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凡纳滨对虾G蛋白Gα_s基因的克隆和功能鉴定 被引量:3
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作者 金利华 骆晶晶 +2 位作者 邹海鹰 林圣彩 叶志云 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期409-414,共6页
寻找并克隆凡纳滨对虾G蛋白α亚基基因,为对虾的生理调控研究提供理论基础.通过简并PCR和RACE技术获得目的基因的全长cDNA序列.将该基因的编码序列克隆到pCMV5表达载体,通过免疫共沉淀实验和胞内cAMP浓度的测定鉴定该基因表达产物的功能... 寻找并克隆凡纳滨对虾G蛋白α亚基基因,为对虾的生理调控研究提供理论基础.通过简并PCR和RACE技术获得目的基因的全长cDNA序列.将该基因的编码序列克隆到pCMV5表达载体,通过免疫共沉淀实验和胞内cAMP浓度的测定鉴定该基因表达产物的功能.用半定量RT-PCR和Western blotting确定该基因的表达产物在对虾身体各部位的分布.克隆到凡纳滨对虾的G蛋白短式剪切模式Gαs亚基基因,将其表达产物命名为pvGαs-s.pvGαs-s的序列和功能与其它物种的Gαs具有高度保守性.它在对虾身体各部位存在普遍分布,尤其在脑神经和腮中大量表达,在触角、眼等部位也有适量分布.说明pvGαs-s在对虾生命活动中的重要性,为研究对虾的生理调控奠定了理论基础. 展开更多
关键词 G蛋白 克隆 凡纳滨对虾
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Characterization and in-vivo evaluation of potential probiotics of the bacterial flora within the water column of a healthy shrimp larviculture system 被引量:12
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作者 薛明 梁华芳 +1 位作者 何瑶瑶 温崇庆 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2016年第3期484-491,共8页
A thorough understanding of the normal bacterial flora associated with shrimp larviculture systems contributes to probiotic screening and disease control. The bacterial community of the water column over a commercial ... A thorough understanding of the normal bacterial flora associated with shrimp larviculture systems contributes to probiotic screening and disease control. The bacterial community of the water column over a commercial Litopenaeus vannamei larval rearing run was characterized with both culture-dependent and culture-independent methods. A total of 27 phylotypes at the species level were isolated and identified based on 16S rDNA sequence analysis. Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) analysis of the V3-V5 region of 16S rRNA genes showed a dynamic bacterial community with major changes occurred from stages zoea to mysis during the rearing run. The sequences retrieved were affiliated to four phyla, Proteobacteria, Actinobacteria, Bacteroidetes, and Firmicutes, with the family Rhodobacteraceae being the most frequently recovered one. Subsequently, 13 representative strains conferred higher larval survival than the control when evaluated in the in-vivo experiments; in particular, three candidates, assigned to Phaeobacter sp., Arthrobacter sp., and Microbacteriurn sp., significantly improved larval survival (P〈0.05). Therefore, the healthy shrimp larviculture system harbored a diverse and favorable bacterial flora, which contribute to larval development and are of great importance in exploiting novel probiotics. 展开更多
关键词 Bacterial flora Litopenaeus vannamei LARVICULTURE PROBIOTICs 16s rRNA gene
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跑道式南美白对虾养殖池中弧菌的数量动态 被引量:4
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作者 阎冰 廖思明 +1 位作者 陈剑锋 兰国宝 《水产科学》 CAS 北大核心 2005年第11期10-12,共3页
采用TCBS平板计数法对南美白对虾跑道式养殖池和土塘养殖塘水样弧菌数量进行了一个养殖周期的连续监测.结果表明:跑道式养殖池水体中弧菌数在放苗后的前70 d均较低,随后迅速增加并维持在一个较高水平,变化幅度为15.0~1.42×104 cfu... 采用TCBS平板计数法对南美白对虾跑道式养殖池和土塘养殖塘水样弧菌数量进行了一个养殖周期的连续监测.结果表明:跑道式养殖池水体中弧菌数在放苗后的前70 d均较低,随后迅速增加并维持在一个较高水平,变化幅度为15.0~1.42×104 cfu/ml,平均3.96×103 cfu/ml,平均数比土塘高2倍.跑道式养殖对虾始终未发病,跑道式养虾病害少,产量高. 展开更多
关键词 南美白对虾 跑道式养殖 弧菌
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南美白对虾养殖系统中弧菌为主的致病菌群的分子比较 被引量:5
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作者 张洪沂 赵勇 +1 位作者 戴习林 潘迎捷 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第B06期257-262,共6页
弧菌是最常见、最重要的细菌性病原菌,采用16 S rDNA克隆文库法对南美白对虾(Litopenaeus vannarnei)养殖系统中水体和底泥的弧菌为主的致病群落的组成进行分析研究。从水体和底泥16 S rDNA克隆文库中各随机挑选55个克隆子进行测序(约11... 弧菌是最常见、最重要的细菌性病原菌,采用16 S rDNA克隆文库法对南美白对虾(Litopenaeus vannarnei)养殖系统中水体和底泥的弧菌为主的致病群落的组成进行分析研究。从水体和底泥16 S rDNA克隆文库中各随机挑选55个克隆子进行测序(约114 bp),对测序结果进行了BLAST比对。结果表明:水体样品有16个OTU,主要Vibrio(弧菌,33.3%)、Chloroflexi(绿屈挠菌,18.5%)和Pantoea(泛菌属菌,7.41%);底泥样品有14个OTU,主要是Vibrio(弧菌,50.0%)和Chloroflexi(绿屈挠菌,13.6%);2个文库比较来看,proteobacterium(变形细菌)仅在水体样品中,Aeromonas(气单胞菌)仅在底泥样品中。用MEGA 4从测序的克隆子中选出30个OTU进行系统发育分析。 展开更多
关键词 南美白对虾 16srDNA克隆文库 弧菌属
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凡纳滨对虾DNaseⅠ基因的克隆及原核表达
5
作者 兰旺仁 张子平 +2 位作者 邹志华 王国栋 王艺磊 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期8-17,共10页
利用RT-PCR和RACE技术,从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺中克隆了DNaseⅠ基因的全长cDNA序列。该序列全长1614bp,包含1209bp的开放阅读框,编码一个含403个氨基酸的蛋白;5′非翻译区为116bp,3′非翻译区为289bp。实时定量PCR分... 利用RT-PCR和RACE技术,从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺中克隆了DNaseⅠ基因的全长cDNA序列。该序列全长1614bp,包含1209bp的开放阅读框,编码一个含403个氨基酸的蛋白;5′非翻译区为116bp,3′非翻译区为289bp。实时定量PCR分析结果表明,DNaseⅠ基因在肝胰腺的表达量是其他器官表达量的16~162倍,表明凡纳滨对虾DNaseⅠ基因属于胰腺型表达。本研究还利用酶切重组构建原核表达载体,并在大肠杆菌(Escherichia coli)中成功表达出了有活性的重组DNaseⅠ蛋白。 展开更多
关键词 DNaseⅠ RACE 原核表达 凡纳滨对虾
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