柴胡疏肝散合参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织LXRαmRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织LXRαmRNA及蛋白表达水平的影响。方法:选用SD大鼠55只,随机分为正常组10只、模型组15只、疏肝组10只、健脾组10只、综合组10只。正常组以基础饲料喂养,其余各组除基础饲料外,每天上午8∶00灌饲高脂肪乳剂10 mL.kg-1。所有动物自由进食饲料和饮清水,连续8周。各药物干预组大鼠在施以造模因素的同时,按体质量10 mL.kg-1给予相应药物,给药剂量按人和动物体表面积折算,其中疏肝组灌服柴胡疏肝散(含生药量0.32 kg.L-1),健脾组灌服参苓白术散(含生药量1.00 kg.L-1),综合组灌服柴胡疏肝散和参苓白术散的合方(含生药量1.19 kg.L-1),正常组和模型组灌服同样剂量的蒸馏水,每天下午1次。给药8周后处死动物,腹主动脉采血,用全自动生化分析仪检测血脂及肝功能;常规HE染色观察肝组织病理变化;RT-PCR方法检测肝组织LXRαmRNA的表达;免疫组织化学方法检测肝组织LXRα蛋白的表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,血脂及肝功均有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),大鼠肝组织LXRαmRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01);各给药组血脂、肝功能和肝组织LXRαmRNA及蛋白的表达水平均较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01),其中以健脾组下降最为明显。结论:疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NAFLD有较好的治疗作用,其机制可能与其下调肝脏LXRα的表达水平有关。

甜菊醇调控巨噬细胞ABCA1蛋白表达

甜菊糖能够降低机体的胆固醇水平,而甜菊醇(steviol,STE)是甜菊糖在机体内的主要天然水解物。作者研究了甜菊醇对小鼠巨噬细胞J774A.1三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)的调控作用,并探讨其可能的分子机制。首先,利用MTT方法建立了甜菊醇的使用条件及浓度。采用免疫蛋白印记、细胞免疫荧光以及荧光定量PCR方法,发现在环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的类似物8-(4-硫代氯苯基)腺苷-3',5'-环磷酸盐(8-(4-chlorophenylthio)adenosine 3',5'-cyclic monophosphate,CPT)的协作下,甜菊醇能够显著提高ABCA1在蛋白质水平和基因转录水平的表达;且甜菊醇可以显著上调ABCA1的上游调控基因肝X受体(LXRα)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)的mRNA表达水平和蛋白质表达水平,但对过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)的表达无明显调控作用。结果表明,甜菊醇能够调控ABCA1蛋白表达的机制,可能与PPARα、LXRα的表达有关。本研究为后续治疗和预防动脉粥样硬化具有指导意义,对甜菊糖食品的应用提供了一定的参考作用。