环二肽Cyclo(Leu-Pro)对植物乳杆菌的促生长作用

研究旨在探讨环二肽Cyclo(Leu-Pro)对植物乳杆菌生长的影响。该研究以植物乳杆菌(Lactobacillus Plantarum T1)为研究对象,采用高效液相色谱法初步定性定量植物乳杆菌T1发酵液中的Cyclo(Leu-Pro),然后将植物乳杆菌T1分别接种于不含或含不同质量浓度(0.5、1、5、10μg/mL)Cyclo(Leu-Pro)的MRS肉汤培养基中培养18 h,采用96孔法和平板计数法测定不同培养条件下植物乳杆菌T1的生长曲线和活菌数。结果表明:不同质量浓度的Cyclo(Leu-Pro)对植物乳杆菌T1的生长均有明显的促生长作用,其中,1μg/mL Cyclo(Leu-Pro)的促生长效果最佳,可将活菌数提高到8.73×10^(10) CFU/mL,相比于对照组提高了一个数量级。在不同胁迫条件下,1μg/mL Cyclo(Leu-Pro)能使植物乳杆菌T1的延滞期缩短、生长速度提高,其活菌数和生物量显著增加(P<0.05)。综上所述,Cyclo(Leu-Pro)促进了植物乳杆菌T1的生长,增强了其抗胁迫能力。这将有利于植物乳杆菌T1作为发酵剂在食品发酵领域的应用。

基于CRISPR-Cas9系统构建LEU1基因缺失酿酒酵母用于酿造低醉酒度米酒

为探究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)异丙基苹果酸合成酶基因LEU1的缺失对酿造米酒生成高级醇的影响,该研究构建重组质粒p414-Cas9-BleoR和p426-gRNA.LEU1-kanMX后电转化酿酒酵母XF0,利用成簇规则间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR-Cas9)系统构建LEU1基因缺失的酿酒酵母XF0-L。将出发菌株XF0和重组菌株XF0-L进行培养基模拟发酵和米酒发酵,测定发酵酒的理化指标和高级醇含量。结果表明,菌株XF0-L与XF0模拟发酵酒的理化指标无显著差异(P>0.05),说明LEU1基因的缺失对酿酒酵母发酵性能无影响。相较于出发菌株XF0,重组菌株XF0-L模拟发酵酒中正丙醇(26.27 mg/L)和异丁醇含量(88.64 mg/L)分别提高21.96%和85.25%,异戊醇含量(141.82 mg/L)、异戊醇/正丙醇(5.39)、异戊醇/异丁醇(1.60)分别降低15.53%、30.99%、54.42%;相较于出发菌株XF0,重组菌株XF0-L发酵米酒中正丙醇(268.67 mg/L)和异丁醇含量(992.33 mg/L)分别提高14.17%、52.90%,异戊醇含量(1016.33 mg/L)、异戊醇/正丙醇(3.78)、异戊醇/异丁醇(1.02)分别降低13.58%、24.40%、43.65%,说明重组菌株XF0-L能够显著降低发酵酒中的异戊醇/正丙醇、异戊醇/异丁醇从而降低醉酒度(P<0.05)。

质体ACCase Trp-1999-Leu突变对小麦田菵草生长适合度的影响

为了明确质体乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)Trp-1999-Leu突变对小麦田菵草生长适合度的影响,以ACCase基因CT区域的1999位纯合突变型(Leu/Leu, RR)和纯合野生型(Trp/Trp, SS)菵草为对象,采用温室盆栽法探究两种基因型菵草在早期生长阶段及营养生长阶段的株高及地上生物量、成熟期的繁殖力,在室内与田间不同条件下测定两种基因型菵草与小麦竞争能力的差异,以期明确在无除草剂选择压力下该位点突变对菵草生长的影响。结果表明,在菵草生长早期的10~15 d,RR型菵草的生物量和株高分别比SS型低24.9%和11.5%;在营养生长阶段,RR型菵草的相对生长速率(RGR)和净同化率(NAR)分别比SS型菵草低18.2%和28.6%,叶面积比(LAR)高于SS型14.0%,但是二者的地上生物量无显著差异。在成熟期,RR分配给生殖器官的资源更少,无论是繁殖力还是平均植株总种子重量均显著低于SS,分别低13.1%、11.4%。竞争力方面,在室内条件下,随着小麦密度的升高,RR基因型菵草地上生物量及种子产量均显著低于SS型;在田间试验中也证实了室内研究的结果,RR型与SS型菵草相比,与小麦的竞争力更弱。因此,ACCase Trp-1999-Leu基因突变会使抗性菵草产生明显的繁殖力和竞争力适合度代价,研究结果可为该基因型菵草的进化和治理提供一定的理论基础。

Zn(Leu)SO_4·0.5H_2O在丙酮-水混合溶剂中的结晶动力学

确定了Zn(Leu)SO4 ·0 5H2 O在水 -丙酮中结晶生长的最佳体积比为 1∶5,用微量热法测定了该结晶生长过程在 2 98 15K时的放热量及产热速率,计算了动力学常数,认为结晶过程符合Burton Cabrera Grank位错理论.同时测定了Zn(Leu)SO4 ·0 5H2 O 2 98 15K时在纯水中的溶解焓为(3 17± 0 0 9)kJ·mol-1,计算了Zn(Leu)2 +(aq)的标准生成焓为( - 10 88 2 6± 4 2 8)kJ·mol-1.

LEU2基因敲除对工业啤酒酵母高级醇生成量的影响

通过敲除啤酒酵母中β-丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2),研究该基因对工业啤酒酵母高级醇特别是异戊醇生成量的影响。通过醋酸锂一步转化法,将一段两端具有LEU2基因序列同源区,中间为遗传霉素(G418)抗性基因的DNA片段转入酵母细胞中,与LEU2基因的ORF(open reading flames)进行同源重组,利用遗传霉素抗性进行筛选。将突变株与出发菌株进行发酵实验,测定其发酵性能和高级醇的生成量。筛选获得了LEU2基因突变的工业啤酒酵母。在支链氨基酸含量较低的培养基中进行发酵测定,突变株发酵液中高级醇含量比出发菌株降低了9.97%,其中异戊醇的含量降低了11.82%,而酒精度、发酵速度等发酵性能没有明显变化。LEU2基因敲除可降低工业啤酒酵母在支链氨基酸含量较低的培养基中高级醇特别是异戊醇的生成量。

N-Ac-L-Leu-PEI/微小RNA-34a复合物对大鼠颅骨缺损成骨的影响

目的:将N-Ac-L-Leu-PEI/微小RNA(microRNA,miR)-34a复合物用于大鼠颅骨缺损模型,探讨miR-34a对骨缺损区成骨的影响。方法:Wistar雄性大鼠32只,制备标准大鼠颅骨缺损模型,随机分为4组,分别于缺损区覆盖载有磷酸盐缓冲液(phosphate buffered salin,PBS)、N-Ac-L-Leu-PEI、N-Ac-L-LeuPEI/miR-34a复合物、N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34aNC复合物的口腔生物膜,饲养10周后处死大鼠,通过锥形束CT(cone beam computerized tomography,CBCT)、微型CT(microcomputed tomography,micro-CT)、反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)等方法检测大鼠颅骨缺损区新骨形成情况。结果:N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物组缺损区骨新生最为明显,新生骨量与总组织量之比(bone volume/total volum,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)值均高于其它组,成骨标志性基因Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、Osterix转录因子(serine protease 7,SP7)及Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,ColⅠ)的mRNA表达显著上调。结论:对实验性大鼠颅骨缺损模型,N-Ac-LLeu-PEI/miR-34a具有促进缺损区成骨的作用。

电沉积LEU UO_2靶件生产医用^(99)Mo的工艺研究

^(99)Mo是一种重要的医用放射性同位素。采用低浓铀(LEU)靶件生产裂变^(99)Mo是发展趋势。本工作进行了电沉积UO_2靶件制备、靶件溶解以及99Mo化学分离等工艺研究,确定了电沉积LEU UO_2靶件制备医用裂变99Mo的工艺流程。研究表明,于不锈钢管内壁上电沉积UO_2,在p H=7、电流0.5~2 m A/cm2、温度75~90℃、镀液中U浓度5 mg/mL条件下,经过约210 h电沉积,不锈钢管内壁上UO_2沉积层质量达到42 mg/cm^2;采用6 mol/L HNO_3溶解UO_2镀层。采用α-安息香肟沉淀法实现^(99)Mo与大量裂变产物的初步分离,采用阴离子交换法与活性炭色层法联用实现99Mo的纯化;纯化后的99Mo溶液中,杂质^(131)I、^(90)Sr、^(95)Zr、^(103)Ru、^(238)U活度与^(99)Mo活度比值分别为4.47×10^(-6)%、7.40×10^(-7)%、8.67×10^(-7)%、2.57×10^(-6)%、1.69×10^(-14)%,均小于《欧洲药典》规定值,满足医用要求。本工作建立了电沉积LEU UO_2靶件生产高纯医用裂变99Mo的工艺流程,为今后采用LEU技术生产医用裂变99Mo,进而实现其自主规模化生产打下了基础。

中国人Wilson病ATP7B基因Arg778Leu/Gln点突变与中医证型的相关性研究

目的 :探讨中国人Wilson病 (WD)ATP7B基因Arg778Leu/Gln点突变与中医证型的关系。方法 :应用PCR技术分别扩增 90例WD患者和 30名健康人ATP7B基因的第 8外显子 ,其PCR产物行限制性内切酶MspⅠ酶切分析。 90例WD患者进行中医辨证分型。结果 :90例WD患者有 34例Arg778Leu/Gln点突变 ;WD患者中医辨证分型属肝风内动者Arg778Leu/Gln点突变占 2 0例。 结论 :Arg778Leu/Gln点突变组患者的发病年龄迟于未见该点突变组的患者 。

Preproghrelin基因Leu72Met多态性与T2DM和DN的关系

目的探讨前促生长激素释放多肽原(Preproghrelin)基因Leu72Met多态性(C→A)与2型糖尿病(T2DM)及糖尿病肾病(DN)的关系。方法以上海地区汉族人群中的252例T2DM患者(T2DM组)和83名口服葡萄糖耐量试验(OGTT)正常的非糖尿病非肾病对照者(对照组)作为研究对象。根据尿白蛋白排泄率(AER),将T2DM患者分为三组:未合并DN组(DN0组,n=92),合并DN微量蛋白尿组(DN1组,n=91)和合并DN大量蛋白尿组(DN2组,n=69)。采用PCR-RFLP法,检测各组Pre-proghrelin基因外显子2的Leu72Met多态基因型,比较组间基因型、等位基因频率分布及临床变量间的差异。结果T2DM组与对照组Preproghrelin基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,两组间Leu72Met多态基因型(CC、CA、AA)频率及等位基因(C、A)频率比较均无显著差异(P>0.05)。DN0、DN1、DN2组间比较,CA+AA基因型及A等位基因频率虽无显著差异,但依DN0组、DN1组、DN2组顺序呈下降趋势(基因型频率:44.5%vs38.5%vs36.2%;A等位基因频率:24.5%vs19.8%vs18.1%)。根据基因型分组进行临床变量比较表明,AA基因型组的AER显著低于CA与CC基因型组(P=0.035,P=0.019);血清肌酐水平及24 h尿蛋白定量依CC、CA、AA基因型顺序呈下降趋势(P>0.05)。结论上海地区汉族人群中,Preproghrelin基因Leu72Met多态性与T2DM及DN无显著相关性,但AA基因型携带者的尿微量白蛋白较CA和AA基因型携带者显著下降。推测Leu72Met多态性(C→A)可能具有延缓T2DM微量蛋白尿继续加重的作用。

6个线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因突变糖尿病家系临床分析

目的 研究中国大连地区糖尿病 (DM)人群中线粒体 t RNALeu( UUR) 3 2 4 3位点 A→ G突变糖尿病的发病率及临床特点。 方法 按照 ADA (1997) / WHO(1999) DM诊断标准 ,采用 PCR-RFL P技术筛查了 62 9例 DM患者 ,并对其中无亲缘关系的基因诊断阳性者及其一级亲属进行了基因和临床分析。 结果 从 DM患者中共检出 6例基因突变先证者 ,从其一级亲属 16人中检出该基因突变者 12例 ,其中 6例为线粒体 DM,1例为 IGT。患者不肥胖 ,发病年龄轻。9例有母系遗传 ,11例存在不同的听力障碍 ,5例因口服降糖药继发性失效 ,最终需用胰岛素治疗。 结论 大连地区人群线粒体 32 4 3点突变检出率是 0 .95% ,此类 DM患者的临床特点是发病年龄轻、不胖、母系遗传、耳聋发生率和使用胰岛素比率高等。

GPx-1基因Pro198Leu多态与2型糖尿病及合并冠心病的关系

目的探讨谷胱苷肽过氧化物酶基因(GPx-1基因)Pro198Leu多态性与2型糖尿病(T2DM)及T2DM合并冠心病(CHD)的关系。方法以上海地区汉族人群中的198例T2DM患者和94名口服糖耐量试验(OGTT)正常的非DM对照者作为研究对象。其中T2DM组又分为无冠心病组(n=95)和冠心病组(n=103)。采用PCR扩增-直接测序法,分别检测各组GPx-1基因外显子2的Pro198Leu多态的基因型,并分析比较组间基因型、等位基因频率分布及临床变量间的差异。结果非DM对照组中,GPx-1基因Pro198Leu多态基因型以CC型、等位基因以C型为主,频率分布与文献报道中的瑞典人相比有显著差异(P=0.001);该多态基因型及等位基因频率分布,在无冠心病T2DM组与冠心病T2DM组间比较均无显著性差异(P>0.05);但与非DM对照组相比,T2DM组该多态CT基因型频率显著增加(P=0.012,OR=2.254)。结论上海地区汉族人群中,GPx-1基因Pro198Leu多态CT基因型个体发生T2DM的风险显著增加,但T等位基因并非T2DM发生冠心病的风险因素。

中文版FACT-Leu量表用于CML患者生活质量评估及影响因素分析

目的探讨白血病治疗功能评估量表(FACT-Leu)在中国慢性髓系白血病(CML)患者中的适用性,了解国内CML患者生活质量的现状及影响因素,为医疗、护理干预提高患者生活质量提供参考。方法选取2017年4-5月就诊于四川大学华西医院门诊的确诊为CML患者120例,采用FACT-Leu中文版和自制的生活质量影响因素问卷进行横断面调查,了解生活质量现状。结果共发放问卷120份,回收有效问卷111份,FACTLeu中文版的内在一致性系数Cronbach'sα为0.817,各维度分别为生理状况0.875,社会/家庭状况0.898,情感状况0.735,功能状况0.880,白血病专用条目0.864。不同性别、文化程度、医疗保险种类、自理能力、依从性(未遵医嘱服药次数)的CML患者,其生活质量差异有统计学意义(P<0.05)。其中,女性、生活无法完全自理、未遵医嘱服药次数较多、离异或丧偶是危险因素,城镇职工医疗保险或商业保险、文化程度较高是保护性因素。结论FACT-Leu量表中文版在中国CML患者的生活质量评价中具有良好的信度和适用性;我国CML患者生活质量与性别、文化程度、婚姻状况、服药依从性、生活自理能力有关,提示医疗护理中,应重视对CML患者服药依从性和自理能力的干预,以提高其生活质量。

海南地区人群中FⅩⅢ Val 34 Leu多态性的研究

目的:研究海南地区汉族人群、黎族人群、脑梗死患者、冠心病患者FⅧ val 34Leu分布特点。方法:用聚合酶链反应、限制性片段长度多态性分析及核苷酸顺序测定检测205名汉族正常人、236名黎族正常人、196例脑梗死患者、188例冠心病患者(心肌梗死/非心肌梗死,55/133)FⅩⅢA链 Val 34 Leu多态性。结果:汉族人群、黎族人群、脑梗死组未发现Val 34 Leu多态性,在冠心病组中发现1例Val 34 Leu杂合子。结论:FⅧ Val 34 Leu变异在中国人群中不是多态性,与缺血性心脑血管疾病没有关联,不是中国人群中防止动脉血栓性疾病的保护性因素。

Preproghrelin基因Leu72Met多态性与广州地区汉族人群2型糖尿病的相关性研究

目的:探讨Preproghrelin基因Leu72Met多态性与广州地区汉族人群2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法:以广州地区汉族人群中的95位非糖尿病的正常人(对照组)和102位2型糖尿病人(T2DM组)为研究对象,采用PCR扩增目的片段、限制性内切酶BseNⅠ酶切,Native-PAGE分离和银染分析,确定各组Preproghrelin基因Leu72Met多态基因型,比较分析各组间基因型、等位基因频率分布的差异。结果:对照组和T2DM组的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。在对照组95例样本中,CC68例、AC27例,AA0例;基因型频率分别为:0.716、0.284、0;在T2DM组102例样本中,CC71例、AC25例、AA6例,基因型频率分别为:0.696、0.245、0.059。组间基因型和等位基因频率差异无统计学意义。结论:Preproghrelin基因Leu72Met多态性与T2DM之间无显著的相关性。但在T2DM组中检测到AA基因型而对照组中未发现,提示等位基因A在T2DM发生中有某种作用,将进一步研究。

凝血因子XⅢ基因Val34Leu突变与脑出血神经功能的相关研究

目的 探讨凝血因子 XⅢ (FXⅢ )基因 Va134Leu突变与中国人群脑出血发病的相关关系。方法 利用等位基因特异性聚合酶链反应技术分析了 150例原发性脑出血病人和 150例非脑卒中对照组 FXⅢ基因的基因型位点频率。结果 在所研究的人群中发现了 4例 FXⅢ基因 Val34Leu突变的杂合子，全部位于脑出血组，没有发现突变型的纯合子。等位基因 Val34和 Leu34在所研究的中国人群中的频率分别是 99.3％和 0.7％。结论 FXⅢ基因 Val34Leu突变可能与中国人群的脑出血有潜在的关系。

降血压肽Val-Leu-Pro-Val-Pro在Caco-2细胞模型中的吸收机制

目的研究降血压肽Val-Leu-Pro-Val-Pro(VLPVP)在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法用体外培养的Caco-2细胞单层模型,考察时间、pH值、药物浓度、吸收抑制剂及促进剂对VLPVP吸收的影响。用HPLC法检测VLPVP的浓度。结果VLPVP在pH7.4时转运量最大,且与浓度和时间呈正相关。肽转运载体竞争性抑制剂Gly-Pro、arphamenine A和细胞内吞抑制剂氧化苯胂对VLPVP的转运没有显著的抑制作用,而旁路转运促进剂去氧胆酸钠、多药耐药蛋白抑制剂MK-571和能量抑制剂叠氮化钠对VLPVP从AP侧至BL侧的转运有非常显著的促进作用,而叠氮化钠和MK-571对VLPVP从BL侧至AP侧的转运无显著影响。结论VLPVP以旁路转运为主要方式被小肠上皮细胞吸收,并受到多药耐药蛋白MRP2强烈的外排作用。

广西壮族人群CYP1B1基因Leu432Val多态性与乳腺癌易感性的关系

目的探讨CYP1B1基因Leu432Val多态性与广西壮族妇女乳腺癌易感性的关系。方法采用人工修饰双等位基因特异性引物扩增法(diASA-AMP)技术对85例广西壮族女性乳腺癌患者和113例健康对照进行CYP1B1 Leu432Val基因分型,运用SPSS 15.0统计软件进行分析。结果 CYP1B1 Leu432Val G等位基因分布在对照组和乳腺癌组均较低,分别为12.4%和9.4%,两组均未检测到GG纯合子基因型。与对照组相比,乳腺癌两种等位基因(C和G)和两种基因型(CC和CG)分布频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论单纯CYP1B1Leu432Val基因型分布频率可能与广西壮族妇女乳腺癌易感性无明显关联。

配合物Zn(Leu)SO_4·0.5H_2O的合成与热行为(英文)

在水-丙酮溶液中制备了Zn(Leu)SO4·0.5H2O的配合物。通过热重和红外分析,研究了它的热分解机理,可分为三步完成。第一阶段配合物的脱水过程在60～180℃,形成Zn(Leu)SO4,第二阶段,Zn(Leu)SO4进一步分解为Zn(Leu)SO4·9ZnSO4,随后其在728℃完全分解为ZnO。在不同线性升温5.0,10.0,15.0,20.0K·min-1条件下,用两种积分法和三种微分法研究了题目化合物失去配体过程的非等温动力学,相应过程的表观活化能E为133.78kJ·mol-1,指前因子A为108.19s-1,配体失去过程为三维扩散机理控制,并建立了反应过程的动力学方程。

血硒、GPx酶活力与GPx-1基因Pro198Leu多态关联分析

目的 探讨谷胱苷肽过氧化物酶-1 （GPx-1）基因Pro198Leu多态性与血硒、GPx酶活力的关系.方法 抽取陕西低硒地区149人和正常对照212人共计361名为研究对象.采用2,3-二氨基奈荧光分光光度法测定全血硒、比色法测定GPx酶活力、PCR-RFLP方法检测GPx-1基因Pro198Leu多态的基因型,并进行相关分析.结果 血硒范围0.03～0.14 μg/ml,GPx-1酶活力范围47.8～173.7 U/g.Hb,GPx酶活力随血硒水平增高而增高,GPx酶活力和血硒之间存在线性正相关（r=0.752,P＜0.01）,GPx-1基因198位点多态性与血硒和GPx-1酶活力之间存在明显关联,硒水平和多态性频率之间存在剂量依赖负相关关系.

中国汉族人群Ghrelin基因Leu72Met多态性与2型糖尿病相关性Meta分析

目的探讨ghrelin基因Leu72Met(C408A)位点多态性与中国汉族2型糖尿病(T2DM)人群发病的关系。方法检索中国生物医学文献数据库、万方医学网,检索时间范围包括2013年5月之前的所有文献,分别检索到研究ghrelin基因Leu72Met位点多态性与中国汉族T2DM相关文献15篇。按纳入、排除标准选取病例,采用RevMan4.2.10分析其相关性。结果纳入研究文献5篇(涉及l 132例2型糖尿病患者和961名对照组)。Meta分析结果表明,中国汉族人群2型糖尿病与Leu72Met位点多态性相关:AA基因型与CA基因型和CC基因型合并后比较,固定效应模型OR=2.55,95%CI:1.07～6.11,P=0.03;AA基因型与CC基因型比较,固定效应模型OR=2.63,95%CI:1.09～6.30,P=0.03;等位基因A与C比较,固定效应模型OR=1.30,95%CI:1.06～1.60,P=0.01。结论 Ghrelin基因Leu72Met位点多态性与中国汉族人群2型糖尿病的发生发展可能有关。