HepG2细胞内HPVDNA物理状态及表达L1蛋白

目的了解人肝癌细胞系Hep G2细胞内人乳头瘤病毒(HPV)基因组的物理状态,胞质内包涵体物质的性质以及晚期衣壳蛋白1(L1)表达。方法用PCR对细胞内HPV18型E2和E6基因进行扩增,判断HPV18基因组的物理状态;用ELISA、光镜和电镜的免疫组化、Western blot等方法,以多价HPV L1小鼠单克隆抗体做探针,检测Hep G2细胞内L1蛋白表达;用反转录PCR检测细胞内L1 mRNA表达。结果 Hep G2细胞内HPV DNA基因组呈整合状态;细胞裂解液中有HPV L1蛋白存在;细胞呈HPV L1阳性反应;胞质内包涵体样物质,由均匀的颗粒样物质组成,可以为胶体金标记的HPV L1抗体所标识。Hep G2细胞裂解液中有HPV L1蛋白,在56 ku区出现与He La细胞一样的L1特异阳性条带。反转录PCR检测显示Hep G2细胞内有L1 mRNA存在。结论 Hep G2是HPV18阳性细胞,细胞内HPV DNA基因组呈整合状态。细胞内包涵体样物质为HPV18 L1蛋白,Hep G2细胞可以表达L1。

CaSki细胞内HPV L1蛋白的表达

目的了解含人乳头瘤病毒(HPV)基因组的宫颈癌Ca Ski细胞中HPV晚期衣壳蛋白1(L1)的表达。方法以多价HPV L1小鼠单克隆抗体做探针,采用ELISA、免疫组化、Western blotting等方法,检测Ca Ski细胞内L1蛋白的表达;采用RT-PCR法检测细胞内L1 mRNA的表达。结果 Ca Ski细胞呈HPV L1阳性反应,显示细胞内有HPV L1蛋白存在;Ca Ski细胞内有L1 mRNA存在。结论包含HPV16混合基因组的Ca Ski细胞可以表达L1蛋白。