同源盒LHX4基因在成年中枢神经组织的表达

通过MTEarray分析 72种人不同组织中LHX4基因mRNA的表达 ,发现LHX4基因不仅在胚胎的中枢神经系统表达 ,也在成年的中枢神经系统保持着低水平表达。通过原位杂交的方法发现LHX4基因在成年动物脊髓腹侧的运动神经元和大脑皮层特异性表达 ,提示该基因可能在成年中枢神经系统 ,特别是在脊髓运动神经元中发挥作用。

人同源框基因Lhx4 cDNA序列的获得,染色体定位和基因组分析

Lhx4基因是LIM同源框基因家族的一员 ,它在运动神经元的发育过程中发挥着重要的作用 .从人脊髓cDNA文库中筛选到了 1个人源性Lhx4基因的cDNA全长序列 ,它与鼠源性的Lhx4基因的cDNA序列有 92 %同源性 .它的基因被定位在 1号染色体 1q 2 4 .1- 1q 2 4 .3的位置 ,并包含有 6个外显子 .其中同源框结构域由外显子 4和 5表达 ,LIM结构域 1由外显子 2表达 ,LIM结构域2由外显子 3表达 .

中国4个牛品种LHX4基因的多态性及遗传效应

利用PCR-SSCP和DNA测序技术,对秦川牛、南阳牛、郏县红牛和中国荷斯坦牛(共计817个个体)的LHX4基因外显子5及其两侧部分内含子序列进行多态性分析,并结合南阳牛的生长指标,分析不同基因型的遗传效应。新发现3处单核苷酸突变位点,分别是NW_001493443:g.42757G>A、NW_001493443:g.42768A>G和NW_001493443:g.42917T>C,并因此形成AA、AB和BB 3种基因型。4个牛群体中,AA基因型的频率分别为0.766 2、0.771 70、.723 4和0.891 3。群体间的χ2检验结果揭示,不同牛品种的基因型频率差异不显著(P>0.05)。南阳牛群体中不同基因型个体与生长指标间的相关性分析结果显示,AA基因型个体的6月龄体质量显著大于其他基因型个体(P<0.05),暗示该位点有可能作为南阳牛生长性状辅助选择的标记之一。

同源盒基因Lhx4在PC12细胞缺氧损伤保护中的作用

目的:转染并筛选Lhx4高表达的PC12细胞株,观察Lhx4基因对PC12细胞的缺氧保护作用。方法:①用RT-PCR检测PC12细胞缺氧培养后Lhx4基因的表达变化;②Lhx4基因连接至pLX IN逆转录病毒载体,收集病毒上清,感染PC12细胞,G418筛选阳性克隆,PCR鉴定,所筛选的克隆缺氧培养;③通过台盼蓝染色和培养液中乳酸脱氢酶活性的检测评价PC12细胞的存活状态。结果和结论:PC12细胞缺氧培养4 h后Lhx4基因的表达明显上调;缺氧8 h后Lhx4基因表达开始下调。所筛选的Lhx4高表达转染细胞株表现出明显的缺氧耐受性,相同的损伤条件下,细胞的存活数目及生存状态明显优于对照组。说明Lhx4基因在PC12细胞的缺氧损伤保护中具有重要的作用。

LIM同源结构域转录因子LHX3与LHX4的研究进展

LIM同源结构域转录因子LHX3和LHX4在垂体发育和神经系统发育中起重要作用，在部分癌症、白血病、耳聋等疾病中也发挥一定的作用。编码这些调节蛋白的基因突变与人类和动物联合垂体激素缺乏症密切相关，神经系统缺陷、肿瘤、白血病、耳聋也与这些基因突变有关。分析这些疾病和LHX3、LHX4蛋白的生物学性质有助于更好地研究这些疾病的发病机制。该文就LHX3和LHX4的研究进展作一综述。

甲状腺干扰物 p, p'-DDE抑制Nthy-ori-3-1细胞LHX4和DIS3L蛋白表达

目的:观察甲状腺干扰物4,4-二氯二苯二氯乙烯(p,p’-DDE)处理甲状腺Nthy-ori-3-1细胞后,其LHX4和DIS3L mRNA水平及蛋白表达量的变化。方法:取对数生长期Nthy-ori-3-1细胞,配制0、0.5、1.0、2.0和5.0μg/ml p,p’-DDE溶液,按浓度梯度给药,处理Nthy-ori-3-1细胞。显微镜观察细胞生长状态、细胞形态。基因芯片检测基因表达谱变化,通过实时荧光定量PCR检测LHX4和DIS3L mRNA水平,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LHX4和DIS3L蛋白表达量。结果:p,p’-DDE浓度为0、0.5、1.0和2.0μg/ml时,Nthy-ori-3-1细胞均生长正常。2.0μg/ml组细胞差异基因共33个,其中,13个基因表达下调,20个基因表达上调。与对照组比较,1.0、2.0μg/ml组细胞LHX4、DIS3L蛋白表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),1.0μg/ml组细胞LHX4和DIS3L蛋白mRNA相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:p,p’-DDE处理Nthy-ori-3-1细胞会影响LHX4和DIS3L蛋白表达水平。

淫羊藿苷改善甲状腺功能减退模型大鼠的垂体发育

背景:甲状腺功能减退常伴随着垂体合成分泌激素分泌不足,有研究表明淫羊藿苷对甲状腺功能减退引起的垂体激素分泌不足有确切疗效,但其作用机制还不清楚。目的:探究淫羊藿苷对大鼠甲状腺功能减退后垂体合成分泌激素的影响及机制。方法:(1)40只新生雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组及75,150,300 mg/kg淫羊藿苷组,每组8只,后4组给予丙基硫氧嘧啶1.5 mg/(kg·d)灌胃处理构建甲状腺功能减退大鼠模型,各淫羊藿苷剂量组给予75,150,300 mg/kg淫羊藿苷干预治疗,检测各组miR-17-5p、LIM同源框4(LIM homeobox 4,LHX4)、PROP成对同源1蛋白(prop paired end homology 1 protein,PROP1)和HESX1表达,以及垂体合成分泌激素含量。(2)采用锂盐处理共培养的大鼠甲状腺细胞和垂体前叶细胞,给予不同浓度淫羊藿苷(10,30,50,70,100μmol/L)干预,CCK-8试剂盒检测垂体前叶细胞活力;ELISA试剂盒检测促卵泡激素、生长激素和促甲状腺激素水平;实时荧光定量PCR检测miR-17-5p表达;Western印迹法检测PROP1和HESX1蛋白水平;采用双荧光素报告酶基因和RNA结合蛋白免疫沉淀实验检测miR-17-5p和LHX4的结合关系。结果与结论:(1)体内实验结果显示,150 mg/kg淫羊藿苷组较模型组促甲状腺激素含量降低(P<0.05),生长激素(P<0.01)和促卵泡激素(P<0.05)含量显著升高;此外,150mg/kg淫羊藿苷组较模型组血清游离三碘甲状腺原氨酸、血清游离甲状腺素、血清三碘甲状腺原氨酸和血清甲状腺素激素分泌水平增加;(2)用50,70,100μmol/L淫羊藿苷干预能够增强大鼠垂体前叶细胞活力(P<0.01),其中70μmol/L淫羊藿苷干预效果最佳(P均<0.01);(3)淫羊藿苷处理抑制了锂盐处理的大鼠垂体前叶细胞中miR-17-5p表达增加,上调PROP1和HESX1表达(P均<0.05);(4)锂盐处理组细胞上清液中生长激素和促卵泡激素含量明显降低,促甲状腺激素含量增加,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.01);(5)用不同浓度淫羊藿苷干预细胞后,生长激素和促卵泡激素含量增加(P<0.01),促甲状腺激素水平明显降低(P<0.05),70μmol/L时干预效果最佳(P<0.01);(6)与对照组相比,转染miR-17-5p mimic抑制锂盐处理的大鼠垂体前叶细胞活力(P<0.05),下调细胞中PROP1和HESX1的蛋白表达,增加促甲状腺激素含量(P<0.05),减少生长激素和促卵泡激素含量(P均<0.01),而转染miR-17-5p inhibitor与转染miR-17-5p mimic的作用相反;(7)LHX4是miR-17-5p的靶基因,过表达LHX4增加细胞活力,促进PROP1和HESX1蛋白表达(P均<0.01),减少促甲状腺激素含量(P<0.05),增加生长激素和促卵泡激素含量(P<0.01);(8)提示淫羊藿苷可能通过miR-17-5p/LHX4轴恢复失调的垂体合成分泌激素水平。

垂体柄阻断综合征的病因分析及诊疗进展

垂体柄阻断综合征（PSIS）的病因和发病机制目前尚不明确。近来研究表明，有遗传因素参与PSIS的发生、发展，尤以HESX1、LHX4基因缺陷最为密切。PSIS的临床表现复杂多样，随不同年龄及不同垂体激素缺乏而表现各异。早期诊治对患者激素缺乏症状的改善至关重要，MRI是唯一能明确此病诊断的影像学方法，胰岛素样生长因子及其结合蛋白3可与MRI联合提高对PSIS的诊断率。