多重耐药基因lsa(E)实时荧光定量PCR检测方法的创新

【目的】创新多重耐药基因lsa(E)实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)的检测方法,为lsa(E)基因流行和传播的监测提供参考。【方法】根据GenBank中lsa(E)基因的参考序列设计特异性引物,通过纯化、连接和转化等步骤,提取含有lsa(E)基因片段的重组质粒DNA为标准品进行检测,绘制标准曲线,验证其特异性和重复性,从而对多重耐药基因lsa(E)qRT-PCR检测方法进行创新;使用该检测方法对牛场粪便、土壤、淤泥和卧料等环境样品中lsa(E)基因的拷贝数量和相对丰度进行检测。【结果】该多重耐药基因lsa(E)qRT-PCR检测方法熔解曲线均为平滑单峰,特异性强;扩增效率良好(101.56%);标准曲线呈现良好的线性关系(r^(2)≥0.997);检测拷贝数量范围广(1.71×10^(2)~1.71×10^(8) copies·μL^(-1))且灵敏度高,组内组间变异系数范围为0.45%~1.66%,重复性强;使用该方法检测牛场环境样品,lsa(E)基因拷贝数量范围为2.54×10^(4)~1.52×10^(8) copies·μL^(-1),相对丰度范围为9.39×10^(-4)~1.20×10^(3),而普通PCR方法仅能在拷贝数量大于1×10^(6) copies·μL^(-1)的环境样品中检测到lsa(E)基因。【结论】本研究创新了多重耐药基因lsa(E)的qRT-PCR检测方法,特异性强,灵敏度高,检测范围广,且能应用于不同养殖环境样品(粪便、土壤和淤泥等)中lsa(E)基因的定量检测,为lsa(E)基因流行和传播的监测提供技术支持和理论指导。

新疆阿克苏地区猪场optrA/lsa(E)阳性粪肠球菌的耐药情况及传播特点分析

【目的】了解新疆阿克苏地区猪源粪肠球菌中optrA和lsa(E)的流行及传播特点,并探明optrA和lsa(E)阳性粪肠球菌的耐药情况,为评估两个耐药基因对公共卫生的影响和危害提供科学依据。【方法】对新疆农业大学兽医药理学实验室分离保存的322株粪肠球菌采用PCR的方法进行optrA和lsa(E)筛查,根据CLSI推荐药物及方法采用琼脂稀释法测定optrA和lsa(E)阳性菌株对氨苄西林、红霉素、泰乐菌素、四环素、多西环素、利奈唑胺、氟苯尼考、万古霉素、左氧氟沙星、恩诺沙星、庆大霉素和沃尼妙林的最小抑菌浓度(MIC)并进行耐药判定,利用PCR方法筛查相应的耐药基因,包括ermA、ermB、ermC、fexA、fexB、tet(K)、tet(L)、tet(M)、aac(6’)-le-aph(2")-Ia和cfr。选取31株不同来源的optrA和lsa(E)阳性粪肠球菌进行MLST分子分型和接合转移试验。【结果】共193株粪肠球菌检出optrA和/或lsa(E),其中38株optrA和lsa(E)共存,9株仅携带optrA,146株仅携带lsa(E)。这193株粪肠球菌对红霉素、泰乐菌素、四环素、多西环素、庆大霉素和沃尼妙林的耐药率均达到100%,虽然optrA检出率远低于lsa(E),但optrA阳性菌株总体耐药程度明显高于仅携带lsa(E)的菌株以及optrA、lsa(E)双阴性的菌株,其耐药基因的检出结果也呈现相同趋势。optrA和lsa(E)共存和仅携带optrA菌株的多重耐药谱集中在8耐和10耐,占比分别为84.6%和100.0%,而仅携带lsa(E)的菌株和optrA、lsa(E)双阴性菌株的多重耐药谱主要集中在6—8耐,占比为89.4%和90.7%。进一步分析optrA、lsa(E)与耐药性之间的关系发现,耐药较为严重的猪场optrA和lsa(E)的检出率也相对较高。耐药基因检出结果显示:193株菌均不同程度地携带ermB、ermC、tet(K)、tet(L)、tet(M)、aac(6’)-Ie-aph(2")-Ia、fex(A),并且optrA、lsa(E)共存的菌株及仅携带optrA菌株的耐药基因检出率总体上也高于仅携带lsa(E)的菌株和optrA、lsa(E)双阴性菌株。MLST和接合转移试验结果提示,optrA/lsa(E)菌株遗传环境复杂、可能既存在克隆传播又存在水平转移的现象。【结论】新疆阿克苏地区猪源粪肠球菌中optrA和lsa(E)的高携带率以及高耐药水平表明该地区耐药形势严峻,对当地生猪养殖业甚至于公共卫生安全都造成威胁,应及时采取措施以防控耐药性的进一步发展。

城乡差异视角下疼痛的货币化衡量与影响研究

文章基于2016年中国动态劳动力调查(CLDS)数据,使用LSA估值法与工具变量法,将疼痛的幸福损失与支付意愿进行货币化衡量和城乡影响差异比较,并从生理、心理、社会融入和经济四个角度考察了疼痛带来的健康折旧效应、经济效应与医疗成本。研究结果体现在以下三个方面。(1)疼痛对生活幸福感有显著负影响。总体上人们在均值处对单位疼痛的边际支付意愿约为年平均收入的1.1~3.3倍,疼痛上升幅度越大,支付意愿越强。城乡人群的疼痛支付意愿存在差异,农村的相对支付意愿更高。(2)在影响效应方面,疼痛程度上升不仅加速个体的健康折旧,还降低个体收入和就业机会,对医疗体系、社会就业和稳定有负向影响,并且提高医疗支出成本约26.3%~54.4%。疼痛上升对农村的收入和医疗成本负向影响更大,农村为等量疼痛缓解付出的成本更高,医疗保障体系具有“亲城镇”特征。(3)社会医疗保险保障的提高与互联网使用可缓解疼痛。文章认为,在医疗保障政策改革和乡村振兴背景下,政府应重视城乡生命质量差异及其对经济社会稳定的影响,通过提高医疗保障水平及互联网等手段提高生命质量,对乡村进行政策倾斜。

基于LSA分析法的初中体育优课师生互动行为研究

将基于信息技术的弗兰德斯互动分析系统作为编码工具,通过滞后序列分析法,对11节国家级体育优课中的师生互动行为进行比率分析、序列分析和行为情景的讨论。研究发现,因组制宜的行为策略督促学生“动”起来;师生同信息技术的联动让课堂“活”起来;多种互动情景使学生主体地位“显”出来。值得反思的是:互动中需提高学生主动性,加强信息技术使用的深度,改进教师提问和鼓励策略。

融合多种语言的语音情感识别

由于语言的差异,提高跨语言情感数据库识别语音情感的准确度,仍然是一项难题。该文针对语言差异这一难题,融合了语音情感识别技术和自然语言处理技术。该文选取Berlin语音情感数据库和CASIA语音情感数据库,从两个数据库中分别挑选200条语音,选用开源API下的Google Speech,实现语音文本的转化。使用机器翻译方法,将语言转化为文本,统一翻译成中文。利用自然语言处理的词法分析、句法分析、LSA的关键词提取算法,提取出表达情感的关键词。对于被提取出来的关键词,使用SpeechLib工具包将提取过特征值的文本转化成语音,提取MFCC特征,构建DNN+BLSTM模型,实现语音情感的分类。实验结果表明,文中使用的方法未加权平均召回率(UAR)和加权平均召回率(WAR)分别为48.22%和56.5%,相比其他方法,UAR和WAR分别提高了4%和8%。

心理咨询门诊中社交焦虑障碍的共病与功能损害情况调查

目的 调查心理咨询门诊中社交焦虑障碍的共病情况及功能损害程度。方法 用系统抽样法抽取 494名咨客 ,用LSAS量表初步筛选 ,并按照DSM Ⅳ的诊断标准进行诊断 ,功能损害情况按照患者自我评价分为有无严重影响。结果 心理咨询门诊中 ,66%社交焦虑障碍患者共患其他精神疾病 ;有 1 7%～ 47%的患者报告社交焦虑障碍对婚姻家庭、工作功能、和学习功能产生严重影响 ;合并抑郁组的患者年龄、LSAS他评分数及功能损害程度与非合并抑郁组比较差异具有统计学意义。结论 心理咨询门诊中社交焦虑障碍与其他疾病共患率高 ,对生活质量影响较重 。

基于隐含语义分析的微博话题发现方法

随着微博的大量普及和关注度的不断提高,微博热点话题发现已成为当前研究热点。针对于短文本、向量空间模型(VSM)文本表示方法存在高维度、稀疏,以及同义多义问题,导致难以准确度量文本相似度,提出一种基于隐含语义分析的两阶段聚类话题发现方法。引入话题热度的概念来选取具有一定关注度的微博文本,用隐含语义分析(LSA)对数据集进行建模;用层次聚类的CURE算法确定初始类中心;用K-means聚类得到热点话题的聚类结果。真实微博数据集的实验结果验证了该方法的有效性。

多层次web文本分类

传统的文本分类大多基于向量空间,分类体系为甲面体系,忽视了类别间的层次关系.根据LSA理论提出了一种多层次web文本分类方法.建立类模型时,根据类别的层次关系树由下到上逐层为具有相同父节点的类别建立一个类模型;分类时,由上到下,根据相应的类模型存LS空间上分类.这种分类方法解决了LSA模型中高维矩阵难以进行奇异值分解的问题.同时体现了web文本中词条的语义关系,注重了词条在网页中的表现形式.实验表明,多层次web文本分类方法比基于平面分类体系的分类方法在查全率和准确率方面要好.

关于OSPF路由优化技术的探讨

OSPF对网络变化的适应性强,便于网络维护,但对设备的系统开销较大,不利于园区网低端设备运行。该文研究表明,可以利用区域划分、路由汇总、末节区域设置和重发布列表等OSPF技术过滤不必要的LSA,简化路由表,使该OSPF路由环境适合低端三层交换机运行,从而构建出一个稳定可靠、又方便管理的园区网。

OSPF路由协议的认证分析

OSPF(Open Shortest Path First)路由协议的路由表是基于LSA(Link State Advertisement)计算出来的,为了保证计算出的OSPF路由表是正确的,就应该对传输过程中的LSA信息的完整性和可靠性进行认证。分析了RFC2328的OSPF路由协议的认证机制,包括简单口令认证和加密身份认证,并介绍了基于数字签名的OSPF,对实现和应用OSPF路由协议的认证机制提供了参考。

原发性肝癌患者脂质结合唾液酸、总唾液酸和B超检测

脂质结合唾液酸(lipid-bound sialic acid,LSA)作为肿瘤标记物已有报道[1-3],但LSA、总唾液酸(total sialic acid,TSA)、B超3者联合检测在原发性肝癌中的研究甚少.1998年至2001年,作者以正常人和良性肝病患者为对照,探讨了LSA、TSA与B超联合检测对原发肝癌的临床价值.

“女大难嫁”还是“男大难婚”——婚姻匹配的男女差异与“剩男剩女”的代价

使用CGSS 2010-2012研究我国目前存在的婚姻匹配困难问题,结果发现:男性成为"剩男"的可能性比女性成为"剩女"高约2.37个百分点;工作、收入和地区因素对于男性和女性的婚姻匹配都有显著影响,高等教育对女性的婚姻匹配困难作用有所减弱;RIF分解的结果表明系数效应是导致婚姻匹配市场上性别差异的主要原因,而非男女在禀赋上的差别;初步探究原因,性别比这一相对外生的因素贡献了系数效应的87.97%;婚姻匹配困难对人们的幸福感产生了负向影响,应用LSA估价法求得,"剩男"的代价为71294-80579元/年,"剩女"的代价为91532-103375元/年。"剩男剩女"是需要从本质上加以解决的重要社会问题。

测定血清TSA和LSA诊断肝胆胰癌

测定76例肝胆胰癌和124例肝胆胰良性疾病患者血清TSA及LSA水平的结果表明,TSA对肝胆胰癌总敏感度、特异性、诊断效率为77.6%、85.5%、66.3%;LSA则为89.5%、91.1%、81.5%。两法对肝胆胰癌的诊断均有显著的临床价值。对两法进行统计学比较,LSA敏感度明显高于TSA(p<0.05),诊断效率显著高于TSA(p<0.01)。LSA动态监测对肝胆腹癌诊断、鉴别、疗效观察和预后分析具有显著的临床价值。

OSPF协议DD报文的脆弱性分析与验证

分析了OSPF协议在EXSTART/EXCHANGE状态下DD(Database Description)报文交互过程,提出了该过程存在的脆弱性,设计开发了验证系统,并对两款不同厂家的路由器进行了验证和对比,证明了该缺陷的存在.

一种基于聚类和LSA相结合的文本特征降维方法

提出了一种特征选择和特征抽取相结合的特征降维方法。首先使用改进的k-means聚类算法对特征进行选择,然后使用SVD方法在基于语义层面上对特征空间进行压缩,试验结果表明,这种特征降维模式在文本分类的准确性方面效果较好。

树舌多糖对HepA小鼠的抑瘤作用及血清LSA含量的影响

目前,国内外对多糖类的研究方兴未艾,许多研究表明糖类化合物具有较强的免疫刺激和抗肿瘤作用,如云芝多糖能提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的舌噬能力,并使因带瘤而降低了的T细胞功能全面恢复,牛膝多糖能提高荷瘤小鼠低下的血清IgG含量,提高其NK细胞活性等,这就为人们从天然植物中寻找出一种毒性低、抗瘤作用强的新药开辟了途径。树舌多糖就是从小兴安岭产树舌中提取的多糖,实验证明它能明显延长L^(7811)白血病和H_(22)小鼠的生存时间,抑制肿瘤胞的生长,为进一步研究其抑瘤作用,本文研究了它对实体型肝癌(HepA)

血清脂质结合唾液酸快速测定法

一种简便快速的血清LSA测定法如下:取血清0.2ml以有机溶剂提取,提取物与F—8836专用试剂在沸水浴反应20min;生成物对560nm光有最大吸收。其吸收度(A)即可反映LSA含量。用本法检测癌症及其它疾病共127例及健康成人80例,结果23例癌症血清LSA十分显著高于健康人,阳性率73.9％;8例良性肿瘤或包块患者及9例癌症治疗缓解或手术后全为阴性;各种炎症、结核、肾脏疾病、SLE、脑外伤等也有部分阳性病例。

血清NSE,TNF-α,LSA联检对肺癌诊断的意义

目的 :探讨神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)及脂质唾液酸 (LSA)在肺癌中的表达及其诊断价值。方法 :收集肺癌病人血清 78份 ,良性肺病患者血清 32份 ,正常对照血清 10 9份。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和化学发光免疫分析法分别测定血清中的NSE、TNF -α及LSA。结果 :肺癌患者血清中的NSE、TNF -α、LSA分别为 19 78± 12 10ng/ml、135 6 4± 4 9 0 1pg/ml、1 0 6± 0 31mg/ml,明显高于良性肺病组 7 5 6± 3 4 1ng/ml、84 70± 2 4 89pg/ml、0 78± 0 18mg/ml及正常对照组 8 0 1± 2 81ng/ml、71 2 5± 13 5 0pg/ml、0 70± 0 13mg/ml(p <0 0 1)。对肺癌诊断的阳性率分别为 6 2 82 %、84 6 2 %、75 6 4 。联合检测阳性率达92 31%。结论 :血清NSE、TNF -α、LSA在肺癌病人中有较高的阳性率 ,联检阳性率更高 ,故NSE、TNF -α、LSA的联检是肺癌的非常有用的辅助诊断指标。 阳性标准为NSE >16 0ng/ml,TNF -α >10 0pg/ml,LSA >0 5 8mg/ml。

改性磺化木质素LSA阻垢分散性能及机理研究

以工业木质素磺酸盐LS为原料,采用自由基共聚反应对LS进行接枝羧基改性,制备得到改性磺化木质素LSA,用红外光谱对其结构进行表征。对LSA与目前常用几种阻垢剂进行阻垢分散性能的比较,结果表明,改性产物LSA为一种阻垢分散性能较为理想的绿色阻垢剂,并从螯合作用、分散作用及晶格畸变作用三方面对LSA阻垢机理进行了探讨。

血清LSA测定在恶性肿瘤临床诊断中的初步应用

本文根据Svennerholm和蒋谷人等的方法略加改良,测定了蚌埠地区113例正常人,71例恶性肿瘤患者和82例非肿瘤疾病患者血清脂质结合唾液酸(LSA)的含量。正常值为12.4mg/dl(SD=±3.6mg/dl),71例不同肿瘤患者的平均值为28.2mg/dl(SD=±9.7mg/dl),阳性率为88.7％,82例非肿瘤疾病患者的平均值为16.82mg/dl(SD=±5.4mg/dl),假阳性率为17％。方法的灵敏度,重复性(平均CV=3.6％)和回收率(平均回收率=101.4％)测定结果是满意的。本研究的初步结果表明,血清LSA测定对肺癌、白血病、胃癌和食管癌具有一定的临床诊断价值。