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百脉根液泡膜H^+-PPase基因LcVP1植物表达载体构建与转基因毛白杨的获得
被引量:
1
1
作者
孙艳香
冯雪
赵学良
《中国农学通报》
CSCD
北大核心
2011年第4期134-138,共5页
为通过基因工程手段进行杨树耐盐性状的遗传改良,笔者分析已克隆的百脉根液泡膜H+-PPase基因LcVP1的cDNA序列,根据其与植物表达中间载体pGN上的酶切位点设计1对带酶切位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增百脉根液泡膜H+-PPase基...
为通过基因工程手段进行杨树耐盐性状的遗传改良,笔者分析已克隆的百脉根液泡膜H+-PPase基因LcVP1的cDNA序列,根据其与植物表达中间载体pGN上的酶切位点设计1对带酶切位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增百脉根液泡膜H+-PPase基因开放阅读框片段。双酶切PCR回收产物和pGN载体,将目的片段定向连接构建成植物表达载体pGVP,并转入根癌农杆菌;在此基础上,利用根癌农杆菌介导的叶盘转化法,将百脉根液泡膜H+-PPase基因转入毛白杨基因组中。转基因杨树的获得,为获得耐盐性提高的杨树品系提供了基础。
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关键词
百脉根
液泡膜H+-PPase
lcvp1
pGVP
毛白杨
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职称材料
百脉根液泡膜H^+-PPase基因的cDNA克隆与分析
被引量:
4
2
作者
孙艳香
王勇
《植物生理学通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期657-663,共7页
采用EST电子克隆和RACE技术从豆科模式植物百脉根中克隆到一个液泡膜H+-PPase基因的cDNA,命名为LcVP1。该cDNA长为2962bp,含2304bp的完整开放阅读框,编码767个氨基酸,其推测的氨基酸序列与绿豆、拟南芥等I类液泡膜H+-PPase的氨基酸序列...
采用EST电子克隆和RACE技术从豆科模式植物百脉根中克隆到一个液泡膜H+-PPase基因的cDNA,命名为LcVP1。该cDNA长为2962bp,含2304bp的完整开放阅读框,编码767个氨基酸,其推测的氨基酸序列与绿豆、拟南芥等I类液泡膜H+-PPase的氨基酸序列同源性在80%以上,且有很高的功能区段保守性。该cDNA序列已提交GenBank,登录号为EF440187。半定量RT-PCR表明,LcVP1在根、茎、叶中的表达不同,叶中表达最多,茎中最少。
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关键词
百脉根
液泡膜H^+-PPase
lcvp1
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职称材料
题名
百脉根液泡膜H^+-PPase基因LcVP1植物表达载体构建与转基因毛白杨的获得
被引量:
1
1
作者
孙艳香
冯雪
赵学良
机构
廊坊师范学院生命科学学院遗传与育种研究所
出处
《中国农学通报》
CSCD
北大核心
2011年第4期134-138,共5页
基金
河北省教育厅自然科学项目"豆科模式植物百脉根液泡膜H+-PPase基因在植物抗旱耐盐基因工程中的应用研究"(20070318)
廊坊市科技攻关项目"利用基因工程手段选育抗旱
耐盐林木新品系"(2007010201)
文摘
为通过基因工程手段进行杨树耐盐性状的遗传改良,笔者分析已克隆的百脉根液泡膜H+-PPase基因LcVP1的cDNA序列,根据其与植物表达中间载体pGN上的酶切位点设计1对带酶切位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增百脉根液泡膜H+-PPase基因开放阅读框片段。双酶切PCR回收产物和pGN载体,将目的片段定向连接构建成植物表达载体pGVP,并转入根癌农杆菌;在此基础上,利用根癌农杆菌介导的叶盘转化法,将百脉根液泡膜H+-PPase基因转入毛白杨基因组中。转基因杨树的获得,为获得耐盐性提高的杨树品系提供了基础。
关键词
百脉根
液泡膜H+-PPase
lcvp1
pGVP
毛白杨
Keywords
Lotus corniculatus L.
the tonoplast H+-PPase
lcvp1
pGVP
Populus tomentosa Carr.
分类号
S3 [农业科学—农艺学]
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职称材料
题名
百脉根液泡膜H^+-PPase基因的cDNA克隆与分析
被引量:
4
2
作者
孙艳香
王勇
机构
廊坊师范学院生物系
南开大学生命科学学院
出处
《植物生理学通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期657-663,共7页
基金
廊坊师范学院博士专项基金项目(LSZB200603)
天津市科技厅项目(043123711)
文摘
采用EST电子克隆和RACE技术从豆科模式植物百脉根中克隆到一个液泡膜H+-PPase基因的cDNA,命名为LcVP1。该cDNA长为2962bp,含2304bp的完整开放阅读框,编码767个氨基酸,其推测的氨基酸序列与绿豆、拟南芥等I类液泡膜H+-PPase的氨基酸序列同源性在80%以上,且有很高的功能区段保守性。该cDNA序列已提交GenBank,登录号为EF440187。半定量RT-PCR表明,LcVP1在根、茎、叶中的表达不同,叶中表达最多,茎中最少。
关键词
百脉根
液泡膜H^+-PPase
lcvp1
Keywords
Lotus corniculatus L.
tonoplast H^+-PPase
lcvp1
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
S541.6 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
百脉根液泡膜H^+-PPase基因LcVP1植物表达载体构建与转基因毛白杨的获得
孙艳香
冯雪
赵学良
《中国农学通报》
CSCD
北大核心
2011
1
下载PDF
职称材料
2
百脉根液泡膜H^+-PPase基因的cDNA克隆与分析
孙艳香
王勇
《植物生理学通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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职称材料
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