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Androgen receptor isoforms in human prostatic cancer tissue and LNCaP cell line 被引量:12
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作者 Shu-JieXIA Xiao-DaTANG Qing-ZhengMA 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2001年第3期223-225,共3页
Aim: To investigate the androgen receptor (AR) isoform expressions in human prostatic cancer tissue and LNCaPcell line. Methods: With high resolution isoelectric focusing (IEF) method we demonstrated the different exp... Aim: To investigate the androgen receptor (AR) isoform expressions in human prostatic cancer tissue and LNCaPcell line. Methods: With high resolution isoelectric focusing (IEF) method we demonstrated the different expres-sions of AR isoforms in human prostatic cancer tissues and LNCaP cell line. Results; Data were obtained from threeprostatic cancer specimens and the LNCaP cell line. Three types of AR isoforms were detected with pI values at 6.5,6.0, and 5.3. For the 3 prostatic cancer specimens, 1 sample showed all the three types of AR isoforms, the secondspecimen expressed at 6.5 and 6.0, and the third failed to show any type of isoforms. The LNCaP cell line expressedall the three AR isoforms. Binding of ~3H-dihydrotestosterone (~3H-DHT) to these three isoforms was inhibited by the ad-dition of 100-fold excess of DHT or testosterone, while not by progesterone, oestradiol and diethylstilboestrol. Conclu-sion : The expression of AR isoforms is different in different prostate cancer tissues, which may be related to the dif-ference in the effect of anti-androgen therapy in different patients. (Asian J Androl 2001 Sep; 3: 223 - 225) 展开更多
关键词 lncap cell line RECEPTORS ANDROGEN PHENOTYPE prostate
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Further Analytical Studies on a Mercuri Thiol Adduct Isolated from a Human Prostate Cancer Cell Line (LNCaP)
2
作者 Michael Gronow 《Journal of Analytical Sciences, Methods and Instrumentation》 CAS 2022年第3期31-47,共17页
Thiols play vital roles in cellular metabolism knowledge of which may be important in the design of future anticancer drugs. Previous work on the composition of the thiols present in human cancer cell lines has shown ... Thiols play vital roles in cellular metabolism knowledge of which may be important in the design of future anticancer drugs. Previous work on the composition of the thiols present in human cancer cell lines has shown the presence of an unknown low molecular weight species, deemed to be a “Conthiol”, which could be important in this respect. This was prepared and isolated from a human prostate cancer cell line (LNCaP) in the form of an adduct of 2-mercuri-4-nitrophenol;it accounts for 56.5% of the total cellular thiols present in this cell line. Initial LC-MS analysis of this adduct had indicated that the possible molecular weight of the thiol was in the region of 467 daltons. In further analytical studies to identify the thiol, attempts were made to release it from the adduct by passage through a Thiopropyl Sepharose6B column. LC-MS analysis of the column eluate revealed two components yielding negative ion fragments of 427 m/z and 449 m/z. Only the former component contained thiol, indicating that a breakdown and/or possible rearrangement of the Conthiol had occurred. Further investigations of the column thiol eluate using ICP-MS analysis showed that the sulfur content agreed with the spectrophotometric analysis result (Ellman assay) and that the molecule did not contain phosphate. Amino acid analyses of the eluate were negative. In an attempt to prevent the breakdown of the thiol released by the Thiopropyl Sepharose 6B column, the adduct was treated with 5% v/v bromine water prior to applying to the column. In this instance the thiol containing eluate obtained from the column was treated with an equimolar quantity of mercuric chloride forming a fresh adduct, RS-Hg-SR. LC-MS analysis of this mercurial adduct detected a negative ion fragment of 782 m/z which on further ionization gave a ladder like pattern showing loss of mass units of 58 in each rung. This would seem to suggest the presence of a repeat polymer like structure containing 5 monomers, which, plus the thiol atom, gives a possible formula weight of 322;probably revealing only a part of the unknown Conthiol molecule whose properties and formula weight do not correlate with any known cellular thiol. Further analysis of the thiol released from the adduct on the Thiopropyl Sepharose 6B column by Infra-red (FTIR) provided little information except to confirm the presence of the thiol group and C=O stretch bands together with the possibility of a lactam ring at 1651 and 1634 cm·s<sup>&#45</sup><sup>1</sup>. 展开更多
关键词 Low Molecular Weight Thiol Conthiol lncap Prostate Tumour cell line Thiol Adduct Analysis LC-MS Analysis ICP-MS Analysis
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Inhibitory effects of apogossypolone on subcutaneous implants of human LNCaP prostatic carcinoma cells
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作者 Yaozhen Chen Haishan Chen +6 位作者 Chen Chen Xiaofeng Huang Shijie Mu Mengyao Zhang Xingbin Hu Qunxing An Xianqing Zhang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2012年第1期33-36,共4页
Objective:The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of apogossypolone (ApoG2) on subcutaneous implants of human LNCaP prostatic carcinoma cells, and explore its mechanism. Methods:To establish hum... Objective:The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of apogossypolone (ApoG2) on subcutaneous implants of human LNCaP prostatic carcinoma cells, and explore its mechanism. Methods:To establish human LNCaP prostatic carcinoma cell line subcutaneous xenograft models and observe the inhibitory effect of ApoG2 on the tumor model. Immunohistochemistry was employed to observe the expression of Bcl-2, PCNA, CD31, caspase-3 and-8 in tumor tissues. The microvessel density was calculated. Results:ApoG2 could obviously inhibit the growth of subcutaneous prostatic carcinoma implant. ApoG2 decreased the expression of PCNA and CD31, and increased the expression of caspases-3,-8 in tumor tissues. Conclusion:ApoG2 has an inhibitory effect on prostatic carcinoma implants. 展开更多
关键词 apogossypolone (ApoG2) prostate cancer lncap human prostatic carcinoma cell line transplantation
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靶向TRPV6的siRNA对前列腺癌LNCaP细胞抑制作用的体外研究 被引量:6
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作者 赵晓智 郭宏骞 +5 位作者 刘光香 纪长威 张士伟 刘铁石 甘卫东 李笑弓 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期423-427,共5页
目的:运用RNA干扰(RNAi)技术阻断前列腺癌LNCaP细胞中瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚家族6(TRPV6)基因的表达,探讨TRPV6基因沉默对LNCaP细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:针对TR-PV6基因,构建2条小干扰RNA(siRNA)序列;在脂质体介... 目的:运用RNA干扰(RNAi)技术阻断前列腺癌LNCaP细胞中瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚家族6(TRPV6)基因的表达,探讨TRPV6基因沉默对LNCaP细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:针对TR-PV6基因,构建2条小干扰RNA(siRNA)序列;在脂质体介导下转染前列腺癌LNCaP细胞,用RT-PCR测定TRPV6mRNA的表达;MTT法和流式细胞技术测定siRNA对LNCaP细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果:两条siRNA序列均能有效地阻断LNCaP细胞中TRPV6基因在mRNA水平上的表达(P<0.01),且mRNA表达随着转染时间的延长而减少,转染72h后TRPV6mRNA的表达减少至对照组的27%和23%;siRNA转染能显著抑制LNCaP细胞增殖,转染48h细胞增殖抑制率最高,分别为34.53%和29.32%,与转染24h和72h比较有统计学意义(P<0.05);转染48h后,siRNA转染组G0~G1期细胞增多,S期细胞数量明显减少,与空白对照组及阴性对照组相比有统计学差异(P<0.01);siRNA转染组细胞的凋亡率分别为14.45%和12.73%,显著高于空白对照组及阴性对照组3.78%和5.22%(P<0.05)。结论:针对TRPV6的siRNA在体外能有效地抑制LNCaP细胞TRPV6mRNA的转录,同时能够抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,细胞凋亡率显著增加。 展开更多
关键词 TRPV6 SIRNA lncap细胞株 前列腺癌 体外
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激素递减法成功建立雄激素非依赖性LNCaP细胞亚系 被引量:3
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作者 纪家涛 许传亮 +3 位作者 叶华茂 周铁 汤元杰 孙颖浩 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1311-1315,共5页
目的:利用激素递减法对LNCaP细胞进行去雄环境培养,建立雄激素非依赖的LNCaP细胞(LNCaP-AI)亚系并予以鉴定。方法:利用活性炭处理的血清培养模拟去雄细胞环境,逐步递减培养基中激素10d,后完全在非雄培养,共连续培养3个月,直到LNCaP细胞... 目的:利用激素递减法对LNCaP细胞进行去雄环境培养,建立雄激素非依赖的LNCaP细胞(LNCaP-AI)亚系并予以鉴定。方法:利用活性炭处理的血清培养模拟去雄细胞环境,逐步递减培养基中激素10d,后完全在非雄培养,共连续培养3个月,直到LNCaP细胞重新进入快速生长期,利用CCK-8法、放免法、RT-PCR法分别测定细胞生长曲线、PSA及雄激素(AR)表达情况。结果:LNCaP细胞在激素递减后,生长缓慢,呈神经内分泌样改变和成簇生长,经过共3个月的连续非雄培养,细胞重新恢复以前的形态及生长。CCK-8测定提示LNCaP-AI细胞能够在去雄环境中生长,放免法提示LNCaP-AI细胞能够在去雄环境中恢复分泌PSA功能,RT-PCR方法提示LNCaP-AI细胞显著高表达AR。结论:激素递减方法可以3个月左右有效地建立雄激素非依赖的LNCaP细胞亚系。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 雄激素非依赖 lncap细胞系
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多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性 被引量:5
6
作者 韦华 郝晓柯 苏明权 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第1期10-12,共3页
目的:研究多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性。方法:采用免疫组化染色和RT-PCR,检测与K237结合的VEGF受体KDR的表达;用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的结合能力。结果:前列腺癌细胞系LNcap中有KD... 目的:研究多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性。方法:采用免疫组化染色和RT-PCR,检测与K237结合的VEGF受体KDR的表达;用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的结合能力。结果:前列腺癌细胞系LNcap中有KDR的表达;流式结果显示:多肽K237以浓度依赖性与LNcap细胞结合。激光共聚焦显微镜可观察到,多肽K237结合在LNcap细胞的胞浆和胞膜中。结论:多肽K237对前列腺癌细胞系LNcap具有较高的亲和性,为利用多肽K237通过抑制自分泌途径从而抑制前列腺癌细胞的增殖提供了基础,为肿瘤的治疗提供了新的方法。 展开更多
关键词 K237 lncap细胞 KDR 前列腺癌
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双氢睾酮对LNCaP细胞系Smad3和Smad4转录及表达的影响 被引量:1
7
作者 顾润国 周春文 马庆铮 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期211-214,共4页
目的:探讨双氢睾酮(DHT)对前列腺癌细胞系LNCaP中转化生长因子β(TGFβ)信号通路的下游信号蛋白Smad3、Smad4的基因转录及表达是否有影响,氟他胺对这些影响有无拮抗作用。方法:用含不同浓度DHT(2、10、50nmol/L)和氟他胺(100nmol/L)的RP... 目的:探讨双氢睾酮(DHT)对前列腺癌细胞系LNCaP中转化生长因子β(TGFβ)信号通路的下游信号蛋白Smad3、Smad4的基因转录及表达是否有影响,氟他胺对这些影响有无拮抗作用。方法:用含不同浓度DHT(2、10、50nmol/L)和氟他胺(100nmol/L)的RPMI1640培养液培养LNCaP细胞株。RTPCR检测LNCaP细胞中Smad3、Smad4mRNA水平,Western印迹法检测Smad3、Smad4蛋白表达情况。结果:与不含DHT和氟他胺的对照组比较,10、50nmol/LDHT明显增强LNCaP细胞中Smad3mRNA的表达(P<0.05),不同浓度的DHT均使Smad3蛋白的表达增高(P<0.05),氟他胺明显抑制DHT的这种增强作用(P<0.05);10nmol/L浓度的DHT对Smad4mRNA的转录有明显的抑制作用(P<0.05),这种抑制作用受氟他胺的抑制,不同浓度的DHT均可以使Smad4蛋白的表达下降,而且下降程度要比Smad4mRNA下降更为明显(P<0.05),氟他胺能够减轻这种抑制作用。结论:DHT能够增强Smad3mRNA的转录和表达,而对Smad4mRNA的转录和表达有抑制作用,氟他胺可以不同程度地抑制DHT的这些作用。雄激素受体(AR)信号通路和TGFβ信号通路可能在Smads水平上存在交联。 展开更多
关键词 前列腺癌 lncap细胞系 双氢睾酮 SMAD3 SMAD4 氟他胺
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帕米磷酸二钠及埃本磷酸二钠对前列腺癌细胞系DU145、LNCaP体外生长的抑制作用
8
作者 戴玲 刘淑俊 +1 位作者 宛凤玲 陈捷 《实用癌症杂志》 2004年第5期474-477,共4页
目的 观察帕米磷酸二钠 (PAM )及埃本磷酸二钠 (IBN )对体外培养的前列腺癌细胞系DU 14 5、LNCaP生长的抑制作用 ,探讨双磷酸盐类药物抑制前列腺癌细胞生长的机制。方法 采用MTT法检测不同剂量的PAM、IBN对DU 14 5、LNCaP细胞系生长... 目的 观察帕米磷酸二钠 (PAM )及埃本磷酸二钠 (IBN )对体外培养的前列腺癌细胞系DU 14 5、LNCaP生长的抑制作用 ,探讨双磷酸盐类药物抑制前列腺癌细胞生长的机制。方法 采用MTT法检测不同剂量的PAM、IBN对DU 14 5、LNCaP细胞系生长的影响 ,并计算 2种药物的IC50 值 ,应用流式细胞仪检测DNA含量以探讨双磷酸盐类药物的作用机制。结果 PAM、IBN对前列腺癌DU 14 5、LNCaP细胞系的生长均有抑制作用 ,抑制效应与药物剂量、作用时间成正比 ,15 0 μg/mlPAM和 10 0 μg/mlIBN作用 72h后 ,2种细胞的生存率均低于 40 .0 0 % (P <0 .0 5 )。根据IC50 值可知IBN对前列腺癌细胞的抑制作用比PAM强。结论 PAM、IBN对体外生长的前列腺癌细胞系DU 14 5、LNCaP产生剂量、时间依赖性的抑制作用 ,其抑制细胞的作用机制为促进癌细胞凋亡和干扰DNA合成。 展开更多
关键词 双磷酸盐药物 DU145细胞系 lncap细胞系 凋亡 细胞抑制 前列腺癌 癌细胞
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Apogossypolone对人前列腺癌LNCaP移植瘤的生长抑制作用
9
作者 陈要臻 陈晨 +4 位作者 黄晓锋 穆士杰 胡兴斌 安群星 张献清 《肿瘤预防与治疗》 2011年第3期153-156,共4页
目的:探讨apogossypolone(ApoG2)对前列腺癌LNCaP细胞系裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及可能的机制。方法:建立人前列腺癌LNCaP细胞系的裸鼠移植瘤模型,观察ApoG2对皮下移植瘤的生长抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中PCNA、Bcl-2... 目的:探讨apogossypolone(ApoG2)对前列腺癌LNCaP细胞系裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及可能的机制。方法:建立人前列腺癌LNCaP细胞系的裸鼠移植瘤模型,观察ApoG2对皮下移植瘤的生长抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中PCNA、Bcl-2、CD31、caspase-3及easpase-8的表达,并进行平均微血管密度(MVD)计数。结果:ApoG2可以有效抑制LNCaP移植瘤的生长,ApoG2降低肿瘤组织内PCNA和CD31的表达,增强了caspase-3,8的表达。结论:ApoG2可有效抑制LNCaP移植瘤的生长。 展开更多
关键词 Apogossypolone 前列腺癌 人前列腺癌lncap细胞系 移植瘤
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PC-1基因表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响 被引量:4
10
作者 张惠 万里川 +2 位作者 王健 周建光 黄翠芬 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1043-1047,共5页
背景与目的:PC-1基因在雄激素非依赖和高转移能力的前列腺癌C4-2细胞中高表达,在雄激素依赖及不转移的前列腺癌LNCaP细胞中低表达。本实验旨在研究PC-1对前列腺癌细胞迁移能力的影响。方法:构建PC-1稳定高表达的LNCaP细胞株和反义核酸... 背景与目的:PC-1基因在雄激素非依赖和高转移能力的前列腺癌C4-2细胞中高表达,在雄激素依赖及不转移的前列腺癌LNCaP细胞中低表达。本实验旨在研究PC-1对前列腺癌细胞迁移能力的影响。方法:构建PC-1稳定高表达的LNCaP细胞株和反义核酸调低内源性PC-1表达的C4-2细胞株。利用体外迁移系统检测PC-1表达对LNCaP和C4-2细胞迁移运动能力的影响。结果:体外迁移实验表明稳定转染提高PC-1的表达水平并未使LNCaP迁移细胞数增多(P>0.05),而反义核酸降低PC-1表达则使C4-2迁移细胞数降低(P<0.05)。PC-1蛋白水平升高不能提高LNCaP细胞迁移能力,但降低内源性PC-1表达则使C4-2细胞迁移能力明显降低。结论:PC-1可能在前列腺癌细胞侵袭过程中起一定作用。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤/病理学 PC-1基因 lncap细胞 C4-2细胞 迁移能力
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姜黄素对雄激素依赖性前列腺癌细胞的诱导凋亡作用 被引量:8
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作者 郭辉 余建华 +2 位作者 谌科 叶章群 刘国昌 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期141-144,共4页
目的:探讨姜黄素对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的诱导凋亡作用。方法:分别用10、25、50、75、100μmol/L浓度的姜黄素作用于LNCaP细胞,5、12、24 h后MTT法检测细胞生长活性;24 h后流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡的变化,透射... 目的:探讨姜黄素对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的诱导凋亡作用。方法:分别用10、25、50、75、100μmol/L浓度的姜黄素作用于LNCaP细胞,5、12、24 h后MTT法检测细胞生长活性;24 h后流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡的变化,透射电镜观察细胞超微结构变化;5 h后W estern印迹法检测细胞内IκBα的表达。结果:姜黄素能显著抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度姜黄素组之间与不同作用时间组之间的差异均有显著性意义(P均<0.05)。姜黄素诱导LNCaP细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞(P<0.01),各浓度组凋亡细胞比例均显著高于空白对照组(P均<0.05),差异有显著性意义;姜黄素作用24 h后LNCaP细胞出现凋亡的形态学改变;不同浓度姜黄素作用后,LNCaP细胞内IκBα的表达无变化。结论:姜黄素能显著抑制LNCaP细胞的体外生长,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 姜黄素 细胞株 lncap 凋亡 体外研究
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苦参碱对前列腺癌细胞增殖及雄激素受体功能的抑制作用 被引量:6
12
作者 谌科 胡志全 +3 位作者 王涛 郭峻莉 郭辉 叶章群 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期719-722,共4页
目的:探讨苦参碱(matrine)对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的增殖及雄激素受体(androgen re-ceptor,AR)表达的抑制作用。方法:分别用0.5、1.0、1.5、2.0、3.0g/L浓度的苦参碱作用于LNCaP细胞12、24、36h后MTT法检测细胞生长活性;... 目的:探讨苦参碱(matrine)对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的增殖及雄激素受体(androgen re-ceptor,AR)表达的抑制作用。方法:分别用0.5、1.0、1.5、2.0、3.0g/L浓度的苦参碱作用于LNCaP细胞12、24、36h后MTT法检测细胞生长活性;台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线;24h后流式细胞仪测定细胞周期变化;24h后Western印迹法检测细胞内AR的表达。结果:苦参碱能抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度苦参碱组之间与不同作用时间组之间的差异均有显著性意义(P<0.01)。苦参碱诱导LNCaP细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞(P<0.01);细胞内AR的表达随苦参碱剂量依赖性减少(P<0.01)。结论:苦参碱通过下调细胞内AR表达和阻滞细胞周期进展来抑制LNCaP细胞的体外生长。 展开更多
关键词 前列腺癌 苦参碱 细胞株 lncap 雄激素受体
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PSMA增强子/启动子特异性驱动shRNA靶向干扰EGFP的研究 被引量:4
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作者 孙建涛 徐勇 +4 位作者 张志宏 杨阔 王萌 刘冉录 韩育植 《天津医科大学学报》 2008年第1期22-26,共5页
目的:探讨前列腺特异性膜抗原增强子、启动子(PSMAe/p)驱动shRNA转录效果,比较何种终止序列最有效。方法:分别以poly(A),minipoly(A),poly(U)为终止序列设计针对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的干扰序列,克隆入经SalⅠ和BamHⅠ双酶切的pPSMA... 目的:探讨前列腺特异性膜抗原增强子、启动子(PSMAe/p)驱动shRNA转录效果,比较何种终止序列最有效。方法:分别以poly(A),minipoly(A),poly(U)为终止序列设计针对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的干扰序列,克隆入经SalⅠ和BamHⅠ双酶切的pPSMAe/p载体上。然后通过脂质体介导,将各重组干扰质粒与pEGFP-C1质粒共转染PC-3和LNCaP细胞,采用荧光显微镜,流式细胞仪,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测EGFP在各组细胞中的干扰效果。结果:重组质粒中成功插入了目的基因片段;荧光显微镜和流式测定结果显示各干扰质粒与pEGFP-C1质粒共转染LNCaP后,各干扰组荧光表达均有不同程度减少,与空载体组相比均有统计学差异(P<0.01),pPSMAe/p-shEGFP-poly(A)组减少与pPSMAe/p-shEGFP-minipoly(A)组相比有统计学差异(P<0.05),与pPSMAe/p-shEGFP-poly(U)组相比有显著统计学差异(P<0.01)。各干扰载体与pEGFP-C1质粒共转染PC-3后各组荧光表达无统计学差异(P>0.05),EGFP mRNA和蛋白表达水平无明显差异;LNCaP细胞各干扰组中EGFP mRNA和蛋白表达与空载体对照组相比均有不同程度下降,以pPSMAe/p-shEGFP-poly(A)组最为明显。结论:成功构建了针对EGFP的RNA干扰表达载体pPSMAe/p-shEGFP-poly(A)、pPSMAe/p-shEGFP-minipoly(A)和pPSMAe/p-shEGFP-poly(U);PSMAe/p可特异性驱动shRNA转录;poly(A)终止信号终止转录最有效。 展开更多
关键词 前列腺特异性膜抗原 启动子 增强型绿色荧光蛋白 RNA干扰 lncap细胞系
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与人PC-1同源的鼠PC-1基因的启动子的分子克隆和特性分析(英文)
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作者 梁瑞霞 涂智杰 +8 位作者 王健 张惠 姜飞 庞博 郑斌 李素萍 施庆国 黄翠芬 周建光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期856-861,共6页
为了鉴定鼠mPC-1基因表达的调控元件,克隆并分析了该基因的启动子.构建了一系列mPC-1基因启动子的截短序列.通过荧光素酶报道基因,分析了它们在前列腺癌细胞和其它细胞中的表达.结果表明,在AR阳性细胞系中,mPC-1基因启动子活性远远高于S... 为了鉴定鼠mPC-1基因表达的调控元件,克隆并分析了该基因的启动子.构建了一系列mPC-1基因启动子的截短序列.通过荧光素酶报道基因,分析了它们在前列腺癌细胞和其它细胞中的表达.结果表明,在AR阳性细胞系中,mPC-1基因启动子活性远远高于SV40和p61-PSA启动子,mPC-1基因启动子599bp至449bp可能含有一个负调控元件;mPC-11.1kb启动子控制的表达主要在前列腺癌细胞系中;雄激素可调控mPC-11.1kb启动子表达.mPC-11.1kb序列是一个有前列腺癌细胞特异性和较强的启动子,经过进一步的修饰有可能作为一种有用的前列腺癌基因治疗元件. 展开更多
关键词 mPC-1基因 启动子 前列腺癌 lncap细胞
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BH3-HIV-TAT抗前列腺癌的活性
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作者 韦华 郝晓柯 +2 位作者 苏明权 张建芳 刘家云 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第4期272-276,共5页
目的:探讨人工合成的BH3-HIV-TAT肽对前列腺癌细胞株LNCaP增殖的影响。方法:以25、50、1000μmol/L的BH3-HIV-TAT处理LNCaP细胞12或24h,以激光共聚焦显微镜观察BH3-HIV-TAT肽的细胞定位;观察经BH3-HIV-TAT肽处理后,LNCap细胞凋亡过程中... 目的:探讨人工合成的BH3-HIV-TAT肽对前列腺癌细胞株LNCaP增殖的影响。方法:以25、50、1000μmol/L的BH3-HIV-TAT处理LNCaP细胞12或24h,以激光共聚焦显微镜观察BH3-HIV-TAT肽的细胞定位;观察经BH3-HIV-TAT肽处理后,LNCap细胞凋亡过程中核染色质的形态学变化;用流式细胞仪分析不同时间不同浓度的短肽对细胞凋亡程度和周期的影响;以MTS/PMS测定,分析短肽对LNCaP细胞的增殖是否有浓度依赖性的影响。结果:激光共聚焦检测结果显示BH3-HIV-TAT肽主要定位在细胞核内;LNCap细胞经短肽处理后,可观察到分为2期的细胞凋亡过程;流式细胞仪检测结果证实了短肽对细胞凋亡程度和周期的影响;MTS/PMS测定表明该短肽具有浓度依赖性的抗前列腺癌细胞的活性。结论:BH3-HIV-TAT肽可有效地诱导前列腺癌细胞株LNCaP的凋亡,从而影响其增殖,实验结果为癌症靶向性治疗提供了依据。 展开更多
关键词 BH3 HIV-TAT lncap细胞 前列腺癌
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前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株的建立及相关lncRNA和mRNA的筛选 被引量:2
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作者 关翰 凌志新 +6 位作者 方芳 毛溧凯 尤宗昊 王灿 陈恕求 许斌 陈明 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期116-121,共6页
目的:构建人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株并筛选恩杂鲁胺耐药对lncRNA和mRNA表达谱的影响。方法:体外以恩杂鲁胺10μmol/L浓度诱导培养人前列腺癌LNCa P及C4-2B细胞株6个月,建立耐药细胞株LNCa P-ENZA及C4-2B-ENZA。MTT法检测各细胞株IC5... 目的:构建人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株并筛选恩杂鲁胺耐药对lncRNA和mRNA表达谱的影响。方法:体外以恩杂鲁胺10μmol/L浓度诱导培养人前列腺癌LNCa P及C4-2B细胞株6个月,建立耐药细胞株LNCa P-ENZA及C4-2B-ENZA。MTT法检测各细胞株IC50值和耐药指数,Western印迹检测前列腺癌恩杂鲁胺耐药相关基因FL-AR、AR-V7、HnRNPA1在各细胞株中的表达。应用高通量芯片技术筛选C4-2B和C4-2B-ENZA细胞中差异表达的lncRNA与mRNA。结果:恩杂鲁胺耐药细胞株LNCa P-ENZA和C4-2B-ENZA的IC50值分别为60.83、88.32μmol/L,与亲本细胞(分别为12.31、18.96μmol/L)相比显著增高(P<0.05),其耐药指数分别为4.94和4.67。Western印迹结果表明LNCa P-ENZA和C4-2B-ENZA中恩杂鲁胺耐药相关基因AR-V7、HnRNPA1的蛋白表达量相较与LNCa P和C4-2B细胞显著升高,而FL-AR的表达量未见显著改变。通过lncRNA芯片技术筛选后发现与C4-2B相比,在C4-2B-ENZA细胞中显著差异表达的lncRNA有1 440个,其中上调倍数最大者为DPP10-AS1(fold change=33.6),下调最大倍数为G090385(fold change=186.41);mRNA有1 236个,其中上调倍数最大者为BCHE(fold change=193.70),下调倍数最大者为ANKRD1(fold change=182.90)。结论:成功建立了人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞,并且筛选出了与耐药相关的lncRNA与mRNA,为前列腺癌恩杂鲁胺耐药的治疗提供分子依据。 展开更多
关键词 前列腺癌 恩杂鲁胺耐药 lncap细胞株 C4-2B细胞株 lncRNA MRNA
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前列腺癌转移细胞模型——LNCaP细胞模型 被引量:4
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作者 张惠 周建光 黄翠芬 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2005年第6期576-579,共4页
前列腺癌是严重威胁欧美国家男性健康的恶性肿瘤。研究前列腺癌发生与发展的分子机制,尤其是从雄激素依赖性向雄激素非依赖性转化的分子机制对该病的诊断和治疗极为重要。前列腺癌转移LNCaP细胞模型包括LNCaP、C4、C4-2和C4-2B等一系... 前列腺癌是严重威胁欧美国家男性健康的恶性肿瘤。研究前列腺癌发生与发展的分子机制,尤其是从雄激素依赖性向雄激素非依赖性转化的分子机制对该病的诊断和治疗极为重要。前列腺癌转移LNCaP细胞模型包括LNCaP、C4、C4-2和C4-2B等一系列的遗传背景相同的细胞系,成功模拟前列腺癌细胞从雄激素依赖性发展到雄激素非依赖性,从不转移到转移各个阶段的基本生物行为学的特征,已成为当前应用最为广泛的前列腺癌细胞模型之一。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 细胞系 lncap细胞系 雄激素类 肿瘤转移
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