荜茇宁对动脉粥样硬化家兔主动脉LOX-1和VCAM-1基因表达的影响

目的观察荜茇宁对动脉粥样硬化(AS)家兔血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)和血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)mRNA表达的影响。方法采用高脂饲料喂养家兔建立AS模型,将32只兔随机分为正常组、模型组、荜茇宁组和阳性对照组,荜茇宁组和阳性对照组分别给予5mg.kg-1.d-1荜茇宁和辛伐他汀。8周后,采用实时定量聚合酶链式反应(Real-timePCR)检测各组动物主动脉LOX-1,VCAM-1mRNA表达水平。结果模型组主动脉LOX-1,VCAM-1的表达量显著增加,分别是正常组的16.8和8.1倍;而荜茇宁组LOX-1,VCAM-1mRNA表达水平明显降低,分别是正常组的9.8和4倍,比模型组分别减少42%和51%。结论荜茇宁抑制AS兔主动脉LOX-1,VCAM-1mRNA的表达,这可能是其抗AS的一种作用机制。

基于极化荧光方法的人LOX-1配体高通量筛选

目的建立以极化荧光为检测方法的高通量筛选技术,通过大规模筛选发现氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX1)的天然配体。方法密度梯度超速离心获得正常人血中低密度脂蛋白(LDL),然后用CuSO4(5μmol·L-1)修饰为氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)。FITC标记hLOX1,以受体(LOX1)和配体(oxLDL)的相互作用为基础建立筛选模型,用极化荧光检测方法,在激发光485nm、发射光525nm,对3200个样品进行高通量筛选,并用Z′因子值评价实验。结果Z′因子值为0.75,根据建立的基于极化荧光的高通量筛选实验方法,发现3个化合物与hLOX1有较高的结合活性,IC50值小于31.6μmol·L-1。结论极化荧光检测方法适合于高通量筛选技术,具有较高的稳定性、灵敏性和可重复性。

原发性高血压患者血浆脂联素和LOX-1的水平变化及相关性

目的:探讨脂联素、LOX-1与原发性高血压发生、发展的关系。方法:收集120例原发性高血压患者,根据血压水平分组,高血压1级(37例),2级(40例),3级43例,同时选取健康对照40例。于肘静脉采血,采用ELISA法检测血浆脂联素及sLOX-1浓度,同时检测相关生化指标。结果:1、2、3级组脂联素水平均低于健康对照组,且3级组脂联素水平明显低于1级组(P<0.01);相反,1、2、3级组sLOX-1的水平均高于对照组,且3级组LOX-1水平明显高于1级组(P<0.01);血浆脂联素和sLOX-1水平呈显著负相关(r=-0.903,P<0.05)。结论:原发性高血压的发病与血浆脂联素及sLOX-1水平有密切关系。

银杏叶提取物对脂多糖介导的血管内皮细胞低密度脂蛋白受体LOX-1表达的影响

[目的]观察银杏叶提取物(GBE50)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化低密度脂蛋白受体(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor,LOX-1)表达的影响。[方法]应用LPS刺激体外培养的HUVECs 24h。RT-PCR方法检测(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor mRNA,LOX-1 mRNA)表达水平;采用蛋白质印迹分析检测LOX-1蛋白表达水平。[结果]LPS(1μg/mL)上调LOX-1 mRNA和蛋白表达水平,GBE50(40μg/mL)轻度抑制LPS介导的LOX-1 mRNA(P<0.005)和蛋白表达增加(但没有统计学意义,P>0.05),GBE50(80μg/mL)及NF-κB抑制剂CAPE(20μg/mL)明显抑制LOX-1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01)。[结论]GBE50可能通过抑制LOX-1表达,在防治动脉粥样硬化中发挥作用。

吡格列酮对高脂饮食兔主动脉LOX-1表达的影响

目的探讨吡格列酮对高脂饮食下兔主动脉LOX-1表达的影响及其对动脉粥样硬化的作用。方法设立正常饮食、高脂饮食及高脂饮食加吡格列酮干预3组,通过比较主动脉病理形态学改变、血脂的变化、LOX-1分子及mRNA的表达进行研究,采用免疫组化检测兔主动脉LOX-1分子的表达,采用RT-PCR检测LOX-1mRNA的表达。结果吡格列酮能减轻高脂饮食所致的内膜增厚和平滑肌增生,减轻高脂血症所致动脉粥样硬化的发展。吡格列酮还能明显升高HDL,对TC、LDL、TG和BS无明显影响。高脂饮食刺激兔主动脉LOX-1分子及mRNA的表达,吡格列酮能显著减轻这种作用。结论吡格列酮能减轻高脂饮食兔主动脉LOX-1分子及mRNA的表达,这可能是噻唑烷酮类药物抗动脉粥样硬化的重要作用机制。

TLR4激动上调内皮细胞氧化低密度脂蛋白受体LOX-1表达

目的近年研究表明介导先天免疫反应的受体Toll样受体4(TLR4)参与了动脉硬化的发生发展。业已证明氧化低密度脂蛋白受体LOX1介导内皮细胞活化和功能失调,激发炎症过程,在动脉粥样硬化的发生和发展中起着极为重要作用。本研究观察TLR4激动是否调节内皮细胞LOX1表达。方法应用脂多糖(LPS)刺激体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24h。采用RTPCR和流式细胞术分别检测TLR4、LOX1mRNA和蛋白表达水平。为了观察转录因子NFκB在调节LOX1表达中的作用,应用NFκB特异性抑制剂咖啡酸苯乙酯(CAPE)预处理细胞,然后以LPS刺激,检测LOX1mRNA和蛋白变化。结果LPS(10～1000ng/mL)上调HUVECsTLR4和LOX1mRNA表达,LPS(1000ng/mL)上调TLR4和LOX1蛋白表达,CAPE(20μg/mL)可抑制LPS介导的LOX1表达上调。结论TLR4/NFκB信号途径可能通过上调内皮细胞LOX1表达参与动脉粥样硬化的发生及发展。

搜风祛痰中药对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞LOX-1 mRNA及NF-κB mRNA表达的影响

目的观察搜风祛痰中药对AngⅡ诱导体外培养人脐静脉内皮细胞凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)与核因子-κB基因表达的影响。方法制备家兔中药复方活心汤含药血清。采用酶消化法体外培养HUVECs2～3代用于实验。采用RT-PCR法测定脐静脉血管内皮细胞LOX-1 mRNA水平。随机分为正常对照组、AngⅡ组、AngⅡ+低剂量中药血清组、AngⅡ+中剂量中药血清组、AngⅡ+高剂量中药血清组。用中药先孵育2h后再加入0.5μmol/LAngⅡ刺激2h,取出细胞盖玻片固定。结果与对照组比较,活心汤含药血清可抑制AngⅡ导致的细胞损伤,减少LOX-1mRNA及NF-κB mRNA的表达。结论活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。

TWEAK对THP-1细胞中LOX-1表达的影响

目的探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导剂(TWEAK)对人单核细胞(THP-1)中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响。方法通过半定量RT-PCR检测不同浓度的TWEAK对THP-1细胞中LOX-1mRNA的表达,通过Western blot检测不同浓度的TWEAK对THP-1细胞中LOX-1蛋白表达的影响。结果发现TWEAK能够上调THP-1细胞中LOX-1mRNA及蛋白的表达,并且具有浓度和时间依赖性。结论 TWEAK可通过诱导单核-巨噬细胞表达LOX-1而具有致动脉粥样硬化的作用。

中国荷斯坦奶牛LOX-1基因3′UTR的PCR-SSCP分析

为了寻找影响奶牛产奶性状的候选基因,采用PCR-SSCP分子标记方法,对中国荷斯坦奶牛LOX-1基因3′非编码区进行了多态性分析。结果表明,在中国荷斯坦奶牛中检测的LOX-1基因3′UTR有AA型、BB型和AB型3种基因型,其频率分别为0.1374,0.3130和0.5496;不同基因型与中国荷斯坦奶牛的乳脂率之间有显著的相关性(P<0.05),但对乳蛋白率、产奶量和体细胞评分(SCS)影响不大,未达到显著水平。初步认为LOX-1基因可能是控制中国荷斯坦奶牛产奶性能的一个候选基因,或是与之存在紧密遗传连锁的分子标记。

近红外荧光分子标记的LOX-1抗体靶向小鼠动脉粥样硬化模型的成像研究

目的:探讨近红外荧光分子标记的凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)抗体探针在ApoE-/-鼠主脉动脉粥样硬化近红外荧光(NIRF)成像中的可行性。方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饮食喂养20周,建立动脉粥样硬化模型。将24只ApoE-/-动脉粥样硬化模型小鼠随机分为3组,即抗LOX-1抗体-NIR-797组、非特异性IgG-NIR-797组和单纯磷酸盐缓冲液(PBS)组,每组8只,分别经尾静脉注入抗LOX-1抗体-NIR-797、非特异性IgG-NIR-797和单纯PBS。另取8只C57BL/6小鼠作为对照组,经尾静脉注入抗LOX-1抗体-NIR-797,注入探针24 h后取小鼠主动脉及主要脏器行NIRF成像,再取主动脉行油红O染色,比较NIRF成像面积和油红O染色面积比例的差异。结果:ApoE-/-小鼠经尾静脉注入抗LOX-1抗体-NIR-797探针24 h后,NIRF成像显示有强荧光信号聚集于小鼠离体主动脉的斑块区域,而注入非特异性IgG-NIR-797组斑块区信号明显减弱,PBS组及对照组C57BL/6小鼠仅见较弱荧光信号,单因素方差分析结果显示差异有统计学意义(F=232,P<0.001)。NIRF阳性面积与斑块油红O染色面积比例分别为(42.70±1.25)%和(42.78±1.51)%,两者差异无统计学意义(t=0.409,P=0.695)。结论:近红外荧光分子标记的抗LOX-1抗体探针能够特异性地显示ApoE-/-鼠主动脉粥样硬化斑块的分布,可以作为小鼠动脉粥样硬化斑块成像的有效工具,LOX-1将来可能成为一个新的评价动脉粥样硬化的良好靶点。

LOX-1研究进展

LOX 1是一种Ⅱ型膜蛋白 ,按结构分类 ,它属于C型选择素家族。它可以结合、中和、降解ox LDL ,还具有介导血小板与内皮细胞的相互作用等功能。LOX 1的表达不是结构性的 ,在血管紧张素Ⅱ、剪切力、肿瘤坏死因子α、肿瘤生长因子β、内皮素 1作用下 ,其表达上调。对血浆中可溶性LOX

糖肾宁对糖尿病肾病大鼠早期肾功能及LOX-1 mRNA表达的影响

目的:观察糖肾宁对糖尿病肾病模型大鼠早期肾功能及肾脏组织中LOX-1 mRNA表达的影响。方法:用三联造模法(单侧肾摘除+高糖高脂+小剂量链脲佐菌素腹腔注射)建立早期糖尿病肾病大鼠模型,糖肾宁干预12周后,采用RT-PCR方法观察大鼠肾脏组织中LOX-1 mRNA表达的变化。结果:用三联造模法可成功复制早期糖尿病肾病大鼠模型,模型大鼠的肾脏组织中LOX-1 mRNA表达增多,糖肾宁可减少LOX-1 mRNA在模型大鼠肾脏组织中的异常表达。结论:LOX-1的异常表达是糖尿病肾病的发病机制之一,糖肾宁可能通过降低LOX-1mRNA在模型大鼠肾脏组织中的异常表达对肾功能起到保护作用,值得进一步深入研究。

西红花酸对动脉粥样硬化大鼠血脂及LOX-1表达的影响

目的研究西红花酸对动脉粥样硬化大鼠血脂及LOX-1表达的影响。方法健康SD雄性大鼠,随机分为4组:空白对照组、模型组、西红花酸高剂量组、西红花酸低剂量组。高脂饲料建立大鼠实验性动脉粥样硬化模型,测定大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白。同时取主动脉做病理切片检查。RT-PCR、Westernblotting技术检测主动脉LOX-1的基因与蛋白表达水平,观察西红花酸对其血管平滑肌细胞LOX-1表达的影响。结果高、低剂量的西红花酸能显著降低动脉粥样硬化大鼠血清TC、TG和LDL-C含量;明显降低主动脉LOX-1的表达。结论西红花酸可明显下调动脉粥样硬化大鼠LOX-1的表达。

搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞LOX-1 mRNA表达的影响

目的:观察搜风祛痰中药对血管紧张素II致体外培养人脐静脉内皮细胞LOX-1 mRNA表达的影响。方法:制备兔活心汤含药血清。采用酶消化法培养HUVECs 2-3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞LOX-1 mRNA,随机分成5组:正常对照组,AngⅡ组,低浓度药物血清+AngⅡ组中浓度药物血清+AngⅡ组高浓度药物血清+AngⅡ组。结果:活心汤可抑制AngⅡ所致的内皮细胞损伤,减少LOX-1 mRNA的表达。结论:活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,可以保护血管内皮功能。

oxLDL和大豆异黄酮对滋养细胞LOX-1表达的调控及意义

目的通过检测氧化修饰低密度脂蛋白(oxLDL)和大豆异黄酮(SI)对绒癌细胞株JEG-3细胞血凝素样氧化修饰低密度脂蛋白受体1(LOX-1)表达的调控,来探讨SI对滋养细胞的抗氧化作用,为其应用于子痫前期的防治提供一定的实验基础。方法以具有妊娠早期细胞滋养细胞特性的绒癌细胞株JEG-3细胞为研究对象,用细胞免疫化学、Westernblot、RT-PCR方法检测oxLDL和不同浓度的SI对JEG-3中LOX-1表达的调控。结果通过细胞免疫化学技术检测到LOX-1在JEG-3细胞浆及细胞膜中均有表达。oxLDL可诱导JEG-3细胞LOX-1mRNA和蛋白的表达;在oxLDL作用基础上,加入不同终浓度的SI共培养24h后,又可剂量依赖的逆转上述作用。结论推测SI在JEG-3细胞可能通过受体途径LOX-1对抗oxLDL的氧化损伤作用。

ox-LDL对JEG-3细胞系LOX-1和凋亡相关分子表达的调控及意义

目的检验ox-LDL对滋养细胞中Lox-1和凋亡相关分子表达的调控,探讨ox-LDL和Lox-1与子痫前期发病的关系。方法JEG-3细胞培养并传代;采用细胞免疫化学方法、RT-PCR和Western-blot进行JEG-3细胞LOX-1和凋亡相关基因的检测。结果细胞免疫化学检测到LOX-1和Caspase-3在JEG-3细胞浆及细胞膜中均有表达;加入ox-LDL继续培养24和48h后,细胞的LOX-1和Caspase-3表达显著增强,同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,又逆转上述作用;RT-PCR与Western-blot结果一致,ox-LDL可剂量和时间依赖地诱导JEG-3细胞LOX-1、Caspase-3和Bax蛋白及mRNA的表达,下调Bcl-2蛋白的表达,LOX-1抑制剂角叉菜胶可逆转上述作用。ox-LDL对JEG-3细胞LOX-1表达的调控与Caspase-3和Bax的趋势一致,而与Bcl-2的趋势相反。结论ox-LDL可诱导滋养细胞LOX-1的表达,并可能导致滋养细胞凋亡增加,为进一步解释子痫前期的发病机制提供了实验基础。

不同剂量瑞舒伐他汀对急性心肌梗死患者hs-CRP、LOX-1的影响

目的观察不同剂量瑞舒伐他汀对急性心肌梗死(AMI)患者hs-CRP、LOX-1的影响。方法 60例急性心肌梗死患者随机分为两组,在常规治疗的基础上,常规剂量组口服瑞舒伐他汀10 mg/d,高剂量组口服瑞舒伐他汀20 mg/d,连续服药4周。30例健康体检患者作为对照组。比较治疗前各组hs-CRP、LOX-1水平,治疗组治疗前后hs-CRP、LOX-1、血脂水平,并监测其不良反应。结果与正常健康人相比较,AMI患者hs-CRP、LOX-1水平均明显升高(P<0.05),治疗4周后,治疗组hs-CRP、LOX-1、血脂水平均较治疗前明显降低(P<0.05),其中高剂量组较常规剂量组降低更明显(P<0.05)。结论 AMI患者早期使用较大剂量瑞舒伐他汀20 mg/d能显著降低患者hs-CRP、LOX-1、血脂水平,增加剂量能进一步增强其效果。

银杏叶提取物对重复＋GZ暴露高脂血症大鼠主动脉LOX-1及NF-κB表达的影响

目的观察银杏叶提取物、对重复正加速度(+G_z)暴露高脂血症大鼠主动脉凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)及核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法雄性SD大鼠50只随机分为5组,对照组、+Gz作用高脂模型组、银杏叶提取物低剂量干预组、银杏叶提取物中剂量干预组和银杏叶提取物高剂量干预组,每组10只。对照组给予普通饲料,模型组和药物干预组大鼠均给予高脂饲料喂养合并重复+Gz暴露处理,药物干预组大鼠每日灌胃给予各自剂量银杏叶提取物1次。实验持续8周后,检测各组大鼠血脂水平、氧化应激指标、炎症反应指标以及胸主动脉LOX-1、NF-κB表达。结果银杏叶提取物能降低重复+Gz暴露合并高脂饮食大鼠氧化型低密度脂蛋白水平,下调主动脉LOX-1表达,抑制NF-κB活化,减少促炎症因子的产生。结论银杏叶提取物可能通过下调主动脉LOX-1表达,抑制NF-κB活化,减轻炎症反应,进而减轻重复+Gz暴露合并高脂饮食导致的主动脉炎症损伤。

瘦素对人脐静脉内皮细胞的ICAM-1、LOX-1及MCP-1表达的影响

目的:探讨瘦素对血管内皮细胞ICAM-1、LOX-1、MCP-1表达的影响,以揭示瘦素致动脉粥样硬化的可能机制。方法:运用逆转录聚合酶链反应测定在不同浓度瘦素作用下,内皮细胞ICAM-1、LOX-1及MCP-1mRNA的表达。结果:空白对照组无瘦素刺激时,ICAM-1、LOX-1及MCP-1的mRNA表达低于瘦素刺激组,加入低剂量瘦素对于ICAM-1、LOX-1及MCP-1的mRNA表达影响不大(P>0.05),而随着瘦素剂量的升高,ICAM-1、LOX-1及MCP-1的mRNA表达明显增加,与对照组相比有明显统计学差异(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:中等浓度以上的瘦素(>12 mg/L)可以促进血管内皮细胞ICAM-1。

阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞Lox-1、TNF-α及ICAM-1表达的影响

目的研究阿托伐他汀(ATV)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞间黏附分子(ICAM-1)表达的影响,探讨ATV防治动脉粥样硬化的机制及其抗炎作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,加入ATV干预24h,收集细胞,用荧光定量PCR方法测定LOX-1、TNF-α及ICAM-1mRNA的表达;用Western blotting法测定LOX-1、TNF-α及ICAM-1蛋白表达。结果用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,引起LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高表达,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),用ATV干预以后显著抑制LOX-1、TNF-α及ICAM-1的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ATV可抑制LOX-1、TNF-α及ICAM-1的表达,这可能是其发挥抗动脉粥样硬化作用及抗炎作用的机制之一。