Rho/Rock信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用

目的评价Rho/Rock信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤（ventilator-induced lung injury,VILI）中的作用。方法选择健康雄性SD大鼠96只,12~15周龄,体重300~350g,采用随机数字表法将大鼠随机分为四组：空白对照组（C组）、Rho激酶抑制药法舒地尔组（F组）、高潮气量组（H组）和高潮气量＋Rho激酶抑制药法舒地尔组（HF组）,每组24只。C组和F组不行机械通气,H组和HF组行高潮气量40ml/kg机械通气4h。F组和HF组在机械通气前1h给予腹腔注射法舒地尔10mg/kg。分别于通气前（T0）、通气后4h（T1）、8h（T2）和24h（T3）每组随机取6只大鼠,采集血样,测定血清TNF-α、IL-6及IL-10浓度;采血结束后处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,采用考马斯亮兰法检测BALF总蛋白;测定肺组织湿/干重比（W/D）;光镜下行肺组织病理学损伤评分;采用分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;采用Western blot和RT-PCR法分别检测肺组织RhoA、Rock2蛋白含量和mRNA表达水平。结果与C组比较,T1~T3时H组和HF组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-10浓度、BALF总蛋白含量、肺组织W/D、病理学损伤评分、MPO活性、RhoA、Rock2蛋白含量和mRNA表达水平明显升高（P〈0.05）;与H组比较,T1~T3时HF组大鼠血清TNF-α、IL-6浓度、BALF总蛋白含量、肺组织W/D、病理学损伤评分、MPO活性、RhoA、Rock2蛋白含量和mRNA表达水平明显下降,血清IL-10浓度明显升高（P〈0.05）。结论Rho激酶抑制药法舒地尔可减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤,其机制可能与其抑制Rho/Rock信号通路,降低肺组织内炎性反应有关。

基于络病学探讨内毒素“二次打击”急性肺损伤大鼠的Rho/ROCK机制及川芎嗪的保护作用

目的:研究内毒素血症"瘀滞络脉"急性肺损伤大鼠的Rho/ROCK机制及川芎嗪的保护作用。方法:以内毒素"二次打击"建立大鼠内毒素血症"瘀滞络脉"急性肺损伤模型,分别设正常对照组、模型组、川芎嗪低剂量组、高剂量组,测定呼吸频率、肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)百分率、肺湿/干重比、肺组织髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性、ROCK mRNA表达量,并观察、评估肺组织损伤严重程度。结果:与模型组相比,川芎嗪显著降低呼吸频率、PMN百分率、肺湿/干重比、MPO活性、ROCK mRNA表达量,减轻大鼠急性肺损伤病理改变。结论:川芎嗪可能通过抑制Rho/ROCK通路对内毒素血症"瘀滞络脉"大鼠急性肺损伤有较好的保护作用。

MiR-26b靶向hENT1通过RhoA/ROCK-1通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移

目的:探讨miR-26b在肺癌组织中的表达及miR-26b在肺癌细胞侵袭和迁移过程中的作用及其机制。方法:q PCR检测肺癌和正常肺组织中miR-26b的表达情况;荧光素酶报告基因检测miR-26b与人平衡核苷转运蛋白1(human equilibrative nucleoside transporter 1,hENT1)的相互作用;Transwell侵袭试验检测miR-26b的表达对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕试验检测miR-26b的表达对肺癌细胞迁移能力的影响;Western印迹检测h ENT1,ROCK-1,Rho A蛋白的表达情况;鬼笔环肽染色观察miR-26b-mimic处理后细胞骨架的变化情况;裸鼠皮下成瘤试验检测miR-26b-mimic对肺癌成瘤大小及体积的影响。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中miR-26b表达明显降低;且晚期、低分化和有淋巴结转移的肺癌组织miR-26b表达明显较早期、高分化和无淋巴结转移的肺癌组织低;miR-26b能与h ENT1的3'-UTR特异性结合;miR-26b可以调控肺癌A549细胞的侵袭迁移能力;过表达miR-26b可以抑制h ENT1,ROCK-1,Rho A的表达;miR-26b-mimic处理后,F-actin染色明显减少,细胞膜皱褶形成明显减少,伪足形成明显减少;裸鼠皮下成瘤试验显示:miR-26b-mimic处理后肿瘤体积和质量明显减小。结论:MiR-26b在肺癌中表达明显降低,且跟肺癌分期、分级及淋巴结转移与否密切相关,同时靶向h ENT1通过Rho A/ROCK-1信号通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移。

异丙酚通过Rho/Rock信号通路调控大鼠呼吸机相关性肺损伤的机制研究

目的探讨异丙酚通过Rho/Rock信号通路调控大鼠呼吸机相关性肺损伤的机制。方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为双肺通气组(TLV组),单肺通气组(OLV足),单肺通气+异丙酚组(D组),单肺通气+异丙酚+法舒地尔组(DL组)。对各组大鼠血清血清TNF-α、IL-6及IL-10含量及肺组织RhoA及Rock2蛋白水平和基因表达水平进行测定。结果 D组和DL组大鼠血清TNF-α、IL-6水平低于TLV和OLV组,IL-10水平高于TLV和OLV组,差异有统计学意义(P<0.05)。DL组血清TNF-α、IL-6水平低于D组,IL-10水平高于D组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组和DL组大鼠W/D及BALF总蛋白水平低于TLV和OLV组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组和DL组大鼠RhoA和Rock2蛋白含量低于TLV和OLV组,差异有统计学意义(P<0.05)。DL组大鼠RhoA和Rock2蛋白含量水平低于D组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论异丙酚能够有效缓解呼吸机相关肺损伤的炎性反应,同时其作用机制可能与其能够抑制Rho/Rock信号通路的激活有关。

内皮抑制素抑制RhoA/ROCK信号通路减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤实验研究

背景急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是一种由多种诱因引发的急性肺部炎症性疾病,目前无有效防治手段。内皮抑制素(endostatin,ES)可特异性抑制血管内皮细胞的增殖和迁移,广泛应用于肿瘤治疗中,但其在急性肺损伤中的作用尚不明确。目的探讨内皮抑制素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的影响及可能机制。方法将36只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,分别为对照组、LPS组(模型组)、ES干预组A(LPS+1 mg/kg ES 6 h)、ES干预组B(LPS+1 mg/kg ES 12 h)、ES干预组C(LPS+5 mg/kg ES 6 h)、ES干预组D(LPS+5 mg/kg ES 12 h),每组6只。LPS组:将LPS溶液(15 mg/kg)通过肺部液体定量雾化器装置递送至小鼠肺,作用24 h,建立小鼠急性肺损伤模型;对照组:在相同时间点以同样的方式递送等体积0.9%氯化钠注射液,作用24 h;ES干预组:LPS刺激小鼠24 h后,腹腔注射不同剂量(1 mg/kg或5 mg/kg)的ES注射液,分别作用6 h与12 h。观察各组小鼠肺组织形态学改变;测定肺系数变化;行苏木素-伊红染色病理学检查;酶联免疫吸附实验检测小鼠血清中血管内皮生长因子水平;流式细胞术检测小鼠血清与肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6水平;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测小鼠肺组织细胞凋亡;免疫印记实验检测小鼠肺组织中Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)和Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho-associated coiled-coil-forming protien kinase 1,ROCK1)的表达。结果与对照组比较,LPS组肺系数增大(P<0.01),肺损伤评分升高(P<0.01),肺组织凋亡细胞数增多(P<0.01),血清血管内皮生长因子水平升高(P<0.05),血清与BALF中TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),肺组织RhoA与ROCK1蛋白表达增加(P<0.05)。与LPS组比较,ES干预组D肺部炎性渗出浸润减少,肺间质水肿及肺泡结构破坏减轻,肺损伤评分降低(P<0.01),肺系数减小(P<0.01),肺组织凋亡细胞减少(P<0.01),血清中TNF-α、IL-6和VEGF水平均下降(P均<0.01),肺组织RhoA和ROCK1表达减少(P<0.05)。结论内皮抑制素可减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤,减少肺组织细胞凋亡,其降低肺毛细血管内皮细胞通透性和炎症反应的功能可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

Rock抑制剂法舒地尔改善高氧致新生大鼠肺纤维化的作用机制

目的探讨Rho激酶(Rock)抑制剂法舒地尔(FAS)改善高氧致新生大鼠肺纤维化的作用机制。方法将24只SD新生大鼠,按随机数字表法分为空气组(正常对照组)、FAS空气组、高氧组和FAS高氧组,分别建立动物模型。在造模的第21日取各组新生大鼠行肺组织辐射状肺泡计数(RAC),Western blotting检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白及Rho/Rock信号通路中Rock1和磷酸化肌球蛋白轻链磷酸酶靶亚单位1(p-MYPT1)蛋白的表达。结果与空气组比较,高氧组RAC值明显下降(P<0.05);FAS高氧组RAC值较高氧组上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。高氧组肺组织TGF-β1蛋白的表达较空气组显著升高(P<0.05),而FAS高氧组肺组织TGF-β1蛋白较高氧组明显降低(P<0.05)。与空气组比较,高氧组肺组织Rock1蛋白表达有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),而p-MYPT1蛋白表达明显升高(P<0.05);FAS高氧组肺组织Rock1蛋白表达较高氧组下降,但差异无统计学意义(P>0.05),而p-MYPT1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 FAS可通过减少TGF-β1的表达,一定程度改善高氧致新生大鼠肺纤维化,其调控机制可能与抑制Rho/Rock信号通路的活化有关。

高氧致SD大鼠年龄相关的肺损伤及可能机制

目的·观察新生鼠和幼鼠高氧肺损伤的异同,并初步探索Rho/Rock信号通路在年龄相关高氧肺损伤中的作用。方法·将新生SD大鼠(新生鼠)与3周龄SD大鼠(幼鼠)分为新生鼠空气组、新生鼠高氧组、幼鼠空气组、幼鼠高氧组,建立动物模型直至第14日,统计生存率、体质量变化,取SD大鼠肺组织行病理学检查、损伤程度评分、羟脯氨酸含量测定、SOD与MDA检测,以及ROCK1、p-MYPT1、MYPT1表达的检测。结果·①新生鼠高氧组较新生鼠空气组、幼鼠空气组、幼鼠高氧组生存率明显降低,幼鼠空气组与高氧组生存率无明显差异;新生鼠高氧组较空气组、幼鼠高氧组较空气组体质量增长缓慢,且新生鼠高氧组较幼鼠高氧组体质量增长更为缓慢。②新生鼠高氧组、幼鼠高氧组出现啼组织损伤及纤维化改变,且新生鼠较幼鼠更为严重。③新生鼠高氧组较空气组、幼鼠高氧组较空气组MDA含量升高,SOD活力降低;与幼鼠高氧组相比,新生鼠高氧组SOD活力基础值较低且高氧后降低更为明显。④新生鼠高氧组较空气组、幼鼠高氧组较空气组肺组织ROCK1蛋白表达有上升趋势,p-MYPT1蛋白表达增强,且新生鼠高氧组较幼鼠高氧组p-MYPT1蛋白表达增强更为明显。结论·高氧肺损伤具有年龄依赖性,新生鼠对高氧耐受力明显弱于幼鼠,与其自身抗氧化能力弱有关;Rho/Rock信号通路活化程度的不同可能在年龄相关高氧肺损伤中发挥重要作用。

肝素对脓毒症小鼠急性肺损伤时FAK/RhoA/ROCK信号通路的影响

目的评价肝素对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)时黏着斑激酶(FAK)/Ras同源家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠30只,6~8周龄,体质量20~23 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):对照组(C组)、ALI组和肝素组(H组)。采用腹腔注射LPS 15 mg/kg的方法制备脓毒症小鼠ALI模型,C组注射等量生理盐水。H组尾静脉注射肝素钠10 U,30 min后制备模型,C组和ALI组注射等量生理盐水。于注射LPS后24 h时深麻醉下采集眼球静脉血样,随后处死小鼠取肺组织。采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6和TNF-α浓度;HE染色法观察肺组织病理学结果并行肺损伤(LI)评分,确定肺湿质量/干质量(W/D)比值;免疫组化染色法观察血管内皮黏附因子1(VCAM-1)表达;Western blot法检测FAK、磷酸化FAK(p-FAK)、RhoA、结合GTP形式Rho蛋白A(RhoA-GTP)和ROCK表达。结果与C组相比,ALI组血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度、肺W/D比值、LI评分和VCAM-1表达水平升高,肺组织p-FAK、RhoA-GTP和ROCK表达上调(P<0.05);与ALI组相比,H组血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度、肺W/D比值、LI评分和VCAM-1表达水平降低,肺组织p-FAK、RhoA-GTP和ROCK表达下调(P<0.05)。结论肝素减轻脓毒症小鼠ALI的机制与抑制FAK/RhoA/ROCK信号通路有关。

Rho/Rho激酶信号通路与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征

Rho/Rho激酶信号通路参与调节细胞的收缩、黏附、迁移、增殖、凋亡等多种生物学行为和功能,随着对Rho/Rho激酶信号通路研究的深入,发现其在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中发挥着重要的作用。笔者就Rho/Rho激酶信号通路在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的作用机制作一综述。

百令胶囊对急性胰腺炎模型大鼠肺损伤的修复作用

目的探讨百令胶囊对急性胰腺炎模型大鼠肺损伤的修复作用。方法将72只Wistar大鼠随机分为假手术组(等体积生理盐水灌胃),模型组(等体积生理盐水灌胃),百令胶囊低、中、高剂量组(1,2,4 g/kg灌胃)及法舒地尔组(30 mg/kg腹腔注射),各12只。除假手术组外,其余5组大鼠均胰胆管注射4%牛磺胆酸钠(1 mL/kg)以复制胰腺炎大鼠模型,建模成功后,各组大鼠均予相应药物或生理盐水,每天1次,连续5 d。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血清淀粉酶、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肺组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)水平;采用血气分析仪测定二氧化碳分压(PaCO_(2))、氧分压(PaO_(2)),并计算氧合指数(OI);称定大鼠肺组织湿质量(W)及干质量(D)并计算W/D;采用苏木素-伊红(HE)染色,检查肺组织病理形态学;采用实时定量聚合酶链式反应法及Westernblot法分别测定RhoA、Rho激酶1(ROCK1)、Rho激酶2(ROCK2)mRNA及蛋白表达水平。结果与模型组比较,百令胶囊低、中、高剂量组及法舒地尔组大鼠的血清淀粉酶及IL-6,TNF-α,PaCO_(2),MPO,ROS水平,肺组织W/D及RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05),PaO_(2),OI,SOD水平均显著升高(P<0.05),大鼠肺组织病理形态学显著改善。结论百令胶囊能改善急性胰腺炎肺损伤模型大鼠的肺功能,其机制可能与抑制Rho/ROCK通路,继而抑制炎性因子释放及氧化损伤有关。

麦角甾醇对LPS诱导的肺损伤小鼠的抗炎作用研究

目的研究麦角甾醇对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎作用研究。方法取50只雄性BABL/c小鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、地塞米松组(2 mg/kg)、麦角甾醇低剂量组(20 mg/kg)、麦角甾醇高剂量组(40 mg/kg)。空白对照组和模型组按体积给予生理盐水,地塞米松组(2 mg/kg)、麦角甾醇组(20、40mg/kg)灌胃给予相应药物。给药1 h后,除空白对照组,其余各组小鼠气管滴注20μg LPS。检测小鼠肺干湿重比(W/D),肺泡灌洗液(BALF)中超氧化物歧化酶(SOD)水平、丙二醛(MDA)含量,血清与肺泡灌洗液炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平。取各组小鼠肺组织做HE染色,并检测肺组织Rho、ROCK1、ROCK2、p-NF-κBP65、NF-κBP65、p-IκBα、IκBα蛋白表达。结果麦角甾醇20、40 mg/kg能显著提升LPS诱导的急性肺损伤小鼠血清SOD水平,降低MDA含量;改善血清及肺泡灌洗液炎症因子水平和肺组织病理学改变;降低肺组织Rho、ROCK1、ROCK2、p-NF-κBP65、p-IκBα蛋白表达。结论麦角甾醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠有保护作用,其作用可能与Rho/ROCK/NF-κB信号通路有关。

中医药治疗非小细胞肺癌研究简况

非小细胞肺癌为本虚标实之证,环境污染、烟毒等因素可提高发生率;辨证分型结合现代医学治疗成为主导思想,在增效减毒、提高生存质量、延长生存期、改善免疫状态和抗术后复发转移等方面疗效显著。对于不易手术、放化疗患者和晚期体质较弱的患者更为适用,但缺乏循证医学支持,临床疗效评价标准不规范,符合多中心、随机化及大样本研究规范的少,结果可靠度不高,未来期待统一规范辨证分型、临床疗效评价标准、规范研究设计。

柴芩双解汤对急性胰腺炎所致大鼠肺损伤的保护作用机制

目的研究柴芩双解汤对急性胰腺炎所致大鼠肺损伤的保护作用及对Rho/ROCK通路的调节作用。方法72只大鼠随机分为假手术组,胰腺炎肺损伤组,柴芩双解汤低、中、高剂量组及法舒地尔组,每组12只。柴芩双解汤低、中、高剂量组分别灌胃给予2、4、8 mL/kg的柴芩双解汤,每日2次;法舒地尔组腹腔注射法舒地尔10 mg/kg,每日1次,连续5 d。检测大鼠动脉血氧分压(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))水平及肺组织髓过氧化物酶(MPO)、环氧化酶2(COX⁃2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平、肺组织RhoA、ROCK2 mRNA及蛋白水平,苏木精⁃伊红(HE)染色法对大鼠肺组织进行病理学检查并评分。结果与胰腺炎肺损伤组大鼠比较,柴芩双解汤不同剂量组大鼠血PaO_(2)水平显著升高(P<0.05)、血PaCO_(2)水平及肺组织MPO、COX-2、iNOS水平、RhoA、ROCK2 mRNA及蛋白水平降低,肺组织病理学评分降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论柴芩双解汤能够改善急性胰腺炎所致肺损伤大鼠肺功能并抑制肺组织病理性改变,降低炎症水平及氧化损伤,其机制可能与调节Rho/ROCK通路有关。

岩盐气溶胶疗法治疗支气管哮喘临床疗效的研究

目的:观察岩盐气溶胶疗法在支气管哮喘治疗中的临床疗效。方法:选取60例患者随机分为2组,包括:对照组(常规治疗)和观察组(在常规治疗基础上加用岩盐气溶胶疗法),每组30例。通过支气管哮喘患者症状评分、肺功能(FEV1、PEF)指标评估岩盐气溶胶疗法在支气管哮喘治疗中的疗效,并对患者在治疗前期、中期、后期的疗效进行评定和统计学分析(P<0.05)。结果:观察组患者的症状评分及肺功能指标均不同程度优于对照组。结论:岩盐气溶胶疗法是可以有效地改善支气管哮喘患者肺功能及临床症状。

非小细胞肺癌中DLC-1、ROCKI的表达及其临床意义

目的探讨肝癌缺失基因-1（DLC．1）和Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶I（ROCKI）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。方法选取48例手术切除并经病理检查证实的NSCLC组织及癌旁组织，采用免疫组织化学EnVision法检测DLC-1、ROCKI蛋白的表达，并分析二者之间的相关性及其与临床病理特征的关系，探讨DLC-1基因对NSCLC患者的预后价值。结果DLC-1蛋白在NSCLC组织中呈低表达或表达缺失，阳性表达率为33．3％（16／48），明显低于癌旁组织的70．8％（34／48），差异有统计学意义（X2=13．523，P〈0．01）；ROCKI蛋白在NSCLC中的阳性表达率为58．3％（28／48），高于癌旁组织的0（0／48），差异有统计学意义（x2=39．529，P〈0．01）；NSCLC中DLC-1的表达与性别、吸烟史、组织类型等无关，与肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关，且差异有统计学意义；DLC．1阳性表达组中ROCKI的阳性表达率为37．5％（6／16），而ROCKI的阴性表达率为68．8％（22／32），相关分析提示DLC-1与ROCKI在NSCLC中表达呈负相关（r=-2．214，P=0．039）；DLC-1蛋白高表达组3年生存率高于低表达组，差异有统计学意义（P=0．043）。结论DLC-1蛋白的低表达或表达缺失、ROCKI蛋白的表达在NSCLC的发生、发展中可能扮演重要角色，检测DLC-1及ROCKI蛋白的表达，有助于判断NSCLC的生物学行为及预后。

1,25-二羟维生素D_3抑制RhoA/ROCK通路减轻幼鼠海水淹溺型肺损伤的实验研究

目的探讨1,25-二羟维生素D3对幼鼠海水吸入型肺损伤的干预作用及其机制。方法32只SD幼鼠随机分为空白对照组、海水处理组、活性Vit D3处理组和地塞米松处理组,每组8只。海水处理组幼鼠给予气管内灌注3 ml/kg海水,Vit D3处理组和地塞米松处理组在海水处理组的基础上分别给予25μg/kg Vit D3和10 mg/kg地塞米松灌胃处理。分别检测各组肺组织湿干比和通透性变化,ELISA法检测肺组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞-1β(IL-1β)的表达,Western blot检测GTPRho A和磷酸化MYPT-1的表达变化。结果与正常对照组比较,海水气管内滴入4 h后幼鼠肺部组织出现明显炎症和水肿,炎症因子TNF-α和IL-1β的表达显著增高,Rho A的活化和MYPT-1磷酸化增加;1,25-二羟维生素D3和地塞米松干预可显著减轻海水导致的肺组织损伤,减少了TNF-α和IL-1β的释放,并且抑制了Rho A的活化和MYPT-1的磷酸化。结论 Rho A/ROCK通路参与幼鼠海水吸入型肺损伤的发展,1,25-二羟维生素D3能够通过调节该信号通路减轻肺损伤。

基于RhoA/ROCK通路探讨宣肺化浊方对急性肺损伤小鼠肺内皮细胞微管解聚的影响及机制研究

目的:基于RhoA/ROCK通路探讨宣肺化浊方对急性肺损伤(ALI)小鼠肺微血管内皮细胞骨架肌动蛋白微管的调控作用及机制研究。方法:72只雄性C57BL/6小鼠按体质量随机分为空白组,模型组,盐酸法舒地尔组(10 mg/kg)及宣肺化浊方低、中、高剂量组(0.06、0.11、0.22 mg/kg)。除空白组外,其余各组采用腹腔注射LPS建立小鼠ALI模型。计算BALF中细胞总数;HE染色观察肺组织病理学变化;透射电镜观察肺血管内皮细胞线粒体的超微结构;RT-PCR法检测肺组织中通路相关因子RhoA、ROCK mRNA表达量,Western Blot及免疫组化法检测肺组织中微管相关蛋白p-Tau、p-MAP-4、Ace-tubulin的表达量。结果:与模型组比较,各治疗组小鼠肺组织BALF中细胞总数均显著降低(P<0.01);宣肺化浊方中高剂量组、阳性对照组肺间质炎性细胞浸润,肺间质水肿,肺泡壁增厚,肺泡腔破坏程度均比模型组明显减轻;宣肺化浊方中、高剂量组及阳性对照组:线粒体形态结构较模型及低剂量组好,线粒体嵴均轻度模糊;与模型组比较,宣肺化浊方中、高剂量组及阳性对照组RhoA、ROCK mRNA水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组小鼠肺组织P-Tau、P-MAP-4蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Ace-tubulin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:宣肺化浊方可通过调控RhoA/ROCK通路来更好地抑制微管解聚从而降低LPS所致ALI小鼠肺微血管内皮细胞的通透性,对肺组织起到保护作用。

法舒地尔抑制肺肌成纤维细胞分化的作用机制

目的观察法舒地尔对大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的抑制作用。方法培养原代新生鼠肺成纤维细胞,予以转化生长因子(TGF)-a1诱导向肌成纤维细胞分化,并予以法舒地尔预处理。免疫组织化学染色法检测a-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达。免疫印迹法检测I型胶原(Col I)、血清反应因子(SRF)和a-SMA的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,给予TGF-a1刺激,能够显著诱导其向肌成纤维细胞分化,胞浆内出现明显的肌丝样结构。免疫印迹结果显示,与对照组比较,TGF-a1诱导组Col I、SRF和a-SMA表达显著上调,分别是对照组的6.25倍、4.50倍和3.58倍;而法舒地尔预处理组与TGF-a1诱导组比较,Col I、SRF和a-SMA的表达量是TGF-a1诱导组的36.00%、35.56%和38.87%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论法舒地尔能够抑制TGF-a1介导的肺肌成纤维细胞分化。

褪黑素减轻动态吸入火箭煤油小鼠肺组织氧化损伤

目的探讨褪黑素对小鼠动态吸入火箭煤油肺组织氧化损伤的防护。方法选择雄性ICR小鼠18只,随机分为正常对照组、火箭煤油组,褪黑素干预组,每组6只。吸入染毒前2 h,褪黑素干预组灌胃2 mg/kg的褪黑素,火箭煤油组灌胃0.5%羧甲基纤维素溶液。所有小鼠分别置于防爆式动态吸入染毒柜中进行吸入染毒,火箭煤油染毒组和褪黑素干预组分别通以火箭煤油(设染浓度为18 000 mg/m^3),正常对照组通以室外洁净空气,小鼠动态吸入染毒4 h,染毒后2 h测定肺组织中TAOC、SOD和GSH-Px的活性和MDA的含量。结果与正常对照组比较MDA:(0.98±0.15)nmol/mg Pr;TAOC:(1.33±0.11)U/mg Pr;SOD:(5.21±0.38)U/mg Pr;GSH-Px:(73.26±12.69)U/mg Pr,染毒后2 h吸入火箭煤油组小鼠肺组织MDA(1.18±0.04)nmol/mg Pr的含量显著增加(P<0.05),TAOC(1.19±0.10)U/mg Pr、SOD(4.40±0.29)U/mg Pr和GSH-PX(56.83±9.70)U/mg Pr的活性显著降低(P<0.05)。褪黑素能明显降低火箭煤油组小鼠肺组织中MDA的含量(1.07±0.11)nmol/mg Pr,P<0.05,显著增加TAOC(1.29±0.06)U/mg Pr、SOD(4.93±0.44)U/mg Pr和GSH-Px(67.17±3.67)U/mg Pr的活性,P<0.05。结论褪黑素能减轻吸入火箭煤油诱导的小鼠肺组织氧化损伤,对肺组织有一定的保护作用。