枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响

目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)观察衰老细胞,HE观察睾丸形态,ELISA检测血清中睾酮(testosterone,T)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,免疫组化和Western blot检测衰老、氧化损伤和Nrf2/ARE通路相关因子表达。结果模型鉴定成功后,经枸杞籽油干预,改善了睾丸形态,下调β-gal和γH2AX表达;升高血清中SOD、GSH以及T、FSH水平及降低MDA和LH水平(P<0.05);上调睾丸组织Nrf2、GCLC、NQO1和SOD2蛋白表达水平(P<0.05)以及支持细胞中Nrf2核表达。结论枸杞籽油激活亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路表达,降低其氧化损伤,改善其激素水平。

不同盐胁迫条件下枸杞种子的耐锂特性研究

以3个枸杞品种(宁杞1号、宁杞5号、宁杞7号)为试材,研究不同浓度NaCl溶液对枸杞种子萌发的影响,以及盐胁迫下不同浓度LiCl溶液处理对3个品种枸杞发芽率、发芽势、发芽指数、根长、芽长和活力指数的影响。结果表明,随着盐浓度的不断升高,对宁杞1号的根长和芽长均起抑制作用;对宁杞5号的根长和芽长则是先促进后抑制;而对宁杞7号的根长表现出抑制作用,对芽长表现出先促进后抑制。低锂浓度对宁杞1号、宁杞5号和宁杞7号的发芽率、发芽势、发芽指数、根长、芽长和活力指数起促进作用,其中宁杞1号较宁杞5号和宁杞7号具有更强的耐锂性。

枸杞籽油对中波紫外线诱导人永生化角质形成细胞光损伤的防护作用

明确枸杞籽油对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)诱导人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes,HaCaT)光损伤的防护作用,进一步提高枸杞籽油的利用率。采用GB 5009.168—2016、GB 5009.83—2016、DB64/T 1514—2017、《保健食品中功效成分检测方法》和GB 5009.82—2016(第一法)提供的方法分别测定枸杞籽油主要活性成分脂肪酸、β-胡萝卜素、玉米黄质、叶黄素、谷甾醇以及维生素E的含量,利用HaCaT细胞构建UVB光损伤模型,检测枸杞籽油对UVB诱导的光损伤HaCaT细胞存活率、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、凋亡相关细胞因子和炎症因子的影响。结果表明,与模型组相比,枸杞籽油可明显提高UVB光损伤HaCaT细胞的存活率(P<0.05),促进抗凋亡因子B淋巴细胞瘤/白血病-2 mRNA的表达(P<0.01),抑制细胞内ROS的生成(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.01),抑制细胞凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9和p53 mRNA的表达(P<0.01),减少炎症因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6的蛋白含量及mRNA表达(P<0.05)。结果表明枸杞籽油可通过调控细胞凋亡及减轻炎症反应来缓解UVB所致HaCaT细胞光损伤。

新疆精河枸杞种子耐盐特性研究

为充分利用新疆盐渍土地并促进枸杞大面积推广栽培,以新疆精河枸杞种子为试验材料,研究其在不同浓度的NaCl和Na_(2)SO_(4)盐溶液中的发芽情况。通过不同浓度的盐胁迫处理,测定枸杞种子的发芽率、发芽势和发芽指数。结果表明,当NaCl溶液浓度在20~60 mmol·L^(-1)时发芽率、发芽势和20~40 mmol·L^(-1)时发芽指数均高于对照,但是差异不显著;NaCl溶液浓度在80~100 mmol·L^(-1)时,精河枸杞种子发芽率、发芽势、发芽指数低于对照,且除80 mmol·L^(-1)时发芽指数外均差异不显著(P>0.05);NaCl浓度达到120 mmol·L^(-1)时精河枸杞种子发芽率、发芽势和发芽指数低于对照,发芽指数存在极显著差异(P<0.01);Na_(2)SO_(4)盐溶液处理时,溶液浓度在20~120 mmol·L^(-1)范围内精河枸杞种子的发芽率、发芽势和发芽指数均低于对照;Na_(2)SO_(4)溶液浓度增加到80~120 mmol·L^(-1)时,枸杞种子的发芽率、发芽势、发芽指数均极显著低于对照,且随浓度的增加各指标逐渐下降。Na_(2)SO_(4)盐溶液对精河枸杞种子萌发的抑制强于NaCl。精河枸杞种子在萌发期间具有一定的耐盐特性,但是高浓度的盐碱会抑制精河枸杞种子的萌发。

接触辉光放电等离子体对枸杞种子萌发的促进作用及其处理工艺

为促进枸杞种子的萌发,探究接触辉光放电等离子体(CGDP)对枸杞种子萌发的影响及最佳处理工艺。以枸杞种子为研究对象,考察在不同处理时间、电压及电解质条件下CGDP对枸杞种子萌发的影响。在单因素实验的基础上,以种子发芽率、发芽指数、活力指数为指标,采用响应面优化处理种子工艺,通过种皮形貌观察与接触角测定,初步探讨了CGDP对种皮结构和性质的影响。结果表明:处理种子的最佳条件为处理时间15 min、电压550 V、电解质Na_(2)SO_(4),种子萌发率最高时为95.56%;处理后种皮变得平整、纹理模糊,种子亲水性增强;幼苗叶片中叶绿素含量提升。分析结果可知,辉光放电等离子体可通过改变种皮结构对枸杞种子的萌发及生长产生促进作用。

独脚金内酯对干旱胁迫下黑果枸杞种子萌发和幼苗生理变化的影响

本试验以黑果枸杞(Lycium ruthenicum)为研究对象,探讨其种子萌发和幼苗生理特性对干旱胁迫下外源独脚金内酯(Strigolactones,SLs)的响应。试验通过聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG-6000)模拟干旱胁迫,对黑果枸杞种子和幼苗进行不同浓度SLs处理,测定各处理对种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数及幼苗叶绿素、脯氨酸(Proline,Pro)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量和总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)的影响。结果表明:SLs浸种对干旱胁迫下黑果枸杞种子萌发具有低浓度促进、高浓度抑制效果;干旱胁迫下对幼苗喷施适宜浓度SLs,可显著提高其叶绿素、Pro含量(P<0.05),同时有增强T-AOC、降低MDA积累的作用;主成分分析显示1μmol·L-1 SLs处理能够增强黑果枸杞的抗旱能力。综上所述,SLs不仅可以缓解干旱胁迫对黑果枸杞种子萌发的抑制,还能增强幼苗抗旱性,最佳使用浓度为1μmol·L-1。本研究为SLs应用于黑果枸杞人工种植提供了一定的理论支持。

枸杞籽油脂肪酸和挥发油化学成分的气质联用分析

分析枸杞籽油的主要组成及挥发油的化学成分和含量。以超临界CO_(2)提取的枸杞籽油为原料,采用三氟化硼甲酯化法对枸杞籽油进行处理,使脂肪酸甲酯化。利用水蒸气蒸馏法提取枸杞籽油中的挥发油,用GC-MS技术分别对脂肪酸甲酯化样品、挥发油化学成分和含量进行分析。枸杞籽油中共鉴定出22种脂肪酸甲酯化合物,主要为亚油酸甲酯(50.03%)、油酸甲酯(11.19%)、棕榈酸甲酯(7.53%)、亚油酸乙酯(4.82%)、硬脂酸甲酯(3.57%)和二十二烷酸甲酯(2.53%);枸杞籽油在110℃和150℃时得到的挥发组分中,有11种化合物相同,主要是亚油酸乙酯、反油酸乙酯、罗汉柏烯和2,2'-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)。枸杞籽中含有丰富的脂肪酸和药用活性物质,具有较高的食药用价值。

异质生境下黑果枸杞异形果实的种子休眠及萌发特性

黑果枸杞(Lycium ruthenicum)是我国西北干旱区药食同源的国家二级保护植物。在新疆南部自然居群中出现扁形和圆球形果实的两种个体,二者在不同海拔居群出现比例上存在差异。为了了解该物种异形果实的种子在不同海拔居群的萌发特性及其对不同气候类型荒漠环境的响应,对其在不同海拔居群的结籽率和种子质量、休眠、萌发特性及干旱胁迫的响应进行了室内控制性实验的比较研究,以期揭示该物种异形果实对新疆南部不同海拔荒漠环境的响应。结果表明:黑果枸杞扁形果实的结籽率高于圆球形果实;异形果实结籽率随着居群海拔的上升而逐渐降低,种子质量则随海拔的上升而逐渐升高。低海拔居群种子的吸水率比高海拔居群高,扁形果实种子的吸水率高于圆球形果实的种子。高温(20~30℃)、低浓度(0.1 mmol·L^(–1))的赤霉素及全黑暗条件是打破休眠的主要因素。圆球形果实的种子对高浓度30%PEG干旱胁迫的响应能力高于扁形果实的种子;低海拔居群果实的抗旱能力高于高海拔居群。

黑果枸杞种子萌发及幼苗生长效应研究

为探究黑果枸杞播种籽实不同处理(种子未处理-S、种子水浸泡-SW、种子水浸泡兼高锰酸钾处理-SWK、果实未处理-F、果实水浸泡-FW、果实水浸泡兼高锰酸钾处理-FWK)对发芽及其幼苗生长发育的影响,对种子发芽率及生长约1月龄的容器苗地上(苗高、茎高、叶片数)和地下(根长、侧根数)生长量进行了测定分析。结果表明,黑果枸杞果实播种发芽较种子播种发芽晚10天左右,且果实播种发芽时间较为集中;在幼苗期生长发育较快且地下生长量大于地上生长量,并且地上和地下所有生长指标间都显著相关(p<0.01),但地上和地下生长量在籽实不同处理的株间变异较大。试验考虑的3个因素即籽实类型、水浸处理和高锰酸钾处理对黑果枸杞幼苗地上和地下生长发育的影响不同,其中,籽实类型的影响大而广,对地上和地下生长量都有明显的影响,籽实中的种子播种苗生长量普遍大于果实播种苗,而且茎高、根长和侧根数多个指标在籽实类型间达到显著差异水平(p<0.05);而水浸处理和高锰酸钾处理的影响小而窄,主要对地下生长量尤其对种子播种苗的地下生长量有明显影响。相比之下,水浸处理效果好,高锰酸钾处理对地下生长量的影响是负面的,而水浸处理的影响是正面的,而且水浸各处理的地上和地下生长量都普遍较大,尤其处理SW,其根长与SWK间,侧根数和茎高与S处理间均达到显著差异水平(p<0.05),同时茎高、根长和侧根数与F、FW、FWK处理间也达到显著水平(p<0.05)。说明,黑果枸杞以水浸处理的种子播种效果较好。

枸杞籽油抗动脉粥样硬化的功效强度及作用机制的实验研究

目的:研究枸杞籽油抗动脉粥样硬化的功效强度及涉及的可能机制。方法:高脂膳食制备家兔动脉粥样硬化实验模型,动态观测其血浆TC、TG、LDL-C、HDL-C的变化;8周后,测定血清SOD、GSH-Px、T-AOC活性和MDA的含量;制作石蜡切片进行病理学检测;采用RT-PCR和免疫组化分析NFκ-Β、TNF-α在血管中的表达。结果:枸杞籽油可增加实验家兔血浆HDL-C含量,降低血浆TC、TG、LDL-C含量,增强血清SOD、GSH-PX、T-AOC活性,降低血清MDA、TNF-α的含量;降低NFκ-Β、TNF-α分子在血管中的表达,减少脂质斑块的形成。其效应强度与脂必妥相当。结论:枸杞籽油具有显著的抗动脉粥样硬化效应。其机制涉及降血脂、抗氧化,抑制动脉粥样硬化病灶中NFκ-Β的通路,降低血清中炎性分子TNF-α的含量。

不同提取方法对枸杞籽油品质的影响

研究了压榨法、超临界CO2萃取技术和水代法3种制油方法对枸杞籽油的脂肪酸组成、酸价、过氧化值、VE以及β-胡萝卜素含量的影响。结果表明,在3种制油方法中,水代法制取的油脂,其亚油酸含量显著高于其他两种制油方法;超临界CO2萃取技术制取的油脂,其亚麻酸、油酸、VE和β-胡萝卜素含量均显著高于其他两种制油方法;3种制油方法所得油脂过氧化值及酸价存在显著性差异,其中以压榨法制取的油脂(压榨油)为最高。

枸杞籽油脂的提取及其成分测定

枸杞果实中有很多种籽 ,加工时剩下的皮渣中经漂洗分离的种籽可用来提取天然植物油脂。用气相色谱法分析枸杞籽油的成分 ,检出 5种主要脂肪酸 :软脂酸 10 34 %、硬脂酸 4 0 2 %、油酸 2 3 2 1%、亚油酸 46 0 7%、亚麻酸 16 37%。油的脂肪酸组成较好 ,故枸杞籽油有较高的医疗保健价值 。

PKC和MMPs在枸杞籽油抗动脉粥样硬化中的作用和机制

目的研究枸杞籽油抗动脉粥样硬化的功效及其可能的作用机制。方法高脂膳食制备家兔动脉粥样硬化实验模型,观测其血浆中TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoA、ApoB的变化;56 d后,测定血清SOD、GsH-Px、T-AOC活性和MDA的含量;石蜡切片进行病理学检测;免疫印迹检测PKC、MMP-2、MMP-9在血管中的表达。结果枸杞籽油可增加实验家兔血浆中HDL-C、ApoA的含量,降低血浆中TC、TG、LDL-C、ApoB的含量,增强血清中SOD、GSH-PX、T-AOC的活性,降低血清中MDA的含量;降低PKC、MMP-2、MMP-9在血管中的表达。结论枸杞籽油具有显著的抗动脉粥样硬化效应。其机制可能是通过PKC途径,减少MMPs的分泌、抑制SMC的增生、分泌胶原、降血脂和抗氧化等。

黑果枸杞种子萌发对PEG模拟干旱胁迫的响应

[目的]研究干旱胁迫对黑果枸杞种子萌发及幼苗生长的影响,为黑果枸杞人工栽培提供理论依据。[方法]通过聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)模拟干旱胁迫,测定不同干旱胁迫强度下黑果枸杞种子的萌发进程、发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、幼苗的生长、幼苗渗透调节物质、叶绿素含量等指标,研究干旱胁迫对黑果枸杞种子萌发及幼苗生长的影响。[结果]干旱胁迫不利于黑果枸杞种子的萌发,重度干旱胁迫推迟其萌发的高峰期;干旱胁迫下黑果枸杞种子的发芽率、发芽势均呈下降趋势,-0.6 MPa处理下,黑果枸杞种子发芽率、发芽势相对对照分别降低72.06%和74.07%;干旱胁迫对黑果枸杞种子发芽指数和活力指数有抑制作用,其抑制程度随干旱胁迫强度的增加而增加;适度干旱胁迫有利于黑果枸杞幼苗胚根和胚芽的生长,而中度、重度干旱胁迫不利于幼苗胚芽的生长;干旱胁迫下黑果枸杞幼苗根、芽脯氨酸含量和可溶性糖含量均随着胁迫程度的增加逐渐增加,而幼苗叶绿素含量(Chl a+b)随干旱胁迫强度的增加逐渐降低。[结论]干旱胁迫对黑果枸杞种子萌发及幼苗生长有重要影响,适度的干旱胁迫有利于黑果枸杞幼苗的生长。

黑果枸杞硬实种子处理方法研究

[目的]研究不同硬实处理方法对黑果枸杞种子发芽的影响。[方法]以2007年收获的黑果枸杞种子为材料,采用98%H2SO4、40%NaOH、200 mg/L GA3、100 mg/L GA3、200 mg/L NAA、60℃、80℃、100℃水温,不同浸种时间和80目砂纸打磨、刀切处理,研究打破黑果枸杞种子硬实的效果。[结果]结果表明:GA3处理的效果较好,尤其是浸种24 h的效果最好,平均发芽率达到了94%,其他处理依次是98%H2SO4>GA3>NAA>NaOH>刀切>80目砂纸打磨>水温处理。[结论]该研究为进一步了解黑果枸杞的种子特性、试验栽培及其他相关信息提供了试验基础。

超临界CO_2萃取枸杞籽油工艺的研究

利用响应面法优化超临界CO2萃取枸杞籽油的工艺.在单因素试验的基础上,选取萃取压力、萃取温度和萃取时间作为影响因素,采用Box-Behnken中心设计模型,以枸杞籽油得率为响应值,进行响应面分析.结果表明,超临界CO2萃取枸杞籽油的最优工艺条件为：原料粒度40～60目、萃取压力37.8 MPa、萃取温度38.4℃、静态萃取时间5 min、动态萃取时间41 min,在此条件下,枸杞籽油得率为21.78％.

黑果枸杞籽油品质及体外抗氧化活性

为挖掘黑果枸杞籽油的潜在开发利用价值,采用石油醚浸提法提取黑果枸杞籽油,对黑果枸杞籽油的理化性质进行测定,分析其脂肪酸组成及含量,并测定其对DPPH·、ABTS^(+)·的清除能力和总还原能力。结果表明:黑果枸杞籽油碘值(I)为(84.0±0.2) g/100 g,皂化值(KOH)为(130.1±0.3) mg/g,过氧化值为(0.42±0.03) g/100 g,酸值(KOH)为(8.4±0.2) mg/g,需进一步精炼;黑果枸杞籽油主要包括亚油酸(68.31%)、油酸(17.76%)、棕榈酸(5.37%)、γ-亚麻酸(3.73%)、硬脂酸(2.58%)等9种脂肪酸;黑果枸杞籽油对DPPH·清除率的IC_(50)为0.587 mg/mL,3.2 mg/mL黑果枸杞籽油的ABTS^(+)·清除率为57.50%,且其具备一定的Fe^(3+)还原能力。因此,黑果枸杞籽油富含不饱和脂肪酸,体外抗氧化活性良好,具有开发的价值和潜力。

超临界二氧化碳萃取枸杞籽油的实验研究与数值模拟

建立了一套超临界流体萃取枸杞籽油的实验流程。以二氧化碳为萃取剂,考察了萃取压力、操作温度、二氧化碳流量及原料颗粒度等因素对枸杞籽油萃取率的影响。确定了较佳的萃取工艺条件:压力30MPa,温度313～318K,枸杞籽颗粒40～50目,二氧化碳流量0.3～0.4m3/h时枸杞籽油萃取率最高,可达15.5%。基于萃取器微分单元和固态颗粒微分单元质量守恒原理,建立了微分方程,利用直线推动力近似理论拟合总传质推动力及平衡吸收常数,化简方程,对部分实验结果进行数值模拟。

不同浓度的混合盐胁迫对枸杞种子萌发的影响

[目的]探讨混合盐碱胁迫条件对枸杞种子萌发的影响。[方法]用12.5-100.0 mmol/L含有不同比例的NaCl、Na2SO4、NaHCO3和Na2CO34种盐成分的30种混合盐对枸杞种子进行盐碱混合胁迫处理,测定枸杞种子对盐碱胁迫的反应情况。[结果]枸杞种子相对萌发率、幼苗的干重与鲜重及根长与芽长随盐浓度增大以及碱性盐比例增高而下降。碱性盐所造成的高pH值所致的的胁变效应与盐浓度关系极大,浓度低时pH作用较小,随浓度增大pH作用加剧。用混合盐处理过的枸杞种子,解除胁迫后可以明显提高种子的萌发率,增加幼苗的干重与鲜重及根与芽的长度。[结论]生产栽培实践中用低浓度盐或低碱性溶液预先浸种,完全有可能提高枸杞种子的萌发率和成活率。

水酶法提取枸杞籽油工艺优化

用水酶法提取枸杞籽油,先通过单因素试验选取影响因素和水平,再采用二次正交旋转组合设计方法研究液料比、酶添加量、酶解时间对枸杞籽油得率的影响。结果表明,各因素对枸杞籽油得率影响大小依次为液料比>酶添加量>酶解时间;频率分析法得到枸杞籽油最优的提取工艺为液料比3.6∶1(V∶m),酶添加量3.0%(以原料量计),酶解时间3h,该条件下3次的枸杞籽油平均验证得率为87.6%。