酶联免疫吸附法和凝集素微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体的研究

目的:比较酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent,ELISA)和吸附柱微量离心柱法[lens cu-linaris agglutinin(LCA)-coupled spin column,ACSC]检测甲胎蛋白异质体(alpha-fetoprotein isoforms,AFP-L3)在甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)阳性的良恶性肝病鉴别诊断中的价值。方法:采用ELISA法检测92例原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC),45例慢性肝炎及肝硬化患者血清中AFP-L3浓度,用ACSC法检测该批标本的AFP-L3/AFP%,比较两种方法对良恶性肝病鉴别诊断的价值。结果:ELISA法检测AFP-L3浓度和ACSC法检测AFP-L3/AFP%对92例原发性肝癌(HCC)的敏感性分别是83.69%和85.86%,对45例慢肝、肝硬化的特异性分别为88.88%和82.22%,ELISA法和ACSC法两种方法诊断原发性肝癌的符合率分别为85.40%和84.67%,在受试者工作特征曲线(recover operatin characteristic,ROC)下的面积AUC分别为0.819和0.823。结论:ELISA法检测AFP-L3浓度和ACSC法检测AFP-L3/AFP%在HCC鉴别诊断中具有相似的临床价值,但是ELISA法操作简便、省时、经济、患者易接受,更利于临床推广应用。

比较用凝集素微量离心柱法和酶联免疫吸附法检测甲胎蛋白异质体对原发性肝癌的诊断价值

目的比较用凝集素微量离心柱法(ACSC)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测甲胎蛋白异质体对原发性肝癌的诊断价值。方法选取2013年7月至2015年12月于本院就诊的原发性肝癌(HCC)患者85例,慢性肝炎(CH)与肝硬化(LC)患者38例;用ELISA法检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3)浓度,用ACSC法检测AFP(甲胎蛋白)-L3/AFP%,比较2种检测办法对良恶性肝病的鉴别诊断价值。结果 ACSC法在HCC中AFP-L3/AFP%≥10%阳性率为84.70%(72例/85例),ELISA法在HCC中AFP-L3>37.89 ng·m L^(-1)的阳性率为90.59%(77例/85例)。2种方法检测CH与LC的阳性率分别为13.16%(5例/38例)、10.53%(4例/38例),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。在2种方法对良恶性肝病鉴别诊断性能评价的ROC曲线中,AUC值分别为0.89,0.82(均P<0.01),95%可信区间分别为0.81~0.98,0.74~0.90。2种方法诊断HCC的敏感性分别为84.71%(72例/85例),88.24%(75例/85例);特异性分别为86.84%(33例/38例),89.47%(34例/38例);准确性分别为85.36%(105例/123例),88.62%(109例/123例),这三者比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 2种方法诊断HCC的敏感性、特异性、准确性类似,但ELISA法具有操作简单、价格低廉等优点,更适合在临床上推广应用。

凝集素微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体在肝癌诊断中的价值

目的:探讨凝集素微量离心柱法(lens culinaris agglutinin(LCA)-coupled spin column,ACSC)法检测甲胎蛋白异质体(alpha-fetoprotein isoforms,AFP-L3)对甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)阳性的良恶性肝病鉴别诊断价值。方法:采用凝集素微量离心柱法及电化学发光法检测92例原发性肝癌(hepatocellu-lar carcinoma,HCC),45例慢性肝炎及肝硬化患者血清中AFP及AFP-L3浓度,以AFP-L3%≥10%为阳性判断标准,分析AFP-L3%与良恶性肝病的关系。结果:ACSC法检测AFP-L3%对92例原发性肝癌(HCC)的灵敏度是85.86%,对45例慢肝、肝硬化的特异性为95.56%,诊断准确度为89.05%,在受试者工作特征曲线(receiver operatin characteristic curve,ROC)曲线下的面积为0.9226。结论:ACSC法检测AFP-L3指标在PHC鉴别诊断中具有临床价值。

AFP-L3蛋白芯片的建立与应用

目的:建立一种可同时检测血清中甲胎蛋白(AFP)及甲胎蛋白异质体(AFP-L3)的蛋白芯片方法,为AFP-L3检测提供经济、便捷、省时、有效的新途径。方法:将鼠源AFP单克隆抗体和小扁豆凝集素点样固定在醛基玻片上,制备出AFP抗体和小扁豆凝集素蛋白芯片。利用抗原抗体特异性结合以及盐藻糖与小扁豆凝集素特异性结合的原理,用蛋白芯片方法检测血清样本中的AFP和AFP-L3。结果:肝癌血清39份,其中37份检测到AFP;26份肝癌血清中同时检测到AFP和AFP-L3,2份肝癌血清均未检测到AFP和AFP-L3。肝细胞癌组血清样本中AFP和AFP-L3水平明显高于健康对照组(P<0.001),健康对照组与空白对照组统计学上无差异(P>0.05)。结论:本研究成功地建立AFP和AFP-L3同时检测的蛋白芯片方法,与ELISA法和凝集素微量离心柱法相比,是一种切实可行,经济、便捷、省时、有效的方法。