早期饲喂沙棘提取物对猪生长性能、肉品质和血清Leptin水平及脂肪Leptin mRNA表达的影响

本试验旨在研究早期饲喂沙棘提取物对猪生长性能、肉质、血清leptin水平及脂肪组织lept★表达的影响。选用(28±2)日龄断奶的长白×大白二元杂交仔猪24头,随机分成试验组和对照组,每组3个重复,每重复4头猪(公母各1/2)。第一阶段对照组饲喂基础日粮,试验组日粮在其基础上添加0.1%沙棘提取物,于57日龄起第二阶段全部饲喂基础日粮,至180日龄结束试验。运用荧光相对定量PCR测定脂肪中leptin mRNA表达量,以及沙棘提取物对肉质和血清leptin水平的影响。结果表明,早期饲喂沙棘提取物可显著提高试验组肥育猪眼肌面积(P<0.05),降低背膘厚和肌内脂含量(P<0.05);试验组仔猪血清leptin水平显著高于对照组(P<0.05),而肥育猪的试验组与对照组无显著差异(P>0.05);试验组肥育猪背部皮下脂肪和肠系膜脂肪leptin mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),腹部皮下脂肪leptin mRNA表达量高于对照组,差异极显著(P<0.01)。脂肪leptin mRNA表达量与血清leptin水平呈极显著负相关(P<0.01);对照组脂肪leptin mRNA表达量与背膘厚、眼肌面积和肌内脂呈显著相关(P<0.05)。综合分析认为,在断奶仔猪日粮中添加0.1%沙棘提取物可通过影响脂肪leptin mRNA表达量及血清leptin水平,改变与肉质的相关系数,来改善肥育猪肉质特性。

不同能量摄入水平对围产期奶牛脂肪组织Leptin mRNA和HSL mRNA表达的影响

选用围产期健康奶牛30头随机均分为3组,其中组为对照组,组和组为试验组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组于产前28d开始分别饲喂中国奶牛饲养标准(2000)标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%日粮(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂同一标准日粮至56 d。试验各组奶牛分别于产前28、14 d、产后1、14、28、56 d尾根部手术采取脂肪样品,采用荧光RT-PCR法对脂肪组织Leptin mRNA及HSL mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,不同能量摄入水平显著影响脂肪组织Leptin mRNA和HSL mR-NA表达。低能饲喂明显提高了脂肪组织中Leptin mRNA表达,降低了HSL mRNA表达;高能饲喂明显降低了脂肪组织中Leptin mRNA表达,提高了HSL mRNA表达。

Leptin mRNA表达的组织分布及在大鼠急性肠道损伤中的变化

目的:探讨leptin在急性炎症反应中的作用.方法:采集正常大鼠下丘脑、肺、肝、脾、胃、十二指肠、肾、附睾脂肪垫、睾丸等重要脏器标本,以RT-PCR法检测leptinmRNA表达的组织分布;并建立大鼠盲肠结扎穿孔模型,设立假手术组(A)和脂肪乳组(B)、单纯损伤组(C)、雌二醇组(D)、胰岛素组(E)等实验组,采用RT-PCR检测脂肪、肝及肺内leptinmRNA表达的变化.结果:正常大鼠的上述9种重要脏器内均有leptinmRNA表达,肾脏内含量最高而睾丸内含量最低.大鼠盲肠结扎穿孔12h后,与A组leptinmRNA表达水平相比,其在B组脂肪内表达显著增高而在肝、肺内表达显著降低,在C组肝内表达无显著差异而在脂肪、肺内表达显著降低,在D组肺内表达显著增高而在脂肪、肝内表达显著降低,在E组肺内表达无显著差异而在脂肪、肝内表达显著降低.脂肪乳对leptinmRNA表达的影响具有中枢分泌组织(脂肪)内诱导而外周脏器内抑制的双向模式.结论:LeptinmRNA表达水平在干预急性肠道损伤后能量代谢和神经-内分泌功能时发生敏感变化,提示leptin可能作为一种核心保护因子促进内环境的稳定.

长型Leptin(瘦素)受体mRNA在大鼠消化道中的表达

本试验以 5只 SD雌性大鼠为研究对象 ,采用原位杂交技术研究了大鼠消化道长型 Leptin (瘦素 )受体 m RNA的表达及其分布。结果表明 ,长型 Leptin受体 m RNA在大鼠胃和十二指肠的粘膜及粘膜下层组织中广泛表达 ,从而证明了在大鼠消化道存在长型

长型Leptin(瘦素)受体mRNA在大鼠卵巢中的表达和分布

以5只SD雌性大鼠为研究对象,采用原位杂交技术研究了大鼠长型Leptin受体mRNA在大鼠卵巢中的表达及其分布。结果表明,Leptin受体mRNA在大鼠卵巢中,主要分布于黄体细胞以及黄体、初级卵泡、生长卵泡和成熟卵泡周围基质颗粒细胞内。而且在黄体细胞上有黄褐色阳性颗粒密集分布;在基质等其他部位中未能检测到Leptin受体mRNA杂交信号。

男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ_2、leptin、TNF-α mRNA的表达与胰岛素抵抗

目的:研究肥胖患者腹部皮下脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(PPARγ2)、瘦素(leptin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:应用RT-PCR凝胶成像半定量技术测定男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA,以及空腹血清leptin、胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBS),计算胰岛素抵抗指数(IRI),分析观察指标与肥胖之间的相关关系。结果:①肥胖组FINS、leptin、IRI、脂肪组织mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA高于非肥胖组(P<0.05);②IRI与leptin mRNA、TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptin、BMI、FINS成正相关(P<0.05);③以IRI为应变量,TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptinmRNA、血清leptin、BMI为自变量做多元逐步回归分析,回归方程:Y=0.358+0.813PPARγ2mRNA。结论:①男性肥胖患者leptin及腹部皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA、TNF-α mRNA较非肥胖者升高;②男性患者PPARγ2 mRNA与IR密切相关,可以反映IR的程度。

侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑前阿黑皮素mRNA表达的影响

给体重 180～ 2 0 0 g的雌性 SD大鼠侧脑室中注射重组瘦素 (L eptin) 1μg,采用 RT- PCR测定了其下丘脑前阿黑皮素 (POMC) m RNA和 L eptin受体 (OB- R) m RNA的表达水平。结果表明 ,注射重组 L eptin后 ,OB- R基因和 POMC基因表达量均上升 ,与生理盐水注射组、空白对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。由此认为 ,L eptin在大鼠下丘脑

瘦蛋白(Leptin)对体外培养新生牛脂肪细胞Leptin、HSL基因表达的影响

取单层生长良好的脂肪细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、2.5、5、10、50、100μg/L的外源牛重组瘦蛋白(Leptin),培养12h后提取总RNA,每个处理3个重复(孔),应用半定量PCR方法检测外源Leptin对脂肪细胞Lep-tin mRNA和HSLmRNA水平的影响。结果表明,Leptin对脂肪细胞内Leptin mRNA表达具有抑制作用,但一定浓度的Leptin能提高脂肪细胞内HSL mRNA水平,其中以5μg/LLeptin的作用最为明显;当Leptin的质量浓度超过5μg/L,HSL mRNA表达水平呈下降趋势。

不同分型卵巢癌患者组织中瘦素mRNA表达的相关研究

目的:探讨不同分型卵巢癌患者组织中瘦素(Leptin)mRNA的表达差异及临床价值。方法:收集我院2015年6月~2016年6月收治的卵巢癌患者129例及正常对照42例,于超声引导下行卵巢穿刺活检术,取少量卵巢周围组织,提取总RNA并纯化mRNA,运用RT-PCR技术检测各组leptin mRNA的表达情况,并分析leptin表达与不同分期,不同病理分型相关性。结果:与正常对照组相比,各组卵巢组织中leptin mRNA的表达均有所升高(P<0.05),且浆液性腺癌组leptin mRNA的表达尤为明显(P<0.05);浆液性腺癌组各临床分期中,Ⅲ期卵巢组织中leptin mRNA的表达最为显著(P<0.05)。结论:Leptin在不同分型不同分期卵巢癌组织中有一定表达差异,可能成为一种早期检测、诊断卵巢癌的新型指标。

降脂颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠血清瘦素及肝脏瘦素受体mRNA的影响

目的观察降脂颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠血清瘦素及肝脏瘦素受体mRNA的影响。方法高脂饲料制备SD大鼠非酒精性脂肪肝模型,随机分为东宝肝泰组、降脂颗粒低剂量组、降脂颗粒中剂量组、降脂颗粒高剂量组和模型对照组。治疗4周后检测相关指标。结果降脂颗粒能明显降低非酒精性脂肪肝模型大鼠血脂(TG、TC)的水平,降低血清瘦素水平,增加肝脏瘦素受体mRNA的表达。结论降脂颗粒可以改善瘦素抵抗并增加非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏瘦素受体mRNA的表达。

中药降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏瘦素受体mRNA及P-JAK2/P-STAT3的影响

目的:观察降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用及其对血清瘦素、肝组织瘦素受体mRNA、P-JAK2/P-STAT3蛋白含量表达的影响.方法:将60只SD♂大鼠,随机分为空白组(正常饮食)和造模组(高脂饮食).待造模成功后将造模组大鼠随机分为模型对照组、降脂颗粒低、中、高剂量组和东宝甘泰组.治疗4 wk后行肝组织生化和病理学检测,并同时应用ELISA试剂盒检测血清瘦素,RT-PCR法检测肝组织瘦素受体mRNA表达,应用Western blot检测肝组织P-JAK2和P-STAT3蛋白的表达.结果:低、中、高剂量组降脂颗粒能明显降低非酒精性脂肪肝大鼠模型肝脂(TG和TC)水平,改善脂肪变性,降低肝脏炎症反应,并能明显降低血清瘦素高水平状态(193.02±23.8ng/ L,163.97±31.38ng/L,147.83±17.59ng/L vs 317.22±39.26ng/L,P<0.01),改善瘦素抵抗,同时增加瘦素受体mRNA的表达(1.87±0.06,2.20±0.04,2.78±0.04 vs 1.50±0.05,P<0.01),增加肝组织P-JAK2和P-STAT3蛋白的含量(119.88±2.98,123.45±0.68,124.34±3.42 vs 113.15±1.27,P<0.01;94.15±0.78,100.18±3.33,101.94±2.20 vs 89.06±0.69,P<0.01).结论:降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质和炎症有较好的治疗作用,其可能机制是改善瘦素抵抗,增加肝脏瘦素受体mRNA表达及P-JAK2,P-STAT3蛋白含量.

侧脑室注射瘦素对大鼠垂体生长激素mRNA表达的影响

为了探讨Leptin(瘦素)对动物生长激素(GH)分泌的影响,以大鼠为试验动物,通过侧脑室注射1 mg Leptin,并采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法测定了大鼠垂体GH mRNA表达水平。结果表明,大鼠侧脑室注射Leptin,能显著增加垂体GH mRNA的表达。这一结果证明了Leptin可通过下丘脑调控动物垂体GH的合成与分泌。

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘组织中瘦素mRNA的表达及意义

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织瘦素mRNA的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量(RTQ-PCR)法检测2014年3月至2016年3月安庆市立医院收治的30例ICP孕妇和12例正常妊娠孕妇胎盘瘦素mRNA表达水平,其中ICP患者按不同临床分度、不同孕周分类。结果 1瘦素mRNA在42例胎盘组织中均有表达;215例轻度ICP组瘦素mRNA水平(0.220 6±0.170 1)U/μL、15例重度ICP组(0.176 9±0.147 0)U/μL及12例正常妊娠组的瘦素mRNA水平(0.154 5±0.177 3)U/μL相比,差异无统计学意义(P>0.05);313例ICP足月产组瘦素mRNA水平(0.285 5±0.173 4)U/μL、17例ICP早产组为(0.132 5±0.108 7)U/μL、正常妊娠组为(0.154 5±0.177 3)U/μL,3组比较差异有统计学意义(F=4.121,P=0.024),但两两比较,ICP早产组与正常妊娠组差异无统计意义(P>0.05)。结论瘦素在足月产ICP患者中呈高表达趋势,缺氧可能是主要原因,胎盘组织中瘦素mRNA表达水平在一定程度上反应了胎盘功能,可能参与ICP发病。

不同浓度瘦素对乳鼠成骨细胞增殖及VEGF mRNA表达的影响

目的通过观察不同浓度瘦素对离体培养乳鼠颅骨成骨细胞的作用,探讨瘦素(Leptin)对成骨细胞增殖以及成骨细胞上血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,为促进骨愈合过程中骨修复、再生的临床治疗提供一定的理论依据。方法取新生24h乳鼠颅盖骨,经酶解消化后得到原代成骨细胞,进行体外培养并鉴定。采用MTT法(噻唑蓝染色法)测定各组的OD值,观察瘦素对成骨细胞增殖能力的影响;采用RT-PCR法测定瘦素作用成骨细胞后VEGF mRNA的表达情况。结果经细胞鉴定后证实其系成骨细胞;经MTT法检测表明,瘦素作用24h后,各实验组OD值随瘦素浓度升高而增加;经RT-PCR法检测表明,VEGF mRNA可在乳鼠成骨细胞内稳定表达;半定量分析表明,不同瘦素剂量组间VEGF mRNA的表达量呈现一定规律,随着瘦素浓度的升高,VEGF mRNA的表达量逐渐增加。结论瘦素可促进成骨细胞增值;VEGF mRNA在成骨细胞内稳定表达;瘦素可上调成骨细胞上VEGF mRNA的表达,并存在一定的剂量依赖关系。

瘦素和RORγt mRNA在尖锐湿疣患者外周血中的表达及意义

目的检测RORγt、瘦素在尖锐湿疣(CA)患者外周血中的表达情况,探讨RORγt、瘦素在CA发病中的作用。方法用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测31例CA患者(CA组)、19例健康志愿者(正常对照组)外周血中RORγt mRNA的表达水平,同时用ELISA检测外周血中瘦素的表达情况。结果 CA组患者外周血中RORγt mRNA的表达量为4.705±7.232,正常对照组RORγt mRNA的表达量为0.037±0.055,两组比较差异有统计学意义(t=3.593,P=0.001)。而两组外周血中瘦素的表达分别为:CA组为(2.064±1.861)×10~4pg/mL、正常对照组为(3.035±2.007)×10~4pg/mL,差异无统计学意义(t=-1.739,P=0.088);进一步将CA组分别初发组和复发组,两组瘦素的表达量分别为:初发组为(2.487±1.985)×10~4pg/mL,复发组为(1.294±1.378)×10~4pg/mL,差异无统计学意义(t=1.963,P=0.06)。结论 CA患者外周血中RORγt mRNA的表达升高,提示RORγt可能在CA的发病中起作用,而瘦素在CA发病中的作用尚不明确。

重组leptin干预对营养性肥胖大鼠血清胰岛素、C-肽、内源性leptin含量及ob基因表达水平的影响

目的:探讨重组leptin侧脑室注射后,营养性肥胖大鼠模型腹膜后脂肪组织obese基因表达、内源性leptin含量以及血清胰岛素、C肽的变化,以期进一步探讨leptin中枢干预对肥胖大鼠leptin抵抗、胰岛素抵抗的改善作用。方法:(1)应用高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,用ELISA双抗体夹心法和放免法测定血清中leptin及胰岛素、C肽的含量;(2)应用RT鄄PCR技术检测各组大鼠脂肪组织中obese基因的表达水平。结果:(1)肥胖组大鼠经leptin干预后血清胰岛素和C肽明显降低,与正常各组之间无显著性差异;肥胖对照组、生理盐水组血清胰岛素、C肽较正常组明显升高。(2)肥胖大鼠经重组leptin干预后,脂肪组织obmRNA含量明显低于肥胖对照组、肥胖生理盐水组;其与正常对照组、正常leptin、生理盐水干预组之间无显著性差异。(3)肥胖对照组、肥胖生理盐水组大鼠血清leptin含量明显高于肥胖leptin干预组以及正常对照组、正常各干预组;肥胖leptin干预组与正常对照组、正常各干预组之间无显著性差异。(4)各组大鼠脂肪组织中obmRNA含量与其血清leptin含量、呈显著正相关关系。大鼠血清leptin含量与血清胰岛素、C肽浓度呈显著正相关。结论:侧脑室给予leptin可以显著减少肥胖大鼠脂肪组织中ob基因的表达以及血清leptin、胰岛素和C肽的含量。

AMI患者血清瘦素及外周血单个核细胞内皮素受体mRNA的检测

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清瘦素(Leptin,LP)水平的变化及外周血单个核细胞内皮素受体(ETA-R)mRNA的表达和临床意义。方法:采用酶联免疫法测定65例AMI患者和70例健康对照组血清LP水平;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定ETA-RmRNA的表达。结果:AMI患者在<6h、>6h、24h采血,LP水平随时间的延长而增高,24h达到高峰,48h后反而下降。6h内与48h组LP水平与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);>6h、24h组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);6h内与48h组相比差异无统计学意义(P>0.05)。AMI患者ETA-RmRNA的表达明显增高,随时间的延长变化不明显,维持在一个较高的水平。与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);AMI组内相比差异无统计学意义(P>0.05)。经直线相关分析:LP水平与ETA-RmRNA的表达无相关性(P>0.05)。结论:AMI患者血清LP水平及ETA-RmRNA的表达明显升高,分别是AMI发生的重要的独立危险因素及预测因子,早期监测LP水平及ETA-RmRNA的表达,有利于AMI的预防。

瘦素和瘦素受体mRNA表达与哮喘和肥胖的关系

目的探讨瘦素(LEP)和瘦素受体(LEPR)mRNA表达与哮喘和肥胖的关系。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法测定各组PBMC LEP和LEPR mRNA表达水平,分析LEP mRNA与血浆瘦素浓度、EOS%、IgE和FEV1占预计值(%)的关系。结果哮喘、肥胖、哮喘合并肥胖组的PBMC LEP mRNA表达量与健康对照组相比明显升高(P均<0.01),中、重度哮喘与轻度哮喘相比明显升高(P均<0.05);肥胖组LEPR mRNA表达量与其余各组相比明显升高(P均<0.01);哮喘组PBMC LEP mRNA表达量与血浆LEP浓度呈正相关(r=0.211,P=0.012),与FEV1占预计值(%)成负相关(r=-0.314,P=0.043),与EOS%、IgE无相关关系(r=0.002、0.001,P=0.58、0.96)。结论 LEP mRNA表达升高可能参与哮喘和肥胖的发生,并且导致较为严重的哮喘表型,其机制可能与血浆瘦素浓度增高有关,其相关的哮喘是非嗜酸细胞性、非过敏性的;LEPR mRNA高表达参与肥胖发生,但与哮喘无关。

瘦蛋白对体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA表达的影响

取单层生长良好的脂肪细胞，采用单因素试验，分别添加浓度为5ng／mL外源牛重组瘦蛋白（每12h添加1次）不添加作为对照至4、12、24、36、48和72h后提取总RNA，每个处理3个重复（孔），应用竞争RT-PCR法检测外源瘦蛋白对初生犊牛脂肪细胞Leptin长型受体（Ob—Rb）表达水平的影响，结果与对照组相比在12～24h内随着培养时间的增加，脂肪细胞Ob—Rb表达水平量亦显著增加（P〈0．01），之后其表达量逐渐回降，在48～72h趋于平稳（P〉0．05）。结果表明，在一定时间内瘦蛋白可提高体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA的表达水平。