广东省腹泻仔猪大肠杆菌blaCTX-M-65与mcr-1基因共传播特征

【目的】调查分析广东省某生猪养殖场腹泻仔猪的大肠杆菌耐药情况以及同时携带blaCTX-M-65与mcr-1两种耐药基因的阳性大肠杆菌的分子特征与其共同传播特征,为耐药性监测及风险防控提供科学依据。【方法】从广东省肇庆市某生猪养殖场采集腹泻仔猪直肠棉拭子样品90份,并进行大肠杆菌分离鉴定;采用PCR方法检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与mcr-1基因,通过测序确定CTX-M亚型;采用琼脂二倍稀释法和微量肉汤稀释法测定分离菌对12种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC);使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点序列分型(MLST)分析菌株间的遗传背景;通过接合转移方法确定质粒水平转移的能力;使用复制子分型、S1-PFGE、Southern blotting方法检测质粒类型、耐药基因的定位及定位质粒的大小;通过三代测序及序列分析确定质粒的重组过程。【结果】共分离鉴定86株大肠杆菌,检测到44株携带CTX-M型ESBLs基因,其中blaCTX-M-55基因最流行(n=16,36.4%),其次是blaCTX-M-65(n=10,22.7%)、blaCTX-M-27(n=8,18.2%)、blaCTX-M-15(n=5,11.4%),还检测出blaCTX-M-79(n=2,4.5%)、blaCTX-M-14(n=2,4.5%)和blaCTX-M-24(n=1,2.3%)。10株blaCTX-M-65基因阳性菌有8株同时携带mcr-1基因。这8株大肠杆菌均表现为多药耐药,包括氨苄西林、阿莫西林、头孢噻呋、头孢喹肟、黏菌素等多种抗生素。8株菌共分为6种ST型、7个PFGE谱型。接合转移试验发现,有6株菌的blaCTX-M-65和mcr-1基因发生了共转移,且blaCTX-M-65与mcr-1基因均位于IncHI2型(253 kb)质粒上。其中1株菌在接合转移的过程中,其所携带的一个253 kb IncHI2质粒与一个69 kb IncFⅡ质粒发生融合,形成一个大小323 kb的融合质粒。对融合质粒进行三代测序解析,结果表明,在接合转移的过程中IS26介导了两个不同大小质粒的重组。【结论】IncHI2质粒是介导blaCTX-M-65和mcr-1基因共同传播的主要媒介,IS26通过与靶位点GTTTCACT的整合导致IncHI2质粒与IncFⅡ质粒融合。质粒重组扩大了大肠杆菌的耐药谱,加速了耐药基因的传播,促使多药耐药现象更严重,对公共卫生安全构成威胁,本研究为阐明多重耐药大肠杆菌的传播机制提供了参考依据。

M/M/1排队系统输出过程的转移概率与瞬时分布

本文对M/M/1排队系统,求出其输出过程在顾客到达时刻的转移概率及在任意时刻的分布.

服务失效状态为吸收状态及重试率为常数的M^([X])/M/1排队模型的主算子的谱分析

研究服务失效状态为吸收状态及重试率为常数的M^([X])/M/1排队模型的主算子在左半复平面中的谱.当顾客的到达率λ,服务员的服务率ν,顾客的重试率α和服务员的服务完成率b满足一定的条件时,证明了实部为-(λ+ν+b)的所有复数都不是该模型主算子的特征值;当λ,ν, α, b满足一定的条件时,证明了区间(-(λ+ν+b),0)中无穷多个点是该主算子的几何重数为1的特征值.

非那雄胺联合塞来昔布治疗慢性前列腺炎对巨噬细胞集落刺激因子、单核细胞趋化蛋白-1水平表达的影响

目的探究非那雄胺联合塞来昔布治疗慢性前列腺炎对巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平表达的影响。方法选取我院2020年5月-2023年3月收治的慢性前列腺炎患者218例作为本次研究对象。218例患者平均分为观察组、对照组各109例。观察疗效、症状评分、M-CSF、MCP-1水平。结果观察组治疗总有效率(93.58%)高于对照组(85.32%),差异显著,χ^(2)=3.937,P=0.047。治疗前两组的NIH-CPSI评分比较差异不显著(P>0.05),治疗后,观察组NIH-CPSI评分低于对照组,差异显著,P<0.05。治疗前两组的M-CSF、MCP-1水平比较差异不显著(t=0.521,P=0.603,t=1.084,P=0.280),治疗后,观察组M-CSF(168.73±53.24)pg/mL、MCP-1(3.42±0.85)ng/mL水平均低于对照组(205.44±49.71)pg/mL、(4.22±1.12)ng/mL,差异显著,P<0.05。结论非那雄胺联合塞来昔布用于治疗慢性前列腺炎效果良好,该治疗方案能够降低M-CSF、MCP-1水平,改善患者临床症状,提高生活质量。

N^(6)-腺苷甲基化修饰及其对LINE-1的调控机制

长散布元件-1(long interspersed elements-1,LINE-1)是现今在人类基因组中唯一具有自主转座能力的转座子,其转座会引起细胞基因组结构和功能的改变,是导致多种严重疾病的重要因素。在转座过程中,LINE-1 mRNA是转座中间体的核心,宿主细胞对其进行相关修饰直接影响转座。N^(6)-腺苷甲基化修饰(m^(6)A)是真核细胞RNA上最丰富且动态可逆的表观遗传修饰。目前发现m^(6)A修饰也存在于LINE-1 mRNA上,参与LINE-1整个生命周期的调控,影响其转座和基因组中LINE-1相邻基因的表达,进而影响基因组稳定性、细胞自我更新与分化潜能,在人类发育和疾病中具有重要作用。本文介绍了LINE-1 m^(6)A修饰的位置、功能以及相关机制,并总结了LINE-1的m^(6)A修饰对其转座调控的研究进展,以期为相关疾病发生发展的机制研究和治疗提供新的思路。

有Bernoulli检修与顾客进入控制策略的M/G/1可修排队的可靠性

本文研究一个具有Bernoulli检修与顾客进入控制策略的M/G/1可修排队模型,其中服务台在服务顾客期间可能发生故障.Bernoulli检修与顾客进入控制策略是指每当系统变空时依概率p(0≤p≤1)进入检修,或者依概率(1−p)不进入检修而是等待下一个顾客进入系统后直接开始服务,而且在系统的检修期内至多允许N个顾客进入.运用更新过程理论、全概率分解技术与拉普拉斯变换工具,我们对系统的一些可靠性指标进行了讨论,例如时刻t服务台处于故障状态的概率、在(0,t]内服务台的平均失效次数等等.最后通过数值计算研究了一些系统参数对系统可靠性指标的影响.

淡紫拟青霉M-1固体发酵工艺优化及基于自动化种曲机的中试生产

淡紫拟青霉Paecilomyceslilacinus在线虫生物防治上表现出巨大的潜力,但大规模生产技术的不成熟以及产品货架期短限制其工业化生产。为获得淡紫拟青霉M-1固体发酵的最佳条件,并建立其规模化生产工艺,本研究采用单因素和正交试验对淡紫拟青霉M-1固体发酵培养的组成、发酵条件以及烘干条件进行了优化,结果表明淡紫拟青霉M-1固体发酵最佳的培养基组成为麸皮:玉米粉为1:1、蔗糖添加量5%、尿素添加量0.1%、硫酸铵添加量0.1%、料水比1:0.67,固体发酵最佳的培养条件为培养温度28℃、培养时间为7 d、液体接种量为5%、固体接种量为0.5%,固体菌剂最适烘干条件为在35℃烘干24h,在此条件下淡紫拟青霉M-1固体菌剂的有效活菌数为9.47×10^9CFU/g。在此基础上,基于自动化种曲机,建立淡紫拟青霉M-1规模化固体发酵工艺,并通过3个批次规模化生产进行验证,获得将近2 t淡紫拟青霉M-1固体菌剂产品,菌剂有效活菌数能达到15.6×10^9 CFU/g,杂菌率极低(<0.01%),水分含量为9.68%。由此说明,该工艺可用于淡紫拟青霉M-1工业化生产,且产品质量优异。

灿烂弧菌M-1菌株培养条件优化研究

采用梯度法比较了培养时间、温度、盐度、初始pH值、菌液起始浓度等对灿烂弧菌(Vibrio splendidus)M-1菌株生长的影响;采用正交试验法对Zobell 2216 E培养基组分进行了优化。结果表明:M-1菌株产最大活菌数的培养条件为:培养时间48 h、温度32℃、盐度40、初始pH值8.0、菌液起始浓度为1×105 CFU/mL;最佳培养基成分为:蛋白胨7.5 g/L、酵母浸出膏1.5 g/L、CuSO4 0.075 mg/L、CaCl2 0.04 g/L。

甲磺司特活性代谢物M-1的人体药代动力学

目的:研究甲磺司特活性代谢物4-(3-乙氧基-2-羟基丙氧基)-丙烯酰苯胺(M-1)在健康志愿者体内的药代动力学特征。方法:10名健康志愿者男女各半,单次及多次口服甲磺司特颗粒剂后,采用HPLC-MS法测定人血浆中甲磺司特活性代谢物M-1的浓度,计算药代动力学参数。结果:单次口服甲磺司特颗粒剂100 mg后,甲磺司特活性代谢物M-1的血药达峰浓度为(9.84±2.41)ng/mL;达峰时间为(3.0±1.3)h;AUC为(80.58±10.49)ng.h/mL;消除半衰期为(6.5±1.4)h。多次口服甲磺司特颗粒剂后,甲磺司特活性代谢物M-1的血药达峰浓度为(14.08±1.79)ng/mL;达峰时间为(2.5±1.2)h;AUC为(82.20±12.17)ng.h/mL;消除半衰期为(8.3±1.6)h。结论:多次给药后甲磺司特活性代谢物M-1的人体药代动力学参数与单次给药的药代动力学参数基本一致,AUC与tmax均与性别无关。

链霉菌M-1菌株所产抑菌活性物质特性的初步研究

用链霉菌M-1菌株所产的抑菌物质进行稳定性试验和极性试验,稳定性试验表明该菌株连续传代10次后遗传性稳定,且发酵液在100℃处理60 min,紫外线照射3 min和在碱性条件下处理后其对病原指示菌的抑菌活性基本不减。极性试验表明该物质属于弱碱性水溶性抗生素。本研究为进一步对该抑菌活性物质分离提取工艺和其在实践上的应用,提供了有益的试验数据。

地西他滨抑制SHP-1基因甲基化对MDS细胞株Skm-1增殖及凋亡影响

目的:探讨DCA作用于MDS细胞模型后的表型及分子机制,通过细胞增殖、侵袭迁移及细胞凋亡等多重维度研究化疗药物作用于MDS细胞后的反应,揭示DCA治疗MDS的分子机理及其与SHP-1基因甲基化的关系。方法:采用MTT法测定不同浓度DCA处理后的MDS细胞存活率,采用Transwell实验检测DCA对MDS细胞侵袭和迁移能力的影响,应用AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡情况,Western blot免疫蛋白印迹和real time PCR实验研究DCA治疗MDS的作用机制。结果:实验发现,DCA作用于MDS skm-1细胞能抑制肿瘤增殖,且2.0及5.0μmol/L DCA组相对0.5μmol/L DCA组与阴性对照组相比吸光度降低、抑制效应更加明显。与对照组比较,应用DCA后MDS skm-1细胞穿过Transwell上室底膜的数量显著下降。在0.5、2.0及5.0μmol/L DCA处理后,MDS细胞凋亡率依次为4.54%、9.31%及16.58%,对照组细胞凋亡率为3.20%。这表明,细胞凋亡率随DCA浓度显著增加。在经不同浓度DCA处理的MDS细胞系中,SHP-1基因甲基化状态随着药物浓度升高而减弱,SHP-1表达量升高,STAT3表达量减少,而STAT3磷酸化水平则受到明显抑制。结论:通过对DCA作用于MDS细胞后的表型反应分析,发现其主要通过抑制增殖和转移并诱导凋亡来干预MDS,并具有药物剂量依赖性,这揭示了DCA治疗能够改善SHP-1基因的甲基化进而抑制p-STAT3表达的分子机制。

体外循环心脏手术后尿mAlb、β_2-m和NAG、KIM-1与急性肾损伤的关系

目的:探讨体外循环心脏手术后尿微量白蛋白(mAlb)、β2-微球蛋白(β2-m)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肾损伤分子-1(KIM-1)与急性肾损伤(AKI)的关系。方法:根据AKI的诊断标准,将91例体外循环心脏手术患者分为AKI组和非AKI组,分别留取术前及术后不同时间点的血液和尿标本,测定尿mAlb、β2-m、NAG、KIM-1和Scr水平。结果:AKI组在手术后18h时间点尿mAlb、β2-m、NAG、KIM-1增高,四项指标联合应用,敏感度为84.38%、特异度为90.16%、阳性预测值为81.81%、阴性预测值为91.66%、阳性似然比为9.5、阴性似然比为0.09、诊断准确度为90.10%。结论:体外循环心脏手术后18h时间点mAlb和β2-m和NAG、KIM-1四项指标联合应用后,可早于血清肌酐30h～54h预测AKI的发生。

优良雄株SF-M-1研究初报

对雄性材料SF-M-1花期、花量、花径大小、花粉量等相关指标进行了综合观察测定。研究发现,SF-M-1在花期上与红肉新品种"红什1号"完全适配,且萌芽率、花枝率、母枝单位长度花枝数、每花枝着花数、花序数、花径大小、雄蕊数和花粉生活力等指标符合优良雄株选育目标,认为该雄株材料可入选为"红什1号"的适配雄株,将进一步开展授粉试验。

多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1环境释放安全评价

【目的】为了评价多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1的环境释放中间试验水平的安全性。【方法】通过农药检测、平板计数、Most probable number-PCR(MPN-PCR)和Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)等方法在江苏大丰进行了工程菌株m-CDS-1田间降解农药效果、定殖动态和对土壤微生物群落结构影响的研究。【结果】投加1.01×107CFU/g干土的工程菌株m-CDS-1在30d时均能完全降解10.71mg/kg的甲基对硫磷和1.29mg/kg的呋喃丹。平板计数表明工程菌株m-CDS-1在土壤中快速下降;MPN-PCR检测结果显示,在4d,15d和30d时,0～10cm混合土壤中该工程菌株的数目分别为2.15±0.98×106CFU/g干土,3.70±4.66×104CFU/g干土和检测不出。工程菌株m-CDS-1的投加不会对土壤可培养三大微生物菌群数量产生显著影响;基于细菌16S rDNA V3区的DGGE分析结果表明,施加农药对细菌菌落结构有显著影响,4d,11d,30d时农药施用区与空白对照区的图谱相似性分别为17.16%,49.81%和75.01%,但到60d时的相似性为98.62%。工程菌株m-CDS-1释放在前期对细菌群落结构有一定影响,4d,11d和30d工程菌株释放区相对于空白的相似性分别为49.57%,38.30%和83.30%。在60d时,空白、施药和施菌小区的图谱相似性都在90%以上。【结论】工程菌株m-CDS-1不仅可同时高效降解甲基对硫磷和呋喃丹,仍保持了实验室内的原有特性,而且不会成为优势菌群长期在土壤环境中存在,也不会对土壤微生物群落结构造成长期影响。

帕金森病SD大鼠模型的^(99)Tc^m-TRODAT-1放射自显影实验研究

目的:研究多巴胺转运蛋白(DAT)显像剂99Tcm-2β-[N,N’-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基3β-(4-氯苯基)托烷(99Tcm-TRODAT-1)用于帕金森病(PD)早期诊断的价值。方法:将SD大鼠分成三组:①正常组;②单侧帕金森病(PD)模型组(颅内单侧纹状体毁损);③多发性腔隙性脑梗死(简称多发性腔梗)模型组(颈动脉注射自体血栓术)。观察正常大鼠纹状体内99Tcm-TRODAT-1分布情况。比较各组纹状体99Tcm-TRODAT-1的摄取情况。结果:正常大鼠纹状体明显摄取99Tcm-TRODAT-1,单侧PD模型鼠毁损侧纹状体99Tcm-TRODAT-1摄取较健侧明显减少,多发性腔梗模型鼠的结果与正常组相似。结论:99Tcm-TRODAT-1显像剂被纹状体特异性摄取,能为PD病早期诊断提供有利依据。

^(99)TC^m-TRODAT-1 SPECT脑多巴胺转运体显像在帕金森病病情监测中的价值

为了探讨99TCm-TRODAT-1SPECT脑多巴胺转运体(Dopaminetransporter,DAT)显像在帕金森病病情监测中的价值,本研究对20例帕金森病(PD)患者组、14例正常组分别行99TCm-TRODAT-1SPECTDAT显像,利用感兴趣区(Regionofinterest,ROI)技术计算双侧纹状体与小脑的特异性放射性比值(ST/CB)及两侧纹状体特异性放射性摄取比值的不对称指数(AIPD、AICON),同时对PD患者进行UPDRS评分,以及改良Hoehn-Yahr法分级。结果显示PD患者双侧ST/CB均值与病情Hoehn-Yahr分级、UPDRS日常生活能力、运动功能评分呈显著负相关,AIPD与PD病程呈正相关;PD患者与正常对照组的不对称指数有显著性差异,前者高,后者低。因此,99TCm-TRODAT-1SPECT脑DAT功能显像能够监测PD的病情,反映PD病情的严重程度。

M-FISH用于骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1复杂核型的检测分析(英文)

本研究的目的是观察伴有5号染色体缺失的MDS细胞株MUTZ-1细胞的遗传学变化。首先采用R显带技术对染色体标本进行核型分析,再以Vysis Spectra VysionTMM-FISH作为探针,检测并分析其复杂异常核型。结果表明: M-FISH分析显示有明显的高频率染色体的易位、插入、断裂与重接、缺失、数目增多;染色体分析揭示核型为50, xx, der(1) t(1;2), ins(1;14), +der(2)t(2;19), der(3)t(3;5), der(3)(3::5::22), 5q-, der(6)t(3;6), der(7)(18::7::17), +8, +der(9)t(1;9), der(10)t(1;10), +11, +12, der(? 13)(10::13::5::8), der(14)t(8;14), der(14)t(14,15), der(15)t(15;21)×2, +17, +18,-21,-22.结论: MDS细胞株MUTZ-1在M-FISH检测下有显著复杂的核型变化;M-FISH能增加高度复杂的异常染色体检测的准确性,有助于MDS的诊断和预后评估。

蛋白酶体抑制剂可增加足叶乙甙对白血病细胞系M-07e和TF-1的凋亡诱导效应

近年来的研究显示泛素 蛋白酶体通路在细胞凋亡调控中发挥了重要的作用。本实验就蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO与经典的凋亡诱导剂足叶乙甙 (VP16)对白血病细胞系M 0 7e及TF 1的联合效应进行了初步研究。应用MTT法及台盼蓝拒染法显示Z LLL CHO及VP16联合作用于M 0 7e及TF 1细胞 ,可增强两种药物单独的细胞杀伤效应。流式细胞术检测提示单独应用Z LLL CHO及VP16均可使S +G2 /M期细胞比例增加 ,两者联合应用导致细胞凋亡峰比例的显著增高。通过对M 0 7e细胞裂解物做免疫印迹检测 ,发现在Z LLL CHO及VP16单独作用中均导致Bcl 2蛋白被酶解为 2 2kD的片段 ,而联合作用时Bcl 2的酶解现象具有叠加效应。结论 :Z LLL CHO与VP16联合作用较单独作用有更强的细胞杀伤及诱导细胞凋亡活性 ,细胞周期S +G2 /M期比例的增加及Bcl 2酶解片段的增加是导致蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO及VP16对白血病细胞系联合效应的可能机制。

^(99)Tc^m-TRODAT-1 SPECT脑多巴胺转运体显像在帕金森病和原发性震颤中的应用研究

目的探讨99Tcm-TRODAT-1 SPECT脑多巴胺转运体(DAT)显像在帕金森病(PD)和原发性震颤(ET)中的应用价值。方法对经我院确诊的51例PD患者,19例确诊为ET患者及11例正常人进行99Tcm-TRODAT-1 SPECT脑DAT显像。利用感兴趣区技术(ROI)计算PD患者、ET患者和正常人DAT对99Tcm-TRODAT-1的特异性摄取比值及两侧特异性放射性摄取比值的不对称指数(AIPD、AICON)。结果 1)正常对照组左右侧脑多巴胺转运体的特异性放射性摄取比值分别为1.633±0.088、1.623±0.0691,双侧对称,双侧比较无统计学意义(t=0.655,P=0.527),不对称指数为2.074±1.793。正常人双侧ST/CB均值的95%可信区间为1.577-1.678。2)ET患者左右侧脑多巴胺转运体的特异性放射性摄取比值分别为1.561±0.117、1.546±0.115,两侧基本对称,双侧比较无统计学意义(t=1.396,P=0.180),双侧ST/CB均值及不对称指数同正常人比较无统计学意义(t=1.934,P=0.063;t=-0.795,P=0.433)。ET患者双侧ST/CB均值的95%的可信区间为1.498-1.608。3)PD患者双侧ST/CB比值低于正常人ST/CB比值,具有统计学意义(t=-3.625,P=0.001,t=-4.968,P=0.000)。PD患者左右双侧ST/CB值的95%的可信区间分别为1.386-1.463、1.447-1.534。结论99Tcm-TRODAT-1 SPECT脑多巴胺转运体显像可鉴别帕金森病与原发性震颤,弥补CT、MRI等检查的不足,为临床治疗提供重要信息。

9%Cr-1%Mo耐热钢熔敷金属中M-A组元的研究

通过透射电镜,扫描电镜,光学显微镜以及X射线衍射(XRD)等试验方法,对9%Cr-1%Mo耐热钢熔敷金属焊态下的显微组织进行了观察和分析,观察到了一种新的显微组织,在以前的研究文献中从未提到过。通过对其显微组织进行相的鉴别,认定它是一种M-A组元,并运用焊接冶金理论对其形成及演变过程进行了分析。直接凝固残留的奥氏体的存在是形成M-A组元的必要条件,而后的在两相区内的焊接热作用是形成M-A组元的充分条件;在焊后热处理作用下M-A组元消失,其原因在于在回火热处理温度及一定的保温时间内,残余奥氏体中碳原子与合金元素结合形成碳化物,低碳或无碳的奥氏体转变成马氏体。