恩诺沙星可溶性粉在狼山鸡不同组织中的残留消除规律研究

为探究恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在狼山鸡体内的残留消除规律,并确定其停药期,试验以狼山鸡为研究对象,恩诺沙星按10mg/kg体重的剂量饮水给药,连用5d,于最后一次给药后1、3、5、7、10和14d采集胸肌、肝脏、肾脏和皮脂样品,使用高效液相色谱串联质谱法检测样品中恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的残留量。结果显示,停药后3d,狼山鸡各组织中药物残留量均低于其最大残留限量,狼山鸡胸肌、肝脏、肾脏和皮脂的停药期依次为2.91d、2.26d、3.62d和4.56d。结果表明,为保障狼山鸡食品安全,恩诺沙星的推荐停药期至少为5d。

Alcalase协同强化高温风干成熟工艺对狼山鸡蛋白质水解的影响

以南通狼山鸡为原料,采用碱性蛋白酶(Alcalase)酶解结合强化高温风干成熟工艺制作风鸡,以游离氨基酸总量(∑FAA)、蛋白质水解指数为响应指标,采用响应曲面试验方法分析Alcalase协同强化高温风干成熟工艺对狼山鸡蛋白质水解的影响,并优化狼山鸡强化高温风干成熟工艺。结果表明:Alcalase能显著促进原料的蛋白质水解,鸡肉中∑FAA随着Alcalase添加量与强化高温温度提高而显著提高;Alcalase添加量与强化高温温度和风干温度对∑FAA有显著的交互作用(P<0.05);在控制蛋白质水解指数小于11%的前提下,得到Alcalase酶解风干狼山鸡的优化工艺为强化高温温度46℃、酶添加量1.88 U/g、风干成熟起始温度14.5℃,风干狼山鸡的∑FAA为2.02 g/100 g,蛋白质水解指数为10.42%。说明Alcalase酶解协同强化高温风干成熟工艺能有效促进狼山鸡蛋白质水解,提高风味品质。

不同狼山鸡累计产蛋数曲线拟合和比较分析

运用Logistic、Gompertz和Bertallanffy 3种被广泛采用的非线性生长模型对狼山鸡的累计产蛋数进行拟合分析,结果表明,3种模式都能很好地对其累计产蛋数进行拟合,拟合度(R2)都在0.99以上,但Bertallanffy模型对狼山鸡的累计产蛋数拟合效果更佳,Bertallanffy模型拟合的拐点日龄和拐点产蛋数更为准确;进一步分析Bertallanffy模型拟合参数,发现狼山鸡的拐点产蛋数为66.142个,狼山鸡的拐点日龄275.412 d,在生产中可以运用该模型对狼山鸡的饲养日累计产蛋数进行估计与预测。

不同保种方法对狼山鸡保种群近交系数的影响

以狼山鸡为素材,利用“家系等量随机选配法”和“随机交配法”(对照组)2种保种方法进行继代繁殖鸡群,每个保种群每个世代的鸡只均逐只编制往上追溯5代的系谱图,利用回归斜率分析方法计算世代增量。结果表明,试验组保种群的近交系数的世代增量均呈负增长,公鸡、母鸡分别为-0.003 7和-0.004 4;对照组公鸡、母鸡分别为0.001 7,0.002 2。采用家系等量随机选配法保存鸡种,可有效地控制保种群近交系数的增长。

基于RAD-seq测序的狼山鸡基因组选择信号分析

试验旨在分析狼山鸡基因组选择信号,发掘狼山鸡重要种质特性基因。采用简化基因组RAD-seq测序鉴定狼山鸡及其他18个地方鸡种基因组SNP标记,构建系统进化树阐明狼山鸡的遗传结构,采用ZHp选择信号检测方法鉴定狼山鸡基因组受选择区域(基因)。结果显示,在狼山鸡中鉴定出320874个SNPs。19个地方鸡种总体上聚为五大类,与品种形成历史和区域分布基本一致。狼山鸡16个常染色体上的46个区域受到选择作用(ZHp<-3.5),包含122个受选择基因,其中部分区域在遗传聚类同分支的安义瓦灰鸡(15个区域)、边鸡(14个区域)、大骨鸡(11个区域)和北京油鸡(13个区域)中也受到选择。GO分析结果显示,狼山鸡122个受选择基因显著富集在血细胞生成、转录调控、嗜酸性粒细胞趋化、骨化等生物学过程(P<0.05)。KEGG分析结果显示,狼山鸡122个受选择基因显著富集在心肌细胞肾上腺素能信号传导、Toll样受体信号通路、Ca2+信号通路、细胞质DNA传感通路、NOD样受体信号通路等(P<0.05)。选择作用主要体现在对狼山鸡刺激响应、先天免疫、代谢、神经系发育等方面的塑造。研究结果可为狼山鸡品种评价、保护及利用提供重要遗传信息。

近交对狼山鸡繁殖性状影响的研究

利用RAD-seq简化基因组测序鉴定狼山鸡保种群个体基因组SNP标记,计算个体(间)分子近交系数和分子亲缘系数,结合系谱信息组建高、低近交两个试验组。分析后代繁殖性状近交衰退系数,评价近交对繁殖性状的影响。结果显示:利用FROH、FGRM、FHOM和FUNI四种分子近交系数结合亲缘系数kin估算的后代分子近交系数较为一致。低近交组后代的平均分子近交系数小于0.04,高近交组(6个家系)后代的平均分子近交系数介于0.14~0.25。近交对各繁殖性状的效应表现并不一致。高近交组后代母鸡开产日龄、300日龄产蛋数发生显著衰退(P<0.05,P<0.01),且与分子近交系数呈显著相关(P<0.05,P<0.01);开产体重和开产蛋重未发生显著性衰退(P>0.05)。研究结果为进一步探讨狼山鸡繁殖性状近交衰退分子机制提供了基础。

狼山鸡腌制风干成熟过程中蛋白质分解及游离氨基酸变化规律

以狼山鸡为原料进行腌制风干成熟,分析测定加工过程中鸡胸肉中蛋白质分解和游离氨基酸变化情况,探究其蛋白质分解变化规律.结果表明：狼山鸡在风干成熟过程中蛋白质有显著的分解,蛋白质水解指数（proteolysis index,PI）显著降低（P＜0.05）,肌肉肌浆蛋白和肌原纤维蛋白在腌制结束后显著分解（P＜0.05）;分子质量大于85 kD的蛋白被逐渐分解,20～25 kD的小分子蛋白逐渐累积,产品风干成熟过程中游离氨基酸总量呈显著上升趋势（P＜0.05）,说明蛋白质分解形成了风味前体物质;部分游离氨基酸在风干成熟后期出现降低的趋势,说明风干成熟后期较高的温度可以促进游离氨基酸进一步转化为风味物质.

狼山鸡资源利用现状及发展对策

分析了狼山鸡的历史形成和品种特性,探讨了狼山鸡的利用现状,提出狼山鸡未来发展的对策措施。

鸡突变型和未突变型Mx蛋白体外抗病毒活性研究

【目的】研究鸡Mx蛋白第631位氨基酸变异与抗病性的相关性。【方法】用已经构建成功的中国狼山鸡Mx蛋白基因突变型pcDNA3.0-MMx和未突变型pcDNA3.0-Mx真核表达载体分别转染鸡成纤维(CEF)细胞和鼠成纤维(NIH-3T3)细胞;利用RT-PCR检测突变型MMx基因和未突变型Mx基因的表达,微量细胞病变抑制法测定重组蛋白抗新城疫病毒(NDV)和水泡性口炎病毒(VSV)的效果。【结果】诱变鸡Mx基因的表达重组蛋白可保护CEF细胞在孵育48 h内免受NDV的感染;转染突变型pcDNA3.0-MMx真核表达载体的NIH-3T3细胞在孵育60 h内亦未受到VSV的浸染;而转染未突变型pcDNA3.0-Mx真核表达载体的CEF和NIH-3T3细胞在24 h内均发生了病变。【结论】体外重组突变的Mx蛋白在单细胞水平上具有延缓NDV和VSV感染的能力。

利用血液蛋白质(酶)分析狼山鸡的遗传多态性

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定了狼山鸡的6个血液蛋白质(酶)座位。结果表明:运铁蛋白(Tf)、碱性磷酸酶(Akp-1)、前白蛋白(Pa)、淀粉酶(Amy-1)、后白蛋白(Po)和酯酶(Es-1)6个蛋白座位表现多态性,其平均杂合度为0.2949。分析表明,狼山鸡遗传多样性程度相对较高,遗传选择潜力大。

狼山鸡消化道乳酸菌的分离·鉴定以及生物学特性研究

[目的]分离和鉴定狼山鸡消化道乳酸菌,为开发新型禽用微生态制剂提供依据。[方法]利用厌氧菌分离技术,从狼山鸡肠道中分离乳酸菌,通过形态、生理生化特性、16S rRNA基因序列测定以及同源性分析对其进行鉴定,并对菌株进行耐酸性、抗菌活性等筛选。[结果]分离到5株乳酸菌LCr-01、LCr-02、LCe-01、LCe-02、LCe-03,经过生理生化试验、16S rRNA基因序列测定以及同源性分析,初步鉴定植物乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌以及嗜酸乳杆菌。其中,LCr-02具有较强的耐酸性和抗菌活性。[结论]筛选到的5株菌乳杆菌中LCr-02具有较强的耐酸性与抗菌活性。

苯二氮■化合物等对雌性狼山鸡生产性能的影响

本试验研究苯二氮化合物－Ｆ８９以及β－受体激动剂ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ（ＣＬ）对雌性狼山鸡生产性能的影响。２ｐｐｍＦ８９和２ｐｐｍＦ８９＋１ｐｐｍＣＬ添加在６５－１１５日龄雌性狼山鸡日粮中，能分别提高摄食量１１．３９％和７．５８％，提高增重２０．４６％（ｐ＜０．０１）和１５．３３％（ｐ＜０．０５）；降低料重比７．５２％和６．７１％。屠宰测定表明：日粮中添加２ｐｐｍＦ８９对狼山鸡胴体组成没有影响．而添加２ｐｐｍＦ８９＋１ｐｐｍｃＬ却提高了鸡的胸肌率１１．２８％（ｐ＜０．０１）、腿肌率６．７７％（ｐ＜０．０５），从而改善动物胴体组成，提高瘦肉率。添喂含２ｐｐｍＦ８９的日粮后，狼山鸡血糖浓度显著下降，β－脂蛋白含量显著上升。表明Ｆ８９影响鸡的糖代谢脂代谢活动。

狼山鸡风干成熟工艺优化

以南通市狼山鸡为原料,通过Box-Behnken试验设计其风干成熟工艺,研究不同风干起始温度、风干时间、腌制用盐量与风干狼山鸡感官品质及蛋白质水解之间的关系。结果表明:风干起始温度、风干时间与蛋白质水解及感官品质之间呈显著正相关(P<0.05);以风干狼山鸡的总体感官评分最大值为目标值进行回归优化分析,所得结果为风干起始温度12.5℃、风干时间93h、腌制用盐量2.6%,此时产品感官评分为92分,游离氨基酸总量(∑FAA)为1.54mg/100g,蛋白质水解指数(PI)为10.33%,水分含量为58.42%,剪切力为3.62kg/cm2,盐分为3.87%。

Alcalase酶解狼山鸡肉蛋白规律

以狼山鸡为实验材料,分析Alcalase酶解鸡肉蛋白规律。结果表明：酶解鸡肉蛋白的最适酶解温度为45℃、酶添加量为2.0 U/g、酶解时间为4 h;酶解过程中肌浆蛋白和肌原纤维蛋白有较多的氨基酸释放,并且可溶性氮也有大量的累积,酶解产物的分子质量主要集中在30~50 k D之间;在酶解产物中含量最高的氨基酸分别为天冬氨酸和谷氨酸,并且在酶解产物中亲水性氨基酸（hydropHilic amino acid,HLAA）与疏水性氨基酸（hydropHobic amino acid,HBAA）比值在1.41~1.52之间;通过对酶解产物游离氨基酸营养价值的分析,在不同酶解时间的酶解产物中含有丰富的必需氨基酸,该必需氨基酸指数与联合国粮食及农业组织/世界卫生组织（Food Agriculture Organization/World Health Organization,FAO/WHO）推荐的成人理想氨基酸模式相类似。

狼山鸡高、低近交组卵巢组织转录组差异分析

为了探究近交对繁殖效应的影响,本研究以国家级地方鸡种基因库保存的狼山鸡为素材,结合分子标记和系谱信息,组建高、低近交两个试验组,记录高、低近交组的繁殖性能数据。选取高、低近交组中正常个体各3只,采取卵巢组织进行RNA-seq测序,并对差异基因进行功能注释。结果在高、低近交组中共获得差异转录本1114个,其中783个基因获得注释,307个上调,476个下调。GO和KEGG分析表明,差异基因主要富集在核糖体的生物合成、炎性反应、繁殖、生长、免疫系统过程、代谢过程等生物学过程,Pathway显著富集在叶酸的生物合成、卵母细胞成熟和代谢等生物学通路。功能分析发现,筛选出的差异基因(如GGH、CPEB1、GNMT和PIWIL等)与繁殖功能相关。此外,还包括一些与应激和免疫相关的基因(如APOC3、HSP70、CD38和LGMN等)。研究结果有助于了解狼山鸡繁殖性状近交衰退相关的基因及其调控机制,为家禽特定性状近交衰退分子机理提供参考。

不同蛋白水平日粮对狼山鸡卵黄中激素沉积及子代生长的影响

选取狼山鸡种母鸡160羽,随机分成三个组,分别饲喂粗蛋白水平为10%(低)、15%(对照)和20%(高)的日粮,21d后收集种蛋。每组随机选择10枚种蛋用于放免测定卵黄中母源性甲状腺激素和胰高血糖素,其余孵化后在相同条件饲养至28d,并测定生长性能.。分别与1日龄和28日龄每组各选10羽雏鸡进行屠宰测定。结果:(1)试验前后母鸡体重各组间均没有变化,低蛋白组产蛋率和蛋重显著下降(p<0.05),高蛋白组蛋重显著高于对照组;(2)三组种蛋的卵黄中T3、胰高血糖素水平均没有显著性差异,而高蛋白组卵黄中T4水平显著高于对照组和低蛋白组(p<0.05),低蛋白组1d后代血清中T3水平显著高于对照组,而高蛋白组血清T4水平显著高于对照组(p<0.05);(3)出雏重与蛋重呈正相关(R2=0.9275,p<0.01),出雏后高、低蛋白组子代均表现出较高的生长速度,28d低蛋白组子代鸡体重和相对胸肌重显著高于对照组(p<0.05),高蛋白组体重与对照组相比有增加趋势,但差异不显著(p=0.08)。结论:母鸡饲喂不同蛋白水平日粮可以改变卵黄中母源性激素的沉积并能显著影响子代的生长。

狼山鸡核型参数与生产性能的关系研究

对狼山鸡核型参数与生产性能的关系进行研究,结果表明,狼山鸡No.1染色体相对长度水平与屠宰性状、产蛋性状存在较大的关联,当No.1染色体相对长度水平为4(22.00%<RL≤23.00%)时,屠体重、半净膛重、全净膛重、腿肌重和胸肌重往往表现较低;当No.1染色体相对长度水平为3(21.00%<RL≤22.00%)时,总产蛋量、开产蛋重往往表现较低,说明家鸡的No.1染色体的相对长度可用于辅助育种。

丝羽乌骨鸡种蛋的蛋比重对繁殖性能的影响

试验以丝羽乌骨鸡为素材,以仙居鸡、固始鸡和狼山鸡种蛋为对照组,探索蛋比重是否影响种蛋的受精率、孵化率及出雏时间。将种蛋测定蛋比重以后进行孵化,在孵化过程中观测种蛋的受精率、孵化率和出雏时间。试验结果表明:不同类型鸡种的蛋比重平均级别差异显著,反映了鸡种的蛋比重种质特性不同;种蛋的蛋比重与种蛋的受精率无关;部分鸡种的蛋比重与其孵化率及出雏时间密切相关。由此可见,蛋比重对繁殖性能有重要的影响。

新狼山鸡死亡当量的初步研究

研究以新狼山鸡12个世代的入孵头照白蛋率、孵化期死亡率、育雏期死亡率和育成期死亡率为基础材料,作为探讨新狼山鸡死亡当量的依据。结果表明,新狼山鸡的死亡当量仅为0.24％,与其它一些品种比较相对较小,说明虽经多个世代的缓慢近交繁育但未发生性状的衰退,在生产中可以大规模扩繁加以合理利用。

狼山鸡(南通种群)适龄育肥的效果观测

以31～100日龄南通种群狼山鸡为素材，在能量水平相对固定的情况下，比较粗蛋白含量分别为18％、16．5％、15％饲料的育肥效果。结果表明，3种饲料育肥效果差异不显著。