慢性复合应激对学习记忆的影响及cAMP/PKA-CREB信号通路的作用

目的探讨慢性复合应激对大鼠学习与记忆的影响和cAMP/PKA-CREB信号系统在此机制中的作用。方法将成年雄性Wistar大鼠分为对照组:不作任何处理;慢性单一应激组:每天捆绑6 h,持续6周;慢性复合应激组:每天随机暴露于4种应激原中,持续6周。应激结束后,用Morris水迷宫(MWM)测试大鼠空间学习与记忆成绩;免疫组织化学方法观察大鼠海马PKA-Cβ和磷酸化的CREB的表达水平;应用RT-PCR法半定量检测海马组织内BDNF和Bcl-2的mRNAs水平。结果应激后在MWM寻找平台潜伏期,与对照组(18.9±13.0)s相比,慢性复合应激组(14.2±5.8)s明显缩短(P<0.05),显示其空间记忆明显增强,而慢性单一应激组(20.4±12.8)s无明显差异(P>0.05);慢性复合应激组大鼠海马CA1和CA3区PKA-Cβ的表达以及CA1区和齿状回pCREB的表达明显上调(P<0.05);而慢性单一应激组海马各亚区PKA-Cβ和pCREB的表达无显著性改变(P>0.05)。BDNF和Bcl-2mRNAs的表达水平3组间差别无显著性(P>0.05)。结论慢性复合应激可增强海马依赖的学习与记忆功能,多元的环境刺激可能是其增强的主要原因。PKA-CREB信号通路在其影响机制中发挥了一定的作用。

2000μW/cm^2电磁辐射对大鼠海马NR2A蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨2000μW/cm2电磁辐射对大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2A(NR2A)蛋白及其mRNA水平表达的影响,揭示电磁辐射对大鼠学习记忆功能的损伤机制。方法:实验分为空白对照组,假辐射组,1h/d、2h/d、3h/d辐射组。将辐射组大鼠固定体位,头部接受功率密度为2000μW/cm2的近场辐射,连续辐射30d。通过Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,采用免疫组化法和Western blot法检测大鼠海马组织NR2A蛋白表达的变化,RT-PCR法检测大鼠海马组织NR2A mRNA表达的变化。结果:假辐射组大鼠各项指标与空白对照组相比均无统计学差异(P>0.05);而各辐射组大鼠寻找安全平台的逃避潜伏期较空白对照组明显延长(P<0.05);各辐射组大鼠海马神经元排列紊乱,NR2A阳性细胞比率显著下降,海马组织NR2A蛋白及其mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:2000μW/cm2电磁辐射可导致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与大鼠海马组织NR2A蛋白及其mRNA的表达降低有关。

远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及海马nAChRα7亚基的影响

目的观察远志总皂苷(TEN)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆及烟碱型乙酰胆碱受体α7(nAChRα7)亚基的影响,探讨TEN对AD干预作用的机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、TEN低剂量组(12.5mg/mL)和TEN高剂量组(37.5mg/mL),每组8只。模型组予腹腔注射D-半乳糖(D-gal)致衰联合IBO损毁双侧基底前脑Meynert核建立AD模型。TEN低、高剂量组在建立AD模型的同时分别予12.5mg/mL、37.5mg/mL的TEN灌胃8周。对照组用等体积的生理盐水代替D-半乳糖(D-gal)和IBO注射。采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠的逃避潜伏期(EL)、跨越原平台次数和原平台象限停留时间;用免疫组化法测各组大鼠海马区nAChRα7表达水平。结果与对照组比较,模型组EL延长、跨越原平台次数减少、原平台象限停留时间降低、海马区nAChRα7的表达水平减小(P<0.05);与模型组比较,TEN高、低剂量组EL缩短、跨越原平台次数增加、原平台象限停留时间延长、海马区nAChRα7的表达水平增高(P<0.05)。与TEN低剂量组比较,TEN高剂量组EL时间缩短(但实验第2天两组间比较无统计学差异)、跨越原平台次数增加、原平台象限停留时间延长、海马区nAChRα7表达水平均明显升高(P<0.05)。结论 TEN可显著提高AD模型大鼠海马区nAChRα7表达,这可能是TEN改善学习记忆和认知功能的机制之一。

丁苯酞对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马NR2B表达的影响

目的:观测丁苯酞(dl-3n-butyphthalide,NBP)对血管性痴呆(vasculardementia,VD)小鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚单位2B(N-methyl-D-asparate receptor subunit 2B,NR2B)表达的影响。方法:双侧颈总动脉线结法制备小鼠VD模型。设立假手术组、VD模型组和NBP治疗组(120 mg·kg^(-1),bid,灌胃30 d)。跳台试验和水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力的改变,免疫组织化学方法检测小鼠海马NR2B表达变化。结果:模型组小鼠学习、记忆能力及海马NR2B表达较假手术组均明显下降(P<0.05);NBP组小鼠学习记忆能力明显改善,海马内NR2B表达增高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),与假手术组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:NBP能改善VD小鼠学习和记忆能力,其机制可能与其促进海马细胞内NR2B的表达有关。

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马GluR1蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察补阳还五汤对血管性痴呆(VD)大鼠海马α-氨基羟甲基恶丙酸受体(AMPA)GluR1亚单位蛋白及mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤治疗VD的机制。方法:四血管阻断法制备VD大鼠模型。设立假手术组、VD模型组、尼莫地平组(20mg·kg-1.d-1,灌胃30d)和补阳还五汤治疗组(50g·kg-1.d-1灌胃30d)。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力的改变,免疫组化和Westernb lotting技术检测大鼠海马神经元GluR1蛋白的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马GluR1mRNA表达的变化。结果:与假手术组相比,VD模型组大鼠逃避潜伏期延长和平均探索次数减少(P<0.05);补阳还五汤明显改善了模型大鼠上述学习、记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著(P>0.05)。VD模型组大鼠的GluR1蛋白及其mRNA表达水平较假手术组明显降低(P<0.05);补阳还五汤治疗组大鼠海马的GluR1蛋白及其mRNA表达水平较模型组的表达明显升高(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著(P>0.05)。结论:补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤及恢复海马组织GluR1蛋白及其mRNA的表达有关。

四慧合剂对疲劳模型大鼠学习记忆及海马NMDA受体亚基NR2A、NR2B及EphB2受体表达的影响

目的研究疲劳模型大鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl D-aspartate,NMDA)受体NR2A、NR2B亚基及EphB2受体表达的变化,并观察四逆散、生慧汤、四慧合剂对其影响。方法采用多平台法,进行连续睡眠剥夺168h复制中枢疲劳模型,将实验动物随机分为正常对照组、模型组、四逆散组、生慧汤组、四慧合剂组,每组10只;分别在睡眠剥夺6、30、54、78、102、126、150h时间点灌胃给药及蒸馏水。应用Y迷宫观察大鼠学习记忆能力的变化,并使用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术定量分析大鼠海马NR2A、NR2B亚基及EphB2受体mRNA表达的变化。结果与正常对照组比较,模型组大鼠Y迷宫正确百分率明显下降(P<0.05),海马NR2B和EphB2的mRNA表达明显减少(P<0.01),NR2A表达无明显变化。与模型组比较,四慧合剂组能明显提高大鼠迷宫成绩和海马NR2A、EphB2的mRNA表达(P<0.01),而四逆散组、生慧汤组差异无统计学意义。与四逆散组比较,四慧合剂组EphB2的mRNA表达明显增多(P<0.01)。生慧汤组较模型组亦能明显增加NR2A的mRNA表达(P<0.01)。结论中枢疲劳能导致大鼠迷宫成绩下降和海马NR2B和EphB2基因表达下调。四慧合剂能增加大鼠的学习记忆能力,可能是通过上调大鼠海马NR2B和EphB2的mRNA表达所致。

丙泊酚对大鼠的空间学习记忆和海马NMDA受体NR2A亚基表达的影响

目的观察丙泊酚单次麻醉对成年大鼠空间学习记忆能力的影响以及海马NMDA受体NR2A亚基的变化。方法 30只SD大鼠随机分成丙泊酚组(n=15)和对照组(n=15)。给予丙泊酚50mg/kg腹腔注射作为诱导剂量,待翻正反应消失后在腹腔追加50mg/kg丙泊酚加深麻醉。对照组不予任何处理。待翻正反应恢复12h后应用Morris水迷宫评价丙泊酚对于大鼠空间学习记忆的影响。同时通过免疫荧光技术检测海马NMDA受体NR2A亚基的表达变化。结果丙泊酚组平均学习潜伏期较对照组显著缩短(P<0.05),靶象限活动时间百分比明显延长(P<0.05),丙泊酚组NMDA受体NR2A亚基的表达增加。结论丙泊酚单次麻醉后成年大鼠的空间学习记忆能力提高,这种学习记忆能力的提高可能和NMDA受体NR2A亚基的表达上调相关。

α5GABA_A受体及其变构调节剂对学习记忆功能作用的研究进展

α5亚基γ-氨基丁酸A受体(α5GABAAR)是中枢神经系统的一种抑制性受体,主要分布在海马,通过调控氯离子外向电流对海马神经元产生抑制性效应、大量研究表明,该受体兴奋性的改变会对学习和记忆等认知功能产生影响,从而导致一些病症如术后认知功能障碍、疼痛、抑郁症、精神分裂症和唐氏综合征等的发生而其变构调节剂则能治疗或改善这些病症本文对α5GABA_AR的生理功能。

电磁辐射对大鼠海马NMDA受体NR1亚单位蛋白及其mRNA表达的影响

目的探讨2000μW／cm^2电磁辐射对大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸（NMDA）受体NRI亚单位蛋白及其mRNA水平表达的影响，揭示电磁辐射对大鼠学习记忆功能的损伤机制。方法实验分为空白对照组，假辐射组，1h／d、2h／d、3k／d辐射组。将辐射组大鼠固定体位，头部接受功率密度为2000μW／cm^2的近场辐射，连续辐射30d。通过Mogis水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力，采用免疫组化法和Western—Blot法检测大鼠海马组织NRl蛋白表达的变化，RT—PCR法检测大鼠海马组织NRlmRNA表达的变化。结果各辐射组大鼠在水迷宫检测第4天寻找安全平台的逃避潜伏期分别为1h／d[（12．29±1．36）S]、2h／d[（17．99±2．25）S]、3h／d[（24．66±5．56）S]，均明显长于空白对照组[（8．8±1．66）S]（尸〈0．05）；1h／d、2h／d和3h／d辐射组大鼠海马神经元均排列紊乱，NRl阳性细胞比率明显低于空白对照组，海马组织NR1蛋白[分别为（0．122±0．026）、（0．102±0．023）、（0．060±0．009）]及其mRNA[分别为（0．46±0．07）、（0．35±0．05）、（0．12±0．02）]表达水平较空白对照组[（10．70±0．11）、（0．68±0．11）]均明显降低（P〈0．05）。而假辐射组大鼠各项指标与空白对照组相比均无显著差异（P〉0．05）。结论2000μW／cm^2电磁辐射可导致大鼠学习记忆功能下降，其机制可能与大鼠海马组织NR1蛋白及其mRNA的表达降低有关．

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马NR2B蛋白及其mRNA表达的影响

目的观察补阳还五汤对血管性痴呆（vascular dementia，VD）大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2B（N—Methyl—D—asparate receptor subunit2B，NR2B）蛋白及其mRNA表达的影响，探讨补阳还五汤治疗VD的机制。方法四血管阻断（four vessel occlusion，4VO）法制备VD大鼠模型。设立假手术组、VD模型组、尼莫地平组（20mg·kg-1·d-1，灌胃30d）和补阳还五汤治疗组（50g生药·kg-1·d-1，灌胃30d）。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力的改变，免疫组化和Western—Blot技术检测大鼠海马神经元NR2B蛋白的变化，实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NR2BmRNA表达的变化。结果与假手术组大鼠逃避潜伏期[（24．18±7．90）s]和平均探索次数[（7．99±1．32）次／min]相比，VD模型组大鼠逃避潜伏期[（51．25±18．28）S]延长和平均探索次数[（5．26±0．74）次／min]减少（P〈0．05）；补阳还五汤组[（25．91±9．56）S和（7．52±1．27）次／min]明显改善了模型大鼠学习、记忆成绩俨〈0．05）；假手术组、尼莫地平组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性俨〉0．05）。VD模型组大鼠的NR2B蛋白（0．33±0．06）及其mRNA（593±53）表达水平较假手术组（0．71±0．13）、（5887±501）明显降低（P〈0．05）；补阳还五汤治疗组大鼠海马的NR2B蛋白（0．66±0．11）及其mRNA（5692±482）表达水平较模型组的表达明显升高（P〈0．05）；假手术组、尼莫地平组组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力，其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤及促进海马组织NR2B蛋白及其mRNA的表达有关。

铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸受体亚单位表达的影响

目的探讨铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期各阶段海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)亚单位表达的影响。方法将24只清洁级妊娠昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天起开始饮用含铅水,仔鼠于出生后(PND)21天断乳,继续饮含铅水至实验结束。水迷宫测定PND 40仔鼠学习记忆能力;并分别于PND10、PND20和PND40,测定海马组织中NMDA各受体亚单位(NR1、NR2A、NR2B)蛋白和m RNA的表达水平。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平均较低,除PND 10的0.5 g/L乙酸铅暴露组外,差异有统计学意义(P<0.05);且随着乙酸铅暴露剂量的升高,仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平呈下降趋势。与对照组比较,PND 10时各剂量乙酸铅暴露组及PND 20时1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05);而PND 40时各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均无明显改变。且随着乙酸铅暴露剂量的升高,PND 10、PND 20时仔鼠海马组织中NR2A蛋白的表达水平均呈下降趋势。各剂量乙酸铅暴露不同发育阶段仔鼠海马组织中NR2B m RNA的表达水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论发育早期铅暴露可损伤仔鼠的学习记忆能力,并且抑制仔鼠海马组织中NMDA受体各亚单位的表达。

艾芬地尔对异氟醚麻醉后学习记忆损害的影响

目的 探讨侧脑室给予N-甲基-D-天冬氨酸2B(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 2B, NR2B)受体拮抗剂艾芬地尔对长时程异氟醚麻醉后小鼠学习记忆损害的影响. 方法 雄性C57BL/6小鼠80只,8周龄,按随机数字表法分为5组(每组16只):空白对照组(C组),吸入O2维持6 h;假手术组(S组),侧脑室注射生理盐水2 μl后吸入O2维持6 h;异氟醚组(A组),侧脑室注射生理盐水2 μl后吸入1.3%的异氟醚维持6 h;异氟醚+艾芬地尔组(AI组),侧脑室注射艾芬地尔(2 μg)2 μl后吸入1.3%的异氟醚维持6 h;艾芬地尔组(I组),侧脑室注射艾芬地尔(2 μg)2 μl后吸入O2维持6 h.用新物体识别实验(novel object recognition, NOR)和场景恐惧实验(fear conditioning, FC)检测麻醉后第3、7天小鼠的学习记忆.用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction, q-PCR)检测海马NR2B mRNA表达情况. 结果 在NOR中,麻醉后第3天和第7天,与S组比较,A组辨别指数下降(P<0.05);与A组比较,AI组辨别指数升高(P<0.05).在FC中,麻醉后第3天和第7天,与S组比较,A组凝滞时间百分数减少(P<0.05);与A组比较,AI组凝滞时间百分数增加(P<0.05). q-PCR结果显示,麻醉后即刻,与S组比较,A组海马NR2B mRNA表达升高(P<0.05);麻醉后第3天和第7天,与S组比较,A组海马NR2B mRNA表达降低(P<0.05);与A组比较,AI组海马NR2B mRNA表达升高(P<0.05);麻醉后即刻、第3天和第7天,与S组比较, I组海马NR2B mRNA表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05). 结论 侧脑室预给予艾芬地尔可减轻长时程异氟醚麻醉后小鼠学习记忆损害,其机制可能与海马NR2B表达改变有关.

N-甲基-D-天冬氨酸受体在长时程增强中的作用

突触可塑性是学习记忆的神经生物学基础,神经递质充当着信使的角色。神经递质可以分为兴奋性神经递质和抑制性神经递质,而谷氨酸是中枢神经系统中分布广,作用强的兴奋性神经递质。N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)在学习记忆功能中发挥重要作用,主要以诱导长时程增强(LTP)的形式来调节学习和记忆过程,被称作学习记忆的开关。本文主要对NMDARs的分类、LTP现象及Ca^2+信号通道诱导机制进行综述,主要描述了NMDARs在LTP中的作用,为进一步研究提供参考。

亚慢性染毒苯并[ɑ]芘对大鼠记忆功能及不同脑区NMDA受体表达的影响

[背景]苯并[ɑ]芘(BaP)具有神经毒性,可以引起人和动物短期空间学习记忆障碍,这与其引起的海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达改变有关。BaP是否引起其他脑区NMDA受体亚基表达水平的改变,并参与BaP诱导的神经毒性目前尚不清楚。[目的]通过亚慢性染毒BaP的SD大鼠模型,观察不同脑区NMDA受体亚基(NR1、NR2A、NR2B)mRNA表达水平,为深入研究BaP神经毒作用机制提供依据。[方法]选择40只SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组和1.00、2.50、6.25 mg·kg^(-1)BaP染毒组,每组10只,隔日腹腔注射染毒90 d。采用Morris水迷宫检测大鼠寻找平台平均逃避潜伏期、寻找平台平均总路程、平台象限滞留时间。采用实时荧光定量PCR检测海马区、皮质区、小脑区、纹状体NR1、NR2A、NR2B mRNA表达水平。[结果]与对照组相比,2.50、6.25 mg·kg^(-1)BaP组大鼠平均逃避潜伏期、寻找平台平均总路程延长(P<0.05),6.25 mg·kg^(-1) BaP组大鼠平台象限停滞时间缩短(P<0.05)。2.50、6.25 mg·kg^(-1)BaP组海马区NR1、NR2B mRNA表达水平,6.25 mg·kg^(-1)BaP组NR2A mRNA表达水平均较对照组降低(P<0.05);6.25 mg·kg^(-1)BaP组皮质区NR1、NR2B mRNA表达水平,1.00 mg·kg^(-1)BaP组NR2A mRNA表达水平均较对照组降低(P<0.05);6.25 mg·kg^(-1) BaP组小脑区NR2B mRNA表达水平降低(P<0.05);纹状体NMDA受体各亚基mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]亚慢性染毒BaP引起的大鼠短期空间学习记忆功能损伤,可能与其引起的大鼠海马区NR1、NR2A、NR2B mRNA表达的下调,皮质区NR1、NR2A、NR2B mRNA表达的改变以及小脑区NR2B mRNA表达下调有关。

刺五加总苷对快速眼动睡眠剥夺幼鼠学习记忆的作用研究

目的研究刺五加总苷对快速眼动(REM)睡眠剥夺幼鼠学习记忆的作用。方法将75只幼鼠随机分为对照组(n=25),模型组(n=25)与实验组(n=25)。模型组和实验组均用改良多平台睡眠剥夺法建立REM睡眠剥夺幼鼠模型,对照组为不加任何干预的正常幼鼠。实验组于造模前腹腔内注射刺五加总苷(200 mg·kg^(-1)·d^(-1)),对照组和模型组腹腔注射等量生理盐水,连续干预7 d。睡眠剥夺72 h后,用Morris水迷宫实验测定幼鼠的学习记忆能力;用苏木精-伊红(HE)染色法检测海马组织病理学特点;用羟胺法与硫代巴比妥酸法分别检测血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;用蛋白质印迹(Wb)法检测海马组织磷酸化Camp反应元件结合蛋白(pCREB)、NMDA受体2B亚基(NR2B)蛋白的表达水平。结果对照组、模型组与实验组幼鼠的逃避潜伏期分别为(21.31±4.65),(62.84±8.79),(30.63±5.94)s;穿越平台次数分别为(8.39±1.57),(1.86±0.79),(5.91±1.06)次;海马组织pCREB蛋白相对表达量分别为0.98±0.02,0.17±0.06,0.83±0.14;NR2B蛋白相对表达量分别为0.86±0.11,0.52±0.08,0.68±0.13,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论刺五加总苷可明显改善REM睡眠剥夺幼鼠的抗氧化能力,同时上调海马组织pCREB、NR2B蛋白表达,进而改善其学习记忆能力。