LUNX基因作为与免疫细胞浸润相关的非小细胞肺癌预后生物标志物

目的:研究肺特异性X蛋白(LUNX)基因是否可作为免疫细胞浸润相关的非小细胞肺癌预后生物标志物。方法:选取衡水市人民医院2020年1月至2023年1月期间收治的280例非小细胞肺癌患者,检测其癌组织、癌旁组织LUNX基因表达量,分析LUNX基因与肿瘤微环境中免疫细胞浸润、预后生存状态的关系。结果:与癌旁组织比较,非小细胞肺癌组织LUNX基因表达量、阳性率升高,且与分化程度、淋巴结转移、肿瘤分期有关(P<0.05)。GEPIA数据库分析显示LUNX基因在其他组织中仅有少量表达或不表达,在LUAD、LUSC中表达升高(P<0.05)。LUNX基因、LUNX基因拷贝数与免疫细胞浸润水平有关(P<0.05)。生存分析显示,LUNX基因高表达与患者生存预后有关(P<0.05)。结论:LUNX基因在非小细胞肺癌组织中特异性表达,影响非小细胞肺癌免疫细胞浸润水平,导致免疫微环境失衡,是引起患者预后死亡的重要机制。因此,可作为评价免疫细胞浸润的预后生物标志物。

非小细胞肺癌患者区域淋巴结LUNX基因表达及其临床意义

目的:探讨人类肺组织特异性X蛋白(lung-specific X protein,LUNX)的基因诊断在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)微转移中的临床意义。方法:随机收集43例临床非小细胞肺癌患者作为实验组,同时随机收集15例良性肺部病变患者作为对照组。通过反转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测人类LUNX的靶基因的mRNA在实验组和对照组患者淋巴结中的表达,并与患者相对应的临床病理资料进行相关性分析。结果:LUNX mRNA在两组患者的肺组织及肿块中均为阳性表达;实验组43例患者的87枚淋巴结中有33枚(37.93%)有LUNX mRNA表达,对照组15例肺部良性病变患者的26枚淋巴结中有2枚(7.69%)表达LUNX mRNA,两组比较差异有统计学意义(P(0.05)。LUNX mRNA淋巴结表达阳性与肺癌患者病理类型、细胞分化程度、临床分期有密切关系(r=0.660,0.500,0.460;P=0.011,0.017,0.021);而与患者性别、年龄、吸烟史,以及血清肺癌4项肿瘤标志物(CEA,CA125,NSE和CYFRA211)无明显关系(r=0.230,0.235,0.180,0.354;P=0.739,0.714,0.773,0.125)。结论:与传统的病理切片检查判断NSCLC淋巴结微转移相比,RT-PCR检测肺癌患者淋巴结LUNX mRNA的表达有较高的敏感性。LUNX mRNA的表达是检测肺癌微转移的一个有价值的指标,可为制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据。

非小细胞肺癌LUNX mRNA的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA的表达及其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测56例NSCLC患者(实验组)及34例肺良性病变患者(对照组)外周血中LUNXmRNA的表达情况,分析其与临床病理组织学特征的关系。结果①实验组NSCLC患者外周血中LUNXmRNA阳性表达率为58.93%,而对照组无表达(P<0.05)。②NSCLC患者外周血LUNXmRNA阳性表达率与肿瘤淋巴结转移、分化程度和临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、吸烟以及肿瘤部位、病理类型等均无关(P>0.05)。结论外周血LUNXmRNA的检测可作为评价NSCLC发生、发展潜在指标,对判断病程和指导治疗具有重要的临床意义。

LUNX基因增强子的克隆及调控活性分析

目的鉴定人肺特异性X蛋白(lung specific X protein,LUNX)基因的增强子及其调控活性。方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增生物信息学预测的3个增强子片段(E1:+3770～+3959bp;E2:+6454～+6555bp;E3:+14553～+14652bp),通过荧光素酶报告基因表达体系检测转录活性。结果 PCR产物经测序证实后,分别定向连接至pGL3-Promoter载体中报告基因启动子上游的Kpn I和Xho I酶切位点和报告基因下游的BamHI和Sal I酶切位点上,经酶切鉴定后,构建了6种荧光素酶报告基因表达体系。以pSV-β-Galactosidase质粒为内对照,瞬时转染HEK293细胞,培养48h后检测细胞裂解液中荧光素酶活性。当3个DNA片段位于报告基因启动子上游时,均不具有增强转录的能力。将它们分别连接于报告基因下游时,E1和E3所调控的荧光素酶活性分别是对照pGL3-Promoter的2.83倍(P<0.05)和1.59倍(P<0.05)。结论 LUNX基因的+3770～+3959bp和+14553～+14652bp序列具有增强转录的能力,为LUNX表达调控机制的深入研究奠定了基础。

非小细胞肺癌外周血及淋巴结中LUNX mRNA的表达及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血及淋巴结组织中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测56例NSCLC患者及34例肺良性病变患者外周血及淋巴结组织中LUNX mRNA的表达情况,对比两组表达的差异,并分析其表达与NSCLC临床组织病理学特征的关系。结果病理组织学检查NSCLC淋巴结微转移阳性率为50.0%(28/56),RT-PCR法检查淋巴结组织LUNX mRNA阳性表达率为53.6%(30/56),两者差异无统计学意义(P=0.705)。NSCLC组外周血中LUNX mRNA阳性表达率为58.9%(33/56),在淋巴结组织中的阳性表达率为53.6%(30/56),两者差异无统计学意义(P=0.453);肺良性病变组外周血及淋巴结组织中均无LUNX mRNA表达,NSCLC组外周血及淋巴结组织中LUNX mRNA阳性表达率与对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。外周血和淋巴结组织中LUNX mRNA阳性表达率与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和临床分期均有关(P<0.05),与患者年龄、性别、有无吸烟以及病理类型、肿瘤部位等均无关(P>0.05)。结论外周血和淋巴结中LUNX mRNA的表达是肺癌微转移的一个潜在的特异性指标,外周血LUNX mRNA可能更具敏感性,LUNX mRNA的检测对预后评估具有重要的临床意义。

外周血LUNX mRNA与围手术期肺癌微转移相关性的临床研究

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者围手术期外周血中肺组织特异性基因（LUNX）mRNA的表达与肺癌微转移的相关性,并探讨肺癌根治术中肺血管结扎顺序对LUNX mRNA表达的影响。方法 120例临床可行肺癌根治术的Ⅰ、Ⅱ期和部分ⅢA期（T3N1--2M0）NSCLC患者被纳入实验组,所有患者术前检查均明确无远处转移病灶。术前将患者随机分为静脉组（先结扎肺静脉）及动脉组（先结扎肺动脉）各60例,分别于术前、术中、术后第7日抽取外周血,采用逆转录PCR（RT-PCR）检测其外周血LUNX mRNA的表达情况。另选取60名健康体检者及30例肺部良性疾病需行肺叶切除患者为对照组,同法检测外周血LUNX mRNA的表达情况。结果实验组术前、术中、术后LUNX mRNA表达阳性率分别为47%、61%及20%。静脉组与动脉组术前LUNX mRNA表达阳性率比较差异无统计学意义（P〉0.05）;动脉组术中LUNX mRNA表达阳性率明显较术前高（P=0.017）;术后2组LUNX mRNA表达阳性率均较术前低（P〈0.001、P=0.022）。2组内术前不同TNM分期之间LUNX mRNA表达阳性率比较差异均有统计学意义（P=0.015、P=0.004）,LUNX mRNA表达阳性率均随分期上升而升高。术前2组间不同TNM分期LUNX mRNA表达阳性率比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）;术中动脉组不同TNM分期的LUNX mRNA表达阳性率均高于静脉组,但比较差异无统计学意义（P均〉0.05）;术后,在Ⅰ、Ⅱ期肺癌患者中,2组LUNX mRNA表达阳性率比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）,而在ⅢA期患者中,动脉组术后LUNX mRNA表达阳性率显著高于静脉组（P=0.011）。对照组均无LUNX mRNA表达阳性者。结论手术治疗有助于抑制肺癌微转移,但仍有部分患者有肺癌微转移可能,仍存在术后癌灶复发、转移的风险;肺癌根治术中应采用先结扎肺静脉的顺序;LUNX mRNA的表达也与TNM分期有关。

胸水LUNX mRNA检测对肺癌胸膜转移的诊断价值

目的：探讨胸腔积液（胸水）LUNX mRNA检测对肺癌胸膜转移的诊断价值。方法：用荧光定量RT-PCR法检测肺癌组44例、肺外肿瘤13例、肺部良性疾病46例及肺外良性疾病11例胸水标本LUNX mRNA表达;用放射免疫分析法检测胸水中癌胚抗原（CEA）、糖类抗原（CA125）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）,并进行胸水细胞学检测。结果：肺癌组、肺部良性疾病组胸水LUNX mRNA阳性率及中位拷贝数分别为88.6%、23.58copies/ml和5.26%、0copies/ml;肺外良、恶性疾病组胸水LUNX mRNA阳性率及拷贝数均为0;LUNX mRNA检测的敏感性（88.6%）高于CEA、CA125及CYFRA21-1（40.9%、59.1%、61.3%）（P〈0.05~P〈0.005）;LUNX mRNA阳性率为88.6%,高于细胞学检查的阳性率（65.9%）（P〈0.005）。结论：LUNX mRNA是诊断肺癌胸膜转移特异性较高的分子标志物,对临床胸水性质的鉴别诊断能提供较好的参考价值。

CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA在非小细胞肺癌患者外周血微转移中的表达和意义

【目的】研究非小细胞肺癌外周血CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA的表达及联合检测的临床意义。【方法】采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测59例NSCLC患者、31例肺良性疾病患者及20例健康志愿者外周血CK19mRNA、LUNXmRNA及巢式RT-PCR检测CEAmRNA的表达。【结果】59例NSCLC患者外周血CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA阳性率分别为23.7%(14/59)、33.8%(20/59)、57.6%(34/59)。31例肺良性疾病及20例健康志愿者外周血上述三者的阳性率分别为3.2%(1/31)、12.9%(4/31)、0%(0/31);0%(0/20)。统计结果显示:LUNXmRNA与临床分期、细胞分化程度有关,CEAmRNA与病理类型有关。【结论】CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移的标志物。CEAmRNA对判断病理类型有一定临床意义。LUNXmRNA表达阳性率与肺癌TNM分期、细胞分化程度有关。

非小细胞肺癌外周血LUNX mRNA表达的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血肺特异性X蛋白基因(LUNX)mRNA表达与血微转移的关系。方法选取90例NSCLC(实验组),其中Ⅰ期31例,Ⅱ期32例,ⅢA期27例;肺良性疾病组20例,分别于术前、术中关胸时、术后第7天抽取外周血,RT-PCR法检测LUNX mRNA表达情况,并与健康体检者10例对照。结果健康对照组及肺良性疾病组均无LUNX mRNA表达。实验组术前、术中、术后LUNX mRNA表达阳性率分别为46.67%、65.56%及20.00%,术中LUNX mRNA表达阳性率高于术前(P<0.01),术后低于术前(P<0.01)。Ⅰ期、Ⅱ期和ⅢA期患者术后第7天LUNX mRNA表达阳性率分别为6.45%、18.75%和37.04%,ⅢA期患者表达阳性率高于Ⅰ期、Ⅱ期(P<0.05)。结论 LUNX可作为NSCLC微转移较为敏感和特异的指标。检测肺癌患者LUNX是否可为肺癌患者制订更为个体化的治疗方案有待进一步研究。

非小细胞肺癌患者外周血LUNX mRNA表达及临床意义

目的:通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗前后外周血中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA的表达,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对54例NSCLC患者化疗前后、非肺癌恶性肿瘤患者36例、肺良性疾病患者16例及健康志愿者15例的外周血进行LUNX mRNA检测。结果:54例NSCLC患者化疗前后外周血LUNX mRNA的阳性表达率分别是48.1%(26/54)和25.9%(14/54),差异比较有统计学意义(P<0.05);非肺癌恶性肿瘤患者、肺良性疾病患者及健康志愿者外周血LUNX mRNA的阳性表达率均为0,与NSCLC组比较均有统计学意义(P<0.01);LUNX mRNA的阳性表达率在化疗前后均随TNM分期增加而升高(P<0.05),与患者年龄、性别、病理类型及分化程度无明显相关性(P>0.05);NSCLC外周血LUNX mRNA表达与化疗近期疗效无关(P>0.05)。结论:LUNX mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移较好的特异性标志物;化疗后NSCLC外周血LUNX mRNA的表达比化疗前显著降低,表明有效化疗可消灭NSCLC患者的微转移癌细胞。

荧光定量PCR法检测外周血LUNX mRNA表达与肺癌微转移的关系

目的研究荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测外周血肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA表达与肺癌微转移的关系。方法选择本院2012年3月至2017年8月诊治的225例非小细胞肺癌(NSCLC)患者作为研究组,30例肺部良性病变患者作为对照组。采用荧光定量PCR法检测两组患者外周血LUNX mRNA表达,并探讨其与肺癌微转移的关系。结果研究组患者LUNX mRNA表达阳性率为73.33%,明显高于对照组的10.00%(P<0.05);疾病分期高的患者表达阳性率高,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者阳性率明显高于Ⅰ期患者(P<0.05);淋巴结转移为阳性患者表达阳性率明显高于淋巴结阴性患者(P<0.05);LUNX mRNA表达阳性患者2年生存率明显低于阴性患者(P<0.05),前者中位生存时间为14.27个月,后者中位生存时间为23.84个月。结论FQ PCR检测外周血LUNX mRNA表达可作为肺癌微转移的重要指标,对早期诊断微转移以及评估患者预后具有重要意义。

Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结中ck19、肺特异性蛋白X mRNA表达与微转移及预后的相关性研究

目的研究Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结中细胞角蛋白19(ck19)、肺特异性蛋白X(LUNX)mRNA表达与转移及预后的相关性。方法选择68例我院胸外科术后经病理证实为Ⅰ期非小细胞肺癌患者(观察组)和20例确诊为肺炎性假瘤病例(对照组),将入选病例肿瘤组织、肺门旁(N1)、纵隔淋巴结(N2)蜡块,分别做HE染色和免疫组化检测CK19、LUNX mRNA因子表达。结果 68例Ⅰ期非小细胞肺癌患者肿瘤组织均有CK19、LUNX mRNA表达,肺炎性假瘤病例患者淋巴结未见CK19、LUNX mRNA表达。22例淋巴结可见CK19表达,腺癌17例,鳞癌5例;ⅠA期8例,ⅠB期14例。15例淋巴结可见LUNX mRNA表达,腺癌11例,鳞癌4例;ⅠA期5例,ⅠB期10例。腺癌患者淋巴结CK19、LUNX mRNA表达显著高于鳞癌患者,ⅠB期患者淋巴结CK19、LUNX mRNA表达显著高于ⅠA期患者。鳞癌患者与腺癌患者、ⅠB期与ⅠA期患者的N1淋巴结CK19、LUNX mRNA表达差异不明显,鳞癌患者与腺癌患者、ⅠB期与ⅠA期患者的N2淋巴结CK19、LUNX mRNA表达差异显著(P<0.05)。仅N1淋巴结表达CK19、LUNX mRN患者的生存时间62.5个月,仅N2淋巴结表达CK19、LUNX mRN患者的生存40.2个月,N1和N2均表达CK19、LUNX mRN患者的生存时间36.6个月,NI和N2均为表达CK19、LUNX mRN患者的生存时间为64.8个月。仅NI表达患者与仅N2表达及N1+N2均表达患者的生存时间差异有统计学意义,与未表达患者的差异不显著。仅N2表达患者的生存时间显著低于未表达患者,与N1和N2均表达患者的生存时间差异不显著。结论 CK19和LUNX mRNA可作为I期非小细胞肺癌患者淋巴结微转移的标记物,腺癌患者和ⅠB期患者淋巴结微转移率更高,N2淋巴结微转移是患者影响I期非小细胞肺癌患者预后的主要原因,N2淋巴结微转移患者的预后更差。

肺特异性X蛋白与细胞角蛋白19在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的:常规细胞学诊断肺癌患者淋巴结中的癌细胞具有重要的应用价值,然而对淋巴结和癌旁组织内微转移的诊断有限。本研究探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX) mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA的表达及其在NSCLC发生、转移和预后中的意义。方法:采用实时定量反转录(real-timeRT-PCR)方法检测20例经病理诊断为非小细胞肺癌(NSCLC)组织及42枚区域性淋巴结中LUNX mRNA和CK19 mRNA的表达情况并进行定量分析。以9例肺良性病变患者标本及6枚淋巴结作为对照组。对所有淋巴结进行常规病理切片并行HE染色,观察转移情况。结果:①癌组织中LUNX mRNA水平显著高于对照组,但与患者淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关。②癌旁组织中LUNX mRNA水平明显高于对照组,与淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期有关。③淋巴结组织中CK19 mRNA水平接近对照组,与淋巴结转移及TNM分期有关,但与患者肿瘤大小无关。④淋巴结组织中LUNX mRNA水平接近对照组,但与患者淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关。⑤LUNX mRNA和CK19 mRNA均与患者年龄、性别、组织学分型无关。⑥real-timeRT-PCR法和常规病理方法检测肺癌淋巴结转移的差异有显著性。结论:LUNX mRNA与CK19 mRNA均可作为real-timeRT-PCR检测NSCLC患者癌旁组织、区域性淋巴结微转移的分子标志物,但前者在特异性和敏感性上优于后者。本方法的建立可能有利于提高肺癌淋巴转移的检出率,从而指导临床分期和治疗。

LUNX、CK19和CEA基因在非小细胞肺癌淋巴结微转移中的比较研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX)、细胞角蛋白(CK19)及癌胚抗原(CEA)mRNA的表达及其在NSCLC发生、转移、预后中的意义。方法采用RT-PCR方法检测56例NSCLC患者的肺癌组织及103枚区域性淋巴结LUNX mRNA、CK19 mRNA及CEA mR-NA的表达情况并进行半定量。对照组为15例肺良性病变患者的35枚淋巴结。对所有淋巴结进行常规病理切片HE染色,观察转移情况。结果(1)LUNX mRNA、CK19 mRNA及CEA mRNA在肺癌患者淋巴结中的表达明显高于肺良性病变者淋巴结(P<0.05)。(2)与常规病理学方法检查淋巴结相比,RT-PCR技术的敏感性显著增高(P<0.05)。(3)LUNX mRNA、CK19 mRNA在淋巴结中的阳性表达率与肺癌病理类型之间没有明显相关性(P>0.05),由于CEA mRNA在肺腺癌组织中的表达明显高于鳞癌及其他类型的肺癌(P<0.05)。(4)区域淋巴结中LUNX mRNA表达的阳性率随TNM分期的升高而增加(P<0.05)。结论LUNX mRNA与CK19 mRNA均可作为RT-PCR检测肺癌患者区域性淋巴结微转移的分子标志物,但前者在特异性和敏感性上优于后者。该方法的建立可能有利于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。

肺癌患者外周血肺组织特异性基因mRNA检测的诊断价值

目的：探讨荧光定量RT—PCR法测定外周血肺组织特异性基因（1ung-specific X protein gene，LUNX）mRNA表达对肺癌的诊断价值。方法：荧光定量RT—PCR法检测67例肺癌患者（其中30例手术患者测定术前和术后外周血）、40例良性肺疾病患者、20名健康体检者外周血LUNX mRNA表达，67例肺癌患者同时用放免法测定外周血中CEA、CA125、Cyfra21—1。结果：肺癌患者外周血LUNXmRNA表达阳性率（56．7％）均高于CEA、CA125、Cyfra21—1单项或三者联合检测（分别为16．4％、26．9％、11．9％和32．8％）（P〈0．05～P〈0．005）。荧光定量RT—PCR法测外周血LUNXmRNA表达诊断肺癌的敏感性为56．7％，特异性100％，阳性预测值为100％，阴性预测值为67．4％。结论：荧光定量RT—PCR法测定外周血LUNX mRNA可能成为肺癌基因诊断一项较好的指标。

三种基因在非小细胞肺癌外周血有核细胞中阳性表达的意义

目的为确定外周血有核细胞中LUNX基因、CK19基因和S100A4基因是检测非小细胞肺癌外周血微转移的重要指标提供实验依据。方法术前抽取外周血,通过荧光定量PCR(PCR)检测其肺组织特异性蛋白(LUNX)、细胞角蛋白19(CK19)和钙结合蛋白A4(S100A4)的表达情况,并对其进行半定量分析。结果肺癌患者外周血标本中LUNX mRNA、CK19 mRNA和S100A4 mRNA的阳性表达率分别为66.7%、62.5%和56.3%,明显高于肺良性疾病患者和健康志愿者(P<0.05),这三种基因的表达与组织学类型、肿瘤位置有关,在腺癌中的阳性表达高于鳞癌,在周围型肺癌中的表达高于中央型肺癌。3种基因的表达与肿瘤的大小无明确关系。随着肿瘤分期的增高和淋巴结转移的发生,三种基因的表达有明显增高的趋势。结论 LUNX mRNA和CK19 mRNA、S100A4mRNA可作为检测肺癌微转移的分子标志物。

BCRP、LUNX基因mRNA表达水平与非小细胞肺癌患者的病理类型及分期的相关性

目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和肺特异性X蛋白(LUNX)基因的mRNA水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者病理类型及分期的相关性及其对于预后的价值。方法选取2015年6月至2018年6月河南大学淮河医院收治的89例患者为NSCLC组,以同期收治的55例肺良性病变患者为对照,检测两组患者外周血中BCRP、LUNX的mRNA表达水平,并分析其与临床病理特征及预后的相关性。结果NSCLC组外周血中BCRP、LUNX mRNA的阳性表达率显著高于肺良性病变组(P<0.05);NSCLC患者BCRP mRNA的表达与分化程度、TNM分期有关(P<0.05),与性别、年龄、吸烟、病理类型、淋巴结转移无关(P>0.05);其LUNX mRNA的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、吸烟、病理类型无关(P>0.05);BCRP mRNA表达组与LUNX mRNA表达组的总体生存率均显著低于无表达组(P<0.05);分化程度、TNM分期、淋巴结转移、BCRP mRNA表达、LUNX mRNA表达均为影响NSCLC患者预后的因素。结论NSCLC患者外周血中BCRP、LUNX mRNA的水平显著偏高,且BCRP mRNA的表达与分化程度、TNM分期有关,LUNX mRNA的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,二者可作为评估NSCLC患者预后的独立因素。

检测非小细胞肺癌患者淋巴结中CK19、LunX、KS1／4的表达对诊断微转移的意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）淋巴结中细胞角蛋白19（CK19）、肺组织特异性X蛋白（LunX）、上皮癌相关基因（KS1／4）的表达与NSCLC微转移的关系。方法选择经过9个月随访的52例NSCLC患者，分为转移组和无转移组。提取淋巴结标本的总RNA，反转录为cDNA，采用荧光定量实时PCR检测其中CK19、LunX、KS1／4的mRNA表达水平。结果总RNA通过紫外线分光光度仪检测RNA纯度，OD260／280值为1．650～2．1，RNA浓度为560～1420mg／L。经过随访，52例研究病例中发生转移或复发共18例，转移复发率为34．6％。其中转移组淋巴结中CK19、LunX、KS1／4的mRNA表达均高于无转移组（P值均〈0．05）。结论CK19、LunX、KS1／4可以作为预测NSCLC转移或复发的指标，辅助诊断NSCLC微转移。

肺特异性X蛋白转染表达对A549肺癌株生物学功能的影响

目的观察肺特异性x蛋白（LUNX）转染表达对A549肺癌细胞株的增殖凋亡和生物学功能的影响。方法应用慢病毒基因转染表达方法检测LUNX表达对A549肺癌细胞株的抗增殖作用和生物学功能的影响；通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）技术检测LUNX一小干扰RNA（siRNA）在A549肺癌株中的表达水平，Real—timePCR测定转染后A549肺癌细胞中增殖指标溴化脱氧尿嘧啶核苷（BrdUrd），碱性磷酸酶（AKP）和活性标志物表面活性蛋白C（SPC）的mRNA水平表达变化，并通过显微镜、苏木素．伊红（HE）染色、透射电镜等观察凋亡细胞的形态学改变。结果Real-timePCR和免疫细胞化学证实转染后A549肺癌细胞中有LUNX稳定表达；Real．timePCR结果示：A组AKP、SPC和BrdUrd密度为（0．73±0．14）、（0．53±0．12）、（O．31±0．10）U／L，B组为（1．64±0．38）、（1．47±0．25）、（1．28±0．21）U／L，C组为（1．71±0．45）、（1．53±0．32）、（1．33±0．26）U／L。与B、C对照组比较，A组AKP、SPC和BrdUrd扩增产物条带吸光度（A）值均显著降低（P〈0．01）。噻唑蓝（MTr）比色法表明：随着LUNX—siRNA与A549肺癌细胞效靶比增加及作用时间延长，抑制率明显增强（P〈0．05）。相同作用时间不同比例之间差异也均有统计学意义（P〈0．05），同一比例不同作用时间之间差异有统计学意义（P〈0．01）。LUNX-siRNA作用于肺癌细胞48h后，形态学观察肺癌细胞发生凋亡或坏死，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论体外制备的LUNX—siRNA对肺癌A549细胞具有抑制增殖和促进凋亡作用，其可能是通过通过负性调控信号通路降低A549肺癌细胞株中AKP、SPC和BrdUrd的表达。

肺特异性X蛋白基因在PNO期非小细胞肺癌淋巴结微转移中的表达及临床意义

目的 观察肺特异性X蛋白（LUNX）在PN0期非小细胞肺癌（NSCLC）原发病灶和转移淋巴结中的表达,探讨LUNX在PN0期NSCLC淋巴结微转移中的作用.方法 收集我院经手术切除且病理检查证实的52例PN0期NSCLC病例,记录各患者性别、年龄、吸烟史、肿瘤性质、浸润程度、淋巴结微转移及TNM分期等临床各项资料.将切除的肿瘤标本和清扫的淋巴结标本,行免疫组织化学染色,并提取肿瘤和淋巴结组织的DNA行聚合酶链反应（PCR）扩增和测序,观察LUNX在PN0期NSCLC原发病灶和转移淋巴结中的表达,并分析临床病理特征和患者术后总体生存的关系.结果 （1） LUNX mRNA在52例肺癌病例的原发灶均表达阳性（100％）,327站淋巴结中49站（14.98％）表达阳性,196站纵隔淋巴结中24站（12.24％）表达阳性.（2）影响术后生存和无病生存率的因素包括：LUNX分期（P＜0.01）、纵隔淋巴结微转移（P＜0.01）、清扫淋巴结总站数（P＜0.01）、清扫纵隔淋巴结站数（P＜0.05）、病理分级（P＜0.05）.（3）纵隔淋巴结微转移是影响术后无病生存的唯一独立危险因素,有纵隔淋巴结微转移的患者的复发风险是无纵隔淋巴结微转移的患者的21.8倍（P＜0.01）.结论 通过对PN0期NSCLC原发肿瘤病灶LUNX mRNA蛋白表达的检测,研究其与淋巴结微转移以及患者预后的关系.可以更加精确地预测早期NSCLC患者的预后,减少术后治疗的盲目性,改善疗效.