南方红壤侵蚀区金银花抗旱特性及其对稀土肥的响应

为研究不同干旱胁迫程度和稀土肥浓度对金银花叶片的形态指标和生理指标的影响,探究稀土肥对其抗旱性的影响,本文以四季金银花为材料,设置不同PEG-6000浓度和稀土肥浓度,测定金银花叶片的形态指标和生理指标。研究结果表明:①干旱胁迫下,金银花的叶长、叶宽、叶厚、叶面积均下降,比叶面积和叶组织密度上升,鲜重、干重和相对含水量整体上低于对照,SPAD值显著低于对照(P<0.05),CAT、POD、SOD酶活性和MDA、Pro含量上升,说明金银花能够通过调节形态特征来减少体内水分散失,并能够有效调动渗透调节物质,防御膜质过氧化,适应干旱胁迫;②稀土肥对金银花的抗氧化酶活性无明显影响,但能够促进其形态发育,调节叶绿素和渗透调节物质,促进其抗旱性增强。

金银花花叶总黄酮类化合物的最佳提取工艺研究

利用系统溶剂法及L9(34)正交实验探讨从金银花及金银花叶中提取黄酮类,其最佳提取工艺为90%乙醇、物料比1∶12,于70℃温浸60 min.

高效液相色谱法同时测定金银花及叶中的黄酮类物质

目的建立金银花和金银花叶提取物中黄酮类物质槲皮素及木犀草素的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法，以甲醇－0．02％磷酸（50：50）为流动相，检测波长350nm。结果槲皮素、木犀草素分别在4．0—20，3、8—191μg／ml的浓度范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系，它们的加标回收率在95．07％～97．98％范围内，相对标准偏差0．32％～3．34％。结论此方法简便、灵敏、快速，可用于金银花药材中黄酮类物质的含量测定。

金银花叶药用成分的提取及抑菌试验

用溶剂乙酸乙酯分离总黄酮 ,用 β-环糊精共沉淀法分离绿原酸 ;对分离物进行最小抑菌浓度试验。结果表明 ,金银花叶中的黄酮类物质对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用分别是绿原酸的 4倍和 2倍。

金银花叶中绿原酸的提取及抗氧化活性研究

本研究利用双水相体系分离金银花叶中的绿原酸并分析其抗氧化活性。探讨4种乙醇/无机盐双水相体系提取绿原酸的能力,在乙醇浓度、盐浓度、提取时间和温度4个单因素实验的基础上,通过响应面法研究Na H_2PO_4添加量、乙醇浓度和提取时间3因素及其交互作用对绿原酸提取率的影响。研究结果显示,4种乙醇/无机盐双水相体系中,乙醇/Na H_2PO_4双水相体系具有最佳的绿原酸提取效果。优化的提取工艺为Na H_2PO_4添加量3.15 g、乙醇浓度28.5%和提取时间49 min,提取率可达80.2%。当金银花叶绿原酸浓度为0.5 mg/m L时,其DPPH自由基清除率达84.2%;绿原酸浓度为1 mg/m L时,脂肪过氧化抑制能力达88%。这些研究结果表明乙醇/Na H_2PO_4双水相体系能有效提取金银花叶中的绿原酸,具有较好的应用前景。

2,4-D等植物生长调节剂对金银花叶片植株再生的影响

以金银花叶片为外植体,研究了2,4-D等植物生长调节剂对愈伤组织诱导和植株再生的影响.结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MB+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT,愈伤组织诱导率达91.84%,生长良好;最佳不定芽分化培养基为MB+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,不定芽分化率达93.33%,且生长旺盛;最佳不定芽生根培养基为1/2MB+2.0mg/L IBA+0.2mg/L IAA,生根率达83.33%,且根较多,苗健壮.试管苗移栽成活率达89.3%.

大孔吸附树脂纯化金银花叶总多酚的工艺优化

考察大孔吸附树脂对金银花叶多酚的吸附性能和纯化效果,寻找金银花叶多酚纯化的较优工艺。采用Folin-Cio-calteu比色法定量,比较8种大孔树脂对金银花叶总多酚的吸附和解吸效果,从中筛选出适合分离纯化金银花叶总多酚的树脂,并对其吸附和解吸条件进行考查与优化。结果表明,NKA-Ⅱ为纯化金银花叶总多酚的最佳树脂,当其吸附流速为2BV/h,吸附pH 3,上柱样品溶液质量分数6mg/mL,解吸剂选用60%乙醇时,经NKA-Ⅱ精制的金银花叶总多酚为粉红色粉末,总酚质量分数为61.88%。

HPLC法同时测定忍冬的花、叶中木犀草苷和绿原酸含量

建立了HPLC法测定忍冬的花、叶中木犀草苷和绿原酸含量的方法。应用Shim-pack ODS色谱柱(4.6×250 mm,5μm),乙腈/0.2%甲酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为350 nm。在此色谱条件下,各组分在30 min内均得到良好分离。用该方法测定了3个品种忍冬的花、叶中木犀草苷和绿原酸的含量,结果表明亚特、意大利和九丰一号忍冬叶中木犀草苷含量分别为5.856、2.454和4.633 mg·g-1,明显高于花。

不同类型叶面肥对忍冬生长发育及金银花质量的影响

目的 :研究不同类型叶面肥对忍冬生长发育及金银花质量的影响。方法 :采用紫外分光光度法测定绿原酸含量。结果 :在新梢旺长期喷施全营养叶面肥 (含 N、P、K等大量元素和 Zn、Mn、Fe、B、Cu、Mo等微量元素 )可提高忍冬花枝比例 ,促进花枝伸长 ,增加叶面积 ,提高产量和金银花内绿原酸含量 ,其中高 N型肥料效果最为显著 ;尿素和磷酸二氢钾的效果小于全营养叶面肥。结论 :高 N型叶面肥可促进忍冬生长发育 ,提高金银花产量和质量 ,较适合用于金银花生产。

忍冬叶环烯醚萜苷类化学成分研究

利用硅胶、Sephadex LH-20以及制备液相色谱等方法进行分离纯化,从忍冬叶中分离得到3个环烯醚萜苷类化合物,以及β-谷甾醇和胡萝卜苷。通过理化性质、波谱数据分析,分别鉴定为裂环马钱素酸、demethylsecologanol、裂环马钱素、β-谷甾醇和胡萝卜苷,其中化合物demethylsecologanol为首次从该属植物中分离得到。

金银花叶提取物的抗氧化活性和抑菌作用研究

用POV测定法和过氧化氢氧化法考察了金银花叶提取物的抗氧化活性 ,最小抑菌浓度试验考察了提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用。结果表明 ,绿原酸粗提物和粗黄酮对油脂的过氧化反应均有一定的抑制作用 ,两者的氧化还原容量分别是化学合成抗氧剂BHA的 2 .0和 2 .8倍 ;分离物最小抑菌浓度试验表明 ,金银花叶中的黄酮类物质对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用分别是绿原酸的 4和 2倍。

β-环糊精在绿原酸分离中的应用研究

用β－ 环糊精作载体，使与金银花茎叶提取液中的绿原酸共沉淀，以达到药用成份的分离。

不同栽培居群忍冬植株形态特征研究

目的:比较不同栽培居群忍冬植株形态特征,探讨忍冬植物形态特征变异与环境因素的相关性。方法:选择山东、河北、河南等6个栽培区域内的同一生长年限的忍冬居群,分别测定其株高、株围、枝条长度、枝条直径、叶片长度、叶片宽度、叶片长宽比、花蕾长度、花蕾直径、花蕾干重等形态特征指标,同时记录各栽培居群所处地块的经纬度、海拔高度、年均气温、年降水量、年日照时数等,采用SPSS统计软件对其进行分析。结果:不同栽培居群忍冬植株的各种形态特征指标均有变异,但变异程度不同。环境因素对忍冬植株形态特征具有重要影响,尤以土壤的影响最大。栽培措施对植株形态特征的影响有时远大于环境因素的影响。结论:影响植株形态特征变异的因素既包括遗传因素、环境因素,也包括栽培管理措施。植株形态特征可作为忍冬种质区分、良种选育及药材道地性研究的重要参考依据。

土壤水分变化对金银花叶片生理生态特征的影响

在不同的土壤含水量条件下,测定了金银花叶片的叶面积、叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、叶绿素总量、比叶重、光合日变化、日碳固定总量等多个指标。结果表明:随着土壤含水量的降低,金银花的叶面积降低,而叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、叶绿素总量、比叶重都升高;土壤干旱加剧了金银花叶片光合日变化的波动,土壤相对含水量最低(30.01%)时,光合速率谷底值比峰值降低了89.47%;但日碳固定总量变化不大。金银花通过减小叶面积,增加叶绿素含量、比叶重来保持一定的碳积累以便适应土壤干旱。

忍冬叶中绿原酸提取工艺研究

利用微波炉和紫外可见分光光度计,采用单因数测定和正交实验得出忍冬叶中绿原酸最佳提取工艺:用3倍量的80%乙醇在微波输出功率为500W的条件下预处理80s,然后加25倍量的水在80℃的水浴中浸提3次,每次14min。并建立了绿原酸的紫外分光光度测定法。

绿原酸清洁提取及其体外生物活性评价

植物纤维组织致密结构阻碍天然生物活性成分绿原酸的溶出,为减少绿原酸溶出的传质阻力,选取复配酶(纤维素酶和木质素酶)催化水解金银花叶溶浸获得绿原酸,并采用DPPH自由基清除法、铁氰化钾还原法评价提取物绿原酸的体外抗氧化性。分析酶解金银花叶后的SEM照片发现,酶能有效破坏植物纤维组织结构,有助于形成内部疏松结构,而金属离子对酶催化水解活性作用依次为Mg^(2+)>Na^+>Ca^(2+)>K^(2+)>Cu^(2+);选取纤维素酶-木质素酶酶活比为3∶2的复配酶,在水浴温度45℃、pH 4的条件下,当复配酶投加量为50 U/g时,在Mg^(2+)诱导催化水解2 g金银花叶11 h后,绿原酸浸提率达94.68%,比超声醇提法提高了19.60%,所得绿原酸具备高抗氧化性和还原性,为资源化利用金银花叶以及绿原酸生产提供了新途径。

多效唑和缩节胺对现蕾前忍冬枝叶生长及花蕾性状和有效成分含量的影响

以忍冬品种‘九丰一号’(Lonicera japonica‘Jiufeng 1’)为实验材料,采用叶面喷施方法研究了不同质量浓度多效唑和缩节胺对现蕾前(抽枝生长初期)枝叶生长和叶片叶绿素含量以及花蕾性状和花蕾中绿原酸和总黄酮含量的影响。结果显示:分别喷施100、400、700和1 000 mg·L-1多效唑和50、100、150和200 mg·L-1缩节胺后,多数处理组的开花枝条数、着花节数和叶绿素含量较对照CK1(水)有不同程度提高,但叶面积差异不明显。随处理时间延长,各处理组枝条节间长度总体上呈逐渐增加的趋势,其中多数处理组枝条节间长度增长缓慢。各处理的花蕾长度、百蕾鲜质量和干质量总体上小于CK1,而花蕾折干率、总黄酮含量和绿原酸含量显著或不显著高于CK1。此外,在喷施多效唑和缩节胺的同时喷施质量体积分数1.0%尿素和质量体积分数0.1%硼砂,忍冬的叶面积、着花节数、花蕾长度、折干率、百蕾鲜质量和干质量总体上有所提高,而绿原酸含量降低,但各指标的差异总体较小。研究结果表明:喷施适量多效唑和缩节胺可调控忍冬枝条生长,并能提高花蕾中总黄酮和绿原酸含量。

8个不同种质忍冬叶中绿原酸含量测定

目的：以绿原酸的含量为指标,评价不同种质忍冬叶的质量,为忍冬种质的划分和忍冬叶的开发应用提供理论依据。方法：采用高效液相色谱法。结果：8个种质忍冬叶绿原酸含量为0.79%~2.43%。结论：不同种质忍冬叶中绿原酸含量存在差异。其中含量达到《中国药典》中金银花标准的有24,32,34三个种质,含量在1%以上的有19,21,27,36四个种质,种质17叶片中绿原酸含量最低。

金银花叶中绿原酸的大孔吸附树脂纯化工艺研究

目的:建立金银花叶中绿原酸的含量测定方法,考察不同型号的大孔吸附树脂对金银花叶中绿原酸的提取纯化效果,为金银花药材的综合开发利用提供参考。方法:采用高效液相色谱法测定指标成分。采用静态吸附法和动态吸附法,考察大孔树脂的吸附、洗脱附性能和纯化效果。结果:绿原酸在2.376 8～60.476 9μg与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率96.82%,RSD 1.83%。HPD450大孔吸附树脂纯化效果较好,优化条件为:柱径比3∶1,药液质量浓度0.5～1.0 g·mL-1、吸附速度0.5 BV·h-1、树脂吸附量生药0.3 g·g-1、洗脱溶媒30%乙醇、洗脱速度2 B V·h-1,洗脱溶媒用量2 BV。结论:HPD450大孔树脂对绿原酸纯化效果较好,工艺稳定可行,可用于工业化生产。

山东产忍冬不同药用部位挥发油成分分析及抗氧化活性

目的:对山东产忍冬花、茎、叶不同药用部位进行挥发性成分分析及抗氧化活性研究。方法:分别提取忍冬花、茎、叶的挥发油,利用GC-MS进行成分分析和比较;用70%乙醇分别提取忍冬花、茎、叶,提取液回收溶剂后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,利用DPPH比色法对各萃取物、萃取后的水相部位及挥发油分别进行体外抗氧化能力比较。结果:从忍冬花、茎、叶中共分离鉴定了49种成分,三者共有成分11种,分别占各自挥发油含量的60.66%,77.98%和80.38%,含量最高的均为棕榈酸。忍冬花、茎、叶的不同提取物对DPPH自由基均有较好的清除作用,且清除能力随着浓度的增加而增加,但各样品间存在一定差异。乙酸乙酯萃取物清除能力最强,依次是正丁醇萃取物、水相、挥发油、石油醚萃取物;花的清除能力最强,茎和叶次之。结论:忍冬花、茎、叶中挥发油成分具有较高相似性;三者挥发油及不同极性提取物均具有较好的抗氧化能力。