LNK基因在慢性髓系白血病中的变异

目的:比较慢性髓系白血病(CML)患者组与对照组的LNK基因突变及单核苷酸多态性(SNP),探讨LNK基因变异与CML发生的关系。方法:选取36例CML患者和46例健康对照者。提取骨髓和外周血DNA,用Q-PCR检测BCR/ABL1融合基因,用PCR扩增LNK基因外显子全长;扩增序列中包括了LNK基因内影响氨基酸表达的Rs3184504(C/T)和Rs78894077(A/C/G/T),以及对氨基酸表达无影响的Rs7973120(A/T)的3个SNP位点。测序分析LNK基因突变及单核苷酸多态性。结果:36例CML患者均有BCR/ABL1突变,对照组无突变;1例CML患者有LNK杂合子突变,位点为A300V,突变率2.8%,对照组无突变。Rs3184504:对照组C/T等位基因频率为50%/50%,CML组为94.4%/5.6%,CML组C等位基因明显高于对照组,其中CC基因型占94.4%(P<0.01);Rs78894077:对照组C/T等位基因为9.8%/90.2%,CML组16.7%/83.3%,差异无统计学意义(P>0.05),但CML组CC基因型高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Rs7973120:对照组A/T等位基因频率为10.9%/89.1%,CML组为25%/75%,CML组A等位基因高于对照组(P<0.01)。结论:CML患者中有LNK突变,LNK单核苷酸多态性与CML的发生相关,CML患者多携带有LNK Rs3184504 C等位基因及Rs7973120 A等位基因。

LNK基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的:探讨LNK基因在急性白血病患者中的表达及其与临床特征的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR检测80例AL(ALL 42例,AM L 38例)患者骨髓中LNK m RNA的表达水平,分析其表达水平与临床特征的相关性,应用Western blot检测患者的LNK蛋白表达量。以正常的志愿者(16例)骨髓作为对照组。结果:ALL和AM L组的LNK水平均明显高于正常对照组(P=0.007,P=0.021),ALL组与AM L组之间LNK水平无统计学差异;ALL和AML组中的LNK表达水平均与危险程度呈正相关(P=0.000,P=0.004,r=0.5,r=0.386),且ALL和AML组中高危组的LNK水平均明显高于对照组(P=0.035,P=0.032),AML和ALL组的中危组(P=0.239,P=0.609)及标危组(P=0.974,P=1)LNK水平均高于对照组,但无统计学意义,各组之间危险程度无统计学差异。急性白血病患者LNK蛋白表达量较对照组增加。结论:急性白血病患者LNK基因表达高于正常人,与患者危险度呈正相关。

LNK基因在原发性血小板增多症中的变异及临床意义

目的:探讨原发性血小板增多症(essential thrombocytosis,ET)中LNK基因的突变及单核苷酸多态性(SNP),并分析其与ET发病的关系。方法:用位点特异性PCR的方法检测JAK2V617F基因突变。用PCR扩增LNK基因外显子全长,扩增序列中包括LNK基因内影响氨基酸表达的Rs3184504(C/T)和Rs78894077(A/C/G/T)以及对氨基酸表达无影响的Rs7973120(A/T)3个SNP位点。测序分析LNK基因突变及单核苷酸多态性。结果:发现6例患者有LNK突变,包括4种类型,分别为A300V、R425C、V402L及R426Q。ET患者SNP Rs78894077Ser(丝氨酸)型T等位基因分布高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ET患者SNP Rs3184504 Ser(丝氨酸)型T等位基因频率高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在ET患者中存在LNK基因突变,携带LNK SNP Rs78894077 Ser及Rs3184504 Ser位点T等位基因可增加患ET的风险。

LNK基因突变在骨髓增殖性肿瘤中的作用

骨髓增殖性肿瘤(MPN)是一类造血干细胞克隆性疾病。研究显示,JAK-STAT信号通路与MPN的发病密切相关,对JAK-STAT信号传导具有负调控作用的LNK基因在MPN发生发展中可能扮演了重要角色。在JAK2突变阴性的MPN中,LNK基因的特异性突变可能是导致MPN向不同亚型分化的关键。LNK基因的某些SNP可调控造血细胞向不同方向分化可能也是MPN表现为不同亚型的重要影响因素。LNK基因功能性改变导致JAKSTAT信号通路的异常活化可能是导致MPN发生新的机制。本文就LNK基因在MPN中的作用做一简单综述。

LNK基因表达改变对THP-1细胞增殖及凋亡的影响

目的初步探讨沉默及过表达LNK基因后对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖及凋亡的影响,为研究白血病靶向治疗提供新方向。方法实验分为4组:沉默LNK组(Si-LNK)、过表达LNK组(VP-LNK)、空转组(Empty virus group)及对照组(Control group)。慢病毒转染THP-1细胞,建立稳定沉默及过表达LNK基因细胞株;转染72 h后,观察沉默LNK组、过表达LNK组及空转组绿色荧光蛋白(GFP)的表达量,流式细胞仪检测慢病毒感染效率;RT-PCR及Western blot检测LNK基因mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测THP-1细胞在24、48、72 h的增殖情况,流式细胞术检测THP-1细胞凋亡率。结果经慢病毒感染72 h,沉默LNK组、过表达LNK组及空转组THP-1细胞的感染效率在99%以上。与对照组相比,沉默组LNK基因的mRNA水平及蛋白表达水平均显著降低,而过表达组均显著升高,说明LNK基因沉默或过表达成功。CCK-8法及流式检测结果显示沉默LNK组较对照组细胞增殖活性降低,且细胞凋亡率明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组及空转组相比,过表达LNK组THP-1细胞的增殖活性及细胞凋亡率无明显升高或降低,差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默LNK基因可显著抑制THP-1细胞增殖,促进其凋亡,但过表达LNK对细胞增殖及凋亡无明显影响。