大黄素对人肺腺癌细胞Anip973增殖周期及凋亡基因的影响

目的探讨大黄素对人肺腺癌Anip973细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡基因的影响。方法采用甲基噻唑(MTT)比色法和生长曲线测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对在体外培养的Anip973细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化,用免疫印迹法检测Caspase-3蛋白表达。结果大黄素可在G0/G1期阻滞人肺腺癌Anip973细胞的增殖,使S期细胞比率降低,并激活Caspase-3蛋白;在一定范围内,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论大黄素能抑制人肺腺癌Anip973细胞生长,其抗肿瘤机制是通过激活Caspase-3,诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。

UCN-01去除放射后肿瘤细胞G_2期阻滞及其相关机制

背景与目的:辐射对肿瘤细胞的影响常表现为细胞周期的改变。本研究观察X线照射后肿瘤细胞G2期阻滞及药物UCN鄄01去除此阻滞的情况,并进一步研究其相关机制。方法:选用已知p53突变的人鼻咽癌CNE鄄1细胞系和人肺腺癌973细胞系进行研究,并以p53功能正常的人纤维母细胞瘤HT鄄1080细胞系作为对照。采用细胞培养和流式细胞仪技术分析X线照射对以上细胞系的细胞周期的影响,并观察UCN鄄01对放射后细胞G2期阻滞的影响;应用蛋白印迹法(Westernblot)测定在UCN鄄01去除CNE鄄1细胞G2期阻滞的过程中,细胞内磷酸化CDC2鄄Tyr15含量的相应变化。结果:X线照射明显导致CNE鄄1细胞和973细胞G2阻滞,照射2Gy后两组的G2期细胞比例分别由18.4%和14.8%上升至43.6%和42.8%,两组细胞的G1期阻滞不显著,衡量G1期阻滞的指标“S期消耗率”均较低,分别为14.8%和-1.2%,明显低于p53功能正常的HT鄄1080细胞(57.0%)。UCN鄄01能够去除放射后CNE鄄1细胞和973细胞G2阻滞,两组的G2期细胞比例分别从单纯照射组的63.5%和35.4%降至16.1%和16.3%。CNE鄄1细胞照射后随着细胞G2期阻滞增加,磷酸化CDC2鄄Tyr15的含量相应增加,而UCN鄄01能够降低照射后细胞内磷酸化CDC2鄄Tyr15的含量,并与该药去除细胞G2期阻滞的过程相一致。