期刊文献+
共找到105篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
Association among Serum Organochlorine Pesticide Residues, Glutathione S-Transferase M1 Genetic Polymorphism and Female Breast Cancer
1
作者 Jun Li Shoufang Jiang +4 位作者 Yongli Chang Zhong Guo Sanqiao Yao Juxiang Yuan Guoli Li 《Advances in Breast Cancer Research》 2013年第2期19-23,共5页
Background: The purpose of this study was to evaluate the association among serum organochlorine pesticide residues, glutathione S-transferase M1 genetic polymorphism and female breast cancer. Methods: A 1:1 matched c... Background: The purpose of this study was to evaluate the association among serum organochlorine pesticide residues, glutathione S-transferase M1 genetic polymorphism and female breast cancer. Methods: A 1:1 matched case-control study of 140 newly diagnosed breast cancer patients and 140 non-cancer female patients who consulted the five largest hospitals in the Tangshan city from September 2006 to October 2007. Results: The result showed higher risk of breast cancer among subjects with higher levels of serum DDT and HCH residue, the OR was 3.18 (95%CI, 1.11 - 9.07) and 5.02 (95%CI, 1.64 - 16.56).The value of ORe associated with single environmental factor DDT high residues, and ORg associated with single GSTM1 deletion genotype were respectively 3.86 (1.20 - 12.47) and 1.34 (0.36 - 5.08). The OReg associated with combined action of two factors was 5.59 (1.63 - 18.90), and the value of interaction parameters (γ) equaled 1.24. The value of ORe associated with single environmental factor HCH higher residue and ORg associated with single GSTM1 deletion genotype were respectively 2.73 (0.84 - 8.87) and 1.48 (0.49 - 4.60). The value of OReg associated with combined action of two factors was 3.87 (1.18 - 12.68), and γ equaled 1.38. Conclusion: The results indicated that breast cancer occurrence was the combined result of environmental and genetic factors. The concurrent action of GSTM1 deletion genotype and DDT/HCH enhanced the risk of breast cancer. 展开更多
关键词 Breast Cancer DDT HCH GLUTATHIOnE S-TRAnSFERASE m1 (GSTm1) EnDOCRInE Disruptors gene polymorphism Interaction
下载PDF
Effect of variable number of tandem repeats polymorphism in the human dopamine transporter gene on conflict information processing according to event-related potential
2
作者 Chunyu Han Yuping Wang +1 位作者 Xin Wang Ying Liu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第15期1196-1200,共5页
The dopamine transporter (DAT) is responsible for dopamine reuptake from the synaptic cleft. A variable number of tandem repeats polymorphism in the DAT gene is related to DAT availability and has been associated wi... The dopamine transporter (DAT) is responsible for dopamine reuptake from the synaptic cleft. A variable number of tandem repeats polymorphism in the DAT gene is related to DAT availability and has been associated with cognition. With the advantage of high-time resolution, event-related potential is an important method to study the time course of human information processing. Previous results have suggested that dopamine exhibits a close relationship with conflicting information processing. Therefore, the present study assumed that conflicting information processing could be influenced by DAT variable number of tandem repeats polymorphism. To confirm this, the present study analyzed the influence of DAT genotypes on N270, which is presumed to reflect neural activity of conflict information processing in young healthy adults. A S1-S2 matching task was performed in healthy adults with 10/10 genotype (n = 14) and 10/9 genotypes (n = 14), respectively, when event-related potentials were recorded. Results demonstrated that subjects with the 10/10 genotype exhibited shorter N270 latency and quicker reaction times compared with subjects with the 10/9 genotype. There were no differences in N270 amplitude between the two genotypes. These results suggested that 10/10 genotype subjects more efficiently processed conflict information. 展开更多
关键词 event-related potentials dopamine transporter gene polymorphism n270 P300 COGnITIOn nerve electrophysiology neural regeneration
下载PDF
Gene polymorphism of alpha-2 macroglobulin in patients with Parkinson's disease
3
作者 郝怡鑫 傅强 +2 位作者 郭品娥 张建荣 沈茜 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2005年第3期175-177,共3页
Objective:To explore the relationship between polymorphism of α2-macroglobulin(A2M) gene and Parkinson’s disease(PD)in Han Nationality in Shanghai.Methods:The distributions of A2M gene polymorphism (a Val1000Ile in ... Objective:To explore the relationship between polymorphism of α2-macroglobulin(A2M) gene and Parkinson’s disease(PD)in Han Nationality in Shanghai.Methods:The distributions of A2M gene polymorphism (a Val1000Ile in exon24, V/I)were detected in 66 PD patients and 120 healthy controls using polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP) method. Results:The I allelic frequency in A2M exon24 gene of PD patients(90.9%) was significantly lower than that of the healthy controls(96.3%)(OR=0.39,P=0.033),so was the I/I genotype(OR=0.32,P=0.015), especially in the patients more than 60 years old(OR=0.31,P=0.04).Conclusion:The I allele in exon24 of A2M gene might inhibit the onset of PD in Han Nationality in Shanghai. 展开更多
关键词 Parkinson's disease α2-macroglobulin(A2m) gene polymorphism
下载PDF
Comparative analysis of common CFTR polymorphisms poly-T, TG-repeats and M470V in a healthy Chinese population 被引量:5
4
作者 Qin Huang Wei Ding Mu-Xin Wei 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第12期1925-1930,共6页
AIM: To investigate the three important cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) haplotypes poly-T, TG-repeats and the M470V polymorphisms in the Chinese population, and to compare their distribution... AIM: To investigate the three important cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) haplotypes poly-T, TG-repeats and the M470V polymorphisms in the Chinese population, and to compare their distribution with that in Caucasians and other Asian populations. METHODS: Genomic DNA was extracted from blood leukocytes. Exons 9 and 10 of the CFTR gene were obtained through polymerase chain reaction (PCR). Exon 9 DNA sequences were directly detected by an automated sequencer and poly-T and TG-repeats were identified by direct sequence analysis. Pure exon 10 PCR-amplified products were digested by HphⅠ restriction enzyme and the M470V mutation was detected by the AGE photos of digestion products. RESULTS: T7 was the most common (93.6%) haplotype and the (TG)11 frequency of 57.2% and (TG)12 frequency of 40.9% were dominant haplotypes in the junction of intron 8 (IVS-8) and exon 9. The frequency of T5 was 3.8% and all T5 allele tracts (10 alleles) were joined with (TG)12. Four new alleles of T6 (1.5%) were found in three healthy individuals. In exon 10, the V allele (56.1%) was slightly more frequent than the M allele (43.9%), and the M/V (45.5%) was the dominant genotype in these individuals. The three major haplotypes T7-(TG)11-V470, T7-(TG)12-M470 and T7-TG11-M470 were related to nearly 86.0% of the population. CONCLUSION: The polymorphisms of poly-T, TG-repeats, and M470V distribution were similar to those in other East Asians, but they had marked differences in frequency from those single haplotype polymorphisms or linkage haplotypes in Caucasians. Thus, they may be able to explain the low incidence of CF and CF-like diseases in Asians. 展开更多
关键词 Cystic fibrosis transmembrane conductanceregulator gene gene polymorphism Poly-T TG-repeats m470V
下载PDF
Novel SNP of EPAS1 gene associated with higher hemoglobin concentration revealed the hypoxia adaptation of yak(Bos grunniens) 被引量:8
5
作者 WU Xiao-yun DING Xue-zhi +4 位作者 CHU Min GUO Xian BAO Peng-jia LIANG Chun-nian YAN Ping 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期741-748,共8页
Endothelial PAS domain protein 1 gene (EPAS1) is a key transcription factor that activates the expression of oxygen-regu- lated genes. In this study, in order to better understand the effects of EPAS1 gene on hemato... Endothelial PAS domain protein 1 gene (EPAS1) is a key transcription factor that activates the expression of oxygen-regu- lated genes. In this study, in order to better understand the effects of EPAS1 gene on hematologic parameters in yak, we firstly quantified the tissue expression patterns for EPASl mRNA of yak, identified polymorphism in this gene and evaluated its association with hematologic parameters. Expression of EPAS1 mRNA was detected in all eight tissues (heart, liver, lung, spleen, pancreas, kidney, muscles and ovary). The expressions of EPAS1 in lung and pancreas were extremely higher than other tissues examined. Three novel single nucleotide polymorphisms (SNPs) (g.83052 C〉T, g.83065 G〉A and g.83067 C〉A) within the EPAS1 were identified and genotyped in Pali (PL), Gannan (GN) and Tianzhu White (TZW) yak breeds. Significant higher frequencies of the AA and GA genotypes and A allele of the g.83065 G〉A were observed in the PL and GN breeds than that in the TZW breed (P〈0.01). Association analysis of the PL breed indicated that the g.83065 G〉A polymorphism was significantly associated with hemoglobin (HGB) concentration in yaks (P〈0.05). Individuals with genotype AA had significantly higher HGB concentration (P〈0.05) than those with genotype GA and GG. All these results will help our further understanding of biological functional of yak EPAS1 gene in responding to hypoxia and also indicate EPAS1 might contribute to the hypoxia adaptation of the yak. 展开更多
关键词 EPAS1 gene m RnA expression polymorphism hypoxia adaptation YAK
下载PDF
Cloning of M and NP Gene of H5N1 Avian Influenza Virus and Immune Efficacy of their DNA Vaccines 被引量:2
6
作者 Po Tien 《中国病毒学》 CSCD 2007年第1期46-52,共7页
H5N1 鸟的流行性感冒病毒(A/chicken/Hubei/489/2004 ) 的 M 和 NP 基因被 RT-PCR 从病毒的 RNA 放大,并且分别地克隆向量进 pMD18-T。包含 M 基因(pHM6-m ) 或 NP 基因(pHM6-np ) 的表示 plasmid 然后被把 M 或 NP 基因插入到 pHM6 ... H5N1 鸟的流行性感冒病毒(A/chicken/Hubei/489/2004 ) 的 M 和 NP 基因被 RT-PCR 从病毒的 RNA 放大,并且分别地克隆向量进 pMD18-T。包含 M 基因(pHM6-m ) 或 NP 基因(pHM6-np ) 的表示 plasmid 然后被把 M 或 NP 基因插入到 pHM6 优核质表示向量构造;构造 plasmid 然后被定序。32 只 BALB/c 老鼠(6-week-old ) 在随机被划分成四个组。三组 BALB/c 老鼠被接种一次有 plasmid pHM6-m, plasmid pHM6-np 的 30 渭 g 或 plasmid pHM6-m (15 渭 g ) 和 pHM6-np (15 渭 g ) 的混合的任何一个 30 渭 g 的肌内的线路分别地。老鼠的一个另外的组作为控制与 100 渭 l PBS 被注射。二个星期以后,所有老鼠与相应 H5N1 鸟的流行性感冒病毒被质问,并且在下列 12 天内观察了。在 pHM6-m 组, pHM6-np 组和混合 plasmids 组的老鼠的幸存率分别地是 62.5% , 25.0% 和 50.0% 。结果证明有效保护能被 pHM6-m 或 pHM6-np 提供,但是 pHM6-m 比 pHM6-np 提供了更好保护的效果。关键词 H5N1 流行性感冒病毒 - M 基因 - NP 基因 - 克隆 - DNA 疫苗的 CLC 数字 S852.65 基础条款:国家基本科学才能训练资助(NSFC J0630648 ) 展开更多
关键词 H5n1 influenza virus m gene nP gene CLOnInG DnA vaccine
下载PDF
25羟维生素D3、M型磷脂酶A2受体基因多态性交互影响原发性膜性肾病病情进展的研究
7
作者 黄显莉 文飞亚 郝炎 《临床肾脏病杂志》 2024年第10期834-840,共7页
目的探究25羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitmin D3,25-(OH)D3]、M型磷脂酶A2受体(M-type phospholipase A2 receptor 1,PLA2R1)基因多态性交互影响原发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)病情进展的作用。方法选取2019年... 目的探究25羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitmin D3,25-(OH)D3]、M型磷脂酶A2受体(M-type phospholipase A2 receptor 1,PLA2R1)基因多态性交互影响原发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)病情进展的作用。方法选取2019年1月至2023年1月自贡市第一人民医院收治的101例IMN患者进行前瞻性研究,根据6个月内是否复发分为复发组、未复发组。比较两组患者基线资料、25-(OH)D3水平、PLA2R1基因多态性,以Logistic回归分析影响IMN病情进展的因素,以交互作用系数γ和OR值分析25-(OH)D3、PLA2R1基因多态性交互影响IMN病情进展的作用。结果复发组尿酸[(419.36±25.44)μmol/L比(366.20±28.34)μmol/L]高于未复发组,25-(OH)D3水平[(33.60±10.74)nmol/L比(42.40±9.56)nmol/L]低于未复发组(P<0.05)。复发组rs4664308位点AA基因型(69.44%比44.62%)患者占比高于未复发组,GA基因型(27.78%比43.08%)、GG基因型(2.78%比12.31%)患者占比低于未复发组(P<0.05)。Logis-tic回归分析显示,尿酸、25-(OH)D3、rs4664308位点GA和AA基因型均与IMN病情进展相关(P<0.05),尿酸每升高一个单位,IMN患者病情进展的风险增加4.233倍;25-(OH)D3每降低一个单位,IMN患者病情进展的风险增加0.581倍;rs4664308位点GA和AA基因型患者,病情进展的风险分别是基因型GG患者的3.253、4.054倍。交互作用分析显示,25-(OH)D3和PLA2R1基因多态性交互的OR值<两者单独存在OR值的乘积,两者对IMN病情进展的影响符合次相乘模型,且交互作用系数γ>1,25-(OH)D3非正常对PLA2R1基因多态性的效应具有正向交互作用(P<0.05)。结论25-(OH)D3、PLA2R1基因多态性均与IMN患者病情进展有关,25-(OH)D3水平对PLA2R1基因多态性的效应具有正向交互作用,联合检测两者状态可能有助于预测患者病情进展的风险,为临床个性化预防干预提供决策支持。 展开更多
关键词 25羟维生素D3 m型磷脂酶A2受体 基因多态性 交互作用 原发性膜性肾病
下载PDF
中国人群MN血型中M、N等位基因多态性的研究 被引量:4
8
作者 梁延连 苏宇清 +3 位作者 吴凡 周丹 李大成 张印则 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期537-540,共4页
目的:检测血型糖蛋白GPA相关基因GYPA中全部外显子与部分内含子碱基序列,探讨中国人群MN血型中M、N等位基因的多态性.方法:随机选取国籍为中国人的无偿献血者225人份的血液样本,以血型血清学方法鉴定M、N血型表现型;自行设计引物,直... 目的:检测血型糖蛋白GPA相关基因GYPA中全部外显子与部分内含子碱基序列,探讨中国人群MN血型中M、N等位基因的多态性.方法:随机选取国籍为中国人的无偿献血者225人份的血液样本,以血型血清学方法鉴定M、N血型表现型;自行设计引物,直接测序相关样本GYPA基因的exon-1~7全长碱基序列以及intron-1~7中部分碱基序列,根据序列中碱基的变异分析M、N基因的多态性.结果:M、N血型的基因定型与血清学检测结果一致;根据intron-1中-9位,exon-2中1、22、34、35、56位,intron-2中23位,intron-3中55位,intron-4中63位,intron-5中1373、1374、1375位,intron-6中55、189、190位和exon-7中712位等的变异,可以把M、N基因细分为M101、M102、M103、M201、M202、N101、N102、N103、N104、N201;同时,本研究发现在GYPA基因的intron-2中42、54位突变与59、60位间插入碱基T的变异;intron-3中-28、-29、-65、-102位等基因位点存在新的变异.结论:MN血型中M、N基因具有多态性,中国人群GPA相关基因GYPA的各外显子、部分内含子的结构特点揭示了中国人群的M、N血型基因的多态性,为临床输血、人类群体遗传学及分子生物学的研究提供相关的基础. 展开更多
关键词 mn血型 mn基因多态性 中国人群 GPA GYPA
下载PDF
Predicting Physical Properties of Tetragonal,Monoclinic and Orthorhombic M_3N_4(M=C,Si,Sn) Polymorphs via First-Principles Calculations
9
作者 仓玉萍 连帅彬 +1 位作者 杨慧明 陈东 《Chinese Physics Letters》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期90-94,共5页
The recently discovered tetragonal, monoclinie and orthorhombic polymorphs of M3N4 (M=C, Si, Sn) are in- vestigated by using first-principles calculations. A set of anisotropic elastic quantities, i.e., the bulk and... The recently discovered tetragonal, monoclinie and orthorhombic polymorphs of M3N4 (M=C, Si, Sn) are in- vestigated by using first-principles calculations. A set of anisotropic elastic quantities, i.e., the bulk and shear moduli, Young's modulus, Poisson ratio, H/G ratio and rickets hardness of M3N4 (M=C, Si, Sn) are predicted. The quasi-harmonic Debye model, assuming that the solids are isotopic, may lead to large errors for the non-cubic crystals. The thermal effects are obtained by the traditional quasi-harmonic approach. The dependences of heat capacity, thermal expansion coefficient and Debye temperature on temperature and pressure are systematically discussed in the pressure range of 0 IOGPa and in the temperature range of 0-1100 K. More importantly, o- C3N4 is a negative thermal expansion material. Our results may have important consequences in shaping the understanding of the fundamental properties of these binary nitrides. 展开更多
关键词 SI m=C Si Sn on of Predicting Physical Properties of Tetragonal monoclinic and Orthorhombic m3n4 m Polymorphs via First-Principles Calculations that in is
下载PDF
TGEV的sM、M和N基因克隆及特征分析 被引量:5
10
作者 程杰 柳纪省 +4 位作者 吴润 殷相平 李宝玉 兰喜 王辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期695-700,共6页
参照GenBank中收录的TGEVsM、M和N基因序列各设计1对特异引物,经RTPCR扩增获得了TS株的相应基因片段,分别约为346、932和1217bp,其大小与预计的目的片段相符。与其他毒株的相应基因相比较,并经剪接后,TS株的sM、M和N基因全长分别为248、... 参照GenBank中收录的TGEVsM、M和N基因序列各设计1对特异引物,经RTPCR扩增获得了TS株的相应基因片段,分别约为346、932和1217bp,其大小与预计的目的片段相符。与其他毒株的相应基因相比较,并经剪接后,TS株的sM、M和N基因全长分别为248、789和1149bp,各编码82个、262个和382个氨基酸;TS株与Purdue株、TFI株和961933株的sM基因核苷酸序列同源性分别为95.2%、92.7%和90.2%;推导氨基酸的同源性分别为95.9%、97.2%、98.8%;与Purdue株、TFI株、TGEVH株和961933株的M基因核苷酸序列同源性分别为95.2%、98.0%、99.6%和95.0%;推导氨基酸的同源性分别为97.0%、97.3%、98.5%、93.5%;与Purdue株、TFI株、FS722/70株、Korea株、TO14株、TGEVH株和961933株的N基因核苷酸序列同源性分别为98.1%、97.7%、99.0%、98.3%、99.2%、99.0%和95.9%,推导氨基酸的同源性分别为97.9%、98.4%、99.0%、97.7%、99.5%、96.2%、96.6%。并对TS株基因间的保守序列和sM、M和N基因及其编码的相应氨基酸的结构特征进行了分析,发现sM和N基因在TGEV中保守;并提示在我国不仅存在有2个不同亚基因型的TGEV,而且我国的TGEV可能是输入性的。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 TGEV TS株 sm基因 m基因 n基因 克隆
下载PDF
Streptomyces sp.Tü 4128中新型抗生素bagremycins抗性基因bagJ的研究
11
作者 张玉琛 吴海珍 +3 位作者 鞠诚 祁双双 叶江 张惠展 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期184-192,共9页
通过框内敲除鉴定了链霉菌Streptomyces sp.Tü4128中基因bagJ的功能。HPLC结果表明,敲除基因bagJ导致抗生素生产水平大幅降低;回补菌株恢复了抗生素的生产;过表达菌株大幅提高了抗生素的产量,证明基因bagJ在新型抗生素bagremycins... 通过框内敲除鉴定了链霉菌Streptomyces sp.Tü4128中基因bagJ的功能。HPLC结果表明,敲除基因bagJ导致抗生素生产水平大幅降低;回补菌株恢复了抗生素的生产;过表达菌株大幅提高了抗生素的产量,证明基因bagJ在新型抗生素bagremycins的生物合成中必不可少。抑菌圈实验表明基因bagJ敲除菌株较野生菌株对bagremycins更加敏感;BagJ在Streptomyces lividans TK64中异源表达后使该菌株对bagremycins的耐受性增强,证明bagJ是新型抗生素bagremycins的抗性基因。扫描电镜的结果证明了BagJ异源表达后导致Streptomyces TK64的菌丝形态发生了改变。其他抗生素的敏感性实验表明,BagJ可能是一个逆向转运蛋白。 展开更多
关键词 bagremycins STREPTOmYCES sp.Tü 4128 bagJ mFS家族 抗性基因
下载PDF
Mitigating Root Knot Nematode Propagation on Transgenic Tobacco via <i>in Planta</i>Hairpin RNA Expression of <i>Meloidogyne incognita</i>—Specific PolA1 Sequence
12
作者 Peter Nkachukwu Chukwurah Samuel Aduse Poku +3 位作者 Akira Yokoyama Ai Takeda Masahiro Shishido Ikuo Nakamura 《American Journal of Plant Sciences》 2019年第5期866-884,共19页
Root knot nematodes are top priority nematode pests that significantly constrain agricultural productivity globally especially in developing countries. However, expressing double stranded RNA (dsRNA) of essential nema... Root knot nematodes are top priority nematode pests that significantly constrain agricultural productivity globally especially in developing countries. However, expressing double stranded RNA (dsRNA) of essential nematode genes in susceptible plants is known to confer protection against these pests via RNA silencing. This molecular-based strategy is called host induced gene silencing (HIGS) and the selection of appropriate target nematode gene is critical to its success. In this study, therefore, we focused on root knot nematode PolA1, an essential single copy nuclear gene encoding the largest subunit of RNA polymerase I enzyme and evaluated its effectiveness as a target in conferring nematode resistance on Agrobacterium-mediated transformed tobacco plants. Transgenic tobacco expressing Meloidogyne incognita-specific (MiS) dsRNA of PolA1 gene showed significant reduction in nematode fecundity and multiplication compared to wild type plants in both T0 and T1 generations. T0 plants showed varying degrees of agronomic vigorover WT plants possibly due to varying levels of processed siRNA. However, production of MiS siRNAs in the transgenic plants coupled with significant reduction of PolA1 transcript expression in nematodes feeding on roots of transgenic plants provided evidence of HIGS. Taken together, our results show that PolA1 is a potentially effective target for HIGS-mediated reduction of root knot nematode damage on transgenic tobacco. Given the homology of our target sequence among Meloidogyne species, this protection could be broad range against other root knot nematodes aside M. incognita. 展开更多
关键词 m. incognita nEmATODE Resistance n. tabacum RnA Silencing PolA1 gene
下载PDF
鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1、N和M基因的克隆与表达 被引量:5
13
作者 闫芳 赵宇军 +7 位作者 吴倩 岳文斌 李绪英 吉文汇 刘娟 刘风波 任家琰 化丽珍 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第16期14-17,共4页
为研究鸡传染性支气管炎病毒DNA疫苗,构建了表达IBVS1、M和N基因真核表达载体,并且BHK-21细胞和小鼠体内进行了表达检测,将IBVSX16株的S1、N和M基因克隆入真核表达载体pVAX1,构建IBV真核表达载体pVAX1-16S1、pVAX1-16N和pVAX1-16M。体... 为研究鸡传染性支气管炎病毒DNA疫苗,构建了表达IBVS1、M和N基因真核表达载体,并且BHK-21细胞和小鼠体内进行了表达检测,将IBVSX16株的S1、N和M基因克隆入真核表达载体pVAX1,构建IBV真核表达载体pVAX1-16S1、pVAX1-16N和pVAX1-16M。体外转染BHK-21细胞,用间接ELISA检测到目的蛋白表达,用构建的3个表达载体免疫小鼠,从小鼠血清中检测到了抗IBV抗体,初步证实用IBVS1、N和M基因作为核酸疫苗免疫动物,可以激活机体免疫应答。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 n基因 m基因
下载PDF
猪流行性腹泻病毒的RT-PCR鉴定及其M、N和E基因的序列分析 被引量:6
14
作者 张红垒 董洁 +2 位作者 梁亚冰 许信刚 童德文 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期24-28,共5页
对引起仔猪严重腹泻的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)进行RT-PCR检测,并对PEDV部分基因进行克隆和序列分析。从陕西省某发生严重仔猪腹泻的养猪场采集肠道内容物,利用RT-PCR技术成功检测到PEDV感染。克隆检测... 对引起仔猪严重腹泻的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)进行RT-PCR检测,并对PEDV部分基因进行克隆和序列分析。从陕西省某发生严重仔猪腹泻的养猪场采集肠道内容物,利用RT-PCR技术成功检测到PEDV感染。克隆检测到的PEDV M、N和E基因片段,并将该基因核苷酸序列和推导的氨基酸序列与其他不同来源的PEDV毒株进行比较分析。结果表明,克隆的M、N和E基因与其他已经发表的PEDV毒株核苷酸的同源性分别为96.3%~99.9%、95.2%~99.5%和96.1%~96.9%,氨基酸同源性分别为95.6%~99.6%、96.1%~99.5%和96.1%~98.7%;系统进化树结果表明,试验检测的PEDV与国内分离株的PEDV株亲缘关系更近。可见:陕西省养殖场存在猪流行性腹泻病毒感染,其M、N和E基因变异不大。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 RT-PCR鉴定 m基因 n基因 E基因 序列分析
下载PDF
小反刍兽疫病毒的N、M、F及H基因的序列测定和分析 被引量:8
15
作者 赵文华 杨仕标 +4 位作者 蒋梅 朱建波 李华春 肖雷 张念祖 《动物医学进展》 CSCD 2007年第11期8-11,共4页
小反刍兽疫病毒属于副黏病毒科麻疹病毒属,为有囊膜的单股负链RNA病毒。以灭活的检测用抗原为材料,抽提基因组RNA作为模板,根据GenBank下载的序列及进行原核表达载体的要求,设计可扩增小反刍兽疫病毒N、M、F及H4个基因的全长读码框(ORF... 小反刍兽疫病毒属于副黏病毒科麻疹病毒属,为有囊膜的单股负链RNA病毒。以灭活的检测用抗原为材料,抽提基因组RNA作为模板,根据GenBank下载的序列及进行原核表达载体的要求,设计可扩增小反刍兽疫病毒N、M、F及H4个基因的全长读码框(ORF)的引物,进行RT-PCR扩增及扩增片段的T载体克隆、序列分析。结果显示,均有预期大小的片段扩增出。扩增片段经核苷酸序列测定、分析,N、M、F及H基因ORF全长分别为1578、1008、1641、1830nt;4个基因均与疫苗株Nigeria75/1(X74443)有100%的同源性,说明所购试剂盒用的检测抗原应该是用此疫苗株制备,也证明了设计用于原核表达的4对引物扩增片段的正确性。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 n m F及H基因 逆转录-聚合酶链反应 同源性 疫苗株
下载PDF
变异猪流行性腹泻病毒M和N双基因融合真核表达及其活性鉴定 被引量:4
16
作者 王隆柏 陈秋勇 +3 位作者 吴学敏 陈如敬 车勇良 周伦江 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期3083-3089,共7页
【目的】体外表达变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M-N双基因融合蛋白并明确其生物活性,为开展PEDV新型疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白。【方法】将变异PEDV的M基因克隆至pEASY-Blunt M2(pM2)真核表达载体构建pM2-M真核质粒,通过... 【目的】体外表达变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M-N双基因融合蛋白并明确其生物活性,为开展PEDV新型疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白。【方法】将变异PEDV的M基因克隆至pEASY-Blunt M2(pM2)真核表达载体构建pM2-M真核质粒,通过同源重组将N基因克隆至M2-M基因片段构建pM2-M-N双基因融合重组质粒,然后转染293T细胞表达出M-N双基因融合蛋白。通过Western blotting、ELISA及免疫BLAB/c小鼠试验鉴定表达融合蛋白的生物学活性。【结果】扩增获得的M基因、N基因片段大小分别为678和1359 bp,且与原序列的相似性均达100.0%。将M基因和N基因并连接至pM2真核表达载体成功构建获得pM2-M-N双基因融合重组质粒,M-N双基因片段大小为2004 bp,且与原序列的相似性为99.3%。以pM2-M-N双基因融合重组质粒转染239T细胞,表达出大小约75 kD且具有免疫活性的M-N双基因融合蛋白,纯化的M-N双基因融合蛋白能与PEDV阳性血清反应,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等病毒均无交叉反应;以其免疫BLAB/c小鼠能诱导产生特异性抗体。【结论】通过pM2真核表达载体能构建获得变异PEDV毒株的pM2-M-N融合双基因重组质粒,转染293T细胞后可表达出具有良好免疫活性的M-N双基因融合蛋白,为后期开展变异PEDV基因工程疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) m基因 n基因 双基因 融合蛋白
下载PDF
小反刍兽疫病毒疫苗株N和M基因的克隆、序列分析及原核表达 被引量:4
17
作者 何亚鹏 鲍长磊 +2 位作者 张琪 付明哲 许信刚 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期179-184,共6页
根据GenBank已登录的PPRV基因组序列,设计并合成2对特异性引物,以PPRV疫苗株基因组为模板,经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析,再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中,经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行IPTG诱导表达,并进行SDS... 根据GenBank已登录的PPRV基因组序列,设计并合成2对特异性引物,以PPRV疫苗株基因组为模板,经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析,再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中,经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE和Western blot检测。成功克隆PPRV疫苗株N和M基因,重组菌经IPTG诱导后表达分子质量为57.7ku N蛋白(核衣壳蛋白)和38.1ku的M蛋白(基质蛋白),2个蛋白均能与小反刍兽疫阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 小反刍兽疫毒 n基因 m基因 克隆 序列分析 原核表达
下载PDF
猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5/M/N串联基因的克隆及原核表达 被引量:3
18
作者 邵磊 冉旭华 +3 位作者 闻晓波 倪宏波 王密 朴范泽 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期101-105,共5页
采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5... 采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白的菌株。经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blotting。结果表明,PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发生特异性反应。证明原核表达系统表达的PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 猪生殖与呼吸综合征病毒 △Gp5基因 m基因 n基因 原核表达
下载PDF
变异猪流行性腹泻病毒M和N融合双基因的原核表达及表达产物免疫原性分析 被引量:2
19
作者 王隆柏 王晨燕 +4 位作者 吴学敏 陈秋勇 车勇良 陈如敬 周伦江 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1249-1255,共7页
旨在构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株(GenBank登陆号KJ646580)的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2(pE2)表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组... 旨在构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株(GenBank登陆号KJ646580)的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2(pE2)表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至E2-M片段,转化到Trans 1-T1感受态细胞中,构建出pE2-M-N融合双基因质粒并转化Transetta(DE3),表达出相应的融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot验证蛋白的表达情况。将纯化的M-N融合蛋白皮下接种BLAB/c小鼠,通过ELISA方法检测融合蛋白的免疫原性。结果表明:扩增出M和N基因,成功构建了pE2-M质粒,并将E2-M基因与N基因进行有效连接,构建出pE2-M-N融合双基因质粒,表达出了具有免疫原性的M-N融合蛋白,该蛋白能够诱导小鼠产生相应的特异性抗体。变异PEDV的pE2-M-N双基因融合质粒的构建,为进一步开展变异PEDV的诊断技术和免疫学等研究,奠定良好基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PEDV m基因 n基因 双基因表达
下载PDF
陕西省部分地区猪流行性腹泻病毒S、M和N基因的遗传变异分析 被引量:2
20
作者 庞文静 何亚鹏 +3 位作者 付明哲 许信刚 郭抗抗 张琪 《动物医学进展》 北大核心 2016年第11期25-30,共6页
为了解陕西省部分地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传和变异情况,采集陕西省部分地区规模化猪场的5份疑似PEDV感染的猪小肠内容物,进行PEDV S、M和N基因的RT-PCR扩增,并对扩增产物进行序列测定和遗传变异分析。结果表明,5份病料均能扩... 为了解陕西省部分地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传和变异情况,采集陕西省部分地区规模化猪场的5份疑似PEDV感染的猪小肠内容物,进行PEDV S、M和N基因的RT-PCR扩增,并对扩增产物进行序列测定和遗传变异分析。结果表明,5份病料均能扩增出PEDV S、M和N基因,5株病毒分别命名为SXSL、SX-BJ、SX-YL、SX-WN和SX-HZ株。序列分析表明,5株毒株之间的S、M和N基因核苷酸序列的同源性分别为96.7%~99.8%、98.4%~100%和97.2%~99.9%;氨基酸序列的同源性分别为97.4%~99.9%、98.2%~100%和98.2%~100%。该5株病毒与中国疫苗株CV777的S、M和N基因核苷酸序列的同源性分别为93.9%~99.8%、98.1%~100%和95.3%~99.9%,氨基酸序列的同源性为93.6%~99.9%、96.2%~100%和98.2%~100%。遗传进化分析结果显示,5个陕西分离株的S基因与中国疫苗株CV777亲缘关系较远,与近年来中国株、日本株以及韩国株亲缘关系较近。SX-SL株、SX-BJ株和SX-YL株的M和N基因与中国疫苗株CV777亲缘关系较近,且与中国株CHGD-01亲缘关系密切。SX-WN株和SX-HZ株的M和N基因与中国疫苗株CV777亲缘关系较远。该5株病毒的S基因以及SX-WN株和SX-HZ株的M基因和N基因变异程度较大,而SX-SL株、SX-BJ株和SX-YL株三个流行株均与中国株CHGD-01亲缘关系密切,并且与近年在陕西省流行的PEDV也不完全相同。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S基因 m基因 n基因 序列分析
下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部