莱芜黑山羊同期发情及早期妊娠诊断技术研究

目前莱芜黑山羊存栏量急剧下降,亟需采用先进的繁殖技术手段提高母羊繁殖效率,快速扩繁并提高种群数量。试验选用2~4岁经产莱芜黑山羊进行同期发情处理,研究同期发情方案、季节以及品种对母羊发情和妊娠的影响,并在配种后15~40 d利用B超对母羊进行早期妊娠诊断。结果表明:(1)莱芜黑山羊同期发情处理时,第18天时撤栓发情率和情期受胎率均显著高于第12天撤栓(P<0.05);(2)春、秋两季进行同期发情处理,发情率和情期受胎率均差异不显著(P>0.05);(3)莱芜黑山羊本品种的发情率和情期受胎率均显著高于莱芜黑山羊×波尔山羊杂交培育品种(P<0.05),且掉栓率显著低于杂交品种(P<0.05);(4)配种后第20天利用B超可探查到子宫内有明显的胎液,第25 d首次观察到胎体,其扫描切面形似“铜钱”状,第30天胎儿进一步发育增大,妊娠诊断特征明显。以上结果表明,莱芜黑山羊采用孕酮栓放置18 d,撤栓时肌注500 IU PMSG可取得较为理想的同期发情效果;配种后20~30 d可利用B超对母羊进行早期妊娠诊断。

屠宰体重对莱芜黑猪胴体性能及肉品质影响

选择87~128 kg体重阶段的莱芜黑猪20头屠宰(10头去势公猪,10头母猪),研究不同屠宰体重试验猪的胴体性能和肉品质。结果表明:平均背膘厚和脂肪率都以121~128 kg阶段最高,分别比87~103 kg、104~112 kg阶段提高24.03%(p<0.01)、8.86%(p>0.05)、14.42%(P<0.05)、1.45%(P>0.05);眼肌面积以121~128 kg阶段最高,比104~112 kg阶段提高15.05%(P<0.05);瘦肉率、剪切力都以87~103 kg阶段最高,分别比104~112 kg、121~128 kg阶段提高8.96%(P<0.05)、10.83%(P<0.05)、9.72%(P>0.05)、47.07%(P<0.05);丙氨酸和酪氨酸都以87~103 kg体重阶段最高,分别比121-128 kg阶段提高26.73%(P<0.05)、19.18%(P<0.05);缬氨酸和苯丙氨酸也都以87~103 kg体重阶段最高,分别比104~112 kg、121-128 kg阶段提高16.28%(P<0.01)、17.65%(P<0.01)、19.32%(P<0.01)、16.67%(P<0.01)。其它指标不同屠宰体重间差异不显著。

不同屠宰日龄莱芜黑兔的生产性能和肌肉品质比较分析

本试验旨在研究地方品种莱芜黑兔的肌肉品质特征,确定最佳屠宰日龄。选取35日龄莱芜黑兔30只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复2只,分别于75、84、115日龄进行屠宰。测定分析生产性能及肌肉品质的相关指标。结果表明:1)莱芜黑兔在75和84日龄屠宰的料重比显著低于115日龄(P<0.05)。2)肌肉的红度(a^(*))值随着屠宰日龄的增加而显著增加(P<0.05),75和84日龄的黄度(b^(*))值显著高于115日龄(P<0.05);84和115日龄的滴水损失显著低于75日龄(P<0.05)。3)肌肉中干物质含量随着屠宰日龄增加而增加,且115日龄显著高于75日龄(P<0.05);肌肉中烟酸含量随着屠宰日龄增加而显著减少(P<0.05)。4)84和115日龄肌肉中肌红蛋白含量显著高于75日龄(P<0.05);肌肉中黑色素含量在不同屠宰日龄间无显著差异(P>0.05)。5)肌肉中多不饱和脂肪酸二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳二烯酸含量在84日龄显著高于115日龄(P<0.05),且均在84日龄时最高;鸟嘌呤含量在84和115日龄显著低于75日龄(P<0.05);腺嘌呤含量在84日龄显著低于75、115日龄(P<0.05)。综合考虑肌肉品质及潜在商业价值,莱芜黑兔屠宰日龄以84日龄为宜。

不同储存环境对鸡蛋暗斑产生及蛋品质的影响

为研究不同储存环境对鸡蛋暗斑产生和蛋品质的影响以及珍珠棉储存鸡蛋效果,试验以日龄和饲养环境相同的莱芜黑鸡为研究对象,收集180个鸡蛋并分成6组,每组30个,其中四组分别在30℃+80%RH、30℃+30%RH、4℃+80%RH、4℃+30%RH环境下使用纸蛋托储存,另两组分别在纸蛋托和珍珠棉蛋托在25℃+55%RH环境下储存,检测鸡蛋储存3 h、24 h、48 h、72 h的暗斑率和储存72 h的蛋品质。结果显示:30℃+80%Rh组鸡蛋暗斑率最高,30℃+30%RH组暗斑率最低;低温组蛋白高度和哈氏单位显著高于高温组(P<0.05),并且30℃+80%RH组蛋白高度和哈氏单位显著高于30℃+30%RH组(P<0.05);在25℃+55%RH环境下,相比珍珠棉蛋托,纸蛋托储存的鸡蛋暗斑率较高,总暗斑率为43%,而珍珠棉蛋托中储存的鸡蛋总暗斑率为0,鸡蛋蛋重、蛋白高度和哈氏单位显著高于纸蛋托中储存的鸡蛋(P<0.05)。综上,在低温低湿环境或采用珍珠棉蛋托储存不仅能够使鸡蛋暗斑率下降同时也有利于蛋品质的保持。

含不同比例莱芜猪血缘杂交猪胴体品质及肉质特性的研究

以莱芜猪、3/4莱芜猪、1/2莱芜猪、1/4莱芜猪和大约克夏猪(共60头)为研究对象,在同样条件下饲养至90kg屠宰,研究比较了不同比例莱芜猪血缘对肥育猪胴体品质和肉质特性的影响。结果表明:不同血缘结构的试验猪间在胴体重、胴体长、后腿比例和背膘厚方面存在显著的差异(P<0.05);眼肌面积和瘦肉率方面则存在极显著的差异(P<0.01),并且是随莱芜猪血缘含量的减少,其胴体长、后腿比例、眼肌面积和瘦肉率逐渐增高,而其背膘厚逐渐降低。在肉质特性方面,不同血缘结构的试验猪间肌肉的大理石纹、肉色、干物质和粗蛋白含量存在显著的差异(P<0.05);而肌肉失水率、滴水损失及肌内脂肪含量存在极显著的差异(P<0.01)。在同样体重下,莱芜猪及其杂交猪与大约克夏猪相比,其肌肉具有鲜红的肉色、良好的持水性能和较丰富的肌内脂肪。研究结果提示:为兼顾产肉性能与肉质特性而进行的优质肉猪生产,莱芜猪有其独特的利用价值,其适宜的血缘比例应控制在1/4左右。

猪肌肉组织LPL基因表达的发育性变化及其与肌内脂肪沉积关系的研究

以40-90 kg 6个体重组的莱芜猪和鲁莱黑猪共72头去势公猪为试验对象(每组6头),采用相对定量RT-PCR方法,以-βactin基因为内标,分析肌肉组织LPL基因表达的发育性变化及其与肌内脂肪沉积的关系。结果表明:莱芜猪与鲁莱黑猪肌肉组织中LPL基因表达的发育性变化趋势基本相似,随体重的增长,莱芜猪50-70kg阶段LPLmRNA表达丰度逐渐下降(P<0.05),80 kg阶段迅速回升出现一个峰值后再次下降;鲁莱黑猪LPLmRNA表达丰度随体重的增加呈缓慢下降趋势,70 kg以后变化不大并维持较低水平,其前期(40-60 kg)与后期(70-90 kg)的表达量差异显著(P<0.05)。总体上莱芜猪肌肉组织LPL基因表达量略高于鲁莱黑猪(P>0.05)。相关分析表明,莱芜猪和鲁莱黑猪肌内脂肪相对含量与肌肉组织LPLmRNA表达的发育性变化分别呈显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)的正相关。研究结果提示:猪肌肉组织LPL是肌内脂肪沉积的重要参与者,其编码基因的表达具有明显的体重发育特征,并对肌内脂肪的沉积具有一定程度影响。

莱芜黑山羊发情周期中FSH、LH、E_2和P的分泌规律

莱芜黑山羊在发情期和间情期,血浆内的卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)均呈脉冲式分泌,雌激素(E2)和孕酮(P)为波动式分泌。发情期FSH的脉冲周期较间情期长,两者之间显著差异(P<0.05)。发情期LH的脉冲周期短于间情期,两者之间差异不显著(P>0.05)。在整个发情周期中,FSH和LH均先后出现4个分泌峰,FSH和LH的第1个分泌峰分别出现在第7天和第5天,其余3个分泌峰均同时出现(分别为第10、15和20天)。E2和FSH、LH均在发情周期的第20天达最高峰。P在间情期一直维持在一个较高水平。

猪肌肉组织Col3a1基因表达的发育性变化及其对肌内胶原特性的影响(英文)

以30—90妇体重莱芜猪和40—100kg体重鲁莱黑猪共84头去势公猪为试验对象（每组6头），采用相对定量RT-PCR方法，以β-actin作为内标，研究肌肉中编码Ⅲ型胶原的Col3al基因表达的发育性变化及其对肌肉中胶原蛋白含量和性质（溶解度）的影响。结果表明：研究的两个品种猪肌肉中Col3al基因表达的发育性变化基本一致，即随体重的增加，肌肉中Col3al mRNA表达呈逐渐增加趋势，但莱芜猪和鲁莱黑猪分别在70妇和80妇体重组表达量略有下降。总体上莱芜猪肌肉组织Col3al mRNA表达丰度显著高于鲁莱黑猪（P〈0．05）。相关分析表明，莱芜猪肌肉组织Col3al mRNA表达的发育性变化与总胶原和不溶性胶原含量呈极显著正相关（P〈0．01），与胶原溶解度呈极显著负相关（P〈0．01）。鲁莱黑猪肌肉组织Col3al mRNA表达的发育性变化与不溶性胶原和胶原溶解度分别呈显著正相关和负相关妒〈0．05）。研究结果提示：猪肌肉组织中Col3al基因表达具有明显的体重发育和品种特征，其mRNA表达对于肌内胶原的含量和性质有重要影响。

莱芜黑猪高繁基因的多态性及其对产仔数的影响

分析了莱芜黑猪FSHβ、ESR和PRLR基因的多态性及其与产仔性能的关系。结果表明:对于FSHβ亚基基因,AA基因型占绝对优势,且产仔数最高,但各基因型间的产仔数差异不显著。对于ESR基因,AA基因型占绝对优势,由于在被检测的样本中未检测出BB基因型,因此难以计算基因型的产仔数差异。对于PRLR基因,BB基因型频率占绝对优势,但AA基因型比BB基因型的初产仔数多1.94头,达到显著水平(P<0.05)。FSHβ亚基基因和PRLR基因合并统计对产仔数的影响表明:AAAA基因型为有利基因型。在育种实践中,选择AAAA合并基因型可进一步提高莱芜黑猪的繁殖性能。

莱芜猪前体脂肪细胞的原代培养及诱导分化研究

为了建立莱芜猪前体脂肪细胞的体外培养体系,探索猪脂肪组织增生的生物学特征。本研究采集1日龄莱芜猪仔猪颈、背部皮下脂肪组织,采用胶原酶与胰蛋白酶相结合的方法,分离原代前体脂肪细胞,进行前体脂肪细胞的原代和传代培养,以及前体脂肪细胞诱导分化的研究,并采用Real-time PCR方法检测前体脂肪细胞分化过程中关键基因PPARγ的表达。结果表明,分离的猪原代前体脂肪细胞约8h后开始贴壁,贴壁的细胞呈短梭形或不规则的三角形,第3天多数细胞进入指数生长期,呈成纤维细胞样形态,细胞生长曲线近似S形;诱导培养结果显示,少量细胞在第2天开始出现脂滴,大多数细胞在第3天出现脂滴,第7～8天小脂滴逐渐融合成大脂滴,在第12天左右融合成大脂滴,油红O染色呈橘红色。在前体脂肪细胞分化过程中PPARγ基因mRNA的表达量逐渐增加,在诱导后的48h表达量最高,随后其表达丰度逐渐下降。本试验成功建立了莱芜猪前体脂肪细胞培养体系和体外诱导分化模型,为进一步研究莱芜猪前体脂肪细胞增殖与分化机制和猪体脂肪的沉积奠定基础。

莱芜黑山羊消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究

目的探究莱芜黑山羊消化道内5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)、胃泌素(Gas)和血管活性肠肽(VIP)4种免疫阳性细胞的形态结构和分布规律。方法采用免疫组织化学SABC法。结果消化道中4种免疫阳性细胞形态多样,大多呈椭圆形和锥体形。5-HT阳性细胞数量以结肠最多,空肠和回肠次之,幽门腺区、十二指肠和直肠较少,食管、贲门腺区、胃底腺区和盲肠中未见;SS阳性细胞在幽门腺区数量最多,贲门腺区、结肠、盲肠和直肠中未见;Gas阳性细胞大量出现于十二指肠,在食管、贲门腺区和盲肠未见;除个别器官(食管、十二指肠和回肠)未见VIP阳性细胞外,在消化道的其余各段均有分布。结论消化道内5-HT、SS、Gas和VIP 4种细胞出现最多的部位分别是结肠、幽门腺区、十二指肠和贲门腺区。

猪FUTI基因多态性及其与生长性能的关联性分析

为研究FUT I基因对断奶仔猪生长性能的影响,对莱芜黑猪、杜洛克和大约克猪群共752头仔猪样本在FUT I基因M307位点多态性进行检测,并对不同基因型与生长性状的关系进行分析,结果表明:莱芜黑猪、杜洛克和大约克群体在FUT I基因M307位点均存在丰富多态性,且在该突变位点均显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(p<0.01)。莱芜黑猪群体内G基因占优势,而杜洛克和大约克群体内均为A基因稍占优势。3种基因型对杜洛克和大约克仔猪的70日龄保育重(和断奶仔猪腹泻和水肿病密切相关)影响达到显著(p<0.05)或极显著(p<0.01)水平,但对莱芜黑猪的70日龄的保育重无显著影响。结果提示:FUT I基因作为ETEC F18病原菌的抗性候选基因对杜洛克和大约克等西方猪种有效,但是对莱芜黑猪无效,有必要对莱芜黑猪所具备的遗传抗性做更深入的研究,寻找、定位其相应的QTL和抗性基因。

羽速基因对莱芜黑鸡早期生长速度和蛋用性能的影响

试验选用1日龄健康雏鸡,根据羽毛生长速度进行快慢羽分群饲养,研究羽速基因对莱芜黑鸡早期生长速度和蛋用性能的影响,结果表明,羽速基因对早期生长速度有一定的影响,初生重、2、4、7、10周末快羽系鸡体重显著高于慢羽,但对蛋用性能方面影响差异不显著。

莱芜黑猪a1岩藻糖转移酶基因(FUT Ⅰ)不同基因型对大肠杆菌F18抵抗力研究

为了研究不同猪种(山东省地方猪种莱芜黑猪和引进猪种大约克)和FUT Ⅰ不同基因型仔猪对肠毒性大肠杆菌F18(ETEC F18)的抵抗能力和肠黏膜上皮细胞对ETEC F18黏附能力的差异,在采用PCR-RFLP技术对莱芜黑猪和大约克FUT Ⅰ基因型检测的基础上,选取易感性和抗性断奶仔猪,利用野生型ETEC F18标准株进行试验猪口服细菌攻毒试验和肠黏膜黏附试验。由于多方面原因,接受ETEC F18细菌攻毒的试验猪均未发病,无法判断试验猪对ETEC F18的抵抗能力。ETEC F18标准菌株能与所有FUT Ⅰ敏感基因型仔猪的小肠黏膜上皮细胞黏附,而不能与抗性基因型仔猪小肠上皮黏膜细胞黏附,莱芜黑猪与大约克的肠黏膜上皮细胞与E.coliF18的黏附特性并无品种差异。但是养猪生产实践中,莱芜黑猪极少发生断奶仔猪水肿和腹泻病。所以除FUT Ⅰ基因外,也许本地猪种有其他导致遗传抗性的突变或抗性基因。

莱芜黑猪肥胖基因的多态性分析

肥胖基因 (ob)发生遗传变异而不能产生正常的蛋白产物———Leptin ,而Leptin的最主要功能是反映脂肪组织含量 ,调节体重 ,使体重维持相对稳定 ,因此突变个体表现为肥胖。本文分析了不同品种猪内ob基因HinfI的多态性分布 ,该多态性是有点突变造成的。结果表明 ,中国地方猪种菜芜猪群体内C基因占优势 ,而长白猪和大约克群体中TT纯合子为 10 0 %。这种多态性分布与莱芜猪属肥胖型品种 ,而长白、约克夏猪属瘦肉型品种相吻合。

莱芜黑山羊卵巢FSHr、LHr的免疫组化定位研究

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促性腺激素(GTH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,对处于非繁殖季节的莱芜黑山羊卵巢中FSHr、LHr分布进行免疫组化SABC方法定位.分别选取相邻的6张连续阳性切片,光镜观察、图像分析.结果显示:FSHr、LHr阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞、血管周围间质,尤其以在卵泡颗粒细胞、膜细胞的胞质中分布最多.原始卵泡卵母细胞中便有两种受体阳性物质分布,在各级卵泡中两种受体阳性细胞数量、染色强度随卵泡发育水平呈正向增加趋势.

氨基酸水平对莱芜黑仔猪生产性能和血清生化指标及游离氨基酸浓度的影响

本试验旨在研究理想氨基酸模型下,不同氨基酸水平对莱芜黑断奶仔猪生产性能、血清生化指标及游离氨基酸浓度的影响。选用24头体重为(17.70±2.19)kg的45日龄莱芜黑断奶仔猪,随机分为4个处理,每处理6个重复,饲喂总赖氨酸水平分别为0.8%、0.9%、1.0%和1.1%的饲粮,并通过添加赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸,保证4个处理饲粮中赖氨酸∶蛋氨酸+胱氨酸∶苏氨酸∶色氨酸(100∶60∶65∶18)一致,预试期7 d,试验期35 d。结果表明:饲粮赖氨酸(Lys)水平对莱芜黑断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量和饲料增重比无显著影响(P>0.05)。0.9%Lys处理的血清尿素氮含量显著低于其他各组(P<0.05),血清总蛋白含量极显著高于其他组(P<0.01)。0.9%Lys处理血清中总氨基酸和必需氨基酸浓度极显著高于其他各组(P<0.01),0.9%Lys处理血清中非必需氨基酸浓度极显著高于0.8%Lys处理(P<0.01)。综合各项指标,在理想氨基酸模型下,莱芜黑断奶仔猪饲粮中适宜的总赖氨酸添加水平为0.9%。

莱芜黑山羊松果体超微结构及5-羟色胺分布的季节性变化

应用5-羟色胺(5-HT)免疫组织化学方法和电镜技术,对莱芜黑山羊4个季节的松果体进行了研究。结果显示:(1)松果体内有大量5-HT阳性的松果体细胞及纤维;(2)松果体5-HT免疫阳性细胞面积以冬季最大,且与其他3个季节差异极显著(P<0.01);夏季最小;春秋季之间无明显差异(P>0.05)。4个季节5-HT阳性细胞的光密度差异不大(P>0.05)。松果体中5-HT阳性面积占总面积的比值,春、秋季相差不大(P>0.05),夏、冬季差异极显著(P<0.01);(3)松果体细胞有明细胞和暗细胞之分,2种细胞超微结构明显不同。明细胞胞核较大,常染色质多,粗面内质网(RER)、游离核糖体丰富,高尔基复合体的扁平囊泡层数较多,线粒体嵴发达,糖原较少;暗细胞的异染色质多,RER和游离核糖体较少,高尔基复合体的扁平囊泡层数少,线粒体嵴缺乏,糖原较丰富。结果提示,明细胞功能较暗细胞活跃;(4)不同季节松果体内明、暗细胞的数量不同,冬季为明细胞,夏季为暗细胞,春、秋2季2种细胞皆有,表明季节是影响松果体结构和功能活动的重要因素。

山羊FSHR基因第10外显子序列的克隆与比较研究

根据牛FSHR基因序列设计引物,以波尔山羊和莱芜黑山羊基因组为模板,应用PCR技术克隆测定了FSHR基因第10外显子序列,并与牛该区段序列进行了比较研究。结果表明,PCR扩增获得的片断为1643bp,三畜种FSHR基因第10外显子长均为1233bp。莱芜黑山羊和波尔山羊的第10外显子序列与牛该序列相比,同源性分别为97.49%和97.41%,分别在31个和32个位点发生碱基突变。均引起10处氨基酸密码改变。波尔山羊该序列与莱芜黑山羊的比,同源性为99.60%,且3个位点有碱基突变,其中+1184和+1365位点突变引起氨基酸密码改变。

莱芜黑猪FUTⅠ基因检测及其与生长性能的关系

本研究采用PCR-RFLP法对莱芜黑猪FUTⅠ基因M307位点多态性及其与生长性能的关系进行分析。结果表明:莱芜黑猪FUTⅠ基因M307位点均存在丰富的多态性,而且在该突变位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01)。3种基因型对莱芜黑猪的初生重、断奶重和70日龄保育重(和断奶仔猪腹泻和水肿病密切相关)等均无显著影响(P>0.05)。本研究结果提示:肠毒素大肠杆菌F18抗性基因有可能起源于西方猪种,对莱芜黑猪无显著影响,有必要对其中所具备的遗传抗性做更深入的研究,寻找、定位其相应的QTL和抗性基因。