城市污水优势降解细菌M-6菌株液体营养条件的优化

通过正交实验和方差分析,对城市污水优势降解细菌M-6菌株液体营养条件进行了优化,其最适组成为:淀粉0.5%,牛肉膏0.6%,KNO3 0.4%,KH2PO4 0.3%,NaCl 0.5%。方差分析结果表明,各营养因子对生物量的影响均不显著,相比而言,KH2PO4的影响较大,且趋向于在较高的KH2PO4浓度下生长。这可能与其在污水处理中处于优势地位有关。

油包水(W/O)型微乳液中m-6菌木质素降解酶的研究

【目的】研究W/O十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)微乳液体系和HAc-NaAc缓冲液体系中,m-6菌株固态发酵后产生的胞外木质素降解酶漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)、锰过氧化物酶(Mnp)酶促反应的最佳反应条件。【方法】通过分别对Lip(以2,2′-连氮-二(3-乙苯基并噻唑-磺酸)为底物)、Mnp(以MnSO4为底物)和Lac(以藜芦醇为底物)3种木质素降解酶在W/O型CTAB微乳液体系和HAc-NaAc缓冲液体系中的酶活测定,研究不同温度、pH和底物浓度对酶促反应的影响,探讨最佳反应条件,并比较两种反应体系下的酶活。【结果】在W/O型CTAB微乳液体系中,Lip、Mnp和Lac 3种酶酶促反应的最佳条件为:温度37℃、pH分别为4.5,4.5和3.5;在HAc-NaAc缓冲液体系中,3种酶酶促反应的最佳反应条件为:温度37℃,pH分别为5.0,5.0和4.0;在两种反应体系中的最佳反应底物浓度相同,即藜芦醇、MnSO4、2,2′-连氮-二(3-乙苯基并噻唑-磺酸)浓度分别为0.053,0.116,0.492 mmol/L。在W/O型CTAB微乳液中,Lip和Mnp酶活比其在HAc-NaAc缓冲液体系中分别提高了81.45%和36.75%,但Lac酶活却减少了2.914倍。【结论】得到了Lac、Lip和Mnp酶3种木质素降解酶在W/O型CTAB微乳液体系和HAc-NaAc缓冲液体系中的最佳反应条件,为木质纤维素的生物降解奠定了基础。

假单胞菌M-6菌株对微囊藻毒素MC-LR的降解机理初探

研究了以假单胞菌M-6菌株对藻毒素MC-LR的降解机理。结果表明M-6菌株的胞外物质提取液对MC-LR没有降解能力,而胞内物质提取液60min能将15mg/mL的MC-LR降解92%。SDS-PAGE电泳发现经MC-LR诱导后M-6菌株胞内有三种蛋白的表达量增加,HPLC图谱显示在降解过程中产生了两种中间产物和两种终产物。

续苓健骨方调节骨组织m^(6)A甲基化机制研究

目的利用表观转录组学微阵列芯片技术检测续苓健骨方对绝经后骨质疏松症模型大鼠中骨组织mRNA的m^(6)A甲基化修饰和基因表达的变化。方法雌性SPF大鼠随机分为模型组、续苓健骨方组,采用去卵巢法构建绝经后骨质疏松症模型。治疗组以续苓健骨方药液进行灌胃给药,模型组给予等量生理盐水,运用MeRIP-qPCR和表观转录组学微阵列芯片技术,检测2组大鼠骨组织中mRNA的m^(6)A甲基化和表达水平变化,并对这些mRNA进行GO和KEGG分析,基于检测结果选取6个差异甲基化基因进行验证。结果与对照组相比,续苓组中差异表达的mRNA共有4479个,其中2298个上调,1497个下调;1215个基因m^(6)A甲基化修饰水平显著变化,其中592个高甲基化,623个低甲基化;联合分析发现,825个基因同时发生mRNA表达和m^(6)A修饰变化,433个m^(6)A高甲基化且mRNA表达上调,392个m^(6)A低甲基化且mRNA表达下调;GO和KEGG分析显示,m^(6)A高甲基化且表达上调的基因参与骨髓细胞分化、线粒体中释放细胞色素C、红细胞分化等过程;m^(6)A低甲基化且表达下调的基因参与甘油三酯分解代谢过程的调节、PPAR、磷脂酰肌醇、甲状腺激素、胆固醇代谢等信号通路;MeRIP-qPCR验证显示续苓组中Ggt1、Hps4、H1fx、Selp、Hras的相对m^(6)A甲基化水平高于对照组。结论续苓健骨方对绝经后骨质疏松模型大鼠骨组织中m^(6)A甲基化修饰影响显著,其中Ggt1、Hps4、H1fx、Selp、Hras等基因的m^(6)A甲基化修饰变化可能是其治疗绝经后骨质疏松症的机制之一。

毛冬青甲素对兔颈总动脉球囊损伤后炎性因子IL-6和M-CSF的影响

目的:观察毛冬青甲素(Ilexonin,IA)对兔颈总动脉球囊损伤后炎性因子IL-6、M-CSF的影响,为冠脉内介入治疗提供实验依据。方法:日本大耳白兔30只,高胆固醇饲料喂养4周后随机分为3组(每组10只):对照组,右颈外动脉切开后直接缝合切口;球囊扩张组,右颈外动脉切开并内膜球囊损伤后缝合动脉与伤口;IA治疗组,操作同球囊扩张组,缝合切口后静脉给予IA。三组实验兔继续高胆固醇饮食4周。术前1d,术后1d、1周、2周、4周采集血清,放免法测定白细胞介素-6(IL-6)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。取损伤血管段,病理观察动脉病理改变。结果:①球囊扩张组术后血清IL-6水平明显高于IA治疗组(P<0.05),且较IA治疗组恢复延迟;②IA治疗组术后血清M-CSF水平虽增高,但低于球囊扩张组(P<0.05),且恢复术前血清水平时间也较球囊扩张组明显提前(P<0.05);③血管内皮病理变化:颈动脉损伤后对照组内膜光滑,未见泡沫细胞;球囊扩张组内膜增厚,血管平滑肌细胞增生,可见较多泡沫细胞,管腔狭窄;IA治疗组较球囊扩张组泡沫细胞减少,管腔狭窄程度明显减轻。结论:IA能降低动脉内膜球囊损伤后炎性因子IL-6、血清M-CSF水平,并抑制被损伤内膜血管平滑肌细胞增生。

小柴胡汤对CFA大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、M-CSF作用的实验研究

目的基于治疗前后完全弗氏佐剂(CFA)大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、M-CSF的表达,探讨小柴胡汤(XCHT)治疗类风湿关节炎的机制。方法动物实验将SPF级健康成年雌性Wistar大鼠应用弗氏完全佐剂和牛Ⅱ型胶原制备大鼠类风湿关节炎CFA动物模型。根据随机数字表,将大鼠随机分为正常组、模型组、XCHT低剂量组、XCHT中剂量组、XCHT高剂量组、雷公藤多苷组。造模后分别按照药物干预方案, 2 mL/次,日3次灌胃,实验观察大鼠一般状态、关节炎状态及酶联免疫吸附测定大鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、M-CSF的含量。结果大鼠随着小柴胡汤剂量的增加,一般状态及关节炎状态改善。在血清炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、M-CSF检测方面,随着小柴胡汤剂量的增大,其表达逐渐降低,与模型组比较,小柴胡汤中及高剂量统计结果显示P<0.01,降低很显著。结论本研究显示小柴胡汤随着剂量的增加,可以改善CFA大鼠的一般状态及关节炎状态。小柴胡汤能够通过抑制炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、M-CSF的表达,抑制炎症反应,从而延缓骨破坏,为中药方剂治疗类风湿关节炎提供基础实验依据。

PLDD联合射频热凝术治疗腰椎间盘突出症的疗效及对血清6-keto-PGE1α、PLA2、M-ENK水平的影响

目的探讨经皮激光椎间盘减压术(PLDD)联合射频热凝术治疗腰椎间盘突出症患者的效果。方法选取收治的90例腰椎间盘突出症患者进行前瞻性研究,收集时间2016年3月至2017年5月,采用随机数字表法分为联合组45例(PLDD联合射频热凝术治疗)、对照组45例(仅给予射频热凝术治疗)。对比两组患者治疗前1周后、治疗1个月后、治疗3个月视觉模拟评分(VAS);治疗后的临床效果、治疗前后血清6-酮前列腺素E1α(6-keto-PGE1α)、磷脂酶A2(PLA2)、M型脑钠肽(M-ENK)水平。结果治疗前,两组患者的VAS评分差异无统计学意义(P>0.05);在治疗1周后、治疗1个月后、治疗3个月后两组患者的VAS评分较本组治疗前均显著降低(P<0.05),同时联合组的VAS评分均低于同一时间点对照组(P<0.05);联合组治疗后的临床疗效评价优于对照组患者(P<0.05);治疗前,两组患者的血清6-keto-PGE1α、PLA2、M-ENK水平差异无具有统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的血清6-keto-PGE1α、PLA2水平较本组治疗前均显著的降低(P<0.05),M-ENK较本组治疗前显著升高(P<0.05);治疗后,联合组的血清6-keto-PGE1α、PLA2水平均低于同一时间点对照组(P<0.05),M-ENK高于对照组(P<0.05)。结论 PLDD联合射频热凝术治疗腰椎间盘突出症较单用射频热凝术具有更显著的临床效果,可显著降低血清6-keto-PGE1α、PLA2水平,提高M-ENK水平。

基于METTL3介导的miR-29a-3p的m^(6)A修饰探讨平喘颗粒抑制气道上皮细胞泛凋亡治疗哮喘的机制研究

目的:观察平喘颗粒对METTL3介导的气道上皮细胞中miR-29a-3p的m^(6)A修饰的影响,明确其抑制哮喘气道炎症的分子机制。方法:16HBE采用LPS诱导(50 mg/L)构建细胞模型,并给予平喘颗粒含药血清和地塞米松进行干预。分别采用CCK8法检测细胞活性、ELISA法检测炎症因子(TNF-α、IL-6和IL-8)的含量和miR-29a-3p的m^(6)A修饰水平、Western blot检测METTL3与泛凋亡蛋白的表达和qRT-PCR检测METTL3与miR-29a-3p的表达。结果:与模型组相比,平喘颗粒能够显著增加16HBE的活力,抑制炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的含量,下调泛凋亡相关蛋白p-RIPK3、p-MLKL、cleaved Caspase-1、cleaved Caspase-3的表达和GSDMD-NT/FL-GSDMD与GSDME-NT/FL-GSDME的比值,差异均具有统计学意义(P<0.01)。此外,平喘颗粒能够显著上调细胞中miR-29a-3p和METTL3的表达水平,促进miR-29a-3p的m^(6)A修饰水平,与模型组相比差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:平喘颗粒主要通过METTL3增强miR-29a-3p的m^(6)A修饰水平,抑制气道上皮细胞泛凋亡,改善气道炎症。

GGR6号及M-3试剂在油松育苗上的对比试验

用M-3试剂、GGR6号+M-3混合试剂分别对油松种子浸种育苗,结果表明两种处理对油松苗木的生长都具有显著的促进作用,但GGR6号+M-3效果更好。

M-CSF对人外周血单核细胞诱生IL-6 IL-8及TNF-α的影响

本文研究了巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）刺激体外培养的正常人外周血单核细胞诱生ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－８，检测用培养上清ＥＬＩＳＡ法。结果显示：Ｍ－ＣＳＦ单独刺激单核细胞产生的ＴＮＦ－α效价较低，而与ＬＰＳ＋ＴＰＡ联合刺激则产生高效价的ＴＮＦ－α，动态观察中，１～７天有渐降的趋势。Ｍ－ＣＳＦ对ＩＬ－６。

慢性牙周炎患者牙龈组织中IL-6、IL-34和M-CSFR的表达及临床意义

目的:比较慢性牙周炎患者牙龈组织和健康牙龈组织中IL-6、IL-34及M-CSFR的表达水平,探讨IL-34在慢性牙周炎发病中的作用。方法:收集8例诊断为轻度慢性牙周炎患牙的牙龈组织和8例诊断为重度慢性牙周炎患牙的牙龈组织作为病例组,8例冠延长手术切除的牙龈组织作为对照组,应用实时荧光定量PCR检测IL-6、IL-34及M-CSFR mRNA的表达;应用蛋白免疫印迹检测IL-6、IL-34及M-CSFR蛋白的表达。使用GraphPad Prism 6.0对结果进行统计学分析。结果:IL-6、IL-34、M-CSFR mRNA及蛋白在慢性牙周炎牙龈组织中的表达水平均显著高于正常牙龈组织中的表达(P<0.05)。结论:IL-6、IL-34及M-CSFR的表达可能与慢性牙周炎密切相关。

m^(6)A修饰对药物代谢酶和药物转运体的调控作用

m^(6)A修饰是RNA甲基化修饰中最丰富的一种修饰,受甲基转移酶和去甲基化酶的动态调控,被m^(6)A识别蛋白识别并结合后可影响mRNA的剪切、稳定性和翻译等生物学过程来调控靶基因的表达。最近的研究发现,m^(6)A修饰可通过多种途径来调控药物代谢酶和药物转运体表达,进而影响机体对药物的代谢速率或影响细胞中的药物浓度,最终导致药物治疗效果发生变化。该文综述了m^(6)A修饰调控药物代谢酶和药物转运体分子机制的研究进展,以期为临床上的合理用药、个体化用药提供新思路。

m^(6)A甲基化修饰在女性生殖系统中的作用及研究进展

N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰是RNA中最丰富的表观遗传修饰方式,动态可逆地调控各种生命过程。近期研究表明,m^(6)A甲基化修饰及其调控因子在卵泡发育过程中必不可少,m^(6)A甲基化修饰失调会导致女性生殖系统疾病,包括多囊卵巢综合征、早发性卵巢功能不全、卵巢衰老甚至宫颈癌、子宫内膜癌和卵巢癌等妇科恶性肿瘤。本文对m^(6)A甲基化修饰作用于卵泡发育过程和女性生殖系统疾病发生发展过程的相关研究进展作一综述,系统介绍m^(6)A甲基化酶及其调控因子在卵泡发育和生殖系统疾病发生发展中的作用机制,旨在为女性生殖系统疾病预防、早期诊断和治疗提供新的检测方法和研究方向。

支气管哮喘患儿治疗前后血清IL-6、IL-10和GM-CSF检测的临床意义

目的:探索了支气管哮喘患儿治疗前后血清IL-6、IL-10和GM-CSF水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析对33例支气管哮喘患儿进行了治疗前后血清IL-6、IL-10和GM-CSF测定,并与30名正常健康儿作比较。结果:支气管哮喘患儿在治疗前后血清IL-6、IL-10和GM-CSF水平均非常显著地高于正常儿(P<0.01),经治疗三个月后则与正常儿组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测血清IL-6、IL-10和GM-CSF水平变化对支气管哮喘患儿的治疗、预后均具有重要的临床价值。

IL-37通过调控M-CSF和抑制IL-6-JAK2/STAT3信号通路抑制骨质疏松的机制研究

目的:探讨IL-37在抑制骨质疏松过程中的作用机制。方法:选取本院2013年1月至2015年12月收治的97例骨质疏松患者及在本院行骨折手术的81例无骨质疏松患者(对照组)为研究对象,检测两组血清中IL-37及IL-6的水平。构建IL-37转基因小鼠,将C57BL/6J小鼠、IL-37转基因小鼠分别设置假手术(Sham)组,手术组(卵巢切除术,OVX组)。8周后,取小鼠血清,检测血清中雌激素水平、碱性磷酸酶水平(ALP)、血钙和血磷水平;同时取小鼠的双侧股骨、脊柱,病理切片分析股骨组织形态结构,骨密度仪检测脊柱骨密度变化。分离培养各组小鼠骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs),检测BMSCs的体外增殖能力,M-CSF及IL-6的表达及STAT3的激活。IL-37转染小鼠成骨细胞MC3T3-E1,转染后72 h,ELISA检测上清中M-CSF及IL-6,流式细胞术检测MC3T3-E1细胞的凋亡,Western blot检测STAT3的激活。结果:骨质疏松患者血清中IL-37水平显著低于对照组(P<0.05),而IL-6则显著高于对照组;C57BL/6J小鼠、IL-37转基因小鼠OVX组血清中雌激素、血钙和血磷显著低于假手术组,而ALP水平显著高于假手术组(P<0.05),但IL-37转基因小鼠OVX组血钙和血磷则显著高于C57BL/6J小鼠OVX组(P<0.05)。股骨病理切片及脊柱骨密度结果显示,C57BL/6J小鼠、IL-37转基因小鼠OVX组均出现组织形态结构的破坏和骨密度下降,但IL-37转基因小鼠明显优于C57BL/6J小鼠(P<0.05)。IL-37转基因小鼠OVX组BMSCs增殖能力显著高于C57BL/6J小鼠OVX组,而STAT3的激活和M-CSF的表达则显著低于C57BL/6J小鼠OVX组(P<0.05)。MC3T3-E1细胞转染IL-37后能明显抑制M-CSF及IL-6的表达,而STAT3的激活也明显被抑制,流式细胞检测显示转染IL-37后能显著抑制MC3T3-E1细胞的凋亡。结论:骨质疏松患者血清IL-37水平显著降低,IL-37可能是通过调控M-CSF及IL-6-JAK2/STAT3信号通路促进BMSCs增殖和抑制成骨细胞的凋亡从而抑制骨质疏松的进展。

子宫内膜异位症患者治疗前后血清hs-CRP、IL-6、IL-8和M-CSF测定的临床意义

目的:探讨了子宫内膜异位症患者治疗前后血清hs-CRP、IL-6、IL-8和M-CSF水平的变化及临床意义。方法:采用放射免疫分析和免疫比浊法对33例子宫内膜异位症患者进行了血清hs-CRP、IL-6、IL-8和M-CSF测定,并与35名正常健康人作比较。结果:在治疗前血清hs-CRP、IL-6、IL-8和M-CSF水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),经系统治疗后3个月,则与正常人比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测子宫内膜异位症患者血清hs-CRP、IL-6、IL-8和M-CSF水平的变化对探讨其发病机理、预防和指导用药均具有重要的临床价值。

m^(6)A相关基因在激素性股骨头坏死中的生物信息学分析

背景:m^(6)A修饰与股骨头坏死的发生发展相关,但在激素性股骨头坏死中的作用尚不清楚。目的:基于GEO数据库,采用生物信息学方法分析激素性股骨头坏死中表达差异的m^(6)A基因及互作miRNAs,探寻其潜在发病机制。方法:在GEO数据库中检索并下载与激素性股骨头坏死相关的mRNA表达谱数据集(GSE123568),通过R软件对数据集进行差异基因筛选及GO功能、KEGG通路富集分析。识别差异基因中的m^(6)A差异表达基因(m^(6)A-DEGs)并对其进行GO功能与KEGG通路富集分析,比较m^(6)A-DEGs的表达量并分析它们之间的相关性。最后通过Cytoscape构建m^(6)A-DEGs的PPI互作网络及筛选核心基因。使用TargetScan,miRTarBase和miRBD数据库预测m^(6)A-DEGs相关的潜在miRNAs,同时使用ChIPBase及hTFtarget数据库预测7个核心基因潜在转录因子,然后分别构建m^(6)A-miRNA与转录因子m^(6)A调控网络。最后使用数据集GSE74089验证7个核心m^(6)A-DEGs的表达水平。结果与结论:①从数据集中共筛选出2460个差异表达的基因,其中1455个上调,1005个下调。②从数据集中筛选出了14个m^(6)A-DEGs,包括3个下调和11个上调基因,m^(6)A-DEGs在激素性股骨头坏死中的表达具有显著差异(P<0.05),Spearman分析表明它们之间具有一定相关性。③m^(6)A-DEGs的GO和KEGG富集分析主要集中在骨髓细胞分化与发育、免疫受体与细胞因子受体活性、破骨细胞分化、AMPK与白细胞介素17信号通路。④m^(6)A-DEGs前7个核心基因包括YTHDF3,YTHDF1,YTHDF2,ALKBH5,METTL3,HNRNPA2B1及HNRNPC,它们在miRTarBase,miRDB和TargetScan数据库中共有44个miRNA重叠,在ChIPBase及hTFtarget数据库中共有79个重叠转录因子。⑤在GSE74089数据集中有6个核心m^(6)A-DEGs的表达水平与GSE123568数据集一致。⑥结果证实,根据生物信息学方法筛选的7个m^(6)A-DEGs可能通过调控多个miRNA、转录因子和AMPK及白细胞介素17信号通路表达,进而影响激素性股骨头坏死中骨髓细胞分化发育与破骨细胞分化,为进一步深入研究激素性股骨头坏死的发病机制和靶向治疗提供了数据支持和研究方向。

N6-甲基腺苷修饰和circRNA调控家禽卵泡发育的研究进展

家禽卵泡发育受多种因素调控,卵泡的发育直接决定个体的产蛋性能和经济价值,因此了解家禽卵泡发育相关的调控机制具有重要经济价值和研究意义。在真核生物中N6-甲基腺苷(N6-Methyladenosine,m^(6)A)修饰广泛地作用于RNA,此过程受m^(6)A甲基化转移酶、结合酶和去甲基化酶的调控参与多种生理、病理过程。环状RNA(circular RNA,circRNA)由前体mRNA(Pre-mRNA)剪接产生,其功能和代谢受m^(6)A调控。circRNA可充当小分子RNA(Micro RNA,miRNA)海绵、作为模版翻译多肽以及调控胞内转运,m^(6)A修饰的circRNA可参与真核生物细胞内的多种调控,如癌细胞的转移、细胞凋亡等。已有研究表明,circRNA对家禽卵泡发育具有重要调控作用,同时m^(6)A修饰及其相关多种酶也被证明参与家禽卵泡发育的调控。本文主要综述了m^(6)A、circRNA对家禽卵泡发育的影响,以及二者联合调控卵泡发育的研究进展,以期为进一步解析m^(6)A甲基化修饰和circRNA在家禽卵泡发育过程中的作用提供理论依据。

局麻和全麻对病人血清IL-6、IL-8和M-CSF水平影响的初步探讨

目的:探讨了局麻和全身麻醉对手术病人血清IL-6、IL-8和M-CSF水平的影响。方法:根据不同的麻醉方法将68例胃部手术病人分为硬膜外麻醉组(A组)和静吸复合全麻组(B组),每组34例。在麻醉诱导前、手术切皮和手术开始后1h抽取静脉血3ml,分别测定血清IL-6、IL-8和M-CSF浓度。结果:A组血清IL-6、IL-8和M-CSF含量在切皮和术中1h与术前比较有显著性差异(P<0.05);B组血清IL-6、IL-8和M-CSF含量无显著性差异(P>0.05);在切皮和术中1h,B组IL-6、IL-8和M-CSF含量比A组含量低(P<0.05)。结论:静吸复合麻醉能明显降低IL-6、IL-8和M-CSF浓度,有一定的临床实用价值。

m^(6)A甲基化在心肌梗死后心肌重构发病机制中的研究进展

心肌梗死是心力衰竭最常见的病因,心肌梗死后可发生心肌重构,从而促进心力衰竭的进程。心肌梗死后心室重构的发生与m^(6)A甲基化密切相关。m^(6)A甲基化是一个可逆的高度动态变化的过程。该过程主要受m^(6)A甲基化正负调控酶的介导,并通过细胞自噬等机制参与心肌梗死后心肌重构的发生。该文主要围绕近年来相关文献进行梳理,首先对m^(6)A甲基化作以简介,然后对m^(6)A甲基化酶调控心肌重构的作用进行介绍,最后从自噬、炎症、细胞凋亡、钙离子稳态、细胞外基质重塑和铁死亡等方面对m^(6)A甲基化调控心肌重构的机制作总结性分析,并讨论了m^(6)A甲基化血清学检测作为诊断心肌梗死后心肌重构的可行性,以期为相关研究提供参考。