LncRNA HCG11通过调控miR-144-3p/ZEB1分子轴影响直肠癌的发生及转移

目的:探究lncRNA HCG11通过调控miR-144-3p上调锌指蛋白E-盒结合同源异形盒-(1zine finger E box binding homeobox 1, ZEB1)基因的表达促进结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发生及转移的分子机制。方法:收集2013年1月至2018年1月云南省肿瘤医院结直肠外科手术切除的78例CRC组织标本及其癌旁组织标本,采用qPCR检测HCG11在CRC癌组织及细胞系中表达情况,以构建的HCG11敲降载体、miR-144-3p模拟物及抑制剂转染CRC细胞株SW480及SW620,CCK-8法及克隆形成实验检测细胞的增殖情况,Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭情况。通过Wb及免疫荧光实验检测ZEB1及上皮间质特异蛋白(E-cadherin、Vimentin、ɑ-catenin、Sox2、Nestin、Oct4及Nanog)的表达,通过双荧光素酶报告基因检测HCG11、miR-144-3p及ZEB1的靶向调控关系。建立小鼠移植瘤模型验证敲降HCG11后对小鼠移植瘤生长的抑制作用。结果:HCG11在CRC癌组织的表达显著高于癌旁组织(P<0.01),其在多种CRC细胞系中表达水平明显高于正常肠上皮细胞(均P<0.05);HCG11的表达与CRC患者肿瘤转移、临床分期及预后密切相关(P<0.05或P<0.01)。敲降HCG11后显著抑制CRC细胞的增殖、迁移、侵袭、上皮间质转化及干细胞转化(均P<0.05)。敲降HCG11显著上调miR-144-3p的表达水平(P<0.05),过表达miR-144-3p可显著抑制ZEB1基因的表达(P<0.05)及明显降低双荧光素酶活性(P<0.05)。结论:HCG11通过调控miR-144-3p上调ZEB1的表达,从而促进CRC的发生及转移,HCG11可作为CRC诊断及治疗的靶点。

子宫颈鳞状细胞癌组织中LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达及其与预后的关系

目的探讨Lnc RNA HCG11和mi R-590-3p在子宫颈鳞状细胞癌组织及配对的癌旁组织中的表达情况,以及二者表达水平与患者临床资料和预后的相关性。方法收集58例子宫颈鳞状细胞癌和配对的癌旁正常组织标本,运用q RT-PCR法检测58对子宫颈鳞状细胞癌组织及相应的癌旁组织中的Lnc RNA HCG11和mi R-590-3p的表达,分析与宫颈鳞状细胞癌临床病理和预后的相关性,并评价其临床意义。结果荧光定量PCR显示宫颈鳞状细胞癌组织中Lnc RNA HCG11的表达比癌旁组织明显下调(P<0.05),mi R-590-3p的表达比癌旁组织明显上调(P<0.05);二者在核酸表达水平上呈负相关(r=-0.642,P=0.000)。Lnc RNA HCG11和mi R-590-3p的表达均与宫颈癌淋巴结转移、组织大小及临床分期之间存在显著的相关性,且与预后相关(P<0.05)。Cox回归多因素分析发现Lnc RNA HCG11和mi R-590-3p分别可作为宫颈鳞状细胞癌患者独立的预后因子。结论 Lnc RNA HCG11和mi R-590-3p可作为宫颈鳞状细胞癌独立的预后标志物和潜在的治疗靶点,Lnc RNA HCG11可能通过调控mi R-590-3p的表达量从而发挥抑癌基因的作用。

lncRNA-HCG11通过调控miR-144-3p/PRP11分子轴参与结直肠癌细胞增殖及转移的分子机制研究

目的探讨lncRNA-HCG11对结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移的影响作用及其分子机制。方法采用qRT-PCR检测人结直肠癌细胞和正常结直肠上皮细胞中lncRNA-HCG11的表达水平;双荧光素酶报告系统检测lncRNA-HCG11与miR-144-3p、miR-144-3p与PRP11的相互作用关系;Western blotting检测Lovo细胞中PRP11的表达水平;CCK-8法、Transwell实验分别检测结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果qRT-PCR检测结果表明lncRNA-HCG1在3株结直肠癌细胞中的表达水平均显著高于正常结直肠上皮细胞(P<0.01或P<0.001);敲降lncRNA-HCG11可显著抑制Lovo细胞的增殖、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01),过表达lncRNA-HCG11则得到相反的结果(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA-HCG11与miR-144-3p、miR-144-3p与PRP11之间存在靶向作用关系,过表达miR-144-3p显著抑制Lovo细胞的增殖、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01);抑制miR-144-3p表达显著促进Lovo细胞的增殖、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01);回复实验表明,lncRNA-HCG11与PRP11竞争结合miR-144-3p,促进Lovo细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结论lncRNA-HCG11作为竞争性内源RNA,与PRP11 mRNA竞争结合miR-144-3p,从而促进结直肠癌细胞Lovo增殖、侵袭和转移。