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LA-PCR快速克隆传染性法氏囊病病毒基因组A节段全长cDNA方法的建立
被引量:
4
1
作者
李建荣
宋厚辉
+4 位作者
于涟
黄耀伟
谢荣辉
周继勇
郑筱祥
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期438-441,共4页
从浙江省某鸡场暴发疑似传染性法氏囊病 (IBD)的法氏囊病料中分离到 1株致死率高达 70 %的强毒株 (IBDV-ZJ2 0 0 0 )。通过筛选 ,采用效果最理想的蛋白酶 K法从法氏囊中提取病毒基因组 RNA,经 L i Cl纯化后 ,优化各种反应参数和条件 ,...
从浙江省某鸡场暴发疑似传染性法氏囊病 (IBD)的法氏囊病料中分离到 1株致死率高达 70 %的强毒株 (IBDV-ZJ2 0 0 0 )。通过筛选 ,采用效果最理想的蛋白酶 K法从法氏囊中提取病毒基因组 RNA,经 L i Cl纯化后 ,优化各种反应参数和条件 ,建立了 L ong- accurate PCR(L A- PCR)一步直接扩增 IBDV A节段全长 c DNA的方法 ,得到一约 3.2 6 kb的片段。L A- PCR法能快速从病鸡法氏囊和细胞适应毒中扩增 A节段全长 c DNA,为研究各 IBDV毒株 A节段的结构和功能打下了基础。
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关键词
家畜病毒学
la-pcr
快速克隆
传染性法氏囊病
病毒
基因组
A节段
CDNA
下载PDF
职称材料
用LA-PCR方法克隆东方田鼠部分Y染色体序列
被引量:
1
2
作者
姜宪环
蔡慧强
+4 位作者
高骏
倪丽菊
李凯
肖君华
周宇荀
《实验动物与比较医学》
CAS
2012年第4期324-328,333,共6页
目的克隆东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)Y染色体的部分序列,并挖掘这两个亚种间的单核苷酸多态性位点(SNPs)。方法本研究利用依据Y染色体保守性靶标位点(YCATS)设计的引...
目的克隆东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)Y染色体的部分序列,并挖掘这两个亚种间的单核苷酸多态性位点(SNPs)。方法本研究利用依据Y染色体保守性靶标位点(YCATS)设计的引物,测得Y染色体上的8个内含子短片段序列,进而设计长片段PCR(LA—PCR)引物来获得相距几kb的两个内含子之间的长片段序列。结果获得东方田鼠长江亚种和宁夏指名亚种Y染色体上的7300bp序列,比对这两个亚种的序列后发现4个SNPs位点。结论获得了田鼠Y染色体上的7300bp序列和4个SNPs位点。
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关键词
东方田鼠
单核苷酸多态性位点
Y染色体保守性靶标位点
长片段
pcr
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职称材料
成都地区HBV基因型分布研究
被引量:
7
3
作者
卢亦路
王玲
+4 位作者
张发强
陈清英
夏增亮
胡迪
夏庆杰
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期546-548,共3页
目的调查成都地区乙型肝炎患者外周血中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况。方法以长片段高保真聚合酶链反应(LA-PCR)扩增乙肝病毒S基因区,结合双脱氧链末端终止法(Sanger)测序技术对该地区90例乙型肝炎患者感染的HBV进行基因分型;同...
目的调查成都地区乙型肝炎患者外周血中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况。方法以长片段高保真聚合酶链反应(LA-PCR)扩增乙肝病毒S基因区,结合双脱氧链末端终止法(Sanger)测序技术对该地区90例乙型肝炎患者感染的HBV进行基因分型;同时与常用的基因型特异引物扩增分型法获得的分型结果进行比较,做重复试验以证实所用方法的可靠性和准确性。结果S基因直接测序法检测成都地区人群HBV基因分型结果为B基因型57例(63.3%)、C型30例(33.3%),D型3例(3.3%),无其他基因型和混合型;基因型特异引物分型法除榆出23例(25.5%)混合基因型外,其他各例结果均与S基因测序法吻合。结论成都地区HBV优势基因型以B型为主,C型次之,偶见D型。S基因直接测序法能准确鉴定HBV基因型,并较好地反映HBV基因组变化的准种特征,总体上优于型特异引物分型法,此结论具有统计学意义(P<0.001)。
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关键词
乙型肝炎病毒
基因型
长片段高保真聚合酶链反应
S基因直接测序法
型特异
引物分型法
原文传递
题名
LA-PCR快速克隆传染性法氏囊病病毒基因组A节段全长cDNA方法的建立
被引量:
4
1
作者
李建荣
宋厚辉
于涟
黄耀伟
谢荣辉
周继勇
郑筱祥
机构
浙江大学动物预防医学研究所
浙江大学生物医学工程研究所
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期438-441,共4页
基金
国家"8 6 3"计划资助项目 ( 10 1-j99-0 2 )
文摘
从浙江省某鸡场暴发疑似传染性法氏囊病 (IBD)的法氏囊病料中分离到 1株致死率高达 70 %的强毒株 (IBDV-ZJ2 0 0 0 )。通过筛选 ,采用效果最理想的蛋白酶 K法从法氏囊中提取病毒基因组 RNA,经 L i Cl纯化后 ,优化各种反应参数和条件 ,建立了 L ong- accurate PCR(L A- PCR)一步直接扩增 IBDV A节段全长 c DNA的方法 ,得到一约 3.2 6 kb的片段。L A- PCR法能快速从病鸡法氏囊和细胞适应毒中扩增 A节段全长 c DNA,为研究各 IBDV毒株 A节段的结构和功能打下了基础。
关键词
家畜病毒学
la-pcr
快速克隆
传染性法氏囊病
病毒
基因组
A节段
CDNA
Keywords
IBDV
segment A
long
-
accurate
pcr
clone
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
用LA-PCR方法克隆东方田鼠部分Y染色体序列
被引量:
1
2
作者
姜宪环
蔡慧强
高骏
倪丽菊
李凯
肖君华
周宇荀
机构
东华大学生物科学与技术研究所
上海市农业科学院
上海实验动物研究中心
出处
《实验动物与比较医学》
CAS
2012年第4期324-328,333,共6页
基金
上海市科技创新行动计划实验动物专项基金
文摘
目的克隆东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)Y染色体的部分序列,并挖掘这两个亚种间的单核苷酸多态性位点(SNPs)。方法本研究利用依据Y染色体保守性靶标位点(YCATS)设计的引物,测得Y染色体上的8个内含子短片段序列,进而设计长片段PCR(LA—PCR)引物来获得相距几kb的两个内含子之间的长片段序列。结果获得东方田鼠长江亚种和宁夏指名亚种Y染色体上的7300bp序列,比对这两个亚种的序列后发现4个SNPs位点。结论获得了田鼠Y染色体上的7300bp序列和4个SNPs位点。
关键词
东方田鼠
单核苷酸多态性位点
Y染色体保守性靶标位点
长片段
pcr
Keywords
Microtusfortis
Single nuclear polymorphism (SNP)
Y chromosome conserved anchored tagged sequences (YCATS)
long
and
accurate
polymerase chain reaction
(la-pcr
)
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
成都地区HBV基因型分布研究
被引量:
7
3
作者
卢亦路
王玲
张发强
陈清英
夏增亮
胡迪
夏庆杰
机构
四川大学华西医院眼疾病分子遗传研究室
四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室
四川大学华西分子遗传研究室
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期546-548,共3页
文摘
目的调查成都地区乙型肝炎患者外周血中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况。方法以长片段高保真聚合酶链反应(LA-PCR)扩增乙肝病毒S基因区,结合双脱氧链末端终止法(Sanger)测序技术对该地区90例乙型肝炎患者感染的HBV进行基因分型;同时与常用的基因型特异引物扩增分型法获得的分型结果进行比较,做重复试验以证实所用方法的可靠性和准确性。结果S基因直接测序法检测成都地区人群HBV基因分型结果为B基因型57例(63.3%)、C型30例(33.3%),D型3例(3.3%),无其他基因型和混合型;基因型特异引物分型法除榆出23例(25.5%)混合基因型外,其他各例结果均与S基因测序法吻合。结论成都地区HBV优势基因型以B型为主,C型次之,偶见D型。S基因直接测序法能准确鉴定HBV基因型,并较好地反映HBV基因组变化的准种特征,总体上优于型特异引物分型法,此结论具有统计学意义(P<0.001)。
关键词
乙型肝炎病毒
基因型
长片段高保真聚合酶链反应
S基因直接测序法
型特异
引物分型法
Keywords
Hepatitis B virus (HBV)
Genotype
long and accurate pcr (la-pcr)
Sequencing S fragment
Typespecific primers
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
LA-PCR快速克隆传染性法氏囊病病毒基因组A节段全长cDNA方法的建立
李建荣
宋厚辉
于涟
黄耀伟
谢荣辉
周继勇
郑筱祥
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
4
下载PDF
职称材料
2
用LA-PCR方法克隆东方田鼠部分Y染色体序列
姜宪环
蔡慧强
高骏
倪丽菊
李凯
肖君华
周宇荀
《实验动物与比较医学》
CAS
2012
1
下载PDF
职称材料
3
成都地区HBV基因型分布研究
卢亦路
王玲
张发强
陈清英
夏增亮
胡迪
夏庆杰
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
7
原文传递
已选择
0
条
导出题录
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参考文献
引证文献
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