋亡以及与p53、bcl-2表达的相关性。结果:LMP1的表达与否,与鼻咽癌细胞增殖活性的差异无显著意义,而与癌细胞凋亡程度之间的差异有显著意义,其表达与癌细胞凋亡程度呈正相关;LPM1的表达与p53和bcl-2的表达无相关性。结论:提示LMP1在体内鼻咽癌组织中可能有促使癌细胞凋亡的生物学作用,其机制可能是通过激活细胞毒性T淋巴细胞,增强后者对癌细胞的杀伤作用。LMP1对癌细胞增殖和凋亡的作用可能并不受p53及bcl-2表达的影响。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 E-B病毒 细胞凋亡 LMP1
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EBV-LMP1上调Ezrin表达对鼻咽癌细胞转移潜能的影响 被引量:16
6
作者 申志华 陈小毅 +2 位作者 陈锦 邓惠华 揭伟 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期165-169,共5页
背景与目的:细胞骨架相关蛋白Ezrin的异常表达与肿瘤侵袭转移密切相关,既往研究已证实EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein1,EBV-LMP1)可促进鼻咽癌细胞的转移能力。本研究旨在进一步探讨EBV-LMP1是否通过改... 背景与目的:细胞骨架相关蛋白Ezrin的异常表达与肿瘤侵袭转移密切相关,既往研究已证实EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein1,EBV-LMP1)可促进鼻咽癌细胞的转移能力。本研究旨在进一步探讨EBV-LMP1是否通过改变Ezrin的表达来影响鼻咽癌细胞的转移能力。方法:采用免疫细胞化学和Western blot检测两种鼻咽癌细胞株-CNE1细胞(EBV阴性)和CNE1-GL细胞(稳定转染EBV-LMP1)中LMP1和Ezrin的表达;细胞-基质粘附实验检测CNE1、CNE1-GL和经Ezrin抗体预处理的CNE1-GL细胞(AntiEzrin-CNE1-GL)对细胞外基质的粘附力;Transwell小室法检测上述3种细胞的运动和对重组基底膜侵袭能力。结果:CNE1细胞中Ezrin阴性表达,而CNE1-GL细胞中Ezrin强阳性表达。CNE1-GL细胞对细胞外基质的粘附率[(89.38±6.12)%]强于CNE1细胞[(49.42±5.37)%](P<0.001),而AntiEzrin-CNE1-GL细胞对基质的粘附率[(56.94±4.08)%]明显下降,与CNE1-GL相比,差异有统计学意义(P<0.05)。运动实验和侵袭实验均提示CNE1-GL细胞运动、侵袭能力(107±11和179±25)强于CNE1细胞(27±3和46±6),差异均有统计学意义(P<0.001),而AntiEzrin-CNE1-GL细胞的运动、侵袭能力(38±4和51±5)较CNE1-GL细胞显均显著下降(P<0.001)。结论:CNE1细胞中EBV-LMP1可通过上调Ezrin表达来促进细胞转移。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 EBV—LMP1 EZRIN 细胞粘附 肿瘤转移
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EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过TRAF2活化NF-kB 被引量:14
7
作者 王承兴 李晓艳 +2 位作者 肖绘 邓锡云 曹亚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期517-520,共4页
目的:为了探讨EB病毒(EBV)中LMP1的致瘤机制,对鼻咽癌LMP1激活重要的核转录因子NF-_KB的机制进行了研究。方法:①以LMP1阴性的鼻咽癌细胞系HNE2及表达载体(pSG5)的鼻咽癌细胞系HNE2-pSG... 目的:为了探讨EB病毒(EBV)中LMP1的致瘤机制,对鼻咽癌LMP1激活重要的核转录因子NF-_KB的机制进行了研究。方法:①以LMP1阴性的鼻咽癌细胞系HNE2及表达载体(pSG5)的鼻咽癌细胞系HNE2-pSGS为对照,采用免疫共沉淀-Western-blotting方法在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2-LMP1中证实LMP1与TRAF2是否直接结合形成免疫共沉淀复合物;②在HNE2-LMP1细胞系导入TRAF2表达质粒或不同剂量TRAF2显性负性突变体(TRAF2A6- 86)表达质粒,以 NF-kB报道基因方法确定 LMP1是否通过 TRAF2活化 NF-kB ;③将LMP1(1-231)(CTAR2缺失区)或LMP1△187-351(CTARI缺失区)及不同剂量TRAF2A6-86瞬时导入HNE2中以证实LMP1 CTAR1或CTAR2是否介导了这种效应;④以转染或未转染TRAF26-86的HNE2-LMP1细胞系为材料,应用免疫共沉淀-Western-blotting方法,确定TRAF2△6-86是否竞争性抑制TRAF2与LMP1结合。结果:①在HNE2-LMP1中LMP1与TRAF2形成复合物? 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 LMP1 TRAF2 NF-KB EB病毒
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EB病毒LMP1对鼻咽癌中瘤细胞分化的影响 被引量:9
8
作者 林素暇 宗永生 +3 位作者 林汉良 钟碧玲 李智 梁英杰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期99-101,共3页
目的 探讨EB病毒LMP1对早期鼻咽癌中瘤细胞分化的影响。方法 收集 31例早期鼻咽非角化性癌活检组织。采用DAKO公司的PNA探针和PNA原位杂交试剂盒检测EB病毒早期RNAs (EBERs)。应用免疫组化法检测LMP1,α catenin ,β catenin ,γ cate... 目的 探讨EB病毒LMP1对早期鼻咽癌中瘤细胞分化的影响。方法 收集 31例早期鼻咽非角化性癌活检组织。采用DAKO公司的PNA探针和PNA原位杂交试剂盒检测EB病毒早期RNAs (EBERs)。应用免疫组化法检测LMP1,α catenin ,β catenin ,γ catenin以及高、低分子量细胞角蛋白。结果  31例癌组织中均有相当数量的瘤细胞呈EBERs阳性 ,其中19例表达LMP1( 6 1.2 9% )。LMP1阳性组γ catenin的表达百分率 ( 5 3 .2 5± 34.12 % )明显低于LMP1阴性组 ( 80 .42±15 .77% ,P <0 .0 1)。γ catenin的表达与低分子量细胞角蛋白的表达间呈正相关 (r=0 .44 0 ,P <0 .0 5 )。α catenin ,β catenin和γ catenin的表达相互间呈两两正相关。结论 鼻咽癌中瘤细胞的LMP1能下调γ catenin的表达 ,从而抑制瘤细胞的分化。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 LMP1 CATENIN 分化
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α稳定分布下的加权平均最小p-范数算法 被引量:15
9
作者 邱天爽 杨志春 +1 位作者 李小兵 陈艳霞 《电子与信息学报》 EI CSCD 北大核心 2007年第2期410-413,共4页
该文提出一种新的适用于α稳定分布噪声环境的自适应滤波算法,这种算法通过使加权平均误差函数的p-范数最小来实现自适应滤波。在这种算法的基础上,该文还得到两种新的动量LMP自适应算法。将这些新算法应用于估计AR模型的参数,计算机仿... 该文提出一种新的适用于α稳定分布噪声环境的自适应滤波算法,这种算法通过使加权平均误差函数的p-范数最小来实现自适应滤波。在这种算法的基础上,该文还得到两种新的动量LMP自适应算法。将这些新算法应用于估计AR模型的参数,计算机仿真的结果表明,该文提出的算法的性能比已有LMP算法的性能要更为优越。 展开更多
关键词 Α稳定分布 自适应滤波 LMP算法 m-LMP算法
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EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响 被引量:12
10
作者 欧小波 陈小毅 +1 位作者 吴民华 罗伟仁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期803-808,共6页
背景与目的:EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌的浸润和转移过程中起重要的作用。本实验目的在于研究EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响和探讨其中的相关机制。方法:应用免疫细胞化学RT-PCR法和We... 背景与目的:EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌的浸润和转移过程中起重要的作用。本实验目的在于研究EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响和探讨其中的相关机制。方法:应用免疫细胞化学RT-PCR法和Western blot检测LMP1、E-cadherin和intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1)在人高分化鼻咽癌细胞系CNE1和转染了LMP1基因的CNE1-GL细胞中的表达。应用细胞-细胞粘附实验、细胞-基质粘附实验、划痕实验和细胞运动实验观察LMP1对鼻咽癌细胞粘附和运动能力的影响。结果:免疫细胞化学结果显示:LMP1在CNE1和CNE1-GL细胞中的阳性率分别为0和(96.60±3.03)%(P<0.01);E-cadherin蛋白的阳性率分别为(37.47±1.50)%和(19.53±1.92)%(P<0.01);ICAM-1蛋白的阳性率分别为(5.27±1.45)%和(93.33±4.23)%(P<0.01)。RT-PCR和Westernblot结果表明,与CNE1细胞相比较,CNE1-GL细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而ICAM-1的mRNA和蛋白表达则明显升高(P<0.01)。肿瘤细胞同质粘附实验显示,CNE1-GL细胞的同质粘附能力较CNE1细胞弱(P<0.05)。肿瘤细胞-基质粘附实验得出CNE1-GL细胞的异质粘附能力(A值=0.60±0.03)较CNE1细胞(A值=0.46±0.01)强(P<0.01)。肿瘤细胞运动实验显示,穿过PVPF膜的CNE1-GL细胞数多于CNE1细胞(119.3±6.0 vs 46.3±7.0,P<0.05)。结论:LMP1通过抑制E-cadherin表达、促进ICAM-1表达从而抑制肿瘤细胞的同质粘附能力、增强其异质粘附能力和运动能力来参与鼻咽癌的侵袭和转移。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 EB病毒 LMP1 E-cadhefin ICAM-1 细胞粘附 肿瘤转移
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EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中通过STAT3促进VEGF表达 被引量:13
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作者 谭运年 陶永光 +4 位作者 李力力 刘素芳 唐敏 顾焕华 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期427-431,共5页
探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以... 探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以上调VEGF的表达 ,而STAT3β可以抑制VEGF的上调 ;利用LMP1可控表达细胞系tet on LMP1 HNE2进行LMP1时间和剂量诱导表达研究 ,发现VEGF可以随LMP1的动态表达而表达 ;将VEGF野生型报告基因和VEGF潜在的STAT3转录因子突变体报告基因与LMP1表达载体分别共转染研究发现 ,LMP1可以激活VEGF的转录 ,这种转录通过VEGF启动子区STAT3转录因子的结合位点发挥作用 ;电泳迁移率变动分析 (EMSA)确证了STAT3的这种DNA位点的特异性活性 .结果表明 :EB病毒编码的LMP1在鼻咽癌细胞中可以增加VEGF的转录和表达 。 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1(LMP1) STAT3 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 鼻咽癌
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Inconel 617合金持久强度的评估 被引量:6
12
作者 党莹樱 赵新宝 +5 位作者 尹宏飞 鲁金涛 袁勇 杨珍 严靖博 谷月峰 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2014年第S1期172-175,共4页
在已有文献的基础上,利用Larson-Miller参数法对700℃超超临界电站候选合金Inconel 617的持久数据进行了研究。结果表明,Inconel 617合金持久强度的预测精度与LMP建模所用数据关系密切;与利用595~1 095℃范围内的所有实验点建模相比,由... 在已有文献的基础上,利用Larson-Miller参数法对700℃超超临界电站候选合金Inconel 617的持久数据进行了研究。结果表明,Inconel 617合金持久强度的预测精度与LMP建模所用数据关系密切;与利用595~1 095℃范围内的所有实验点建模相比,由900℃以下数据外推所得持久强度预测值与参考值/真实值更为一致。进一步对显微组织的研究表明产生上述现象的原因与合金在高温段(900℃及以上)的显微组织,特别是强化相的类型、数量等均发生了明显变化有关。因此,在评估此类合金的持久性能时,应慎用高温区数据,从而降低性能的误估倾向。 展开更多
关键词 INCONEL 617 持久性能 LMP参数法 预测
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EB病毒LMP1促鼻咽癌细胞生长与CD23、bcl-2表达和凋亡的关系 被引量:8
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作者 黄培春 梁洪英 +2 位作者 邓惠华 赵明伦 何志巍 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第2期124-127,共4页
目的 :探讨EB病毒LMP1表达促鼻咽癌细胞系生长作用与CD2 3、bcl 2表达和细胞凋亡的关系。方法 :用免疫组化LSAB法检测LMP1、CD2 3和bcl 2蛋白的表达 ;用MTT法测定鼻咽癌细胞系的生长能力 ;用DNA电泳法、流式细胞法和TUNEL法检测癌细胞凋... 目的 :探讨EB病毒LMP1表达促鼻咽癌细胞系生长作用与CD2 3、bcl 2表达和细胞凋亡的关系。方法 :用免疫组化LSAB法检测LMP1、CD2 3和bcl 2蛋白的表达 ;用MTT法测定鼻咽癌细胞系的生长能力 ;用DNA电泳法、流式细胞法和TUNEL法检测癌细胞凋亡 ;用CD2 3单抗阻断和MTT法观察CD2 3单抗对鼻咽癌细胞系生长的影响。结果 :表达LMP1的鼻咽癌细胞系 (L CNE1)的生长能力明显增强 ,并有CD2 3蛋白表达 ,而非表达LMP1的鼻咽癌细胞系 (V CNE1和CNE1)的CD2 3表达阴性 ;3种鼻咽癌细胞系均无凋亡发生 ,而都仅有 2 %~ 3 %的细胞表达bcl 2蛋白 ;CD2 3单抗能明显地抑制L CNE1细胞系的生长 ,但对V CNE1和CNE1细胞系的生长无明显影响。结论 :提示LMP1促鼻咽癌细胞系生长可能是通过上调CD2 3所致 ,而与bcl 2的表达和细胞凋亡无关。 展开更多
关键词 EB病毒 CD23 bcl-2 细胞凋亡 鼻咽肿瘤 LMP1
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EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及纯化 被引量:11
14
作者 张大为 朱进 +1 位作者 陈仁杰 冯振卿 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期420-423,共4页
目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体。方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMP1双酶切... 目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体。方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMP1双酶切后,克隆到pGEX-4T-2中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经谷胱甘肽S-转移酶柱亲和层析纯化,纯化的蛋白经Westernblot法检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为32.2ku,此抗原能够与鼻咽癌患者血清中抗体特异性结合。结论:成功获得了LMP1胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的LMP1胞外肽段保持了原有的抗原性,能够与EBV相关鼻咽癌患者血清中的抗体特异性结合。 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒 LMP1 胞外区 重组基因
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卵巢癌细胞HLA Ⅰ类分子表达异常和TAP,LMP基因表达的关系 被引量:5
15
作者 张笑人 葛海良 +2 位作者 张惠珍 周光炎 蔡晓敏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第4期257-260,共4页
目的:肿瘤细胞表达MHCⅠ类分子是激发肿瘤抗原特异性CTL进行肿瘤免疫治疗的关键,肿瘤细胞HLAⅠ类分子表达异常是肿瘤逃脱免疫监视的重要机制.我们探讨了卵巢癌细胞HLAⅠ类分子表达异常的分子基础.方法:本文以West-ern blot、免疫组化和... 目的:肿瘤细胞表达MHCⅠ类分子是激发肿瘤抗原特异性CTL进行肿瘤免疫治疗的关键,肿瘤细胞HLAⅠ类分子表达异常是肿瘤逃脱免疫监视的重要机制.我们探讨了卵巢癌细胞HLAⅠ类分子表达异常的分子基础.方法:本文以West-ern blot、免疫组化和流式细胞术检测卵巢癌细胞HLA Ⅰ类分子的表达,以RT-PCR检测TAP,IMP基因的表达,探讨肿瘤细胞HLA Ⅰ类分子表达异常的分子基础.结果:卵巢癌中HLA Ⅰ类分子表达异常相当普遍(5/8),并涉及抗原加工相关基因TAP,LMP基因表达异常.25℃培养肿瘤细胞可部分诱导Ⅰ类分子的表达;结论:卵巢癌HLA Ⅰ类分子表达异常与其Ⅰ类抗原加工途径异常有关. 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 HLAⅠ类分子 TAP LMP
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EB病毒与结直肠癌的相关性(英文) 被引量:4
16
作者 宋立兵 张星 +5 位作者 张昌卿 张颖 潘志忠 廖雯婷 李满枝 曾木圣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1356-1360,共5页
背景与目的:研究表明,EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)除与鼻咽癌密切相关外,可能与其它癌症相关。本研究旨在探讨EBV与中国人结直肠癌的关系。方法:采用PCR方法从90例原发性结直肠癌标本及25例配对的癌旁标本检测EBVLMP1(latentmembrane... 背景与目的:研究表明,EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)除与鼻咽癌密切相关外,可能与其它癌症相关。本研究旨在探讨EBV与中国人结直肠癌的关系。方法:采用PCR方法从90例原发性结直肠癌标本及25例配对的癌旁标本检测EBVLMP1(latentmembraneprotein1)基因的第3外显子及BamHⅠW片段的部分序列;采用免疫组织化学方法检测EBNA1(EBVnuclearantigen1)和LMP1的表达,采用原位杂交检测EBERs(EBV-encodedRNAs)的表达。结果:在90例原发性结直肠癌标本中,EBV基因阳性率为27.7%(LMP1外显子3)和32.2%(W片段),而25例癌旁组织中只有1例(4.0%)EBV基因阳性,癌组织和癌旁组织EBV阳性率差异有显著性(P<0.001)。29例W片段阳性的大肠癌标本中,有23例(79.3%)EBNA1表达阳性,只有1例(3.4%)EBERs阳性,阳性细胞主要为癌细胞,阳性信号集中在核内;而在8例W片段阴性的标本中,未检测到EBNA1的表达,也未检测到EBERs;以上标本中均未检测到LMP1的表达。结论:EBV与部分中国人结直肠癌相关。 展开更多
关键词 EB病毒 结直肠肿瘤 中国人 EBNA1 LMP1 EBERs
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鼻咽癌中EB病毒LMP1基因N端XhoⅠ酶切位点的丢失 被引量:4
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作者 林素暇 宗永生 +2 位作者 吴秋良 韩安家 梁英杰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1147-1151,共5页
背景与目的;众所周知,EB病毒LMP1基因在鼻咽癌变过程起着一定的作用。本研究通过检测广东地区鼻咽癌组织EB病毒LMP1基因N-末端区Xho Ⅰ酶切位点的丢失,探讨LMP1基因变异在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:收集中山大学肿瘤防治中心鼻咽癌... 背景与目的;众所周知,EB病毒LMP1基因在鼻咽癌变过程起着一定的作用。本研究通过检测广东地区鼻咽癌组织EB病毒LMP1基因N-末端区Xho Ⅰ酶切位点的丢失,探讨LMP1基因变异在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:收集中山大学肿瘤防治中心鼻咽癌患者鼻咽新鲜活检标本63例。收集EB病毒健康携带者外周血单个核细胞(PBMCs)10例作为对照。采用QIAamp DNA Mini Kit和QIAampDNA Blood Mini Kit分别抽取组织和外周血单个核细胞的DNA,应用巢式PCR扩增EB病毒LMP1基因的N-末端区,并用Xho Ⅰ对扩增产物进行酶切。采用四色荧光 末端终止法对扩增产物进行序列分析。结果:10例健康携带者外周血单个核细胞的EB病毒LMP1基因N-末端区均未见Xho Ⅰ酶切位点的丢失。63例鼻咽癌组织中有50例(79.37%)出现Xho Ⅰ酶切位点的丢失(Xho Ⅰ-loss),还有4例(6.34%)为Xho Ⅰ酶切位点部分丢失,只有9例(14.29%)未见Xho Ⅰ酶切位点的丢失(wt-Xho Ⅰ)。除了Xho Ⅰ酶切位点的丢失(nt:169423~169428;GAGCTC→GA T CTC)外,还发现四个错义点突变。结论:本研究所检测的广东地区EB病毒健康携带者外周血单个核细胞所携带的EB病毒LMP1基因为wt-Xho Ⅰ,而在鼻咽癌组织中主要为Xho-Ⅰ-loss。因此,我们认为EB病毒LMP1基因N-末端区Xho Ⅰ酶切位点的丢失和其? 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒 LMP1基因 N端XhoI酶切位点 基因丢失
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GCG干预LMP1激活的NF-κB信号转导通路中的靶分子 被引量:5
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作者 赵燕 罗非君 +2 位作者 唐发清 唐敏 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期122-128,共7页
为阐明在鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白 1(latentmembraneprotein 1,LMP1)激活的NF κB信号转导通路中的靶分子 ,采用EBV阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1 LMP1细胞 ,利用噻唑蓝 (MTT)法 ,... 为阐明在鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白 1(latentmembraneprotein 1,LMP1)激活的NF κB信号转导通路中的靶分子 ,采用EBV阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1 LMP1细胞 ,利用噻唑蓝 (MTT)法 ,观察表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)对CNE1和CNE1 LMP1细胞生存率的影响 .采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对NF κB活性的作用 .利用间接免疫荧光法 ,观察EGCG对NF κB (p6 5 )核移位的影响 ,再分别提取CNE1和CNE1 LMP1的胞浆及胞核蛋白 ,通过蛋白质印迹分析EGCG抑制NF κB (p6 5 )的核移位后胞浆及胞核蛋白中NF κB (p6 5 )的变化 .采用蛋白质印迹分析EGCG对IκBα的磷酸化水平的影响 .采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对EGFR启动子活性的影响 ,并用蛋白质印迹分析EGCG对EGFR自身磷酸化的作用 .结果表明EGCG对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量依赖性 ,并可抑制NF κB的活性 .EGCG能抑制NF κB (p6 5 )的核移位 ,并抑制IκBα的磷酸化 .EGCG对NF κB信号通路下游的靶基因EGFR的启动子活性及自身磷酸化都有抑制作用 .由上述结果可以推断 ,EGCG对信号转导通路上的NF κB、NF κB (p6 5 )、IκBα、EGFR多个靶点分子具有干预作用 .LMP1是EB病毒编码的蛋白质 ,因此 。 展开更多
关键词 茶多酚 EGCG EB病毒 LMP) 激活 NF-ΚB信号转导通路 靶分子 潜伏膜蛋白1 鼻咽癌 干预
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EBV-LMP1 cDNA的克隆测序与原核表达质粒构建 被引量:4
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作者 林勇平 吴淑华 +2 位作者 杨英 汤郡 马桂璋 《热带医学杂志》 CAS 2002年第4期337-340,共4页
 目的 克隆EBV LMP1cDNA ,构建EBV LMP1基因的原核表达重组质粒。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBV LMP1cDNA ,克隆至pGEM Teasy载体上并测序 ;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET 32a,转化JM10 9菌...  目的 克隆EBV LMP1cDNA ,构建EBV LMP1基因的原核表达重组质粒。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBV LMP1cDNA ,克隆至pGEM Teasy载体上并测序 ;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET 32a,转化JM10 9菌。提取质粒 ,限制性内切酶消化 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 扩增的LMP1cDNA长度为 115 8bp ,测序结果与已知序列吻合 ,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子。结论 成功克隆了EBV LMP1cDNA ,并构建了pET 32a LMP1原核表达载体 。 展开更多
关键词 LMP1 CDNA 克隆 测序 原核表达 EB病毒
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人突变型p53和EB病毒LMP1转基因小鼠的建立 被引量:19
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作者 何迎春 田道法 +1 位作者 卢芳国 毛积芳 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第1期6-9,共4页
目的:建立含突变型p53和EB病毒LMP1基因的双转基因小鼠模型,为研究突变型p53和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌前病变中的交互作用提供有力的工具.方法:通过分子克隆技术构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;采用显... 目的:建立含突变型p53和EB病毒LMP1基因的双转基因小鼠模型,为研究突变型p53和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌前病变中的交互作用提供有力的工具.方法:通过分子克隆技术构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管;取其产3wk龄子代鼠进行PCR初选,再通过Southern杂交进一步确证;利用HE染色法观察4mo龄转基因小鼠不同组织病理变化.结果:将转基因载体进行了707枚小鼠受精卵的显微注射,然后植入30只假孕母鼠的输卵管中,其中26只母鼠怀孕,移植成功率为86.67%;共出生子代鼠179只;PCR检测显示179只子代小鼠中有9只整合了p53mt和LMP1基因,转基因阳性小鼠比例为5.03%(9/179),Southern杂交结果进一步证实了9只基因组整合了外源基因的首建者小鼠;随机抽取其中的1只转基因阳性小鼠鼻腔黏膜、鼻咽、食管表现炎症,鼻咽黏膜上皮灶性增生.结论:成功建立整合人突变型p53和LMP1的转基因小鼠,且表现鼻咽黏膜上皮灶性增生,可为鼻咽癌前病变机制的研究提供手段. 展开更多
关键词 突变型P53基因 LMP1基因 鼻咽癌前病变 转基因小鼠
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