Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体阳性终末与γ-氨基丁酸阳性神经元在小鼠腰髓背角的分布及联系

目的研究Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体(vesicularglutamatetransporter2,VgluT2)阳性终末与γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)阳性神经元在小鼠腰髓背角的分布和联系。方法采用免疫组织化学方法研究VgluT2阳性终末与GABA阳性神经元在小鼠腰髓背角的分布;采用免疫荧光组织化学双重标记方法研究VgluT2阳性终末与GABA阳性神经元在小鼠腰髓背角的联系。结果VgluT2阳性终末与GABA阳性神经元在小鼠腰髓背角各层均有分布,特别是在Ⅱ层内侧部二者分布都较为密集,免疫荧光双重标记后在激光共聚焦显微镜下可见GABA阳性神经元周围有许多VGluT2阳性终末与其胞体或突起密切接触。结论小鼠腰髓背角Ⅱ层内侧部GABA阳性神经元直接接受兴奋性传入。

单侧坐骨神经完全结扎术后Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体在大鼠腰髓、背根神经节和结扎远侧端神经干内表达的变化(英文)

目的 研究单侧坐骨神经结扎对大鼠腰 4～ 5脊髓节段和相应的背根神经节 (DRGs)内VGluT1样免疫阳性反应产物表达的影响以及VGluT1通过轴浆流向外周转运的情况。 方法 采用免疫组织化学方法观察单侧坐骨神经结扎后不同时间内腰 4～ 5脊髓节段、DRGs和结扎部位的近、远侧端神经干内VGLuT1样免疫阳性反应强度的变化。结果 (1)坐骨神经结扎后第 1和第 2天 ,VGluT1样免疫阳性产物在结扎的同侧腰 4～ 5脊髓节段和相应节段的DRGs内未检测到明显变化 ;但自术后第 4天开始 ,可观察到VGluT1样免疫阳性产物的表达在上述部位逐渐减弱 ;VGluT1样免疫阳性产物表达的降低在上述部位所出现的时间和程度相平行。 (2 )结扎后第 1天即可观察到VGluT1样免疫阳性产物在坐骨神经结扎部位近侧端的表达有所升高 ,但自术后第 4天开始逐渐降低 ;而VGluT1样免疫阳性产物在坐骨神经结扎部位远侧端的表达自结扎后第 1天起就逐渐降低 ,至第 4周时已完全消失。结论 (1)DRG神经元合成VGluT1,并通过轴浆流将VGLluT1向中枢突和周围突运输 ,故腰髓内部分VGluT1样阳性末梢起源于DRG神经元 ;(2 )

CFA致炎大鼠脊髓腰膨大组织内miRNA-133b-3p与P2X4受体表达的实验观察

目的:观察CFA致炎大鼠脊髓腰膨大组织内miRNA-133b-3p与P2X4受体表达的相关关系。方法:大鼠足底注射CFA后,0 h、2 h、1 d、3 d检测大鼠机械痛和热痛的痛阈值变化,且在这四个时间点取脊髓腰膨大组织,提取总RNA和蛋白质,检测miRNA-133b-3p表达量的变化,同时检测P2X4受体m RNA和蛋白的表达量的变化。结果:与对照组相比,大鼠脚掌注射CFA后,机械痛和热痛痛阈均明显下降(P<0.05),在2 h时痛阈最低,1 d和3 d时较2 h略有回升;腰膨大部位miRNA-133b-3p表达量在2 h时没有变化,1 d和3 d开始呈现逐渐下降的趋势(P<0.05),四个时间点P2X4受体m RNA表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05),但P2X4受体蛋白在3 d时表达量显著升高(P<0.05)。结论:CFA致炎大鼠脊髓腰膨大组织miRNA-133b-3p表达下调,同时P2X4受体表达上调,两者可能存在负向调控关系。

电针对带状疱疹后遗神经痛大鼠脊髓背角血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察不同频率电针对带状疱疹后遗神经痛(PHN)大鼠脊髓背角血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为溶媒对照组、模型组、2 Hz电针组、15 Hz电针组、100 Hz电针组、假电针组,每组16只。采用单次腹腔注射超强辣椒素受体激动剂树脂毒素(RTX)诱导PHN模型。各电针组采用不同频率电针大鼠"环跳""阳陵泉"穴,隔日1次,持续治疗35d,假电针组将毫针浅刺穴位皮下,不进行电流刺激。采用von Frey丝隔日检测各组大鼠机械痛阈值。采用实时荧光定量PCR技术、Western blot法检测不同频率电针对脊髓背角VEGF 188mRNA和VEGF-A蛋白表达的影响。结果:与溶媒对照组比较,RTX诱导的PHN模型大鼠出现机械痛觉超敏(P<0.01)。与假电针组比较,2Hz、15Hz电针可以显著改善PHN大鼠机械痛觉超敏(P<0.05),而100 Hz电针无显著作用(P>0.05)。与溶媒对照组比较,模型组VEGF 188 mRNA和VEGF-A蛋白表达均显著升高(P<0.05)。2 Hz电针可以显著抑制VEGF 188mRNA和VEGF-A蛋白的表达(P<0.05),而15 Hz、100 Hz电针无显著作用(P>0.05)。RTX诱导的PHN大鼠脊髓背角VEGF表达和机械痛阈值呈负相关。结论:2 Hz电针通过抑制VEGF在PHN大鼠脊髓背角的表达,从而缓解机械痛觉超敏,提示2Hz电针是治疗PHN的最佳频率。

基于NR2B/PSD-95通路探讨推拿对腰椎间盘突出症大鼠脊髓背角树突结构的影响

目的:通过观察N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基(NR2B)/突触后致密蛋白95(PSD-95)通路对腰椎间盘突出症大鼠脊髓背角树突结构的影响探讨推拿镇痛的作用机制.方法:将50只Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、推拿组、阻断剂组和阻断剂+推拿组,采用坐骨神经结扎法制备坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,推拿组和阻断剂+推拿组在造模后第4天起每日实施推拿干预,阻断剂组和阻断剂+推拿组在造模后第4天起每日鞘内注射NR2B阻断剂(MK-801).采用自发痛评分观察各组大鼠的疼痛行为.连续干预14 d后运用免疫组化法检测各组大鼠脊髓背角NR2B及下游PSD-95蛋白的表达水平,高尔基染色法观察大鼠脊髓背角树突的结构变化.结果:相较于空白组,模型组和推拿组大鼠在CCI术后自发痛程度均升高(P<0.01),推拿干预后,推拿组大鼠疼痛程度较模型组减轻(P<0.05).阻断NR2B后,阻断剂组和阻断剂+推拿组大鼠疼痛程度均较模型组减轻(P<0.05).相较于空白组,模型组大鼠NR2B和PSD-95蛋白含量明显升高(P<0.01);脊髓背角树突总分叉数增加(P<0.01),总长度变长(P<0.01).相较于模型组,推拿组大鼠NR2B和PSD-95蛋白含量显著下降(P<0.01);脊髓背角树突总分叉数减少(P<0.01),总长度缩短(P<0.01).阻断NR2B后,阻断剂组和阻断剂+推拿组的NR2B及下游PSD-95蛋白的表达水平较模型组均显著降低(P<0.01);脊髓背角树突总分叉数明显减少(P<0.01),总长度显著缩短(P<0.01).结论:推拿可通过重塑腰椎间盘突出症大鼠脊髓背角树突结构发挥镇痛作用,其机制可能与抑制NR2B/PSD-95信号通路的表达有关.