LT质粒的新法提取及无毒突变体LTS63K的构建和序列分析

目的 获取野生型产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素 (LT)基因、构建LTS63K突变体并进行序列分析。方法 用改进的细菌基因组提取含野生型LT基因质粒 ,用PCR技术扩增LT的DNA ,并亚克隆至pMD1 8 T中进行点突变和序列分析。结果 从野生型大肠杆菌提取大质粒的新法可行 ,所克隆的LT基因与GenBank公布的完全一致 ,点突变正确。