CⅡTA表达与喉鳞状细胞癌(LSCC)患者预后的关系

目的探讨MHC-Ⅱ类反式激活蛋白(classⅡtrans-activator,CⅡTA)的表达水平与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)患者预后的关系。方法收集2013年9月至2015年6月于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院行手术治疗的喉癌患者的病例资料及组织标本。根据纳入标准最终入组67例,采用免疫组织化学方法检测LSCC组织标本中CⅡTA的表达情况。采用χ2检验、Kaplan-Meier、Log-rank检验、Cox比例风险模型多因素回归方法对CⅡTA的表达水平与LSCC患者的临床特征、术后总生存期(overall survival,OS)之间的关系进行分析。利用GEPIA分析CⅡTA的表达与头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)预后的关系。结果CⅡTA的表达与LSCC的病理分级、临床分期、年龄、性别等临床特征无明显相关性;Kaplan-Meier分析显示在LSCC患者中CⅡTA高表达较低表达的预后好(P<0.05);GEPIA分析显示HNSCC患者中CⅡTA高表达较低表达的预后好(P<0.05);Cox多因素回归分析显示饮酒、CⅡTA的表达、淋巴结转移是LSCC术后生存时间的独立影响因素。结论CⅡTA表达与LSCC患者术后OS的关系密切,可作为预测LSCC患者预后的辅助指标之一。

肺癌相关基因LSCC-3真核表达载体的构建及其表达

目的构建含有肺癌相关基因LSCC-3全长ORF片段的真核表达载体,并验证其在细胞内的表达。方法PCR方法获取LSCC-3基因全长ORF片段,构建含有上述片段的真核表达载体(含3’端绿色荧光蛋白尾)并验证、纯化;将该真核表达载体转染人肺腺癌PAa细胞系,在倒置荧光显微镜下对LSCC-3基因的表达进行观察和验证。结果成功将LSCC-3基因全长ORF片段装入真核表达载体pLPS-3’EGFP(pLPS-LSCC-3-3’EGFP)并转染人肺腺癌PAa细胞系,在倒置荧光显微镜下观察到了核外细胞浆内LSCC-3基因蛋白表达产物的存在。结论成功构建了LSCC-3真核表达载体pLPS-LSCC-3-3’EGFP,该载体可在肺癌细胞胞浆内顺利表达。

沉默HIF-1α调控SLC7A11对喉癌细胞生长的实验研究

目的:本研究旨在探究沉默HIF-1α对喉癌中SLC7A11的具体作用,为临床诊断喉癌寻找新的肿瘤标志物和寻找潜在治疗的靶点。方法:培养UMSCC5喉癌细胞,转染HIF-1α-siRNA,Western blot筛选最佳转染效率,针对转染后的细胞CCK-8检测增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Transwell法检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测HIF-1α和SLC7A11表达。结果:成功沉默HIF-1α的表达,其中HIF-1α-siRNA1组的转染效率最高、最稳定(P<0.05)。沉默HIF-1α可以显著抑制人喉癌UMSCC5细胞的增殖(P<0.05)、促进细胞凋亡(P<0.05)以及抑制喉癌细胞侵袭、迁移(P<0.05)。沉默HIF-1α可以明显下调SLC7A11蛋白表达量(P<0.05)。结论:沉默HIF-1α可抑制人喉癌UMSCC5细胞增殖、侵袭、迁移行为以及凋亡,同时抑制SLC7A11的表达。为将来基于HIF-1α进行喉癌临床分子靶向治疗提供新的思路和理论依据。

转录因子HOXC13通过上调PCNA表达促进喉鳞状细胞癌AMC-HN-8细胞的恶性生物学行为

目的:本研究旨在探讨转录因子HOXC13在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达、功能及可能的调控机制。方法:常规培养LSCC细胞,将其分为sh-NC组、sh-HOXC13组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-HOXC13组、pcDNA3.1-PCNA组和sh-HOXC13+pcDNA3.1-PCNA组,用转染试剂将相应核酸和质粒转染各组细胞。用数据库数据分析HOXC13mRNA在LSCC组织中的表达;收集2019年1月至2022年12月在联勤保障部队第九八〇医院耳鼻咽喉头颈外科手术切除的62对LSCC组织及配对的癌旁组织,免疫组织化学法检测中国人LSCC组织中HOXC13蛋白的表达,qPCR检测中国人LSCC组织、癌旁组织以及各组细胞中HOXC13和PCNAmRNA的表达,MTS法检测各组AMC-HN-8细胞的增殖能力,平板克隆实验检测各组AMC-HN-8细胞的克隆形成能力,Transwell小室实验检测各组AMC-HN-8细胞的迁移和侵袭能力,双萤光素酶报告基因实验和染色质免疫沉淀技术(ChIP)验证HOXC13与PCNA之间的结合关系。结果:HOXC13和PCNA在LSCC组织和细胞中均呈高表达(P<0.05或P<0.01)且两者的表达水平呈正相关(P<0.01),HOXC13的表达水平与TNM分期有明显关联(P<0.01)。敲减HOXC13可明显抑制AMC-HN-8细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01),过表达HOXC13则促进TU686细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。HOXC13可与PCNA启动子区结合并调控其转录。敲低PCNA可部分逆转HOXC13对AMC-HN-8细胞的恶性生物学行为的促进作用(均P<0.01)。结论:HOXC13通过上调PCNA促进LSCC细胞的恶性生物学行为,HOXC13是LSSC临床诊断和治疗的潜在靶点。

miR-513b-5p靶向趋化因子CXCL8抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭

侵袭转移是喉鳞癌预后不良的主要危险因素,肿瘤微环境中的趋化因子与侵袭转移密切相关。CXCL8是一种细胞因子样的分泌蛋白质,在多种肿瘤的恶性发展过程中发挥重要作用,但其在喉鳞癌的作用尚未阐明。本文以喉鳞癌细胞为研究对象,阐明CXCL8在喉鳞癌细胞的作用,并寻找靶向CXCL8的miRNA,为喉鳞癌的诊断和治疗提供新靶点。GEPIA网站显示,CXCL8在头颈肿瘤组织中高表达(P<0.05)。实时荧光定量PCR发现,CXCL8在喉鳞癌细胞中高表达,酶联免疫检测也发现,CXCL8在喉鳞癌细胞上清中分泌量较高(P<0.001)。CCK8检测证实,降低CXCL8表达会明显抑制喉鳞癌细胞FD-LSC-1和AMC-HN8增殖(平均抑制率分别为34.0%,19.5%);EdU实验也证实,降低CXCL8表达明显抑制喉鳞癌细胞的增殖(P<0.05)。Transwell小室实验证实,降低CXCL8表达明显抑制喉鳞癌细胞FD-LSC-1迁移和侵袭(平均抑制率分别为40.0%,38.5%);降低CXCL8表达也明显抑制喉鳞癌细胞AMC-HN8迁移和侵袭(平均抑制率分别为37.5%,53.5%)。生物信息学网站预测,CXCL 8可能是miR-513b-5p靶基因,双荧光素酶报告检测证实,miR-513b-5p能够与CXCL 8-3′UTR结合,在喉鳞癌细胞中过表达miR-513b-5p,CXCL 8 mRNA表达量下降60%(P<0.01)。细胞功能恢复实验证实,miR-513b-5p削弱喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的能力可被外源表达的CXCL8有效逆转(P<0.05)。综上所述,miR-513b-5p通过靶向CXCL 8抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭。

长非编码RNA PART1抑制喉鳞癌细胞增殖和侵袭

长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)PART1可作为竞争性内源RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA),在多种肿瘤的发生发展中发挥关键作用,然而PART1在喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的研究尚属空白。我们基于前期lncRNA测序数据发现,PART1在LSCC组织中显著低表达。进一步分析TCGA等公共数据库中的测序和临床数据,共发现了LSCC癌/癌旁组织中146个差异表达的lncRNA(95个上调,51个下调)和2424个差异表达的mRNA,结果显示,PART1在LSCC中普遍低表达(P<0.0001),且PART1高表达组预后明显更好(P<0.05)。本文采用生物信息学手段构建了LSCC中PART1的ceRNA调控网络,并确定与之相互作用的miRNA与mRNA。在体外验证了PART1对LSCC细胞的重要性。通过过表达载体,显著提高了PART1在LSCC细胞中的表达量(P<0.001);5-乙炔基-20-脱氧尿苷染色实验、凋亡分析、划痕愈合实验、Transwell实验和鬼笔环肽染色等研究结果显示,体外过表达PART1可以显著影响LSCC细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭(P<0.001)。因此,PART1可能参与并抑制LSCC的发生和发展。本研究将为阐明PART1在LSCC中的作用提供理论依据。

敲减MET表达对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移及5-FU和顺铂敏感性的影响

目的:探究敲减间质表皮转化因子(MET)表达对人喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep-2细胞生长、迁移及5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂敏感性的影响。方法:通过基因表达综合数据库(GEO)及癌症基因组图谱(TCGA)数据库数据分析人LSCC组织中MET mRNA的表达水平;常规培养正常人支气管上皮细胞16HBE与人LSCC细胞Hep-2、KBV200和TU212,采用qPCR法和WB法检测16HBE、Hep-2、KBV200和TU212细胞中MET基因和蛋白的表达水平。用LipofectamineTM3000将MET敲减质粒(si-Met)和对照质粒(si-NC)转染至Hep-2细胞中,分为空白对照组,si-NC组和si-Met组。采用MTT法、流式细胞术、划痕愈合实验分别检测各组Hep-2细胞的增殖、迁移能力、周期分布以及对5-FU和顺铂的敏感性。结果:数据库数据分析显示LSCC组织中MET mRNA呈高表达(P<0.05),Hep-2、KBV200和TU212细胞中MET mRNA和蛋白的表达水平也均明显高于16HBE细胞(均P<0.01)。敲减MET表达后,Hep-2细胞中METmRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.01或P<0.001)、细胞增殖活力显著下降(P<0.0001)、G0/G1期细胞数量明显升高(P<0.0001)、S期细胞数量明显降低(P<0.0001)。敲减MET表达后,不同浓度5-FU或顺铂对细胞增殖的抑制率均显著升高、药物半数抑制浓度(IC50)均降低(均P<0.0001),划痕愈合率明显降低、迁移能力下降(均P<0.05)。结论:MET在人LSCC组织和细胞中呈高表达,敲减MET可有效抑制Hep-2细胞中MET的表达,抑制细胞增殖、迁移能力,使其周期阻滞于G1期,增强Hep-2细胞对5-FU和顺铂的敏感性。

喉鳞状细胞癌中Skp2、PTEN及p27蛋白的表达及其意义

目的探讨Skp2、PTEN及p27蛋白表达与喉鳞状细胞癌(LSCC)发生、发展的关系。方法采用免疫组化SABC法检测65例LSCC组织中Skp2、PTEN及p27蛋白的表达情况。结果Skp2、PTEN及p27蛋白在LSCC组织中总的阳性表达率分别为60.0%,49.2%和41.5%,Skp2过表达与LSCC的临床分期及淋巴结转移正相关(P均<0.05),低分化、伴颈部淋巴结转移及Ⅲ～Ⅳ期LSCC组织中PTEN阳性率明显降低(P均<0.05),p27在颈部淋巴结转移组中阳性率显著降低(P<0.05)。结论联合检测Skp2、PTEN及p27的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为。

北京荷斯坦牛体细胞数遗传参数估计及其与产量、体型性状的相关性分析

本文配合动物模型用多性状约束最大似然法(REML)分析估计了2000～2007年北京地区81385头荷斯坦母牛的体细胞数自然对数(LSCC)的遗传力,LSCC的遗传力为0.12;个体测定日的LSCC的遗传力为0.06到0.11。体细胞数与产奶量、乳脂量、乳蛋白量的遗传相关分别为0.06、0.14和0.09。头三个泌乳期LSCC间的遗传相关都比较高,特别是第二泌乳期与第三泌乳期间的遗传相关高达0.95,LSCC对第二泌乳期与第三泌乳期可以看作是同一个性状。LSCC预期传递力与体深等大部分体型性状的相关系数几乎为0,但与蹄角度、前乳房附着、后乳房深度有较强的负相关,相关系数分别为-0.17、-0.19、-0.20;与乳头长度呈正相关,相关系数为0.15。体细胞数存在真实的遗传变异,其遗传力高于普遍报道的乳房炎的遗传力估计值的平均值,通过对体细胞数的间接选择来提高乳房炎抗性的育种是可行的,结合部分体型性状的遗传评定也有助于通过遗传育种的方法降低乳房炎的发病率。

不同体细胞数牛乳中纤溶酶热变性动力学研究

通过对高体细胞数(HSCC,100万个/ml)和低体细胞数(LSCC,30万个/ml)原料乳中纤溶酶进行65～130℃范围内热处理,探究牛乳体系中纤溶酶热变性动力学规律。结果表明:纤溶酶在热变性过程中显示了典型的一级动力学方程(n=1);经不同热处理后,牛乳中纤溶酶活性均下降;65～85℃范围的巴氏杀菌对纤溶酶活性影响不显著(P>0.05),超高温灭菌处理对纤溶酶活性影响显著(P<0.05);HSCC样品在≤110℃范围内的D值都大于LSCC样品,在T=130℃时,HSCC样品的D值为53.76s,LSCC样品D值为58.94s;HSCC和LSCC乳中纤溶酶热失活表观活化能Ea在65～95℃范围内分别为65.76kJ/mol和57.26kJ/mol,在95～130℃范围内分别为22.12kJ/mol和21.48kJ/mol。结论:巴氏杀菌范围内,热处理对牛乳中纤溶酶活性影响不显著,HSCC乳中纤溶酶活性比LSCC乳中的更稳定些;超高温灭菌处理后,两样品中纤溶酶活性明显下降,稳定性无差异。

P53和Bcl-2蛋白在喉鳞癌癌变过程中的表达及其临床病理意义

目的 :探讨喉鳞癌 (LSCC)癌变过程中P53和Bcl- 2表达的临床病理意义。方法 :用免疫组化S -P技术检测 2 0例喉正常粘膜 (LNM)、38例喉粘膜不典型增生 (LAH)和 50例LSCC中P53和Bcl- 2的表达情况。结果 :P53蛋白阳性染色局限于细胞核 ,Bcl- 2阳性表达定位于细胞浆。在LNM、LAH和LSCC中 ,P53阳性表达率分别为 0 0 % (0 / 2 0 )、52 6 % (2 0 / 38)和 62 0 % (31 / 50 ) ,组间比较有统计学意义 (χ2 =2 2 72 2 P =0 0 0 1 ) ;Bcl- 2阳性表达率分别为 5 0 % (1 / 2 0 )、76 3 % (2 9/ 38)和 50 0 %(2 5/ 50 ) ,组间比较亦有统计学意义 (χ2 =2 6 698 P =0 0 0 1 )。Bcl- 2在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级LSCC中阳性表达率分别为 1 1 1 % (1 / 9)、44 0 % (1 1 / 2 5)和 81 3 % (1 3/ 1 6) ,组间比较有统计学意义 (χ2 =1 2 0 54 P=0 0 0 2 ) ;在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组表达率分别为 66 7% (1 8/ 2 7)和 30 4% (7/ 2 3) ,组间比较亦有统计学意义 (χ2 =6 52 2 P =0 0 1 1 ) ,而P53与LSCC病理分级和淋巴结转移无关 (P >0 0 5)。在LAH和LSCC两组中 ,P53和Bcl- 2之间均呈负相关 (P <0 0 5)。结论 :P53和Bcl- 2异常表达是LSCC发生过程中的早期事件。Bcl-

喉鳞癌中FHIT基因第5,8外显子纯合性缺失及突变研究

目的探讨喉鳞癌(laryngealsquamouscellcarcinoma,LSCC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因第5,8外显子纯合性缺失及突变的情况。方法分别采用外显子特异PCR及PCR-SSCP技术检测41例LSCC中FHIT基因第5,8外显子纯合性缺失及点突变。结果LSCC中,第5外显子纯合性缺失率为26.8%(11/41),且与患者TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05);第8外显子纯合性缺失率为29.3%(12/41),且与患者TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05);FHIT基因第5,8外显子的纯合性缺失有明显的相关性(P<0.01);所有标本没有检测到第5,8外显子的点突变。结论LSCC中,FHIT基因第5,8外显子为其基因缺失的重要靶区,两者的纯合性缺失可作为检测LSCC生物学行为的重要标志。LSCC中,点突变可能不是FHIT基因失活的主要机制。

HPV16/18E_6和P_(53)基因蛋白在喉鳞癌中的表达及其相关性研究

目的 探讨人乳头瘤病毒16 / 18型早期蛋白E6 (HPV16 / 18E6 )、P53基因蛋白在喉鳞癌(L SCC)中的表达及其相关性。方法 免疫组化SABC法检测HPV16 / 18E6 和P53基因蛋白在L SCC及声带息肉中的表达。结果 HPV16 / 18E6 在声带息肉中未见表达,在L SCC中的表达率为4 0 .0 % ,差异有显著性(P <0 .0 5 )。P53基因蛋白在声带息肉与L SCC中的表达率分别为6 .6 6 %和6 6 .2 % ,差异有显著性(P <0 .0 5 )。HPV16 / 18E6 及P53基因蛋白的表达与L SCC临床分期、淋巴结转移有关。二者的表达无明显相关性。结论 HPV 16 / 18型感染和P53基因异常与L SCC发生、发展有关。HPV16 / 18E6 与P53基因功能异常无明显相关性。

基于嫦娥一号反射率数据月表正面FeO、Al_2O_3反演

波谱在可见光到红外范围对于月表主要矿物探测是敏感的,矿物的波谱特征主要取决于矿物的组分及其土壤的成熟度,月表的矿物及元素分布对于月球演化与成因有着至关重要的作用,用遥感手段分析月表矿物组分,借助统计学的方法反演矿物含量是十分有价值的。本文依据Change-1干涉成像光谱仪反射率影像,结合LSCC月表矿物样品,分析其波谱特征与矿物元素含量的相关性,采用基于改进的角度参数法与MNF统计方法对FeO、Al2O3全月正面分布进行研究。通过对比前人遥感影像及伽马射线谱仪数据填图的结果,其含量对于月海区域误差不大于0.6%,对于高地误差接近1%。

喉鳞癌Apaf-1基因表达及启动子区甲基化研究

喉鳞癌细胞存在多种癌基因和抑癌基因异常 ,Apaf 1(apoptoticproteaseactivatingfactor 1)基因是诱导细胞凋亡的肿瘤抑制基因。为探讨Apaf 1基因在喉鳞癌发生中的作用 ,应用半定量PCR方法分析Apaf 1的表达用比较基因组杂交 (ComparativeGenomicHybrodization ,CGH)和杂合性丢失 (LossofHeterozygosity ,LOH)分析方法对喉鳞癌病人Apaf 1基因所在的 12 q2 2 2 3区域缺失情况进行研究 ,并用甲基化特异PCR对该基因启动子区甲基化情况进行了分析。结果表明 :11例喉鳞癌组织出现Apaf 1mRNA表达明显下调 ,占 4 0 7% (11/ 2 7) ,而 6例良性喉肿瘤未发现缺失或下调 ;CGH分析发现 ,18例喉鳞癌仅发现 2例存在 12 q2 2 2 3区域缺失 ,未发现扩增 ;LOH分析发现 ,72例喉癌组织Apaf 1基因的 5个多态位点LOH发生频率低 ,分别为 18 2 % (D12S346 )、13 9%(D12S170 6 )、18 2 % (D12S32 7)、2 2 2 % (D12S16 5 7)和 16 6 % (D12S393) ,11例出现Apaf 1mRNA下调的喉癌组织均检测到启动子区甲基化 ,而 16例Apaf 1mRNA表达未下调者仅 1例有甲基化 ,两者有显著差异 (χ2 检验 ,P=0 0 0 0 1)。通过以上结果 ,首次证实Apaf 1基因与喉鳞癌相关 ,在喉鳞癌中Apaf 1基因缺失发生率低 。

Survivin、Bcl-2和Bax在喉鳞状细胞癌中的表达(英文)

目的探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞癌中的表达及其与Bcl-2、Bax基因表达的相关性。方法应用免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体(strept avidin-biotin complex,SABC)方法检测45例喉鳞癌及10例正常喉黏膜组织中survivin,Bcl-2及Bax基因的表达。结果喉鳞癌组织中,Survivin的表达率为80%,显著高于正常喉黏膜组织的表达率20%(P均<0.05)。Survivin蛋白表达与喉鳞癌的TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。Survivin表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.05),而与Bax蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论Survivin在喉鳞癌的发生发展中起重要作用,可能成为喉鳞癌基因治疗的新靶点;survivin基因可能与凋亡相关基因Bcl-2、Bax在喉鳞癌的发展中分别起协同和拮抗作用。

喉癌及癌前病变中线粒体DNA拷贝数改变与临床病理的相关性研究

目的研究喉癌、癌周正常组织及癌前病变中线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数改变情况,及其与临床病理特性的关系。方法选取40例喉癌及8例喉癌癌前病变标本,分离癌及癌周组织,分别提取总DNA。选取mtDNA的CoxⅡ和核DNA的β-actin为目的片断,进行荧光定量PCR扩增,以CoxⅡ/β-actin拷贝数平均比定量分析mtDNA的拷贝数情况,并分析拷贝数改变与临床病理特征的关系。结果喉癌组织、癌周组织及癌前病变中mtDNA平均(CoxⅡ/β-actin)比分别为0.9141、0.8103和0.4538,癌和癌周组织、癌和癌前组织及癌周和癌前组织的mtDNA拷贝数差异均有统计学意义(P=0.048,0.003和0.004),有淋巴结转移和无淋巴结转移的喉癌mtDNA平均(CoxⅡ/β-actin)比分别为1.3089和0.6743,差异有统计学意义(P=0.045),mtDNA的拷贝数随肿瘤分期的增加、分化程度的降低而增加但差异无统计学意义(P=0.486和0.459)。结论喉癌中mtDNA拷贝数显著高于癌周组织及癌前病变组织,喉癌中mtDNA拷贝数随淋巴结转移而增加,mtDNA拷贝数改变可能参与喉癌的发生发展。

S100A8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究

目的:研究S100A8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用。方法:应用RT-PCR、Western Blot、免疫组化检测S100A8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性。结果:36例喉鳞癌组织中17例出现S100A8 mRNA表达上调(47.2%),而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调(28.5%)。13例病人喉鳞癌组织中7例S100A8蛋白表达增高。免疫组化分析喉鳞癌组织S100A8蛋白阳性率为54.3%。在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%(P=0.023)。RNAi抑制S100A8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bcl-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响。结论:S100A8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,S100A8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用。S100A8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中S100A8基因位于p65下游。

Influence of Tip Clearance on the Flow Field and Aerodynamic Performance of the Centrifugal Impeller

This paper studies numerically the influence of the tip clearance on the three dimensional viscous flowfield and performance of the NASA Low Speed Centrifugal Compressor (LSCC) impeller with a vaneless diffuser A three dimensional viscous code developed by the authors is applied with several acceleration methods: local time step, multigrid and residual smoothing The computations were performed under several operating conditions with four different tip clearance sizes(0 0%,50%,100% and 200% design t...

转录因子FOXP4在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其对喉鳞癌TU177细胞生物学特性的影响

目的:检测转录因子FOXP4(Forkhead box P4)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织和细胞系中的表达,及其对LSCC细胞TU177体外增殖、迁移、侵袭、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其与上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)进程间的关系。方法:从河北医科大学第四医院生物标本库选取2013年6月至2015年12月收治的40例LSCC手术患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测FOXP4在LSCC与相应癌旁组织中的表达水平,应用qPCR法和Western blotting检测FOXP4在人LSCC细胞系(AMC-HN-8、TU177、TU686及TU212)中的表达水平。采用小干扰RNA敲低TU177细胞中FOXP4的表达,MTS实验、克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术分别检测FOXP4敲低对TU177细胞增殖、迁移、侵袭、周期及凋亡的影响。应用qPCR法检测si-FOXP4转染TU177细胞后EMT标志物N-钙黏蛋白(N-cad‐herin)、β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)、扭曲蛋白(Twist)、转录因子Snail及锌指E盒结合蛋白1(zine finger E box binding homeobox 1,ZEB1)mRNA的变化情况,应用Western blotting测定FOXP4敲低后N-cadherin、β-catenin、Vimentin及Twist蛋白水平的改变。结果:在LSCC组织中FOXP4的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),且与肿瘤的TNM分期及淋巴结转移相关(均P<0.05)。FOXP4在LSCC细胞中的表达亦高于癌旁组织(P<0.05或P<0.01)。转染si-FOXP4的TU177细胞中FOXP4的表达显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,敲低FOXP4可抑制TU177细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01),敲低FOXP4可使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.01),减少S期的复制(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01),敲低FOXP4可降低TU177细胞中N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Twist、Snail、ZEB1的mRNA水平(P<0.05或P<0.01)以及N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Twist的蛋白水平。结论:FOXP4的高表达可能与LSCC的发生和发展相关,FOXP4敲低可以抑制LSCC细胞的体外增殖、迁移与侵袭能力,使细胞G0/G1期阻滞及促进凋亡,且可能参与EMT进程。