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Identification and Molecular Tagging of Leaf Rust Resistance Gene (Lr24) in Wheat 被引量:2
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作者 ZHANG Na YANG Wen-xiang LIU Da-qun 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2011年第12期1898-1905,共8页
This research was aimed to develop AFLP markers co-segregated with gene Lr24 and validate the using for marker assisted selection (MAS). An F2 population developed from the cross between the resistant line TcLr24 an... This research was aimed to develop AFLP markers co-segregated with gene Lr24 and validate the using for marker assisted selection (MAS). An F2 population developed from the cross between the resistant line TcLr24 and the susceptible line Thatcher was tested for resistance to the Puccinia triticina races BGQQ and SHRT using for genetic analysis and molecular marker. A total of 224 AFLP primer combinations were used to test the resistant and susceptible parents, as well as the resistant bulk and the susceptible bulk. Four AFLP markers, P-AGA/M-CTT289 bp, P-AGC/M-CAC1ss bp, P-AGC/M- CAC162 bp, and P-ACG/M-CGC239 bp, were co-segregated with Lr24. The AFLP fragment from the primer combination P- ACG/M-CGC was cloned, sequenced and converted into a STS marker named as ASTS212. Thatcher backgrounded NILs and 115 varieties were examined by using this STS marker and the marker SCS13026oz developed by Gupta. 5R615, 5R616, IR13, and 1R17 were identified and validated to contain gene Lr24. The marker is dominant and may be useful in identification the resistance gene Lr24 in wheat and wheat breeding programs. 展开更多
关键词 wheat leaf rust lr24 gene AFLP STS MAS
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应用高通量实时荧光定量PCR方法筛选FL细胞对低剂量微囊藻毒素LR暴露的应答基因 被引量:4
2
作者 王秀敏 邵敏华 +2 位作者 卢大儒 徐立红 余应年 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期909-911,共3页
关键词 微囊藻毒素lr 应答基因 高通量 实时荧光定量PCR
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Identification of leaf rust resistance genes in common wheat varieties from China and foreign countries 被引量:1
3
作者 LIU Yuan Takele Weldu GEBREWAHID +2 位作者 ZHANG Pei-pei LI Zai-feng LIU Da-qun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期1302-1313,共12页
Wheat leaf rust,triggered by Puccinia triticina Eriks(Pt),is among the most important diseases of wheat worldwide.Deploying resistant varieties against leaf rust is the most effective,environmentally-friendly and econ... Wheat leaf rust,triggered by Puccinia triticina Eriks(Pt),is among the most important diseases of wheat worldwide.Deploying resistant varieties against leaf rust is the most effective,environmentally-friendly and economic way to control the disease.In the present study,66 wheat varieties form China and foreign countries were tested with 17 Pt races for gene postulation during the seedling stage in the greenhouse.All the varieties were also planted to identify slow rusting responses to leaf rust at the adult plant stage in Baoding and Zhoukou field trials during the 2016/2017 to 2017/2018 cropping seasons.Moreover,12 closely linked molecular markers to known leaf rust resistance(Lr)genes were used for assessing all the varieties.The results of both gene postulation and molecular marker identification showed that a total of eight Lr genes,Lr1,Lr10,Lr17,Lr20,Lr26,Lr34,Lr37 and Lr46,either singly or in combination were detected in 32 varieties.Known Lr genes were not identified in the remaining 34 varieties.Seventeen varieties were found to have slow rusting resistance.The resistance sources identified in this study can be used as resources for resistance against leaf rust in wheat breeding programs in China and the respective foreign countries. 展开更多
关键词 WHEAT gene postulation molecular marker lr gene
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草鱼Rab1A基因的克隆表达、抗体制备及对微囊藻毒素-LR的响应 被引量:1
4
作者 何丽 刘林 +4 位作者 阮记明 周颖 梁惜梅 林长高 隗黎丽 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2035-2043,共9页
为了解草鱼(Ctenopharygodon idella)小分子三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白家族成员Rab1A的分子结构特点及其在微囊藻毒素-LR(MC-LR)胁迫中的作用,本研究根据草鱼肝脏(MC-LR诱导)转录组测序获得的unigenes序列,采用RACE技术克隆了草鱼Rab1A基... 为了解草鱼(Ctenopharygodon idella)小分子三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白家族成员Rab1A的分子结构特点及其在微囊藻毒素-LR(MC-LR)胁迫中的作用,本研究根据草鱼肝脏(MC-LR诱导)转录组测序获得的unigenes序列,采用RACE技术克隆了草鱼Rab1A基因cDNA,其全长序列为806 bp,开放阅读框为609 bp,编码202个氨基酸。同源性分析结果表明,Rab1A与鲤鱼(Cyprinus carpio)Rab1A3相似性最高。系统进化分析表明草鱼Rab1A与鲤鱼、斑马鱼(Danio rerio)等鱼类聚为一大支。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析发现Rab1A在草鱼各组织中广泛分布,在血液和鳃等组织中的表达较丰富。构建了pGEX-4T-1-Rab1A重组表达载体,并制备了Rab1A多克隆抗体,通过酶联免疫(ELISA)检测抗体效价为1∶512000以上,Western blot检测显示抗体具有特异性。草鱼肝脏经微囊藻毒素-LR(MC-LR)染毒,发现25和75μg·g^(-1)感染96 h后对Rab1A基因和蛋白表达的影响不明显(P>0.05),但100μg·kg^(-1)可导致草鱼肝脏Rab1A基因和蛋白表达显著下降(P<0.05),表明Rab1A在参与草鱼抵御MC-LR胁迫过程中起着重要的作用。本研究为进一步了解Rab1A基因的功能及其在MC-LR胁迫过程中所发挥的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 草鱼 微囊藻毒素-lr Rab1A 基因克隆 多克隆抗体 表达
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Expression Patterns of the Cell Junction-associated Genes During Rat Liver Regeneration 被引量:1
5
作者 李红蕾 陈晓光 +2 位作者 张富春 马纪 徐存拴 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期892-908,共17页
To study actions of the genes associated with tight junction, adherent junction, focal adhesion, and gap junction during liver regeneration (LR), these genes were obtained by collecting data from databases and thesi... To study actions of the genes associated with tight junction, adherent junction, focal adhesion, and gap junction during liver regeneration (LR), these genes were obtained by collecting data from databases and thesis, and their expression profiles in rat regenerating liver were detected employing Rat Genome 230 2.0 array. Next the LR-associated genes were identified by comparing the difference between sham operation (SO) and partial hepatectomy (PH) groups. 79, 53, 109, 53 genes involved in the above four junctions were found to be LR-associated. The initial and total expression numbers of these genes occurring in the initial phase of LR, G0/G1, cell proliferation, cell differentiation, and structure-functional rebuilding were 124, 43, 122, 10, and 249, 145, 957, 306, respectively, illustrating that genes were initi^ly expressed mainly in the initiation stage, and functioned in different phases. Up-regulation-and down-regulation to a total of 972 and 540 times, as well as, 41 types of expression patterns showed that the physiological and biochemical activities were diverse and complicated in LR. According to the data, there was an increase in the forepart and prophase, but a decrease in late-metaphase and anaphase for gap junction assembly. Focal adhesion formation displayed an enhancement in forepart, prophase, and anaphase; and formation of tight junctions and adherent junctions last throughout the LR. 展开更多
关键词 partial hepatectomy (PH) rat genome 230 2.0 array cell junction genes associated with lr
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表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒构建及应用
6
作者 宋新宇 张茜 +3 位作者 贡鑫 戚亭 陈雨 车艳杰 《中国动物检疫》 CAS 2024年第9期122-128,共7页
为构建表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒(herpesvirusofturkey,HVT),以连续覆盖HVT全基因组的Fosmid文库为基础,利用Red/ET同源重组技术和Gateway LR克隆技术,将优化的携带Pec复合启动子的HA基因插入到HVT复制非必需区HVT... 为构建表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒(herpesvirusofturkey,HVT),以连续覆盖HVT全基因组的Fosmid文库为基础,利用Red/ET同源重组技术和Gateway LR克隆技术,将优化的携带Pec复合启动子的HA基因插入到HVT复制非必需区HVT053与HVT054位点处的95318~95319nt之间,获得了表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组HVT(rHVT-H9-HA株),并对构建的毒株进行鉴定。结果显示,成功构建了含有HA基因的入门质粒pEntr-HA,通过Gateway克隆的LR反应将含有HA基因的表达盒转移到黏粒pFosC DEST的第53和54号基因之间形成pFosC HA;提取5个黏粒后,转染次代CEF细胞获得拯救重组病毒rHVT-H9-HA株。连续传代和动物试验结果表明,rHVT-H9-HA株毒价高,遗传稳定,可以克服母源抗体干扰,免疫持续期长,能够提供针对H9亚型禽流感的保护;同时也实现了一针防两病,效果明显优于灭活疫苗。本研究为H9亚型禽流感病毒重组HVT活载体疫苗的研制提供了技术支撑。 展开更多
关键词 重组毒株rHVT-H9-HA 火鸡疱疹病毒 HA基因 Red/ET同源重组技术 Gatewaylr克隆技术
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微囊藻毒素-LR对小鼠原代肝细胞线粒体功能的影响 被引量:3
7
作者 贺云 陈艺生 +3 位作者 任岚 尹一杰 胡桂玲 吴云丽 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期816-822,共7页
目的蓝藻水华引起的微囊藻毒素污染是世界性关注话题之一,微囊藻毒素LR(MC-LR)具有强特异性肝毒性,但其引起肝损伤的确切机制尚未完全阐明。为解决这一问题,本研究从细胞分子层面探讨MC-LR造成肝细胞线粒体功能改变的分子机制。方法提... 目的蓝藻水华引起的微囊藻毒素污染是世界性关注话题之一,微囊藻毒素LR(MC-LR)具有强特异性肝毒性,但其引起肝损伤的确切机制尚未完全阐明。为解决这一问题,本研究从细胞分子层面探讨MC-LR造成肝细胞线粒体功能改变的分子机制。方法提取小鼠原代肝细胞,加入梯度剂量的MC-LR(2.5~10 nmol/L)作用48 h,以未加毒素处理组为对照,检测MC-LR对线粒体功能的影响(包括ATP水平和线粒体膜电位检测),DNA损伤(包括彗星试验和8-OHdG水平检测),并分析p53抑制剂pft-α作用下线粒体功能损伤情况。结果 MC-LR造成肝细胞线粒体功能障碍,DNA损伤且p53蛋白表达水平上调;p53特异性抑制剂pft-α减轻MC-LR造成的线粒体损伤。结论在本试验条件下,MC-LR造成小鼠肝细胞线粒体功能异常的机制与其造成DNA损伤诱导p53上调有关。 展开更多
关键词 微囊藻毒素-lr 原代肝细胞 线粒体功能 DNA损伤 P53
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针刺太冲穴对肝阳上亢型偏头痛大鼠血清血管活性物质含量的影响 被引量:4
8
作者 林淑芳 王嘉驹 +3 位作者 陈白 曹丽萍 姚娟娟 江一静 《世界中医药》 CAS 2023年第18期2584-2588,共5页
目的:探讨针刺太冲穴对肝阳上亢型偏头痛模型鼠的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为空白对照组(n=10)、模型组(n=40),模型组大鼠以附子汤灌胃结合颈肩部皮下注射硝酸甘油建立肝阳上亢偏头痛模型,其中30只大鼠成模,将成模的大鼠随机... 目的:探讨针刺太冲穴对肝阳上亢型偏头痛模型鼠的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为空白对照组(n=10)、模型组(n=40),模型组大鼠以附子汤灌胃结合颈肩部皮下注射硝酸甘油建立肝阳上亢偏头痛模型,其中30只大鼠成模,将成模的大鼠随机分为模型组、太冲组、非穴组,每组10只。太冲组针刺双侧太冲穴,非穴组针刺双侧肋下非穴,留针30 min。观察大鼠行为学(耳红持续时间、挠头及爬笼次数)、酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清降钙素基因相关肽(CGRP)、5-羟色胺(5-HT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:模型组、太冲组及非穴组均在注射硝酸甘油后4 min左右耳红,持续3 h左右消失;与模型组、非穴组比较,太冲组大鼠耳红持续时间较短(均P<0.05)。针刺前,除空白对照组外,大鼠的挠头、爬笼次数增加且组间差异无统计学意义(P>0.05);针刺后1 h、2 h,与模型组和非穴组比较,太冲组大鼠挠头、爬笼次数均减少(均P<0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠血清中CGRP、TNF-α含量增高(P<0.05),5-HT含量降低(P<0.05);与模型组和非穴组比较,太冲组大鼠血清中CGRP、TNF-α含量减少(均P<0.05),5-HT含量增多(均P<0.05)。结论:针刺双侧太冲穴可缓解偏头痛,其作用机制可能与降低血清中CGRP、TNF-α含量,提高5-HT含量有关。 展开更多
关键词 偏头痛 肝阳上亢 针刺 太冲穴 血管活性物质 降钙素基因相关肽 5-羟色胺 肿瘤坏死因子-α
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1990年河北省小麦叶锈菌群体的毒性基因分析 被引量:5
9
作者 郭爱国 赤国彤 +2 位作者 杨文香 王焕如 朱之堉 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期43-46,共4页
本文采用Wolfe等提出的毒性频率分析法首次对河北省小麦叶锈菌群体的毒性基因及其频率进行了研究,结果表明:毒性基因V_2d,Vs。,V(14a),V_(14b),V_(16)和V_(18)在叶锈菌群体中普遍存在,相对频率高于82.35%,V_9,V_(19),V_(24),V_(25),V_(... 本文采用Wolfe等提出的毒性频率分析法首次对河北省小麦叶锈菌群体的毒性基因及其频率进行了研究,结果表明:毒性基因V_2d,Vs。,V(14a),V_(14b),V_(16)和V_(18)在叶锈菌群体中普遍存在,相对频率高于82.35%,V_9,V_(19),V_(24),V_(25),V_(28)和V_(29)较少,相对频率为0—16.61%,V_1,V_(2a),V_(2c),V_(3Bg),V_(10),V_(14ab),V_(15),V_(17),V_(21),V_(23),V_(26)和V_(30)介于以上二者之间,相对频率为21.22—73.61%。作者根据毒性基因在各地区的分布,初步提出省内抗性基因布局意见。 展开更多
关键词 小麦 抗性基因 毒性基因 叶锈菌
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小麦叶锈菌生理分化及小麦抗叶锈基因分析研究进展 被引量:10
10
作者 徐大庆 黄国红 +1 位作者 杨文香 刘大群 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期71-76,共6页
在病害三角关系中 ,病原物的致病性及寄主的抗病性是决定病害发生与否的内在因素。小麦叶锈病是一种世界性病害 ,人们已对小麦叶锈菌生理分化和小麦抗叶锈基因分析作了大量的研究。在本文中综述了这两方面的国内外研究进展 。
关键词 小麦叶锈菌 毒性基因 抗叶锈基因 近等基因系
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小麦品种抗叶锈基因重复鉴定的比较研究 被引量:4
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作者 郭爱国 刘颖超 +1 位作者 朱之 王焕如 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期13-18,共6页
为避免基因推导的简单化以及增强基因推导的准确性,本研究利用多菌株分组,在不同环境条件下(温室和人工气候箱),用直接比较法在不同年份对同一批小麦品种进行了抗叶锈基因推导,结合系谱分析,在10个小麦品种中得如下结果:京农... 为避免基因推导的简单化以及增强基因推导的准确性,本研究利用多菌株分组,在不同环境条件下(温室和人工气候箱),用直接比较法在不同年份对同一批小麦品种进行了抗叶锈基因推导,结合系谱分析,在10个小麦品种中得如下结果:京农86-161和京农86-6554含有Lr26;H88-65含Lr15和Lr26;唐麦4号、京农86-74和农大84016含Lr26和另一个未确定的抗性基因;京农89-S4069和太原163所含的抗性基因与供试的已知Lr基因不同; 展开更多
关键词 小麦 叶锈菌 抗性基因 品种
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以木糖异构酶基因xylA为选择标记的Gateway系统植物表达载体的构建 被引量:4
12
作者 阎淑滑 周波 +1 位作者 赵霞 李玉花 《生物技术通讯》 CAS 2010年第1期35-38,共4页
目的:构建以木糖异构酶基因xylA为筛选标记的无抗生素标记Gateway系统植物表达载体。方法:克隆大肠杆菌木糖异构酶基因xylA并用其替换植物表达载体pCAMBIA1301中的hpt基因,利用载体中的多克隆位点将Gateway Binary Vector(pH7WG2D)中酶... 目的:构建以木糖异构酶基因xylA为筛选标记的无抗生素标记Gateway系统植物表达载体。方法:克隆大肠杆菌木糖异构酶基因xylA并用其替换植物表达载体pCAMBIA1301中的hpt基因,利用载体中的多克隆位点将Gateway Binary Vector(pH7WG2D)中酶切位点XbaⅠ和HindⅢ之间包括P35S、T35S、attR1、attR2和CmR-ccdB的片段重组入表达载体pCAMBIA1301中,构建表达载体pCAMBIA1301-xylA-GW,利用含有津田芜菁HY5基因片段的BP反应产物与载体进行LR反应,获得含有目的基因的植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5,并导入根癌农杆菌LBA4404中。结果:抗生素筛选及酶切和PCR鉴定表明成功构建了以xylA为筛选标记的无抗生素标记植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5。结论:利用木糖异构酶基因xylA结合Gateway克隆技术构建无抗生素标记植物表达载体,可简化、方便植物转基因表达载体构建。 展开更多
关键词 GATEWAY技术 木糖异构酶基因 lr反应 植物表达载体
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常染色体STR祖孙亲缘关系鉴定分析 被引量:14
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作者 柳燕 赵珍敏 李莉 《中国司法鉴定》 2007年第5期18-21,共4页
目的概括归纳一种简便易行的祖孙亲缘关系鉴定分析方法,对实际检案起到指导作用。方法根据孟德尔遗传规律、概率论和亲权指数(PI)值基本概念,归纳推导适用于常染色体STR各种基因型组合的祖孙亲缘关系似然率(LR)计算式及其代入参数。并... 目的概括归纳一种简便易行的祖孙亲缘关系鉴定分析方法,对实际检案起到指导作用。方法根据孟德尔遗传规律、概率论和亲权指数(PI)值基本概念,归纳推导适用于常染色体STR各种基因型组合的祖孙亲缘关系似然率(LR)计算式及其代入参数。并应用于一个三代家系的祖孙鉴定及实际案例。结果祖孙亲缘似然率(LR)计算总共有三种计算式,它们概括了祖孙亲缘关系鉴定中的各种基因型遗传组合情形。公式中祖父母遗传可能的生父基因的概率可以简单地根据可能生父基因在祖父母基因型中所占的比例数来推定。祖孙亲缘关系鉴定分为孩子生母参与和不参与两种情况,同样的遗传指标检验分析后,前一种情形LRs明显升高,后一种情形LRs明显降低。结论用常染色体STR检验进行祖孙亲缘关系鉴定分析,在祖父、祖母均参与的情况下,其祖孙亲缘关系似然率的计算简单、直观、可操作性强;孩子生母尽可能参与检验,否则需要增加检验STR位点的数量才能获得更加明确的结论。 展开更多
关键词 似然率 祖孙 常染色体STR 生父基因
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人IL-21cDNA的克隆及重组腺病毒表达载体的构建 被引量:4
14
作者 王芹 李进 +4 位作者 王颖嫒 宋力 岳井银 穆传杰 樊飞跃 《广西医科大学学报》 CAS 2009年第4期516-518,共3页
目的:构建含人IL-21基因的重组腺病毒表达载体,为IL-21基因治疗肿瘤研究奠定基础。方法:从人外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IL-21基因片段,将其连接到进入载体pENTR1A,然后经LR重组转入到腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST中,构建含... 目的:构建含人IL-21基因的重组腺病毒表达载体,为IL-21基因治疗肿瘤研究奠定基础。方法:从人外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IL-21基因片段,将其连接到进入载体pENTR1A,然后经LR重组转入到腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST中,构建含IL-21基因的腺病毒载体(Ad-IL-21),并进行测序鉴定和PCR鉴定。结果:Ad-IL-21表达载体测序结果与GenBank中IL-21基因序列一致,Ad-IL-21经PCR扩增出IL-21基因片段。结论:成功构建携带人IL-21基因的重组腺病毒表达载体。 展开更多
关键词 IL-21基因 基因克隆 腺病毒表达载体 lr重组反应
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免耕水稻土固定CO2自养微生物多样性 被引量:13
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作者 钱明媚 肖永良 +1 位作者 彭文涛 曹慧 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3754-3761,共8页
使用^(13)CO_2为标记物,采用稳定性同位素核酸探针(DNA-SIP)技术和微宇宙模拟的方法,对两种南方免耕水稻土中的固定CO_2自养微生物群落结构和多样性进行了研究.实验结果表明,经80d的培养后,从^(13)CO_2标记处理的士样提取的DNA经氯化铯... 使用^(13)CO_2为标记物,采用稳定性同位素核酸探针(DNA-SIP)技术和微宇宙模拟的方法,对两种南方免耕水稻土中的固定CO_2自养微生物群落结构和多样性进行了研究.实验结果表明,经80d的培养后,从^(13)CO_2标记处理的士样提取的DNA经氯化铯密度梯度离心后其浮力密度显著区分于^(12)CO_2对照组表明土壤样品中的固定CO_2自养微生物对CO_2具有同化利用.RT-PCR结果表明两种标记土样DNA密度梯度离心分层的cbbLR基因的拷贝数最高分别为1.36×10~5拷贝/g干土和2.21×10~5拷贝/g干土.克隆文库分析和系统发育分析表明两种土壤中的固定CO_2自养微生物群落结构具有一定差异Bradyrhizobium和Rubriviv二是为FG土壤中的主要类群,占全部克隆数的60.40%和13.86%.而TF土壤的主要类群是Rhodopseudomonas,Rhodospirillum,Methylibium和Variovorax,分别占全部克隆数的20.90%、11.94%,16.42%和10.45%.两种^(13)CO_2标记土样的cbbLR基因文库OTU类型、多样性指数均高于^(12)CO_2对照文库,其群落结构也有明显的变化.因此,免耕水稻土存在高度多样性的二氧化碳固定自养微生物,在农田土壤碳素循环方面具有重要作用. 展开更多
关键词 固碳微生物 免耕水稻土 CBB lr基因 DNA-SIP PCR-RFLP分析
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微囊藻毒素和脂多糖对鲢鱼和草鱼肝脏去毒相关基因活体诱导表达的影响 被引量:2
16
作者 王琳 梁旭方 +2 位作者 刘秀霞 程炜轩 郁颖 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期111-116,共6页
采用50μg.(kg体质量)-1的微囊藻毒素-LR(MC-LR)、2 mg.(kg体质量)-1的脂多糖(LPS)和50μg.(kg体质量)-1MC-LR+2 mg.(kg体质量)-1LPS分别活体腹腔注射鲢鱼、草鱼,采用实时荧光定量PCR方法测定MC-LR和LPS对鲢鱼、草鱼肝脏alpha-谷胱甘肽S... 采用50μg.(kg体质量)-1的微囊藻毒素-LR(MC-LR)、2 mg.(kg体质量)-1的脂多糖(LPS)和50μg.(kg体质量)-1MC-LR+2 mg.(kg体质量)-1LPS分别活体腹腔注射鲢鱼、草鱼,采用实时荧光定量PCR方法测定MC-LR和LPS对鲢鱼、草鱼肝脏alpha-谷胱甘肽S-转移酶(GSTA)、rho-谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和解偶联蛋白2(UCP2)等去毒相关基因活体诱导表达的影响.结果表明,鲢鱼、草鱼GSTA和GSTR的不同诱导变化除与两种淡水鱼类对毒素的耐受性相关外,还与毒素剂量、诱导时间等因素相关.LPS对GSTA和GSTR基因组成型、诱导型的不同作用,可能与调制因子LPS对不同生态习性淡水鱼类肝脏GST基因表达水平的调制作用不同有关.UCP2与GPX也分别在抑制过量ROS发生方面与肝脏抗氧化胁迫等方面起重要作用. 展开更多
关键词 微囊藻毒素-lr 脂多糖 可溶性谷胱甘肽S-转移酶 谷胱甘肽过氧化物酶 解偶联蛋白2 诱导表达 实时荧光定量PCR 淡水鱼类
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Cloning and expression of the first gene for biodegrading microcystin LR by Sphingopyxis sp.USTB-05 被引量:7
17
作者 Hai Yan Huasheng Wang +4 位作者 Junfeng Wang Chunhua Yin Song Max Xiaolu Liu Xueyao Yin 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第10期1816-1822,共7页
Harmful cyanobacterial blooms are a growing environmental problem worldwide in natural waters, the biodegradation is found to be the most efficient method for removing microcystins 0VICs) produced by harmful cyanobac... Harmful cyanobacterial blooms are a growing environmental problem worldwide in natural waters, the biodegradation is found to be the most efficient method for removing microcystins 0VICs) produced by harmful cyanobacteria. Based on the isolation of a promising bacterial strain of Sphingopyxis sp. USTB-05 for biodegrading MCs, we for the first time cloned and expressed a gene USTB-O5-A (HM245411) that is responsible for the first step in the biodegradation of microcystin LR (MC-LR) in E. coli DH5ct, with a cloning vector of pGEM-T easy and an expression vector of pGEX-4T-1, respectively. The cell-free extracts (CE) of recombinant E. coli DH5ct containing USTB-O5-A had high activity for biodegrading MC-LR. The initial MC-LR concentration of 40 mg/L was completely biodegraded within 1 hr in the presence of CE with a protein concentration of 0.35 mg/mL. Based on an analysis of the liquid chromatogram-mass spectrum (LC-MS), the enzyme encoded by gene USTB-O5-A was found to be active in cleaving the target peptide bond between 3-amino-9-methoxy-2,6, 8-trimethyl-10-phenyl-deca-4,6-dienoic acid (Adda) and arginine of MC-LR, and converting cyclic MC-LR to linear MC-LR as a first product that is much less toxic than parent MC-LR, which offered direct evidence for the first step on the pathway of MC-LR biodegradation by Sphingopyxis sp. USTB-05. 展开更多
关键词 microcystin lr Sphingopyxis sp. USTB-05 BIODEGRADATION gene
原文传递
ER、PR、c-erbB-2在126例乳腺癌的表达及意义 被引量:1
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作者 周冠严 潘峰 《福建医药杂志》 CAS 2004年第1期24-25,共2页
目的 探讨c-erbB-2和ER、PR在乳腺癌中的表达与转移及预后的关系。方法 应用免疫组化技术检测126例原发乳腺癌各抗体的表达情况。结果 ER的阳性率为45.2%,PR的阳性率为53.2%,c-erbB-2阳性率为68.3%。ER、PR其阳性表达率随着临床分期... 目的 探讨c-erbB-2和ER、PR在乳腺癌中的表达与转移及预后的关系。方法 应用免疫组化技术检测126例原发乳腺癌各抗体的表达情况。结果 ER的阳性率为45.2%,PR的阳性率为53.2%,c-erbB-2阳性率为68.3%。ER、PR其阳性表达率随着临床分期的增高和淋巴结转移数目的增多而逐渐降低,呈负相关,有显著性差异(P<0.05),c-erbB-2的阳性表达率随着临床分期的增高和淋巴结转移数目的增多而增高,呈正相关,有显著性差异(P<0.05)。ER、PR阳性表达率与c-erbB-2呈负相关。结论 ER、PR、c-erbB-2可作为判断乳腺癌生物学行为及预后的有效指标。 展开更多
关键词 ER PR C-ERBB-2 乳腺癌 肿瘤转移 预后 淋巴结转移
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MC-LR对草鱼组织显微结构及HO-1、IL-10R1基因表达的影响
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作者 覃江凤 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2023年第8期1161-1172,共12页
该项目主要研究微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对草鱼机体的毒害作用。草鱼经腹腔注射微囊藻毒素-LR的剂量为100μg/kg,0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h后对草鱼组织和血液采样,然后进行组织显微结构和基因HO-1和IL-10R1的表达... 该项目主要研究微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对草鱼机体的毒害作用。草鱼经腹腔注射微囊藻毒素-LR的剂量为100μg/kg,0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h后对草鱼组织和血液采样,然后进行组织显微结构和基因HO-1和IL-10R1的表达分析。(1)通过光学显微镜观察,肠道组织病理变化表现为肠绒毛上皮细胞脱落,杯状细胞增多,上皮细胞的细胞核变形;6 h实验组出现肠道充血;12 h实验组和24 h实验组肠绒毛黏膜固有层分离,且有时间效应。(2)采用荧光定量PCR技术对HO-1和IL-10R1基因进行检测,结果显示草鱼鳃、肝脏、肠道、脾脏和心脏组织各实验组较对照组的HO-1基因表达量显著降低(P<0.05),同时草鱼脑、肝脏、肠道、脾脏组织和血液各实验组较对照组的IL-10R1基因表达量显著降低(P<0.05)。微囊藻毒素-LR导致草鱼肠道、肝脏和鱼鳃等器官的病理损伤和HO-1和IL-10R1基因表达量显著降低,可为MC-LR刺激草鱼的炎症反应与免疫反应提供相关理论依据。 展开更多
关键词 微囊藻毒素-lr 草鱼 显微结构 HO-1 IL-10R1 基因表达
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微囊藻毒素LR促肝癌过程中对p53基因突变与表达的影响 被引量:1
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作者 胡志坚 陈华 +5 位作者 薛金发 张小阳 庞春艳 彭仙娥 吕鹏 孙元设 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期698-700,共3页
目前所检测到的微囊藻毒素(microcystin,MC)异构体将近80种。其中,微囊藻毒素LR(MCLR)因其毒性大、分布广,已成为目前研究热点,但对其致毒机制,尤其致肝肿瘤机制尚不清楚。我们根据二阶段致癌理论建立MCLR中期动物模型,并分... 目前所检测到的微囊藻毒素(microcystin,MC)异构体将近80种。其中,微囊藻毒素LR(MCLR)因其毒性大、分布广,已成为目前研究热点,但对其致毒机制,尤其致肝肿瘤机制尚不清楚。我们根据二阶段致癌理论建立MCLR中期动物模型,并分析与细胞周期密切相关的基因p53、p21waf1基因在MCLR促肝癌过程的变化,为更深入了解MCLR的促癌机制提供帮助。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转移酶 基因 P53 基因突变 P21WAF1 微囊藻毒素lr
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