高脂、炎症状态下Api6在巨噬细胞中的表达研究

目的:凋亡抑制因子6(Apoptosis inhibitor 6,Api6)是清道夫受体富含半胱氨酸残基家族新成员,在免疫反应、肿瘤发生中发挥着重要的作用;但作为清道夫受体,Api6在脂质代谢中的作用尚未得到深入研究。方法:本文采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和氧化低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)刺激细胞建立炎症和高脂模型,定量RT-PCR检测初步探讨了Api6在体外培养的2种单核/巨噬细胞株:RAW264.7细胞和THP-1细胞中的表达水平。结果:研究发现200ng/ml的LPS和100μg/ml的oxLDL处理可以导致体外培养的2种巨噬细胞出现异常的脂质蓄积,清道夫受体SRA在RAW264.7细胞和THP-1细胞中的表达分别上调了6倍、2.5倍和6倍、44倍。但同样处理条件下,Api6在RAW264.7细胞的表达没有明显上调;而炎症和高脂同时存在时,Api6在THP-1细胞中的表达却上调了2.7倍。结论:不同处理条件下,Api6的表达水平与肝核受体(Nuclearreceptor liver Xreceptor,LXR)受体α亚型的表达水平明显相关;由于缺乏LXRα受体,体外培养的小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞Api6基础表达量较低,因此可以作为载体细胞,用以建立过表达Api6的细胞模型深入研究Api6在脂质代谢中的作用。

胆结石小鼠肝脏核受体基因的表达

目的通过胆固醇结石（GS）小鼠肝脏的核受体基因—肝核受体类似物1（1iver receptor homolog 1,LRH-1）、法尼醇受体（farnesoid X receptor,FXR）、类固醇受体（steroid X receptor,SXR）的表达,探讨与胆固醇结石形成关系.方法 C57BL/6雌性小鼠40只,平均出生后10周,重量28-35g,20只一组分为两组,一组予以正常饮食另一组予以高脂饮食喂养,均8周后处死.病理切片检查胆囊壁细胞组织学改变,并分别采用实时定量RT-PCR法和Western Blot法测定肝脏LRH-I、FXR、SXR的mRNA表达.结果胆固醇结石小鼠胆囊壁细胞呈现炎性改变,LRH-I的mRNA表达均高于对照组（P〈0.01）,FXR、SXR的mRNA表达两组差异无统计学意义.结论啮齿动物肝脏LRH-1基因的表达异常与胆固醇结石形成有关,FXR、SXR基因的表达与胆固醇结石形成可能无关.

肝X受体-α对炎症的调节及其对神经元孤核受体-1的影响

目的探讨肝X受体-α（LXRα）抑制小鼠枯否细胞（KCs），炎症反应途静与神经元孤核受体（NOR－1）的关系。方法雄性昆明小鼠用密度梯度离心法分离培养KCs，获得的细胞随机分为对照组、脂多糖（LPS）处理组、LPS＋T0901317共处理组。逆转录聚俞酶链反也、纠胞免疫荧光及Western blot法检测各组细胞LXRα和NOR－l及其蛋白表达水平，酶联免疫吸附法检测Kcs培养上清液肿瘤坏死凶子Ⅱ和白细胞介素10含量。采用SPSSl7．0统计软件分析，3组比较采用多个独立样本Kruskal－Wallis检验，组问两两比较采用Mann－Whitney U检验。结果LXIα mRNA：对照组为0．426±0．034、LPS处理组为0．279土0．019、共处理组为0．748土0．072。对其进行多个独立样本KruskalWsllis检验，X＾2=7．200，渐进的双尾P值二-0．027，差异有统计学意义。NOR－l mRNA：对照组为0．991±0．05l，LPS处理组为0．722±0．06l，共处理组为2．726±0．065。对其进行多个独立样本KruskalWsllis检验，X＾2=12．500，渐进的双尾P值=0．002，差异有统计学意义。LXRα蛋白表达量对照组为1．040±0．113，LPS处理组为0．519±0．077，共处理组为1．217±0．133。对其进行多个独立样本Kruskal－Wsllis检验，x。=13．66l，渐进的舣尾尸值=0．001，差异有统计学意义。NOR—l蛋白表达量：对照组为0．560±0．100，LPS处理组为0．355±0．038，共处理组为0．842±0．058。对其进行多个独立样本Kruskal－Wsllis检验，X＾2=15．158，渐进的双尾P值=0．00l，差异有统计学意义。肿瘤坏死因子α含量：对照组为（5．88±2．42）ng／L，LPS处理组为（450．89±78．52）ng／L，共处理组为（57．21±15．00）ng／L多个独立样本KruskalWsllis检验，X＾2＝12．500，渐进的双尾P值-0．002，差异有统计学意义。白细胞介素10含量：对照组为（10．68土3．48）ng／L，LPS处理组为（61．85-412．41）ng／L，共处理组为（537．41±36．41）ng／L。多个独立样本Kruskal－Wsllis检验，X＾2＝12．500，渐进的双尾P值=0．002，差异有统计学意义。结论在KCs，LXRα的表达上调能有效增加NOR－l的mRNA和蛋白表达水平，进而抑制炎症反应。