苗勒管细胞的分离及苗勒管抑制素受体定位的免疫电镜观察

本实验应用胰酶消化后的Percoll梯度分离技术,将苗勒管上皮细胞与间质细胞分离开来,然后分别进行细胞培养。一部分与同胚龄睾丸或卵巢联合培养,观察生殖腺分泌的苗勒管抑制素(MIS)对两类细胞致死率的差异;另一部分以MIS抗体为第一抗体,HRP-羊抗兔IgG或抗生物素-胶体金为第二抗体,作免疫电镜技术,显示苗勒管上皮细胞和间质细胞上MIS受体的结合位点。实验结果表明,睾丸分泌的MIS使培养的苗勒管上皮细胞致死率与对照组相比,有非常显著差异(P<0.001),对间质细胞致死率不明显,但MIS受体结合位点的免疫反应不仅出现在苗勒管上皮细胞上,也显示在间质细胞上。本文讨论了MIS的作用机理。