蛋白酶体抑制剂对人晶状体上皮细胞的增殖抑制作用

目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132对SRA01/04细胞增殖的影响.方法 以不同浓度MG132处理SRA01/04细胞36 h,通过MTT微量比色法检测MG132对SRA01/04细胞活力的影响,通过流式细胞术（FCM）检测MG132对SRA01/04细胞凋亡及细胞周期的影响,通过AnnexinV/FITC-PI双染法观察MG132对SRA01/04细胞的影响.结果 随着浓度的提高（0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 μmol/L）,MG132对SRA01/04细胞增殖的抑制作用逐渐增强.36 h时,半数有效抑制浓度IC50为2.50μmol/L.FCM检测细胞凋亡结果：2.5、5.0 μmol/L的MG132作用于SRA01/04细胞36 h,细胞早期凋亡率分别为（6.55±0.35）%和（13.75±3.18）%,而对照组为（0.75±0.21）%,差异有统计学意义（P＜0.01）.2.5、5.0 μmol/L MG132处理SAR01/04细胞48 h,G0/G1期细胞比例分别为（73.42±3.10）%,（80.95%±3.83）%,而对照组为（42.57±0.64）%,差异有统计学意义（P＜0.01）;S期细胞比例分别为（17.40±1.50）%,（19.57±1.29）%,而对照组为（49.44±1.36）%,差异有统计学意义（P＜0.01）.免疫荧光镜下,MG132诱导SRA01/04细胞的早期凋亡.结论 蛋白酶体抑制剂MG132诱导细胞凋亡、影响细胞周期来抑制SRA01/04细胞的增殖.蛋白酶体抑制剂可起到防治后发性白内障的作用.

MMP-3、Fn和α-SMA在糖尿病模型晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的观察糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞（LECs）的病理变化，探讨基质金属蛋白-3（MMP-3）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤维连接蛋白（Fn）在糖尿病性白内障发生、发展中的作用。方法将105只SD大鼠，随机分为2组，正常对照组45只、糖尿病模型组60只。模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）溶液（60mg／kg）；正常对照组腹腔内注射相应体积的0．1mmol／L柠檬酸缓冲溶液。每周通过裂隙灯观察并记录大鼠晶状体混浊的进展。在建模后4、8、12周时取大鼠晶状体，制成石蜡切片，用HE染色观察LECs的变化情况，采用免疫组化法检测LECs中MMP-3、α-SMA、Fn的表达，并进行相关比较及统计学分析。结果正常对照组中，大鼠晶状体始终保持透明状态；而糖尿病模型组在实验第4、8、12周末白内障的发生率分别为31．48％、77．78％、100％。在光镜下糖尿病白内障组的LECs出现细胞聚集的斑块与成纤维细胞样改变，并形成多层排列。正常对照组LECs中，MMP-3、α-SMA、Fn均不表达；而在糖尿病性白内障组LECs中MMP-3、α-SMA、Fn的表达明显增高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。随着病程的发展，糖尿病性白内障组LECs中MMP-3、α-SMA、Fn阳性表达率呈进行性增强，各时间段之间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）。在糖尿病性白内障组中，LECs中Fn与α-SMA和MMP-3之间的表达呈正相关（r=0．994，P〈0．01；r=0．993，P〈0．01）。结论α-SMA、MMP-3和Fn可能通过调节LECs的生长在糖尿病性白内障的发生、发展中起重要作用。