人接头蛋白LNK对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨人接头蛋白LNK(hLNK)对非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展的影响。方法构建稳定过表达hLNK的人NSCLC细胞株H1299-hLNK及对照细胞株H1299-pCDH。采用Western blot验证上述稳转细胞株中hLNK的表达水平;采用平板克隆实验分析hLNK过表达对H1299细胞增殖的影响;采用划痕实验分析hLNK过表达对H1299细胞侵袭能力的影响;对细胞中上皮间质转化(EMT)的典型标志蛋白进行分析。结果成功构建过表达hLNK的人NSCLC细胞株H1299-hLNK。与对照细胞H1299-pCDH比较,hLNK过表达抑制了H1299细胞的增殖和迁移能力,且细胞EMT水平被抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论hLNK主要通过下调NSCLC细胞H1299的EMT水平抑制癌细胞的增殖、迁移。

LNK碳酸熔盐热物性能研究

简述了碳酸熔盐在热化学催化反应、清洁燃烧、燃料电池、太阳能制氢中的应用研究,指出碳酸熔盐能够满足太阳能高温传热蓄热的要求。采用热分析技术TG-DSC、重量法、阿基米德法、回转振荡法等对(Li-Na-K)_2CO_3熔盐(LNK碳酸熔盐)的熔点、比热、相变潜热、密度、黏度和热稳定性等性质进行了表征。实验结果表明:LNK碳酸熔盐具有熔点低(404.89℃)、比热容(500℃,2.70kJ/(kg·K))和相变潜热(159.7kJ/kg)高、密度大(2g/cm^3)、黏度小(4C_p)以及在800℃下热稳定性好的特点,是一种比较理想的高温热载体。

LNK基因单核苷酸多态性与急性白血病易感性研究

目的:探讨JAK-STAT信号通路的负调控基因LNK(SH2B3)单核苷酸多态性(SNP)与急性白血病易感性的关系。方法:收集31例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者、70例急性髓性白血病(AML)患者以及130例健康对照者的骨髓及外周血标本,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测LNK Rs3184504(c.784T>C)与Rs78894077(c.724C>T)单核苷酸多态位点的分布情况,并用凝胶电泳和测序验证。培养NB4、THP-1、Raji等白血病细胞株模型,直接测序分析各白血病细胞株Rs3184504与Rs78894077位点多态性情况。结果:Rs3184504位点的CC基因型在急性白血病组中明显高于正常对照组(P<0.01),AML组和ALL组之间无差异。Rs3184504C等位基因在急性白血病中明显高于正常对照组(P<0.01)。LNK基因Rs78894077位点的基因型在急性白血病组和正常对照组中无显著性差异(P>0.05)。NB4细胞、THP-1细胞、Raji细胞Rs3184504和Rs78894077位点均为CC基因型。结论:携带LNK基因Rs3184504 C等位基因型位点者更易于发生急性白血病。

LNK基因在慢性髓系白血病中的变异

目的:比较慢性髓系白血病(CML)患者组与对照组的LNK基因突变及单核苷酸多态性(SNP),探讨LNK基因变异与CML发生的关系。方法:选取36例CML患者和46例健康对照者。提取骨髓和外周血DNA,用Q-PCR检测BCR/ABL1融合基因,用PCR扩增LNK基因外显子全长;扩增序列中包括了LNK基因内影响氨基酸表达的Rs3184504(C/T)和Rs78894077(A/C/G/T),以及对氨基酸表达无影响的Rs7973120(A/T)的3个SNP位点。测序分析LNK基因突变及单核苷酸多态性。结果:36例CML患者均有BCR/ABL1突变,对照组无突变;1例CML患者有LNK杂合子突变,位点为A300V,突变率2.8%,对照组无突变。Rs3184504:对照组C/T等位基因频率为50%/50%,CML组为94.4%/5.6%,CML组C等位基因明显高于对照组,其中CC基因型占94.4%(P<0.01);Rs78894077:对照组C/T等位基因为9.8%/90.2%,CML组16.7%/83.3%,差异无统计学意义(P>0.05),但CML组CC基因型高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Rs7973120:对照组A/T等位基因频率为10.9%/89.1%,CML组为25%/75%,CML组A等位基因高于对照组(P<0.01)。结论:CML患者中有LNK突变,LNK单核苷酸多态性与CML的发生相关,CML患者多携带有LNK Rs3184504 C等位基因及Rs7973120 A等位基因。

LNK基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的:探讨LNK基因在急性白血病患者中的表达及其与临床特征的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR检测80例AL(ALL 42例,AM L 38例)患者骨髓中LNK m RNA的表达水平,分析其表达水平与临床特征的相关性,应用Western blot检测患者的LNK蛋白表达量。以正常的志愿者(16例)骨髓作为对照组。结果:ALL和AM L组的LNK水平均明显高于正常对照组(P=0.007,P=0.021),ALL组与AM L组之间LNK水平无统计学差异;ALL和AML组中的LNK表达水平均与危险程度呈正相关(P=0.000,P=0.004,r=0.5,r=0.386),且ALL和AML组中高危组的LNK水平均明显高于对照组(P=0.035,P=0.032),AML和ALL组的中危组(P=0.239,P=0.609)及标危组(P=0.974,P=1)LNK水平均高于对照组,但无统计学意义,各组之间危险程度无统计学差异。急性白血病患者LNK蛋白表达量较对照组增加。结论:急性白血病患者LNK基因表达高于正常人,与患者危险度呈正相关。

LNK基因在原发性血小板增多症中的变异及临床意义

目的:探讨原发性血小板增多症(essential thrombocytosis,ET)中LNK基因的突变及单核苷酸多态性(SNP),并分析其与ET发病的关系。方法:用位点特异性PCR的方法检测JAK2V617F基因突变。用PCR扩增LNK基因外显子全长,扩增序列中包括LNK基因内影响氨基酸表达的Rs3184504(C/T)和Rs78894077(A/C/G/T)以及对氨基酸表达无影响的Rs7973120(A/T)3个SNP位点。测序分析LNK基因突变及单核苷酸多态性。结果:发现6例患者有LNK突变,包括4种类型,分别为A300V、R425C、V402L及R426Q。ET患者SNP Rs78894077Ser(丝氨酸)型T等位基因分布高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ET患者SNP Rs3184504 Ser(丝氨酸)型T等位基因频率高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在ET患者中存在LNK基因突变,携带LNK SNP Rs78894077 Ser及Rs3184504 Ser位点T等位基因可增加患ET的风险。

调节Lnk/干细胞因子-干细胞因子受体通路对糖尿病状态骨髓间充质干细胞成骨功能的影响

目的探讨调节Lnk/干细胞因子(SCF)-干细胞因子受体(c Kit)通路对糖尿病状态大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨功能的影响。方法分离糖尿病大鼠BMSCs,免疫细胞化学染色鉴定后,将细胞分为空白对照组、阴性对照组、RNA干扰组,并用免疫印迹实验检测干扰效果。体外模拟糖尿病状态下诱导BMSCs成骨分化,并检测Lnk/SCF-c Kit通路主要蛋白Lnk、SCF、c Kit及成骨相关蛋白碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原蛋白a1(ColⅠa1)的表达。结果分离培养的细胞表达CD_(44)、CD_(90),不表达CD11b、CD_(45),符合BMSCs表面标记物特征。与其他糖尿病状态BMSCs相比,RNA干扰组Lnk表达降低,SCF、c Kit表达增加(P<0.05)。成骨诱导分化28 d,与其他糖尿病状态BMSCs相比,RNA干扰组细胞Lnk表达降低,SCF、c Kit、ALP、OCN、ColⅠa1表达增加(P<0.05)。结论抑制Lnk表达、激活SCF-c Kit通路可改善糖尿病状态大鼠BMSCs的成骨功能。

LNK基因突变在骨髓增殖性肿瘤中的作用

骨髓增殖性肿瘤(MPN)是一类造血干细胞克隆性疾病。研究显示,JAK-STAT信号通路与MPN的发病密切相关,对JAK-STAT信号传导具有负调控作用的LNK基因在MPN发生发展中可能扮演了重要角色。在JAK2突变阴性的MPN中,LNK基因的特异性突变可能是导致MPN向不同亚型分化的关键。LNK基因的某些SNP可调控造血细胞向不同方向分化可能也是MPN表现为不同亚型的重要影响因素。LNK基因功能性改变导致JAKSTAT信号通路的异常活化可能是导致MPN发生新的机制。本文就LNK基因在MPN中的作用做一简单综述。

Lnk对卵巢肿瘤细胞中胰岛素PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路的调节

目的:研究细胞连接蛋白Lnk对人上皮性卵巢肿瘤细胞中胰岛素PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路的影响及作用机制。方法:稳定转染Lnk WT质粒(空质粒EV作为对照)的TOV112D和OVCA420细胞株,加入人重组胰岛素处理后收获细胞,提取蛋白。Western blot法检测磷酸化和总Akt、ERK和4EBP1信号通路蛋白。并在293T细胞中共转染IR和Lnk WT或EV质粒,收获细胞裂解蛋白。免疫共沉淀(CoIP)检测体外Lnk和胰岛素受体(IR)是否结合。结果:过度表达了Lnk WT的TOV112D和OVCA420细胞中,Akt及其下游信号蛋白4-EBP1的磷酸化蛋白(p-Akt和p-4EBP1)、p-ERK1/2蛋白均较空质粒(EV)对照明显降低;胰岛素刺激下,Lnk WT过表达细胞Akt、4EBP1、ERK1/2磷酸化水平也较EV明显降低;总蛋白则无明显变化。免疫共沉淀实验显示,Lnk与IR在体外可结合。结论:Lnk可通过与IR结合,负性调节对胰岛素反应的PI3K-Akt和MAPK-ERK细胞信号传导;其作为胰岛素信号通路的一个新抑制因子,可能在上皮性卵巢肿瘤及其他胰岛素信号通路异常相关性疾病中起作用。

调节Lnk/SCF-cKit反应轴改善糖尿病大鼠牙槽骨缺损早期愈合的研究

目的:探讨调节Lnk/SCF-cKit反应轴对糖尿病大鼠牙槽骨缺损早期愈合的影响。方法:诱导大鼠形成糖尿病并构建牙槽骨缺损模型后,随机分为3组(n=10),空白对照组不做任何处理,阴性对照组注射空载体质粒,RNAi组注射靶向Lnk的RNA干扰质粒。28 d后处死各组大鼠,HE染色检测局部骨缺损愈合状况;免疫印迹实验检测骨缺损部位Lnk、SCF、cKit以及ALP、OCN、ColIa1的表达水平。结果:构建缺损28 d后,RNA干扰组骨组织再生Lane-Sandhu评分高于各组糖尿病大鼠(P<0.05);免疫印迹实验显示,与其他各组糖尿病大鼠相比,RNA干扰组的Lnk蛋白表达水平降低,但SCF、cKit、ALP、OCN、ColIa1蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论:抑制Lnk表达、激活SCF-cKit通路可能改善糖尿病大鼠牙槽骨缺损的早期愈合。

Lnk基因敲除对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结肠炎的影响

目的比较Lnk基因敲除小鼠与野生型小鼠在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠炎后的表现。方法将周龄相近的C57BL/6小鼠分为野生型组(WT)、野生型小鼠结肠炎组(WT+DSS)、Lnk敲除鼠组(KO)和Lnk敲除鼠结肠炎组(KO+DSS)。WT和KO小鼠正常饮水,WT+DSS及KO+DSS组小鼠自由饮用2. 5%DSS水溶液。实验进行7 d,每日观察小鼠体质量变化、粪便软硬度及肠道出血情况,评估疾病活动指数(DAI)。7 d后取外周血,采用流式细胞技术检测WT小鼠和KO小鼠外周血中调节性B细胞(Breg)频率。处死小鼠,取肠观察外形、颜色,测量肠的长度。结肠组织制作为组织学切片,进行HE染色,显微镜下观察组织学改变。结果 WT和KO组小鼠排便正常,KO+DSS组小鼠与WT+DSS组小鼠较早出现腹泻及排血便情况。KO+DSS组小鼠的体质量在实验周期内较其他3组有显著降低,KO+DSS组DAI随时间显著增加。KO组Breg细胞频率显著低于WT组。KO+DSS组结肠明显变短,HE组织切片镜检糜烂出血、淤血,多病灶浅溃疡,炎性细胞浸润黏膜及黏膜下层并累及肌层,提示炎症反应加重。结论 Lnk缺失可加重DSS诱导的小鼠结肠炎表现,可能与Lnk KO小鼠体内Breg细胞频率降低、对炎症反应的负调控作用减弱有关。

高压AC-DC开关电源转换芯片LNK501

LNK501是PowerIntegrations公司推出的LinkSwitch系列开关电源芯片之一 ,它采用了专为小功率开关电源而设计的拓扑结构 ,其电路简单 ,而成本低廉程度与线性电源相当。文中介绍了LNK501的主要特点。

新型LNK500开关电源器件功能与应用研究

本文简要介绍了LNK500开关电源器件的基本特点、性能及应用领域;详细阐述了LNK500的工作原理,并通过对LNK500器件原理的分析,结合实际应用设计出一款多路输出式电源电路。本文还重点介绍了利用LNK500设计电路的方法和过程。

基于LNK406EG带TRIAC调光和单级PFC的14W LED驱动器

Link．Switch—PH- LNK406EG是一种带TRIAC调光、单级PFC和初级侧恒流控制的LED驱动器IC。基于LNK406EG的TPIAC调光14WLED驱动器，效率≥85％，功率因数〉0．9，调光范围〉1000：1。

连接蛋白Lnk的研究进展

Lnk是新近发现的一种连接蛋白,在蛋白酪氨酸激酶(Jak)信号转导子和转录激活子(STAT)、Ras蛋白/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)等信号转导途径中发挥负性调节作用。其功能涉及到造血细胞的分化、内皮细胞激活、细胞骨架调控。作者对其结构特征、信号转导调节机制及生物学功能作一综述。

基于LNK306P的LED驱动器设计

本文分析并设计一种采用PI公司LinkSwitch-TN系列LNK306P的LED驱动器,同时介绍LinkSwitch-TN系列的内部结构及工作原理,给出该驱动器的主电路和外围.电路的设计方案及LED工作输出波形。

LNK在高血压血管重构中的作用研究

目的探讨LNK在高血压血管重构中的作用.方法选取大鼠胸主动脉平滑肌细胞,在一定条件下构建高血压细胞模型.根据不同处理方法分为空白对照组,AngⅡ+空白对照组,AngⅡ+空载组和AngⅡ+SH2B3重组载体组.流式细胞仪检测VSMC周期、凋亡及增殖的水平;ELISA检测IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平.结果①各组大鼠血管平滑肌细胞周期、凋亡及增殖的水平:与空白对照组比较,AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组VSMC处于G0/G1期减少[(71.357±0.312)%比(67.480±0.613)%、(67.053±0.321)%],S期增加[(21.517±0.254)%比(24.003±0.748)%、(22.927±0.178)%],G2/M期增加[(7.137±0.159)%比(8.483±0.618)%、(10.020±0.364)%],差异有统计学意义(P<0.05).与AngⅡ+空载组比较,AngⅡ+SH2B3重组载体组VSMC处于G0/G1期增加[(67.053±0.321)%比(70.810±1.470)%],S期减少[(22.927±0.178)%比(21.867±0.676)%],G2/M期减少[(10.020±0.364)%比(7.320±1.002)%],差异有统计学意义(P<0.05).AngⅡ+SH2B3重组载体组VSMC细胞凋亡率高于AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组[(5.210±0.053)%比(4.503±0.223)%、(3.837±0.546)%](P<0.05).AngⅡ+SH2B3重组载体组VSMC细胞增殖水平低于AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组[(1.263±0.053)比(1.482±0.104)、(1.480±0.092)](P<0.05).②各组大鼠血管平滑肌细胞上炎性细胞因子水平:与空白对照组相比,AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组IL-6[(176.023±16.776)pg/ml比(264.560±12.368)pg/ml、(486.147±41.893)pg/ml]、TNF-α[(8.563±0.667)pg/ml比(15.738±0.995)pg/ml、(20.389±1.274)pg/ml]和IFN-γ[(631.117±26.551)pg/ml比(1097.271±32.303)pg/ml、(1207.185±38.949)pg/ml]水平均升高,AngⅡ+SH2B3重组载体组IL-6[(157.410±12.456)pg/ml]和IFN-γ[(723.270±15.317)pg/ml]表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05).与AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组相比,AngⅡ+SH2B3重组载体组的IL-6[(264.560±12.368)pg/ml、(486.147±41.893)pg/ml比(157.410±12.456)pg/ml]、TNF-α[(15.738±0.995)pg/ml、(20.389±1.274)pg/ml比(8.394±0.190)pg/ml]和IFN-γ[(1097.271±32.303)pg/ml、(1207.185±38.949)pg/ml比(723.270±15.317)pg/ml]表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论LNK通过介导炎症反应影响血管平滑肌的周期、凋亡及增殖,参与高血压血管重构.

LNK基因沉默对THP-1细胞EPO、EPOR表达影响的研究

目的:探讨LNK基因沉默对人单核细胞白血病细胞(THP-1)EPO、EPOR表达的影响。方法:培养THP-1细胞,以慢病毒为载体介导SiRNA稳定沉默LNK基因,感染72h后在荧光倒置显微镜下观察GFP表达水平;应用流式细胞术检测慢病毒感染效率,RT-PCR验证LNK沉默效应,并检测EPO及EPOR mRNA表达水平;应用Western blot检测LNK、EPO及EPOR蛋白水平。结果:慢病毒感染72h在荧光倒置显微镜下观察GFP表达水平达85%以上,流式细胞术检测感染效率均在99%以上;LNK沉默组LNK、EPO及EPORmRNA表述水平明显低于对照组(P<0.05)。LNK沉默组LNK、EPO及EPOR蛋白水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:成功建立了LNK基因沉默的THP-1细胞株。沉默LNK基因,则EPO及EPOR表达下调,提示LNK可能参与了EPO及EPOR的调控。

连接蛋白Lnk在人脐静脉内皮细胞中的表达

目的:证实体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存在Lnk分子的表达。方法:体外培养HUVEC系用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和W estern印迹技术,检测HUVEC细胞中的Lnk mRNA及蛋白表达。结果:连接蛋白Lnk mRNA及蛋白在HUVEC中均有表达。结论:HUVEC组成性地表达Lnk,可作为体外研究Lnk的细胞系。

LNK(饲料型)快速消化器的研制及应用

粗蛋白含量是饲料产品和原料质量评价的必测指标。目前国内测定饲料粗蛋白含量采用的普通电炉消化样品的方法,存在耗电量大,时间长,放样少,受热不均,不易控制等缺点,不能满足生产中快速检验的需要。虽然国标GB6432—86提倡使用消煮炉(消化器)消化样品。