龙牙百合鳞茎生长点石蜡切片技术改良研究

为了准确观测龙牙百合鳞茎生长点的生长分化过程,以龙牙百合冷藏期间的鳞茎为试验材料,在传统石蜡制片法的基础上,对脱水、透明等步骤进行优化并筛选了最佳的甲苯胺蓝染色方法。试验获得的百合鳞茎生长点石蜡切片制作改良方法为:将百合鳞茎剥开鳞片至可观察到茎尖生长点,修整为5mm大小的立方体投入FAA固定液中,保存一周;用85%乙醇(2 h)、95%乙醇(2h)、100%乙醇(3h)进行脱水处理,再用二甲苯与乙醇等比例溶液(2h)、纯二甲苯(3h)进行透明处理;将透明好的材料放入石蜡+二甲苯溶液(体积比2∶3)中,在37℃的恒温箱中浸蜡2d,期间多次少量加入石蜡;之后在60℃恒温箱更换纯石蜡2次,每次4 h,浸蜡后的材料在60℃的操作台上包埋,再切成厚10μm的薄片,待蜡片完全伸展,将蜡片粘于均匀涂抹了赫伯特粘片剂的载玻片上,37℃烤片5h,脱蜡复水后用1%甲苯胺蓝染液稀释150倍染色3min。

秦岭野百合鳞片植株再生体系的建立

以鳞片为外植体,建立了秦岭野百合(LiliumbrowniiF.E.Brown)植株再生体系。结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,最适继代培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,幼苗根诱导的最适培养基为1/2MS+IBA0.3mg·L-1。随着培养时间的延长,生根率会不断提高,培养到30d,生根率可达100%。

野百合试管鳞茎诱导与增殖的研究

以贵州野百合鳞片不同部位为外植体,用3%次氯酸钠进行消毒,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明,用3%次氯酸钠对野百合鳞茎进行外植体进行消毒完全可行,且对操作人员,实验材料和环境都不存在不良影响,价格低廉;最佳的诱导培养基为MS＋6-BA1.5mg/L＋NAA0.3mg/L;最适合的外植体为百合鳞片基部。用相同的培养基进行增殖培养,25d后,可获得繁殖系数高、生长势好、并有新根生成的试管鳞茎;将直径为1～2cm的试管鳞茎移栽培养,成活率高于90%。该研究得出的方法可在短时间内提供大量的贵州野百合种苗。

龙牙百合鳞球增重及生根培养研究

为获得龙牙百合高品质的鳞球种球,加快组培快繁进程,以龙牙百合小鳞芽为试材,通过组织培养的方法进行了鳞球增重及生根培养研究.结果表明,诱导龙牙百合小鳞芽生长发育成鳞球的最适培养基为MS+IAA1.0mg/L;龙牙百合鳞球增重的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,培养基蔗糖质量分数影响鳞球的增重,适当提高蔗糖质量分数对鳞球的增重有促进作用,以5%效果最好;鳞球生根的最适培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L.

龙牙百合增殖培养及鳞茎生长发育研究

以龙牙百合为材料,筛选适宜的增殖培养基,并研究根块茎膨大将军和芸苔素内酯(BR)对其鳞茎膨大发育的影响。结果表明:龙牙百合丛生芽在培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L中的增殖系数明显高于其他配方,达到7.3,地上部长势表现良好。以1/2MS+IBA 0.27 mg/L+NAA 0.3 mg/L+IAA 0.3 mg/L+6%蔗糖为基本培养基,龙牙百合丛生芽在加入1.0 ml/L BR的处理中生长最好,全株重量和鳞茎重量均最高,达到1.65 g/株和1.33 g/个,高于对照和其他处理。2.0 g/L根块茎膨大将军和1.0 mL/L BR喷施龙牙百合幼苗后,鳞茎鲜重分别为14.65 g/个和14.91 g/个,是对照的108.8%和110.7%,氨基酸含量分别是对照的108.0%和108.5%,蛋白质含量分别是对照的114.4%和113.0%。龙牙百合最适宜的增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L,2.0 g/L根块茎膨大将军和1.0 mL/L BR喷施能提高鳞茎产量及氨基酸和蛋白质含量。

野百合鳞茎芽的诱导和增殖的初步研究

以野生百合的鳞茎为外植体,研究鳞茎的最佳消毒时间、诱导鳞茎芽的最佳部位、影响鳞茎芽诱导的最佳激素组合以及不同激素对鳞茎芽增殖的影响。结果表明:用75%酒精30 s+0.1%HgCl25 min消毒效果最好。鳞茎芽的诱导能力依次是:内层>中层>外层;基部>中部>上部。MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L对鳞茎芽的诱导比较好,MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.05 mg/L对鳞茎芽的增殖比较好。

百合珠芽与鳞茎营养成分及活性成分研究

对百合珠芽及鳞茎的营养成分及活性成分进行了分析和比较。采用国标法对百合珠芽及鳞茎的营养成分进行了分析;采用比色法对百合珠芽及鳞茎的活性成分进行了分析。基本营养成分分析表明,与百合鳞茎相比,百合珠芽中粗纤维和粗脂肪含量具有显著性差异(P<0.05),粗脂肪含量低,粗纤维含量高,总糖、粗蛋白和灰分含量无显著性差异;元素分析结果表明,百合珠芽和鳞茎富含多种营养元素,其中钾含量较高,分别为1 943.52 mg/100g(DW)和2 026.15 mg/100g(DW);氨基酸分析表明,百合珠芽及鳞茎中氨基酸组成基本一致,脯氨酸含量最高,分别为2 260 mg/100g(DW)和2 010 mg/100g(DW);活性成分分析结果表明,与百合鳞茎相比,百合珠芽中总酚、总黄酮、生物碱及皂苷含量具有显著性差异(P<0.05),珠芽中总酚、总黄酮及皂苷含量高,生物碱含量低,珠芽及鳞茎中总酚含量分别为1 025.86 mg/100g(DW)和875.52 mg/100g(DW)。百合珠芽和鳞茎皆营养丰富,从资源开发利用与营养学角度分析,百合珠芽具有重要的开发价值与应用前景。

百合皂苷的提取分离与结构初步鉴定

以百合鳞茎为原料 ,采用乙醇抽提 ,一系列液 液萃取、AB 8大孔吸附树脂分离、乙醚丙酮分步沉淀与HPLC等多种分离方法 ,以电喷雾质谱 (ESI MS)为手段筛选出了两种甾体皂苷 ,并通过化学与光谱手段对其结构进行了初步鉴定。

梵净山野百合组织培养研究

以梵净山野百合鳞片为外植体,比较了不同激素种类及浓度对愈伤组织和不定芽诱导的影响,旨在建立野百合鳞片组织培养再生体系。结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L,最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L。

液相色谱-电喷雾电离质谱与电子轰击质谱联用筛选百合中的甾体皂甙

利用高效液相色谱 电喷雾电离质谱联用仪 (HPLC/ESI MS)、电子轰击质谱 (EI MS)和半制备型高效液相色谱 ,从卷丹百合中筛选出了两种甾体皂甙 ,其中一种为含有 3个糖基与提果皂甙元的甾体皂甙 ,另一种为含有 3个糖基和薯蓣皂甙元的甾体皂甙。结果表明 :在线的HPLC/ESI MS能够准确快速地提供糖甙类化合物的分子质量和糖链部分的有益信息 ,但对甙元部分提供的信息极少 ;离线的EI MS只需极少量 (1mg～ 2mg)的纯品就能准确地提供甙元部分的有益信息 ,但很难获得糖甙的分子离子峰与糖链部分的信息 ,两者有机地结合起来能快速地从植物中筛选甾体皂甙。

龙牙百合脱毒种球培育的施肥效应

为了提高龙牙百合种球培育效率,以脱毒组培移栽成活苗为培育对象,分析了培育周期、施肥方法、肥料配比对种球质量的影响。结果表明,龙牙百合种球培育周期越长,平均种球鲜质量、小区产量及达标率越高,生产中培育时间不短于8个月,20 g以上种球达标率达65.50%以上,同时在冷凉季节定植能提高成活率;相同施肥量,采用基肥和追肥结合能够促进种球生长,在施基肥的基础上,2次以上追肥平均种球鲜质量达21.00 g以上,种球667 m^2产量可达427.42 kg,种球达标率达75.20%;不同N、P、K配比对种球生长影响不同,磷肥对种球鲜质量、产量形成影响最大,其次为氮肥,钾肥的影响最小;氮肥能促进达标率的提高,其次为钾肥,磷肥的影响最小。因此,丘陵地区培育龙牙百合种球时应加大肥料的使用量,增加氮肥、磷肥能够提高产量,促进种球达标率,培育周期不短于8个月,结合基肥及2次以上的追肥,可以实现高效培育脱毒种球。

龙牙百合生根·结鳞茎培养基的优化

[目的]提高龙牙百合组培苗移栽成活率,为龙牙百合种苗工厂化生产提供理论支持和技术指导。[方法]应用311-A最优混合设计法设计试验方案,研究不同浓度NAA、IBA和IAA对龙牙百合生根、结鳞茎的影响,用Excel制图,最后应用Qbasic寻优,获取其最佳培养基。[结果]龙牙百合无菌芽结鳞茎的最佳方案为NAA 0.30 mg/L+IBA 0.24 mg/L+IAA 0.24 mg/L;生根最佳方案为NAA 0.36mg/L+IBA 0.30 mg/L+IAA 0.36 mg/L。综合考虑,龙牙百合生根、结鳞茎的最佳培养基为NAA 0.33 mg/L+IBA 0.27 mg/L+IAA0.30 mg/L。经过验证,在最佳方案下,龙牙百合无菌芽结鳞茎数和生根数分别为48.0个/处理和18.67条/株。[结论]优化了龙牙百合生根、结鳞茎的培养基。

2种百合科植物离体鳞茎诱导

以大百合(Cardiocrinum giganteum)和龙牙百合(Lilium brownii)作为实验材料,采用组织培养技术,研究不同鳞片部位、激素组合和培养基类型对其鳞茎诱导的影响,以探究2种植物最佳的鳞茎诱导方案。结果表明:大百合作为外植体的最佳材料来源为中层鳞片的近鳞茎盘部位,最佳诱导培养基为:MS+BA 5.0mg/L+NAA 0.1 mg/L+ZT 0.08 mg/L;龙牙百合作为外植体的最佳材料来源为中层鳞片,最佳诱导培养基为改良MS+BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ZT 0.01 mg/L。

饱和D-最优设计在龙牙百合小鳞茎诱导中的应用

为探讨龙牙百合小鳞茎诱导的最优培养基,以龙牙百合鳞茎上不同部位鳞片为外植体,以MS为基本培养基,采用饱和D-最优设计对不同激素水平(6-BA,NAA)培养基方案进行设计,应用统计分析软件进行分析寻优,并对寻优结果进行验证。结果表明,鳞茎中部和中部稍偏外部鳞片的下段是适宜小鳞茎诱导的外植体;6-BA对小鳞茎诱导的影响大于NAA,诱导小鳞茎数计算方程为y=159.73±2.447×8.28,小鳞茎数为139.44～180.02个;MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.5mg/L为鳞片诱导小鳞茎的最佳培养基,诱导的小鳞茎数为152.0个。

从进口百合种球中检出咖啡短体线虫和拉特格斯拟滑刃线虫

在荷兰进口的百合种球上检测出咖啡短体线虫Pratylenchuscoffeae和拉特格斯拟滑刃线虫Aphelenchoidesrut gersi,并对其进行描述。

水杨酸在观赏百合试管培养中对鳞茎形成的影响

本文探讨了水杨酸在观赏百合试管培养中对鳞茎形成的影响,研究结果表明:当SA在0.05-1.0mg/L的浓度范围内,能显著提高试管鳞茎的数量.在培养基中加入SA,对百合鳞茎的膨大无明显作用,但具有调节试管鳞茎同期发育的作用.

万载龙牙百合开花生物学特性研究

[目的]探讨万载龙牙百合开花、传粉等生物学特性。[方法]以万载龙牙百合为试材,对其种球重量与开花数量、花期关系,以及开花动态、开花期间花粉生活力和传粉媒介等生物学特性进行了初步研究。[结果]种球重量在一定范围内与花朵数呈正相关;单花花期8~9 d,花粉在整个花期均具有活力;中片品系与柳片品系现蕾-开花时间差异显著;研究地的龙牙百合的访花昆虫主要是菜粉蝶、蜜蜂、蝇类和蚂蚁等,龙牙百合以虫媒传粉为主。[结论]该研究为龙牙百合杂交育种提供科学依据。

高海拔地区百合鳞茎重复开花生长指标的比较

海拔1 000 m左右的亚高山年极端温度少、昼夜温差大、夏季冷凉,适合百合鳞茎生长,尤其是对剪切花后的种球复壮培育非常有利。对连续两年开花的3个百合品种各生长、开花指标的比较可见,百合植株高、茎粗、花径大小等指标在第2次开花时均未降低,且部分指标有所增长,没有出现明显退化,生产百合二茬花是完全可行的,由此可大幅度降低百合种球成本。

百合鳞片组织培养研究

目的:建立百合鳞片组织培养的繁殖技术。方法:研究不同培养基对百合增殖的影响,不同浓度的激素组合对百合鳞片不定芽的诱导、芽的增殖、壮苗和生根的影响。结果:MS培养基为百合最适增殖培养基;最佳诱芽培养基为MS+1.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.5 mg/Lα-萘乙酸(NAA),诱导率为62%,苗长势良好;最适增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖倍数最高达3.90,苗健壮,长势良好,叶色浓绿;最佳壮苗培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L赤霉酸(GA3);最佳生根培养基为MS+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA),平均生根数达4.17。结论:获得了百合鳞片组织培养的最佳培养条件,为百合的资源保护和利用提供了参考依据。

百合鳞茎不定芽诱导与增殖配方优化

以百合‘辛普隆’(‘Simplon’)和‘黄色风暴’(Lilium‘Yelloween’)的鳞茎为材料,MS为基本培养基,在(25±2)℃,暗培养下,采用正交试验设计方法研究百合鳞茎不定芽的诱导与增殖。结果表明:①NAA 0.2 mg·L-1有利于‘辛普隆’鳞茎诱导,诱导率80.21%,平均诱导鳞茎2.86个;②NAA 0.4 mg·L-1有利于‘黄色风暴’鳞茎诱导,诱导率46.41%,平均诱导鳞茎2.40个;③蔗糖是影响‘辛普隆’鳞茎增殖主要因子,6-BA是影响‘黄色风暴’鳞茎增殖的主要因子;④MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ad 5 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1组合有利于‘辛普隆’鳞茎增殖,增殖率2.22;MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ad 10.0 mg·L-1+蔗糖40 g·L-1有利于‘黄色风暴’鳞茎增殖,增殖率4.5。