动脉粥样硬化小鼠lncRNA表达谱分析及lncRNA AI662270的功能初探

目的:分析动脉粥样硬化模型小鼠主动脉中的长链非编码RNA(lncRNA)表达谱,探讨lncRNA AI662270调控小鼠巨噬细胞炎症和脂质吞噬的功能及机制。方法:将20只8周龄雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。实验组给予高脂饲料喂养12周构建动脉粥样硬化模型,对照组给予普通饲料喂养。检测小鼠体重变化和血脂水平,采用油红O染色检测主动脉斑块面积;高通量RNA测序(RNA-seq)分析小鼠主动脉lncRNA表达谱,采用RT-qPCR对差异表达的lncRNA进行验证;利用反义寡核苷酸(ASO)敲减小鼠巨噬细胞RAW264.7中lncRNA AI662270的表达。根据对细胞的不同处理,设置空白对照(blank)组(无任何处理)、氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)组(80 mg/L oxLDL诱导)、阴性转染对照(ASO-NC)组(转染ASONC)、oxLDL+ASO-NC(转染ASO-NC后80 mg/L oxLDL诱导)、ASO-AI662270组(转染ASO-AI662270)和oxLDL+ASOAI662270组(转染ASO-AI662270后80 mg/L oxLDL诱导)6个组。ELISA检测细胞上清中细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达;Western blot检测NF-κB通路相关分子的表达;利用荧光探针标记检测细胞核中NF-κB p65的表达。结果:动脉粥样硬化模型小鼠的体重、血脂水平和主动脉斑块面积与对照组小鼠具有显著差异(P<0.01)。RNA-seq共鉴定出29个表达差异显著的lncRNA(P<0.05),这些差异表达的lncRNA参与代谢途径、吞噬体形成和细胞黏附分子表达等通路。lncRNA AI662270在小鼠主动脉斑块和oxLDL刺激后的RAW264.7细胞中表达均显著上调(P<0.05),敲减AI662270可显著降低RAW264.7细胞中TNF-α和IL-6的表达(P<0.01),减少吞噬脂质,抑制磷酸化NF-κB p65和磷酸化IκBα的表达(P<0.05);此外,敲减AI662270可减少RAW264.7细胞核中NF-κB p65的含量。结论:动脉粥样硬化模型小鼠主动脉组织中lncRNA表达谱发生显著改变,lncRNA AI662270可能通过NF-κB通路调控小鼠巨噬细胞的炎症和脂质吞噬。

LncRNA BANCR在肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(Long non-coding RNA)是一组长度大于200nt、无特异完整的开放阅读框、无蛋白编码功能的RNA,在总nc RNA中占有相当大的比例。其中BRAF-活化的非编码RNA(BRAF-acticited long non-coding RNA BANCR)作为在恶性黑素细胞瘤中新发现的lnc RNA,被认为是人类最重要的原癌基因之一,但有研究表明BANCR在某些肿瘤中可以作为抑癌因子抑制肿瘤的发生发展。本研究对BANCR参与肿瘤的发生发展进行了探讨,并对BANCR在不同肿瘤中的作用机制进行综述,为肿瘤的早期诊断和治疗提出新的展望。