雌激素通过其受体α上调LRP16 mRNA表达并促进MCF-7细胞增殖

目的 探讨雌激素对人乳腺癌MCF 7细胞LRP16mRNA表达的调控作用以及过表达LRP16对MCF 7细胞生长特性的影响。方法 ( 1)用Northern印迹方法检测 17β 雌二醇 ( 17β E2 )对LRP16mRNA表达水平的作用 ;( 2 )构建LRP16启动子 ( -2 .6kb)调控的荧光素酶报告子 ( pGL3 S0 ) ,并与各种核受体包括雌激素受体α和 β(ERα和ERβ)、糖皮质激素受体α(GRα)、雄激素受体 (AR)和过氧化物酶体增殖物激活的受体γ和α(PPARγ和PPARα)表达载体共转染COS 7细胞 ,测定荧光素酶活性 ;( 3 )将LRP16表达载体转染MCF 7细胞 ,测定过表达LRP16对细胞的生长特性和细胞周期的影响 ,并用Western印迹方法测定周期素E、p5 3和 p2 1WAF1/CIP1蛋白的变化。结果 ( 1) 17β E2 使MCF 7细胞的LRP16mRNA表达水平增加 5～ 8倍 ,增加幅度未显示出 β E2 培养时间和剂量的依赖性 ;( 2 ) pGL3 S0 与ERα或AR共转染细胞的相对荧光素酶活性较单独转染 pGL3 S0 细胞 (对照组 )分别升高 11和 7.8倍 ;( 3 )LRP16过表达促进MCF 7细胞的生长且伴有周期素E显著升高 ,S期细胞的数量较对照组增加约 10 %。结论 ( 1)雌激素通过激活ERα增加MCF 7细胞LRP16mRNA的表达 ;( 2 )过表达LRP16可能通过上调周期素E促进MCF 7细胞生长。

LRP16基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:既往研究表明雌激素通过其受体!直接上调LRP16的表达,LRP16基因的高表达促进乳腺癌细胞的增殖。本研究旨在探讨LRP16基因在乳腺癌组织中的表达状况及其与临床病理特征的关系。方法:收集52例乳腺癌组织及其配对癌旁组织,Northernblot与半定量RT-PCR法分别检测22例和30例标本中LRP16mRNA水平。免疫组化法检测肿瘤组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及Ki-67的表达情况。结果:Northernblot检测结果表明,22例癌组织LRP16mRNA的表达较癌旁组织高2倍的有9例,高表达率为40.9%(9/22)。高表达LRP16的9例中有7例ER阳性,8例PR阳性;而非高表达13例中ER阳性6例,PR阳性5例,两组ER与PR阳性率均有显著性差异(P<0.05)。LRP16高表达的9例中只有1例PR和ER同时阴性,而非高表达的13例中有7例。22例患者中,13例肿瘤直径3.0～4.5cm,其中LRP16基因高表达组占8例;有腋窝淋巴结转移的12例中8例LRP16高表达。8例高表达Ki-67患者中6例LRP16高表达。半定量RT-PCR检测结果表明,30例肿瘤标本中9例(30.0%)LRP16mRNA的表达水平明显高于癌旁组织,9例LRP16高表达者ER、PR均阳性,Ki-67高表达,且瘤体直径均大于3.5cm,均有腋窝淋巴结转移,与非高表达组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:LRP16基因表达水平与ER/PR阳性率、细胞增殖活性、肿瘤直径、远处淋巴结转移密切相关,提示LRP16基因可能参与促进乳腺癌的增殖与转移。