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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究 被引量:4
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作者 何冬雷 谢小明 +2 位作者 刘玉 夏立平 许荣华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期31-35,共5页
目的建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA。方法采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA... 目的建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA。方法采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证。结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08。microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调;实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7f、mir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异。结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 结肠癌 耐药相关microRNA 5-氟尿嘧啶 lovo 5-fu细胞株 microRNA芯片
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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU的建立及其差异表达基因的筛选 被引量:3
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作者 盛雅萍 李建芳 +4 位作者 刘炳亚 罗建明 郑磊贞 陈强 郭伟剑 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第17期1899-1904,共6页
目的:建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术... 目的:建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中的差异表达基因,从中筛选出可能的耐药相关基因;用半定量RT-PCR方法对筛选出的部分耐药相关基因在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果:LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大.LoVo/5-FU对5-FU、ADM、MMC耐药,而对CDDP无耐药性(RI:7.69,2.78,1.43和0.96).通过基因芯片筛选出差异表达基因425个,可能的耐药相关基因包括CYP1B1,NAT2,RNF20,SNAI2,MAP3K2,其中CYP1B1在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异(Cy5/Cv3=5.877).结论:LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,耐药机制可能与CYP1B1,NAT2等耐药相关基因有关. 展开更多
关键词 结肠癌 耐药相关基因 5-氟尿嘧啶 lovo/5-fu细胞株 MTT法 基因芯片 逆转录-聚合酶链反应
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The Effect of Targeted Magnetic Nanopaticles on Hepatoma and the Expression of bcl-2/bax Protein 被引量:1
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作者 王剑明 肖宝来 +1 位作者 郑建伟 邹声泉 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第4期443-446,共4页
The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line (HepG2 cells) were randomized into 5 groups, including: ... The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line (HepG2 cells) were randomized into 5 groups, including: (1) group A, receiving normal saline, (2) group B, receiving 5-fluorouracil (5-Fu), (3) group C, receiving magnetic nanoparticles containing 5-Fu, (4) group D, consisting of treatment with magnetic nanoparticles containing 5-Fu and inside magnetic field and (5) group E, receiving pure magnetic nanoparticles and inside magnetic field. Morphological features of transplanted tumors in mice in each group were observed under transmission electron microscope (TEM). The expression of bcl-2/bax protein was immunohistochemically detected by SABC method. The results showed that a large number of apoptotic tumor cells were found in group B and group D under TEM. The expression of bcl-2 protein was significantly decreased and the expression of bax protein increased significantly in both group B and D as compared with those in group A, C and E (P〈0.01 for all). The decrease in bcl-2 and the increase in bax were more in group D as compared with group B (P〈0.01). It is concluded that the targeted magnetic nanoparticles containing 5-Fu can improve the chemotherapeutic effect of 5-Fu by decreasing bcl-2 expression, increasing bax expres- sion and inducing apoptosis of the liver cancer cells. 展开更多
关键词 liver neoplasms cell line bcl-2 BAX magnetic nanoparticles 5-fu
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5-氟脲嘧啶与γ-干扰素作用于Lovo细胞的实验观察
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作者 刘宗荣 马淙 +2 位作者 马文松 邵明 苏卓娃 《热带医学杂志》 CAS 2010年第7期812-814,共3页
目的观察5-氟脲嘧啶与γ-干扰素联合应用对人结肠癌Lovo细胞株的影响。方法采用Lovo结肠癌细胞体外培养,流式细胞仪检测细胞生长、增殖和凋亡的变化。结果 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用后,细胞增殖率下降指数为0.82~1.99,而细胞凋亡... 目的观察5-氟脲嘧啶与γ-干扰素联合应用对人结肠癌Lovo细胞株的影响。方法采用Lovo结肠癌细胞体外培养,流式细胞仪检测细胞生长、增殖和凋亡的变化。结果 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用后,细胞增殖率下降指数为0.82~1.99,而细胞凋亡率增加指数为2.48~4.89。结论 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用可降低肿瘤细胞的增殖和提高肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 人结肠癌lovo细胞株 5-氟脲嘧啶 Γ-干扰素
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中成药逆转人结肠癌细胞株对化疗药物耐药的研究 被引量:4
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作者 张念华 陈高峰 +2 位作者 李寿杰 武如通 高海利 《新中医》 CAS 2017年第2期11-14,共4页
目的:本研究拟观察鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖对结肠癌耐药细胞株的杀伤作用,为临床合理、有效使用中成药提供实验依据。方法:运用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结肠癌lovo细胞耐5-氟尿嘧啶细胞株,并命名为lov... 目的:本研究拟观察鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖对结肠癌耐药细胞株的杀伤作用,为临床合理、有效使用中成药提供实验依据。方法:运用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结肠癌lovo细胞耐5-氟尿嘧啶细胞株,并命名为lovo/5-Fu。MTT法检测lovo/5-Fu的耐药能力及不同浓度中成药对lovo/5-Fu细胞株的耐药逆转作用,并根据相应结果计算耐药逆转倍数(RF)。细胞迁移实验分为4组:空白对照组、黄芪多糖组、鸦胆子组和华蟾素组,检测不同中成药对lovo/5-Fu细胞株迁移能力的影响。结果:5-Fu对lovo细胞株的IC_(50)为14.5 mg/L,对lovo/5-Fu细胞株的IC_(50)为115.1 mg/L,根据上述两株细胞的IC_(50)可算出lovo/5-Fu细胞株对5-Fu的耐药指数为:7.94。浓度为17.3、45.3、83.8、112.5 mg/L鸦胆子油乳注射液的耐药逆转倍数分别为9.5、23.5、54.4、86.5倍;浓度为8.2、21.2、38.6、50.1 mg/L华蟾素注射液的耐药逆转倍数分别为11.2、25.2、56.6、90.5倍;浓度为26.3、70.9、115.2、163.4 mg/L注射用黄芪多糖的耐药逆转倍数分别为1.5、8.2、26.5、74.2倍。与空白对照组比较,黄芪多糖组、鸦胆子组和华蟾素组侵出小室的细胞数目明显减少,迁移能力明显减弱,其中以鸦胆子组和华蟾素组更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖这三种中成药均能不同程度的逆转lovo/5-Fu对5-Fu的耐药性,其中以鸦胆子油乳注射液和华蟾素注射液最为明显。 展开更多
关键词 人结肠癌lovo细胞株 多药耐药性 5-氟尿嘧啶(5-fu):lovo/5-fu细胞株 鸦胆子油乳注射液 华蟾素注射液 注射用黄芪多糖
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结直肠癌转移生物标记物的蛋白质组学研究 被引量:1
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作者 张鹏 黄龙 +7 位作者 马延磊 彭佳远 沈通一 陈红旗 周玉坤 储昭新 张明 秦环龙 《中华胃肠外科杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期618-622,共5页
目的应用蛋白质组学技术寻找结直肠癌转移潜在标志物,研究氟尿嘧啶(5-Fu)对差异蛋白表达的影响,并初步探讨结直肠癌的转移机制。方法常规培养Lovo及SW480细胞至指数生长期后提取蛋白。采用MTF法检测5-Fu对此两种细胞的半数抑制浓度... 目的应用蛋白质组学技术寻找结直肠癌转移潜在标志物,研究氟尿嘧啶(5-Fu)对差异蛋白表达的影响,并初步探讨结直肠癌的转移机制。方法常规培养Lovo及SW480细胞至指数生长期后提取蛋白。采用MTF法检测5-Fu对此两种细胞的半数抑制浓度(IC50),分别用IC50的5-FU干预Lovo和SW480细胞后提取蛋白。对所提取的蛋白进一步行二维凝胶电泳,选取表达有显著差异的点进行质谱检验和生物信息学分析。采用Western blot及免疫荧光验证5-FU作用前后两种细胞显著差异蛋白的表达。结果二维凝胶电泳和质谱分析成功鉴定出11种差异蛋白.根据预设条件筛选出:核内不均匀核糖核蛋白K(hnRNP K)、蛋白质二硫键异构酶(PDI)。Western blot及免疫荧光实验显示;Lovo细胞株中hnRNPK蛋白表达较SW480高,PDI蛋白表达较SW480低:5-Fu干预后.Lovo细胞株中hnRNP K蛋白表达下调程度较SW480显著.免疫荧光强度减弱,SW480细胞株中PDI蛋白表达上调幅度较Lovo细胞显著,免疫荧光强度增强。结论hnRNP K和PDI表达在不同转移潜能结直肠癌细胞系Lovo和SW480存在显著差异,5-Fu干预后其表达有着规律性改变。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 lovo细胞 SW480细胞 氟尿嘧啶 肿瘤转移 蛋白质组学
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