中药巴豆经炮制与发酵后毒性效应的比较

通过观察巴豆的生种仁、灭菌种仁、生全果实、灭菌全果实及其巴豆壳、巴豆霜、巴豆灵芝菌和白僵菌发酵品(以下分别被称为"灵巴菌质"和"白巴菌质")的急性毒性及致炎、溶血作用,比较传统炮制法与固体发酵法对中药巴豆毒性效应的影响。小鼠一次或一日多次灌胃给药后,半数致死剂量(LD50)按由大到小顺序依次为:灵巴菌质1.541 g/kg,白巴菌质1.495 g/kg,灭菌全果实0.894 g/kg,巴豆霜0.787 g/kg,灭菌种仁0.728 g/kg,生全果实0.38 g/kg,生种仁0.308 g/kg;巴豆壳属于低毒,8 h内二次给药的最大给药量为12.5 g/kg。将醚提取物外涂于小鼠耳壳上,生种仁、灭菌种仁、生全果实、灭菌全果实、巴豆霜具有明显的致小鼠耳壳肿胀(炎症)作用;而巴豆壳、灵巴菌质和白巴菌质没有此作用。将生理盐水提取物作用于2%红细胞混悬液,生种仁、生全果实具有明显的溶血作用,灭菌种仁、灭菌全果实、巴豆霜、巴豆壳、灵巴菌质和白巴菌质则没有此作用。以上结果提示:中药巴豆经炮制和发酵处理后均可使之毒性下降,但发酵品毒性更低。

发酵时间对灵巴菌质毒性成分含量的影响

[目的]考察发酵时间对灵巴菌质中毒性成分总蛋白含量和脂肪油及主要成分含量的影响,为灵巴菌质的制备工艺提供科学依据。[方法]取发酵至第01、2、16、202、32、6、29、32天的灵巴菌质,采用经典的重量分析法和考马斯亮蓝G-250染色法分别测定其脂肪油和总蛋白的含量;所得脂肪油经甲酯化进一步利用GC-MS联用仪对其化学成分进行分析,并用面积归一化法计算各成分的百分含量。[结果]随着发酵时间的延长,灵巴菌质中毒性成分脂肪油和总蛋白含量整体呈现下降的趋势。总蛋白在第12至32天、脂肪油在第23至32天分别下降到最低水平,并保持相对平稳状态。通过GC-MS分析,脂肪油在整个发酵过程中共分离和鉴定出42种成分,其中相对含量在1.0%以上的11种成分至发酵第32天时,有6种成分与发酵刚开始(第0天)时相比含量有所增加,有5种成分则有所减少,且至少产生了8种新物质。[结论]灵巴菌质的最佳发酵时间约为23至26 d。

灵芝-巴豆双向发酵品工艺优化及其抗氧化活性研究

目的:采用Box-Behnken效应面法优化灵芝-巴豆双向发酵制备腺苷的最优参数,同时探究巴豆发酵品“灵巴菌质”的抗氧化活性。方法:通过单因素实验和Plackett-Burman实验选择对腺苷产量有显著影响的因素。此外,通过Box-Behnken实验设计,以腺苷含量为指标,研究并优化了灵芝发酵过程中初始含水量、接种量、发酵时间和初始发酵pH值之间的相互作用;通过还原力能力、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力对“灵巴菌质”进行抗氧化评价。结果:“灵巴菌质”制备的最佳工艺条件为:初始含水量为80%,接种量为0.25 mg/g,发酵时间为27 d,发酵pH5,此时的腺苷的含量为2.07 mg/g。抗氧化结果表明,“灵巴菌质”水提物和醇提物均具有不同程度的还原力和对DPPH自由基、羟自由基的清除作用,水提物的抗氧化略强一些;二者的抗氧化能力均大于巴豆水提物和醇提物。结论:本研究建立的模型可对“灵巴菌质”中腺苷含量进行分析和预测,为巴豆资源的开发和利用提供依据。