核受体LXRα在HBV阳性肝硬化及原发性肝癌组织中的表达及意义

目的检测肝脏X受体(Liver X receptor alpha,LXRα)在HBV阳性肝硬化组织及原发性肝癌中的表达情况及临床意义。方法收集20例揭阳市人民医院及汕头大学医学院第一附属医院手术切除的HBV阳性肝硬化原发性肝癌组织标本,应用免疫组化染色检测LXRα表达。Huh7细胞中分别过表达小鼠mLXRα,及共过表达HBx(HBV X protein)和mLXRα,并检测mLXRα及HBx对内源性LXRα信号通路下游靶基因SREBP-1(Sterol regulatory element-binding protein 1)的影响;双荧光素酶报告系统检测人肝癌Huh7细胞中HBx对LXRα转录活性的影响。结果 LXRα在肝硬化组织中阳性表达率为95%,高于癌组织的25%。HBx上调SREBP-1的表达可能与HBx调控LXRα的转录活性有关。结论 HBx通过调节癌前高表达的LXRα的转录活性,并影响其信号通路可能与HCC发生相关。

鸭LXRα基因cDNA的克隆及序列分析

为鸭肝X受体α(LXRα)基因表达、结构功能及其在鸭脂代谢信号传导中的相关研究奠定基础资料,以兴义鸭肝脏组织总RNA为模板,采用RT-PCR法对LXRα基因进行扩增测序,分析其序列特征。结果表明:鸭LXRα基因扩增产物克隆拼接的cDNA序列全长为1 412 bp(GenBank登录号:FJ966078),编码区(CDS)长1 230 bp,包含起始密码子ATG和终止密码子TGA,编码409个氨基酸残基的LXRα锌指蛋白,含有17个磷酸化位点、3个糖基化位点、2个锌指结构(P-box和D-box)和1个配体结合区(LBD),无跨膜螺旋结构,表现出典型的核激素受体超家族的结构特征。鸭LXRα蛋白与哺乳动物和鱼类的LXRα蛋白的同源性为73%～76%,与禽类的同源性高达97%左右,说明LXRα基因在系统进化过程中具有很高的保守性。

SOCS3、LXRα、PLGF在妊娠高血压合并子痫前期中变化及其预测价值

目的:探讨细胞因子信号转导负调控因子3(SOCS3)、肝X受体α(LXRα)、血管胎盘生长因子(PLGF)在妊娠高血压合并子痫前期中变化及其预测价值。方法:前瞻性选取本院2016年1月—2019年12月收治的120例妊娠高血压合并子痫前期患者作为病例组,118例正常妊娠者为对照组,酶联免疫吸附法测定两组患者血清SOCS3、LXRα、PLGF表水平,采用logistic回归模型结合受试者工作特征曲线(ROC)评价各指标对妊娠高血压合并子痫前期诊断价值。结果:病例组血清SOCS3、PLGF水平低于对照组,LXRα高于对照组(P<0.001)。ROC曲线分析显示,截断值时分别为SOCS30.32ng/L、LXRα178.26ng/L、PLGF 41.56pg/ml时诊断子痫前期有一定诊断价值,而3指标联合检测可提高诊断效能(P<0.05),其诊断灵敏度81.7%、特异度70.3%,约登指数0.520,ROC曲线下面积为0.895(95%CI:0.811~0.947)。结论:妊娠高血压合并子痫前期患者血清LXRα表达异常升高,PLGF、SOCS3异常降低,3项指标联合检测诊断效能较好。

大黄素诱导癌细胞凋亡和抑制视黄醇X受体的转录激活功能

大黄素(emodin)对多种肿瘤细胞有较强的抑制增殖和诱导凋亡的作用,但其作用机制尚不清楚。本研究通过配体-受体竞争结合实验以及报告基因检测了大黄素对维甲酸X受体(retinoid X receptor alpha,RXRα)的结合和转录活性的调控,并研究了大黄素对肺癌细胞H460和肝癌细胞SMMC-7721生长和凋亡的作用。结果发现,大黄素对两种癌细胞有很强的抑制增殖作用,加入RXRα的天然配体9-顺式视黄酸(9-cis-retinoid acid,9-cis-RA)共同处理可显著缓解这种抑制作用。大黄素能浓度依赖地引起两种癌细胞系的凋亡,使细胞核出现碎裂和染色质浓染。报告基因实验发现大黄素对RXRα同源和异源二聚体的转录激活有显著抑制作用。体外的配体竞争结合实验发现,大黄素不直接结合RXRα的配体结合区。蛋白质免疫印迹实验发现,大黄素不影响RXRα的蛋白表达。结果提示,大黄素具有诱导肺癌细胞H460和肝癌细胞SMMC-7721凋亡和抑制细胞生长的作用,大黄素抑制9-cis-RA对RXR转录激活作用以及9-cis-RA具有一定程度拮抗大黄素对肺癌细胞H460和肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用,提示大黄素的抗癌作用可能与细胞内RXR的功能有关,并以RXR转录非依赖性的方式起作用。配体竞争结合实验结果提示大黄素可能间接作用于RXR。

肺炎衣原体抑制LXRα-ABCA1途径促进巨噬细胞脂质蓄积

为探讨肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)途径在肺炎衣原体(C.pneumoniae)促巨噬细胞脂质蓄积中的作用和机制,以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为模型,采用高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,RT-PCR检测ABCA1和LXRαm RNA的表达,蛋白质印迹检测ABCA1和LXRα的蛋白质表达;使用LXRα的特异性激动剂T0901317对细胞进行预处理,再观察上述指标的变化.结果显示,C.pneumoniae可促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量增加,抑制胆固醇外流,降低细胞ABCA1和LXRα的表达;使用ABCA1激动剂8-溴-环磷酸腺苷预处理细胞或LXR激动剂T0901317预处理细胞后,可明显减弱C.pneumoniae对THP-1细胞ABCA1的表达抑制,促进细胞胆固醇流出,降低细胞内胆固醇的含量.结果提示,C.pneumoniae促进巨噬细胞脂质蓄积及胆固醇流出障碍,其机制可能与LXRα-ABCA1途径有关.

苦瓜蛋白通过肝X受体α上调三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达

目的观察苦瓜蛋白对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)及肝X受体α(LXRα)表达的变化和细胞内胆固醇流出的影响,探讨苦瓜蛋白抗动脉粥样硬化的机制。方法加入50 mg/L的ox-LDL共同孵育细胞24 h,诱导THP-1单核巨噬细胞成泡沫细胞。分别加入0、0.5、1.5、4.5 mg/ml苦瓜蛋白或4.5 mg/ml苦瓜蛋白处理THP-1细胞0、3、6、12、24 h,以检测其浓度效用和时间效用。MTT法检测苦瓜蛋白的细胞毒性,液体闪烁计数法测胆固醇流出。实时荧光定量PCR和Western blot分别检测ABCA1、LXRα的mRNA和蛋白水平,设计合成LXRα-siRNA序列,并转染THP-1细胞,Western blot法评估沉默效果。结果苦瓜蛋白浓度低于4.5 mg/ml对THP-1细胞无毒性,并浓度和时间依赖性地促进胆固醇流出和上调ABCA1及LXRα表达水平,以4.5 mg/ml苦瓜蛋白作用效果最强;使用LXRα-siRNA沉默LXRα后,ABCA1的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05),胆固醇流出显著减少。结论苦瓜蛋白可通过LXRα途径上调ABCA1的表达促使THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出。

肝X受体α及Endoglin基因在妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达及意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中肝X受体α(LXRα)和Endoglin基因表达水平的变化及其临床意义。方法选择2010年8月-2011年4月在北京军区总医院住院分娩的妊娠期高血压疾病患者44例作为妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压孕妇15例(妊娠期高血压组),轻度子痫前期孕妇14例(轻度子痫前期组),重度子痫前期孕妇15例(重度子痫前期组);以同期正常晚期妊娠妇女16例为对照组。采用Real-time PCR检测各组孕妇胎盘组织中LXRα及Endoglin mRNA表达水平。结果妊娠期高血压疾病组LXRα及Endoglin mRNA相对表达量均明显高于对照组(P<0.05)。重度子痫前期组、轻度子痫前期组LXRα及Endoglin mRNA相对表达量均明显高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组(P<0.05),而妊娠期高血压组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LXRα及Endoglin在妊娠期高血压疾病患者尤其是轻、重度子痫前期患者胎盘中呈高表达,其表达升高可能与妊娠期高血压疾病的发生发展密切相关。

TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制

目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。

肝脏X受体激活对α-GalCer诱导的小鼠肝损伤保护机制探讨

背景:肝脏X受体(LXR)属于核受体超家族成员,对脂类代谢相关基因的转录调控起关键作用,同时具有调节免疫反应和抗炎效应。目的:研究LXR激活对α-GalCer诱导的小鼠肝损伤保护作用的可能机制。方法:15只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、α-GalCer模型组和LXR治疗组,后两组以α-GalCer腹腔注射诱导肝损伤模型,LXR治疗组于造模前连续7 d腹腔注射LXR激动剂T0901317。造模6 h后处死小鼠,行肝组织病理学检查和血清ALT、AST水平检测,免疫组化染色检测肝组织白细胞介素-6(IL-6)表达,蛋白质印迹法检测肝内PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活情况,实时RT-PCR检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达。结果:与正常对照组相比,α-GalCer模型组小鼠肝损伤明显,血清转氨酶水平升高,肝组织IL-6、TNF-α、iNOS表达上调,PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活。LXR治疗组肝损伤和血清转氨酶水平较α-GalCer模型组显著改善,肝组织炎症介质表达下调,PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活受抑。结论:LXR激活可调节免疫反应,抑制肝脏炎症,从而显著减轻α-GalCer诱导的小鼠肝损伤,其机制可能与抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活有关。

烟酸对小鼠体内胆固醇逆转运的影响及其机制

目的观察烟酸干预后对小鼠体内胆固醇逆转运的影响,并探讨其机制。方法14只C57BL/6小鼠随机分为两组,分别给予普通饲料、烟酸添加饲料喂养4周后,腹腔注射经乙酰化-低密度脂蛋白及3H-胆固醇处理过的小鼠巨噬细胞悬液(0.5mL/鼠,细胞数为5.0×106),单独笼养24h后测定粪便中的3H-胆固醇含量(占注射总量的百分比);逆转录聚合酶链反应测定小鼠肝脏和小肠三磷酸腺苷结合盒转运体G5、肝X受体α mRNA及肝脏胆固醇7α羟化酶mRNA表达并用Western blot印迹检测肝脏和小肠的三磷酸腺苷结合盒转运体G5和肝X受体α蛋白表达。结果与对照组比较,烟酸组小鼠肝脏和小肠的三磷酸腺苷结合盒转运体G5、肝X受体α,肝脏胆固醇7α羟化酶mRNA水平和肝肠的三磷酸腺苷结合盒转运体G5、肝X受体α蛋白质水平均增高,粪便中的胆固醇流出率增加21%。结论烟酸可能通过上调体内肝X受体α,从而刺激三磷酸腺苷结合盒转运体G5、胆固醇7α羟化酶表达来发挥促进小鼠体内胆固醇逆转运作用。

乙型肝炎病毒X蛋白对HepG2细胞脂代谢相关基因表达的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒x蛋白（HBX）对脂质代谢相关基因的影响及其在肝细胞脂肪变性发生中的作用。方法将质粒pIRES2-eGFP—HBX转染入HepG2细胞中，建立表达HBX的HepG2／HBx细胞模型；以转染空载体plRES2-eGFP（HepG2／pIRES2细胞）及未转染的HepG2细胞作为对照。转染后24、48、72h，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达；检测细胞内甘油三酯含量；RT—PCR方法检测固醇调节元件结合蛋白I（SREBP-1）和肝x受体（LXR）αmRNA表达水平；WesternMot检测HBX，LXRa及脂肪酸合成酶（FAS）蛋白表达的变化。多组间比较采用成组设计的方差分析，多组间的两两比较采用q检验；各基因表达量之间的关系采用Pearson相关分析。结果在转染后24、48、72h，HepG2／HBx细胞和HepG2／DIRES2细胞中有GFP的表达并随时间延长而增多、增强，仅在HepG2／HBx细胞内有HBx表达，并且随时间的延长而逐渐增加，差异有统计学意义（F=32．21，P〈0．05），提示成功建立HepG2／HBx细胞模型；在转染后24、48、72h，HepG2／HBx细胞内LXRamRNA相对表达量分别为0．386±0．055、0．505±0．071、0．649±0．058，SREBP-1mRNA相对表达量分别为0．395±0．055、0．548±0．047、0．795±0．058；LXRG[蛋白的相对表达量分别为0．178±0．036、0．263±0．047、0．347±0．058，FAS蛋白相对表达量分别为0．436±0．055、0．608±0．053、0．827±0．046，各相同时间点均较对照组明显增加（P〈0．05或JD〈0．01），并均随时间的延长而逐渐增多（P〈0．05或P〈0．01），且与HBX表达量均呈正相关（rLXRa=0．994，rsREBP-1=0．984，r’LXRa=0．989，rFAS=0．991，P〈0．05）。HepG2／HBX细胞内TG含量与对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HBx-LXRa-SREBP-1／FAS通路可能参与了调节脂质代谢相关基因的转录和表达，可能是引起肝细胞脂肪变发生的重要分子机制之一。

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α基因表达变化及意义

目的研究NAFLD大鼠肝X受体α（LXRα）基因表达变化及意义。方法建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠模型后，采用RT-RCR和Western blot法动态观察NAFLD大鼠肝组织中LXRα表达变化。结果4周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达（0．33±0．03）mmol／L，对照组为（0．24±0．03）mmol／L，差异有统计学意义（P〈0．05），随喂养时间延长逐渐升高，12周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达（0．61±0．06）mmol／L，对照组为（0．25±0．01）mmol／L，差异有统计学意义（P〈0．01）。血清ALIT和AST含量在8周时模型组分别为75．8U／L和138．9U／L，对照组分别为54．8U／L和81．4U／L，差异有统计学意义（P〈0．01），12周时模型组分别为102．3U／L和179．1U／L，对照组分别为54．3U／L和79．2U／L，差异有统计学意义（P〈0．01）。2周时模型组大鼠肝组织中LXRα基因表达相对含量为0．62，对照组为0．33，差异有统计学意义（P〈0．01），随着高脂饮食喂养时间的延长表达进一步增强，12周时模型组大鼠高达1．3l，对照组为0．34，差异有统计学意义（P〈0．01）。模型组大鼠肝组织中LXRα蛋白表达与基因表达趋势相同，与脂肪肝进展程度一致。结论LXRα基因表达变化与NAFLD的形成密切相关。

燕麦纤维通过LXRα/ABCA1信号通路对小鼠肠道胆固醇代谢影响

目的探讨燕麦纤维对脂代谢紊乱小鼠肠道胆固醇代谢的影响及其机制。方法选用6周龄雄性C57BL/6小鼠36只,按体重随机分为3组:阴性对照组、模型对照组和燕麦纤维组,预防性干预24周。实验结束后,检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖和胰岛素水平以及肝组织中TG和TC水平。Western blot法测定小肠组织中肝X受体α(LXRα)、三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)和G1(ABCG1)蛋白的表达水平。结果干预24周后,与模型对照组比较,燕麦纤维组小鼠血清TC、LDL-C水平[分别为(2.02±0.44)、(0.54±0.27)mmol/L]降低,HDL-C水平[(1.05±0.19)mmol/L]升高(P<0.05);燕麦纤维组小鼠空腹血糖[(6.68±1.32)mmol/L)和胰岛素抵抗指数(3.66±1.28)明显下降;燕麦纤维组小鼠小肠上段组织中LXRα、ABCA1、ABCG1蛋白表达量[分别为(0.68±0.14)、(0.96±0.24)、(0.59±0.15)]均明显升高(P<0.05)。结论燕麦纤维可降低脂代谢紊乱小鼠血脂水平,增加肠道胆固醇外流;其机制可能与燕麦纤维上调小肠组织中LXRα、ABCA1和ABCG1的蛋白表达有关。

小檗碱吴茱萸碱配伍的降脂作用与上调LXRα和PPARγ蛋白表达的研究

目的:探讨小檗碱吴茱萸碱配伍对高脂血症大鼠肝脏LXRα和脂肪PPARγ蛋白表达的影响。方法:将60只大鼠随机分为空白组6只与模型组54只。建立高脂饮食诱导高脂血症大鼠模型,选取造模成功的48只大鼠随机分为8组(每组6只)后药物干预8周,检测各组大鼠的血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平以评价药物作用效果;以Western blot方法检测肝脏LXRα和脂肪PPARγ蛋白的表达。结果:与模型组相比,小檗碱吴茱萸碱配伍能够明显降低高脂血症模型大鼠血清TC、LDL-C水平(P<0.01),且降脂效果优于小檗碱或吴茱萸碱单用,能够升高血清HDL-C水平(P<0.05),但其作用弱于吴茱萸碱单用;小檗碱吴茱萸碱配伍能够明显上调模型大鼠肝脏LXRα和脂肪PPARγ的表达,且其作用强于小檗碱或吴茱萸碱单用(P<0.05)。结论:小檗碱吴茱萸碱配伍能够降低高脂饮食诱导的高脂血症大鼠血脂水平,其作用机制与其上调LXRα和PPARγ蛋白的表达有关。

淡豆豉异黄酮通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路改善动脉粥样硬化小鼠脂质代谢的作用

目的:通过卵巢切除结合高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化小鼠模型,观察淡豆豉异黄酮(ISSP)对小鼠脂质代谢的影响,并从调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ/肝X受体α/腺苷三磷酸结合盒转运体A1(PPARγ/LXRα/ABCA1)信号通路的角度进一步探讨其作用机制。方法:将50只载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠随机分为模型组、西药组(阿托伐他汀钙,3.03 mg·kg^(-1))、中药低、中、高剂量组(淡豆豉异黄酮,2.5、5、10 mg·kg^(-1)),每组10只,以手术切除双侧卵巢同时喂食高脂饲料的方法制备动脉粥样硬化模型小鼠,另取10只ApoE^(-/-)小鼠,以手术切除卵巢旁脂肪同时喂食高脂饲料的方法作为假手术组,其中部分小鼠因术后感染死亡,最终确定每组为6只小鼠,术后1周开始各组灌胃相应药物或等量生理盐水。12周后检测血清及肝脏组织中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(NEFA)的含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;苏木素-伊红(HE)及油红O染色观察主动脉斑块形成及肝脏脂质沉积情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、ABCG1 mRNA及蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α及IL-6含量显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);肝脏指数明显升高(P<0.05),肝脏脂肪空泡明显,脂质沉积显著,肝脏中TC、TG、NEFA含量显著增多(P<0.01);肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),ABCG1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,服用阿托伐他汀钙和淡豆豉异黄酮中、高剂量组可使小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);肝脏指数显著降低(P<0.01),肝脏脂肪空泡及脂质沉积显著减少,肝脏中TC、TG、NEFA含量明显增多(P<0.05,P<0.01);肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:淡豆豉异黄酮可能通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路调节脂质代谢,减少血清炎症表达及肝脏脂质沉积从而改善动脉粥样斑块的形成。

PM2.5对HepG2细胞脂质堆积影响及机制研究

目的探讨大气PM2.5对人肝肿瘤细胞株Hep G2细胞脂质堆积的影响及可能的作用机制。方法采集广州城区大气PM2.5,以6.25、12.5、25、50和100μg/ml PM2.5分别染毒Hep G2细胞,采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8法)测定细胞存活率,确定PM2.5实验浓度。6.25、12.5、25μg/ml PM2.5染毒细胞36 h后,采用油红O染色观察肝细胞内脂滴变化,测定细胞内甘油三酯和总胆固醇含量,并采用实时荧光定量PCR法检测细胞肝X受体α(liver X receptor alpha,LXRα)和固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)的表达情况。结果油红O染色显示,染毒组Hep G2细胞内可见大量红色脂滴,并伴有脂滴融合现象。PM2.5染毒细胞36 h后,各染毒组Hep G2细胞总胆固醇含量高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);甘油三酯含量高于对照组,且随着PM2.5浓度的增加而升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。PM2.5染毒细胞24 h和36 h后,染毒组Hep G2细胞LXRα和SREBP-1c的m RNA表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 PM2.5可促进肝细胞脂质堆积,该过程可能与其上调LXRα和SREBP-1c的表达有关。

降脂益生菌对非酒精性脂肪肝大鼠胆汁酸代谢的影响及机制

目的探讨降脂益生菌DM9054（鼠李糖乳杆菌）联合86066（植物乳杆菌）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）胆汁酸代谢的影响及其可能机制。方法21只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及益生菌干预组。高脂饮食20周建立大鼠NAFLD模型，造模同时给予干预组大鼠鼠李糖乳杆菌联合植物乳杆菌灌胃，对照组及模型组给予生理盐水灌胃。干预结束后，我们检测了各组大鼠甘油三酯、胆固醇水平以及血清CKl8-M30水平。并使用real-timePCR评估了胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）、纤维生长因子受体4（FGFR4）、法尼醇受体（FXR）mRNA以及回肠FXR、ASBT、纤维生长因子15（FGFl5）mRNA表达水平。Westernblot检验肝脏CYP7A1、FXR及回肠ASBT蛋白表达水平。免疫组织化学法分析肝脏FXR及肠道FXR蛋白表达水平。结果与模型组相比，降脂益生菌干预可显著改善肝脏脂质沉积及损伤，上调肝脏CYP7A1表达水平，抑制肝脏FXR，激活肠道FXR—FGFl5通路，降低ASBT表达，且差异均有统计学意义（P〈0．05），虽然降脂益生菌可使肝脏FGFR4mRNA表达下调，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论降脂益生菌可能通过抑制肝脏FXR通路及肠道ASBT负反馈上调CYPTAl的表达，并激活肠道FXR—FGFl5通路，促进胆汁酸代谢，从而起到改善非酒精性脂肪肝的作用。