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Association of Lysosome Associated Protein Transmembrane 4 Beta Gene Polymorphism with the Risk of Pancreatic Cancer 被引量:1
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作者 Shan Wang Qing-Yun Zhang 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第4期291-295,共5页
Objective: Lysosome associated protein transmembrane 4 beta (LAPTM4B) was originally identified as a gene in human hepatocellular carcinoma (HCC). It was successfully cloned by fluorescence differential display, ... Objective: Lysosome associated protein transmembrane 4 beta (LAPTM4B) was originally identified as a gene in human hepatocellular carcinoma (HCC). It was successfully cloned by fluorescence differential display, rapid amplification of cDNA ends (RACE) and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Previous study showed that the novel gene played an important role in the occurrence, development, migration and prognosis of tumors. Pancreatic cancer is an aggressive malignancy with the majority of patients dying within one year after diagnosis. This study tries to find out the relationship between lysosome associated protein transmembrane 4 beta gene polymorphism and the susceptibility of pancreatic cancer. Methods: A case-control study was conducted in China, including 58 pancreatic cancer cases and 156 healthy controls. Human genomic DNA was used as the template, polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the distribution of LAPTM4B genotype. Analyses Odds ratio (OR) and corresponding 95% confidence interval (95%CI) with logistic regression were performed. Results: Two alleles of LAPTM4B generated three kinds of genotypes in population, *1/1, *1/2, and *2/2. The genotype frequency of *1/1, *1/2 and *2/2 in the pancreatic cancer group were 41.4%, 44.8% and 13.8% respectively, which were not significantly different from those of healthy group (47.4%, 42.9%, 9.6%) (P=0.773, P=0.291). Also the *2 allele frequency of LAPTM4B among pancreatic cancer had no significantly difference with the controls (P=0.354). When compared to the *1 allele, the people with *2 allele had no increased risk of pancreatic cancer. Conclusion: The gene polymorphism of LAPTM4B may not influence the susceptibility of pancreatic cancer. 展开更多
关键词 POLYMORPHISM lysosome associated protein transmembrane 4 beta Pancreatic cancer Susceptibility
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建立数字PCR检测非小细胞肺癌溶酶体相关的4次跨膜蛋白B基因拷贝数变异方法
2
作者 王鲁 徐国兵 张青云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1356-1364,共9页
建立芯片式数字PCR(dPCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)LAPTM4B基因拷贝数变异方法,并初步评估其基本性能和临床应用的可行性。设计LAPTM4B基因引物及特异性探针,建立dPCR反应体系,根据制备的不同浓度目的DNA样品验证该检测方法的最低检测限... 建立芯片式数字PCR(dPCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)LAPTM4B基因拷贝数变异方法,并初步评估其基本性能和临床应用的可行性。设计LAPTM4B基因引物及特异性探针,建立dPCR反应体系,根据制备的不同浓度目的DNA样品验证该检测方法的最低检测限、精密度和线性范围。本研究首次建立并优化dPCR检测LAPTM4B基因拷贝数的反应体系,分析数据显示,该方法最低检测到12.5%的LAPTM4B基因拷贝数缺失,批间精密度变异系数CV<10%,且缺失比例在12.5%~100%范围内线性良好(R^(2)>0.99)。此外,收集2021年3月至7月于北京大学肿瘤医院就诊的6例NSCLC患者,采用自建方法检测其冰冻组织标本,探究其临床应用可行性。dPCR结果显示,其中5例患者的组织样本存在LAPTM4B基因拷贝数缺失,1例出现拷贝数增加,推测可能与其术前化疗有关。综上所述,本研究成功应用芯片式dPCR方法,建立非小细胞肺癌LAPTM4B基因拷贝数变异的检测体系,并在组织标本中初步证实其临床应用的价值。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 laptm4b 拷贝数变异 芯片式数字PCR
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人肝癌相关新基因编码产物LAPTM4B的鉴定及其生物学特性 被引量:14
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作者 刘歆荣 周柔丽 +7 位作者 张青云 张页 邵根泽 金月英 张莎 林明 芮静安 叶大雄 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期340-347,共8页
目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 ... 目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 35× 10 3 和 2 4× 10 3 、等电点分别为 9.0 7和 4 .6 5的两种异型分子。它们在肝癌组织及肝癌细胞系的表达显著上调 ,而相对分子质量为 35× 10 3 者尤为明显 ,并与细胞分化程度相关。LAPTM4B蛋白可与整合素α 6亚单位及表皮生长因子 (EGF)受体形成信号复合物。结论 :LAPTM4B 35蛋白在人肝癌组织及细胞系过表达 ,并可能通过与细胞表面的整合素受体及EGF受体形成复合物而参与细胞外基质成分所启动的信号转导。 展开更多
关键词 肝癌 基因编码产物 laptm4b 鉴定 生物学特性 信号复合物
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LAPTM4B启动子荧光素酶报告基因重组体的构建 被引量:1
4
作者 彭方毅 张青云 +2 位作者 周柔丽 邵根泽 涂植光 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期337-339,共3页
目的:LAPTM4B基因是肝癌中高度表达的新基因。为下一步LAPTM4B启动子的活性分性,本文构建了LAPTM4B基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。方法:以LAPTM4B基因组cDNA为模板扩增翻译起始位点上游DNA序列。PCR产物定向克隆到含荧光素酶... 目的:LAPTM4B基因是肝癌中高度表达的新基因。为下一步LAPTM4B启动子的活性分性,本文构建了LAPTM4B基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。方法:以LAPTM4B基因组cDNA为模板扩增翻译起始位点上游DNA序列。PCR产物定向克隆到含荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中,并经限制性内切酶消化鉴定。结果:通过酶切鉴定和基因测序,证明成功地构建了三种不同长度的pGL3-LAPTM4B-Luc荧光素酶表达质粒,形成了系列的LAPTM4B启动子重组体。结论:充分利用生物信息学资源,利用已知基因的启动子序列,可快速,准确地克隆已知基因启动子序列并构建启动子载体。LAPTM4B启动子荧光素酶报告基因重组体的构建为LAPTM4B启动子的活性分析奠定了基础。 展开更多
关键词 laptm4b 基因表达 启动子
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乳腺癌癌组织中LAPTM4B、dCTP焦磷酸酶的表达水平及临床意义 被引量:5
5
作者 李辉 潘武 黄有成 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第9期1234-1237,共4页
目的研究乳腺癌癌组织中溶酶体四次跨膜蛋白质B(LAPTM4B)、dCTP焦磷酸酶(DCTPP1)的表达水平及临床意义。方法选取2014年3月至2016年6月本院收治的乳腺癌患者93例作为研究对象,收集患者手术切除的肿瘤组织以及癌旁正常组织,采用免疫组化... 目的研究乳腺癌癌组织中溶酶体四次跨膜蛋白质B(LAPTM4B)、dCTP焦磷酸酶(DCTPP1)的表达水平及临床意义。方法选取2014年3月至2016年6月本院收治的乳腺癌患者93例作为研究对象,收集患者手术切除的肿瘤组织以及癌旁正常组织,采用免疫组化法(SP)检测两组组织中LAPTM4B、DCTPP1的表达情况,分析其临床意义。结果乳腺癌癌组织部位LAPTM4B、DCTPP1阳性表达率明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);TNM分期为Ⅱ期的乳腺癌患者LAPTM4B、DCTPP1阳性率显著高于TNMⅠ期(LAPTM4B、DCTPP1阳性率和Ⅱ期患者(LAPTM4B、DCTPP1阳性率、淋巴结转移的乳腺癌患者LAPTM4B、DCTPP1阳性表达率低于无淋巴结转移患者(LAPTM4B、DCTPP1阳性率,差异均具有统计学意义(P<0.05);随访时间36个月,LAPTM4B、DCTPP1表达阳性患者3年生存率和生存时间均低于阴性患者的生存率和生存时间,差异具有统计学意义(P<0.05);LAPTM4B和DCTPP1同时表达阳性患者3年生存率显著低于两者均阴性患者以及仅LAPTM4B表达阴性或者仅DCTPP1表达阴性患者生存率和生存时间,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌患者LAPTM4B和DCTPP1水平呈高表达状态,且其表达阳性率与患者的TNM分期、淋巴结转移以及预后均存在密切联系,有望成为乳腺癌诊断和预后的评估指标。 展开更多
关键词 乳腺癌 溶酶体四次跨膜蛋白质b dCTP焦磷酸酶
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食管癌LAPTM4B mRNA表达及其启动子区甲基化
6
作者 程晓静 张青云 周柔丽 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期89-94,共6页
研究溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因在食管癌中的表达,及其启动子区甲基化状态,为进一步揭示LAPTM4B在不同肿瘤中表达高低机理提供参考.采用半定量RT-PCR法,确定42对食管癌中LA... 研究溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因在食管癌中的表达,及其启动子区甲基化状态,为进一步揭示LAPTM4B在不同肿瘤中表达高低机理提供参考.采用半定量RT-PCR法,确定42对食管癌中LAPTM4B mRNA表达.采用5对肝癌中LAPTM4B mRNA表达做内对照(利用灰度值比较),分析该基因在食管癌中的表达强度.选取其中3对食管癌组织样品(癌组织和癌旁正常组织),提取基因组DNA,采用亚硫酸氢钠修饰法,联合基因测序法分析LAPTM4B启动子区是否有甲基化修饰位点存在.结果发现,在42对食管癌组织中,癌组织和癌旁正常组织LAPTM4B mRNA表达存在差异:癌组织中LAPTM4B mRNA表达阳性为37/42(88.1%),癌旁正常组织中LAPTM4BmRNA表达阳性为26/42(61.9%).经基因测序法分析3对食管癌组织经通用引物PCR扩增的片段,发现1例癌旁正常组织样品中有3个CpG位点.以上结果表明,LAPTM4B基因与肝癌比较在食管癌中低表达,其启动子区1例癌旁正常组织在靠近转录起始点上游-418、-416和-398位置,存在3个CpG位点,而其他2例癌旁正常组织和3例癌组织中,没有发现CpG位点.这提示,LAPTM4B基因启动子区甲基化是其表达调节的重要方式. 展开更多
关键词 溶酶体相关4次跨膜蛋白b 食管癌 甲基化 CPG岛
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LAPTM4B基因多态性与乳腺癌易感性、临床病理特征的相关性分析 被引量:2
7
作者 张金微 孟玥 侯铁英 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第1期16-20,共5页
目的探讨溶酶体四次跨膜蛋白(LAPTM4B)基因多态性与乳腺癌易感性、临床病理特征的相关性。方法检测LAPTM4B基因在424例乳腺癌患者和238例体检健康者中外周血的表达情况,及其对不同基因型结合乳腺癌患者的临床资料进行统计分析。结果与LA... 目的探讨溶酶体四次跨膜蛋白(LAPTM4B)基因多态性与乳腺癌易感性、临床病理特征的相关性。方法检测LAPTM4B基因在424例乳腺癌患者和238例体检健康者中外周血的表达情况,及其对不同基因型结合乳腺癌患者的临床资料进行统计分析。结果与LAPTM4B 1型(*1/1型)基因型比较,LAPTM4B 2型(*1/2型+*2/2型)基因型在乳腺癌患者中的分布频率更高(占63.7%)。*1/2型和*2/2型基因携带者患乳腺癌的危险性分别是*1/1型的1.488倍[95%置信区间(CI)1.061~2.085,P=0.021]与4.915倍(95%CI 2.612~9.249,P<0.05)。*2等位基因携带者患乳腺癌的危险性是*1等位基因的1.911倍(95%CI 1.496~2.440,P<0.05)。LAPTM4B基因多态性与肿瘤大小、淋巴结状态、病理学分级及ki-67的表达情况有相关性(P<0.05)。结论LAPTM4B*2等位基因可能是筛查乳腺癌的指标,在乳腺癌生长、浸润及转移中起重要作用,检测LAPTM4B基因多态性可间接为患者临床治疗方案的选择及预后评估提供参考依据。 展开更多
关键词 溶酶体四次跨膜蛋白基因 基因多态性 乳腺癌 易感性 临床病理特征
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乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因LAPTM4B的表达水平及临床意义 被引量:2
8
作者 罗云杰 成守金 《实验与检验医学》 CAS 2020年第6期1089-1092,共4页
目的分析乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome-associated protein transmembrane-4 beta,LAPTM4B)的表达水平及临床意义。方法研究对象为2019年1月-2020年3月在本院接受乳腺癌手术治疗的患者;应用RT-PCR法检... 目的分析乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因溶酶体相关4次跨膜蛋白B(lysosome-associated protein transmembrane-4 beta,LAPTM4B)的表达水平及临床意义。方法研究对象为2019年1月-2020年3月在本院接受乳腺癌手术治疗的患者;应用RT-PCR法检测乳腺癌组织及癌旁组织中LAPTM4B mRNA水平,比较乳腺癌组织、癌旁组织中LAPTM4B mRNA水平及不同临床特征的乳腺癌患者癌组织LAPTM4B mRNA水平,Logistic回归分析乳腺癌临床特征与LAPTM4B mRNA水平的关系。结果乳腺癌癌组织中LAPTM4B mRNA水平显著高于癌旁组织;将乳腺癌患者癌组织LAPTM4B mRNA水平按中位数分高表达组(≥0.89,n=52)、低表达组(<0.89,n=35),导管浸润性、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、Ki-67阳性的乳腺癌患者癌组织LAPTM4B mRNA高表达比例分别显著高于非导管浸润性、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、Ki-67阴性患者(P<0.05);Logistic回归分析显示乳腺癌病理分型、淋巴结转移、TNM分期及Ki-67表达均是LAPTM4B mRNA表达的独立影响因素。结论乳腺癌癌组织中新肿瘤相关基因LAPTM4B mRNA存在高表达现象,并与乳腺癌病理分型、淋巴结转移、TNM分期及Ki-67表达存在密切关联。 展开更多
关键词 乳腺癌 新肿瘤相关基因 溶酶体相关4次跨膜蛋白b
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溶酶体相关4次跨膜蛋白质基因多态性与肝癌易感性的关系 被引量:1
9
作者 孙桂珍 李卓 +3 位作者 郝娃 牛京勤 殷继明 严艳 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期908-911,共4页
目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,... 目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,分离白细胞,提取基因组DNA,采用特异性引物PCR方法,扩增LAPTM4B第一外显子5′UTR内的部分序列,对三组人群进行分析研究.x^2检验分析肝癌组与对照组LAPTM4B的基因多态性和其他相关因素的相关性.结果:LAPTM4B等位基因在三组观察对象中的分布,^*1和^*2在健康对照组的频率分别是75.71%和24.29%,慢肝组73.16%和26、84%,肝癌组中66.84%和33.45%,三组比较等位基因分布频率有统计学意义,健康对照组与肝癌组比较有统计学意义(x^2=6.979,P=0.008).LAPTM4B的基因型LAPTM4B1^*1型、LAPTM4B^*1/2混合型和LAPTM482^*2型在肝癌组中的频率分别是37.9%、57.9%和4.2%、慢肝组50.5%、45.3%和4.2%、健康对照组56.6%、38.3%和5.1%,三组间三种基因型分布频率比较有统计学意义(x^2=14.854,P〈0.005).结论:基因型^*1/2和等位基因^*2可能与肝癌的发生有关. 展开更多
关键词 肝癌易感性 基因多态性 乙型肝炎 溶酶体相关4次跨膜蛋白质b
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组织芯片检测LAPTM4B与乳腺癌临床病理因素的相关性与生存分析 被引量:1
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作者 张谷 吴昂 高赟 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第17期3348-3350,共3页
目的探讨乳腺癌患者LAPTM4B在肿瘤组织中的表达水平,并评估其在乳腺癌患者预后预测中的地位。方法采用组织芯片(tissue array)技术及免疫组化法检测210例乳腺癌患者肿瘤组织中LAPTM4B表达水平,并收集临床病理资料及随访。结果 LAPTM4B... 目的探讨乳腺癌患者LAPTM4B在肿瘤组织中的表达水平,并评估其在乳腺癌患者预后预测中的地位。方法采用组织芯片(tissue array)技术及免疫组化法检测210例乳腺癌患者肿瘤组织中LAPTM4B表达水平,并收集临床病理资料及随访。结果 LAPTM4B表达水平与乳腺癌患者家族史有关,统计学分析差别有统计学意义(P<0.05),与其他临床病理因素(分子分型、临床分期等)相关性分析无统计学意义。LAPTM4B蛋白高水平表达的乳腺癌患者的预后较差,与LAPTM4B蛋白低表达的乳腺癌患者比较差别有统计学意义(P=0.01)。结论 LAPTM4B蛋白表达水平与遗传因素有关,检测该蛋白表达水平可预测乳腺癌患者的预后。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 溶酶体相关4次穿膜蛋白b(laptm4b) 预后 组织芯片
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新基因LAPTM4B与肿瘤
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作者 印明柱 娄阁 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2011年第1期12-14,共3页
溶酶体相关4次跨膜蛋白质(LAPTM4)B是最近发现的一个新基因,具有癌基因的特性,对其结构、生物学功能、基因多态性及预后与肿瘤关系等进行初步探讨。
关键词 溶酶体相关4次跨膜蛋白质b 肿瘤 癌基因 预后
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子宫内膜癌组织KIF23、LAPTM4B、Snail表达与患者临床病理参数及预后的关系 被引量:4
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作者 玉婷婷 王纯雁 +3 位作者 曾庆东 李雪梅 佟锐 乔志伟 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第16期3069-3073,3086,共6页
目的:探讨子宫内膜癌组织驱动蛋白家族成员23(KIF23)、溶酶体相关4次跨膜蛋白质β(LAPTM4B)、Snail表达与患者临床病理参数及预后的关系。方法:选择2012年10月至2015年2月期间在我院治疗的130例子宫内膜癌患者进行临床研究,采用免疫组... 目的:探讨子宫内膜癌组织驱动蛋白家族成员23(KIF23)、溶酶体相关4次跨膜蛋白质β(LAPTM4B)、Snail表达与患者临床病理参数及预后的关系。方法:选择2012年10月至2015年2月期间在我院治疗的130例子宫内膜癌患者进行临床研究,采用免疫组织化学染色法检测KIF23、LAPTM4B、Snail的表达,分析KIF23、LAPTM4B、Snail的表达与各项临床病理参数及预后的关系。Cox比例风险回归分析子宫内膜癌患者预后的影响因素。结果:子宫内膜癌组织中KIF23、LAPTM4B、Snail阳性率明显高于癌旁正常组织(x^2=61.356、67.031、82.028,均P=0.000)。子宫内膜癌组织中KIF23、LAPTM4B、Snail表达与淋巴结转移、肌层浸润和FIGO分期相关(P<0.05)。KIF23、LAPTM4B、Snail阳性患者5年总生存率明显低于KIF23、LAPTM4B、Snail阴性患者(P<0.05)。FIGO分期、KIF23、LAPTM4B和Snail是子宫内膜癌患者预后的影响因素(HR=1.409、1.478、1.523、2.178,P<0.05)。结论:KIF23、LAPTM4B和Snail在子宫内膜癌中阳性表达率升高,并且均与子宫内膜癌淋巴结转移、肌层浸润、FIGO分期和预后相关,在子宫内膜癌的诊断和预后评估中具有一定临床意义。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 驱动蛋白家族成员23 溶酶体相关4次跨膜蛋白质β SNAIL 临床病理参数 预后
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溶酶体相关4次跨膜蛋白B对结直肠癌增殖和侵袭的影响
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作者 骆洋 卞正乾 +5 位作者 叶光耀 俞旻皓 王正实 秦绍岚 慕逸飞 钟鸣 《中华胃肠外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期606-610,共5页
目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B (LAPTM4B)在结直肠癌增殖和侵袭中的作用。方法采用实时定量PCR检测30对结直肠癌及相应癌旁组织中LAPTM4B mRNA的表达水平,并取6对结直肠癌组织通过免疫组织化学方法检测LAPTM4B蛋白表达水平。选... 目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B (LAPTM4B)在结直肠癌增殖和侵袭中的作用。方法采用实时定量PCR检测30对结直肠癌及相应癌旁组织中LAPTM4B mRNA的表达水平,并取6对结直肠癌组织通过免疫组织化学方法检测LAPTM4B蛋白表达水平。选取结直肠癌细胞系HCT116分别构建LAPTM4B过表达和低表达细胞株,采用CCK8实验检测LAPTM4B对结直肠癌细胞增殖能力的影响,采用Transwell实验检测LAPTM4B对结直肠癌细胞侵袭能力的影响。结果无论mRNA还是蛋白水平,LAPTM4B在结直肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)。 LAPTM4B过表达细胞株的增殖能力和侵袭能力均显著增强(P<0.01),而LAPTM4B低表达细胞株的增殖能力和侵袭能力则显著减弱(P<0.01)。结论 LAPTM4B可促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭,有可能成为一项重要的预后分子标记物。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 溶酶体相关4次跨膜蛋白b HCT116细胞 增殖 侵袭
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微小RNA-188—5p在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞增殖和转移的调控 被引量:3
14
作者 余勇军 刘修恒 郭佳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2643-2646,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-188-5p在前列腺癌中的表达和对前列腺癌细胞增殖和转移的生物学影响。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-188-5p在前列腺癌组织和前列腺癌细胞中的表达。将miR.188-5pmimic利用... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-188-5p在前列腺癌中的表达和对前列腺癌细胞增殖和转移的生物学影响。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-188-5p在前列腺癌组织和前列腺癌细胞中的表达。将miR.188-5pmimic利用Lipfectamine2000转染至前列腺癌细胞,通过软琼脂细胞克隆形成实验、前列腺癌细胞侵袭和迁移实验研究前列腺癌细胞生物功能的改变。利用生物信息学软件miRanda预测miR-188-5p的靶基因。采用双荧光素酶报告实验验证miR-188-5p对靶基因的直接调控。结果miR-188-5pmRNA水平在前列腺癌组织中与前列腺癌旁组织和前列腺增生组织比较表达下调(0.996±0.024、0.990±0.094、0.385±0.031),差异有统计学意义(P〈0.05)。miR-188-5pmRNA水平在LNCaP、DU145和PC-3细胞中较RWPE-1明显下降(1.022±0.012、0.409±0.034、0.358±0.024、0.255±0.018),且差异有统计学意义(P〈0.01)。LNCaP和PC-3细胞中miR-188-5pmimic转染组细胞的体外克隆形成能力明显低于空白对照组(21±5、47±3;25±4、51±5),差异有统计学意义(P〈0.01)。在细胞侵袭和迁移实验中,miR-188-5pmimic转染组PC-3和LNCaP细胞到达对侧的迁移细胞数明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。利用生物信息学软件miranda预测溶酶体相关4次跨膜蛋白质β(LAPTM4B)基因是miR-188-5p可能作用的靶基因。双荧光素酶报告实验确定miR-188-5p与LAPTM4B之间的直接调控关系。结论miR-188-5p在前列腺癌组织和细胞中表达显著下调,过表达miR-188-5p可以抑制前列腺癌细胞的增殖和转移能力。miR-188-5p可能通过作用靶基因LAPTM4B参与调控前列腺癌的生长和转移。 展开更多
关键词 微小RNA-188-5p 溶酶体相关4次跨膜蛋白质β 前列腺癌
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