深山含笑叶片的挥发油成分及其生物活性研究

采用水蒸气蒸馏法及GC-MS联用技术提取并分析了深山含笑(Michelia maudiae Dunn)叶片的挥发油成分,并用杯碟法和Alamar blue法检测了其抑菌和抗肿瘤生物活性。从深山含笑挥发油中共分离出45种化合物,并鉴定出其中37种化合物,占挥发油总相对含量的97.8%;挥发油主要成分有莰烯(16.575%)、β-蒎烯(15.857%)、D-柠檬烯(12.653%)、丁香烯(11.923%)、1R-α-蒎烯(6.855%)及橙花叔醇(5.199%)等。该挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphalococus aureus Rosenbach)和红酵母(Rhodotorula glutinisTrans.)有一定的抑制能力;对人非小细胞肺癌细胞(NCI-H460)有较强的抑制作用,浓度为100 mg.L-1,抑制率可达98.89%以上。

深山含笑和乐昌含笑叶片挥发油的成分分析及性能测定

采用超临界二氧化碳萃取法提取深山含笑和乐昌含笑叶片挥发油,应用GC-MS技术测定挥发油的成分并对其DPPH自由基清除能力和还原能力等抗氧化指标进行测定。结果表明:深山含笑萜类为35.35%,酯类为15.12%,醇类为9.09%,其余37.02%为萜烯类含氧衍生物。乐昌含笑萜类为28.49%,酯类为11.12%,醇类为1.94%,其余54.55%为萜烯类含氧衍生物。两种含笑叶片挥发油质量浓度为50mg/L时DPPH自由基清除能力达到饱和,且挥发油质量浓度越大还原能力越强。通过与常用抗氧化剂进行比较,发现两种含笑叶片挥发油的抗氧化能力均强于植酸PA没食子酸丙酯PG和抗坏血酸Vc。

不同光强下含笑叶绿素荧光特性研究

测定研究了不同光照强度下,含笑的最大量子效率(PSII)和实际量子效率(ΦPSII)等叶绿素荧光参数的变化规律,及其对光照强度的适应特征。结果表明,随着日间光强的增大,叶片PQ还原程度和非光化学猝灭(NPQ)增加,ΦPSII则下降,但后者午后随着光强的下降可得到完全恢复;叶片吸收光能分配于光化学反应的比例随着光强的增大而迅速减少;而天线色素耗散部分及反应中心过剩的光能则显著增加,在午后光强减弱后两者均可恢复到早晨的初始水平。在弱光条件下,其叶片PQ还原程度、NPQ以及ΦPSII均无明显变化,叶片吸收光能也主要用于光化学反应,热耗散及过剩光能比例均较低。

深山含笑引种苗期试验初报

育苗试验表明，原分布在中亚热带的深山含笑基本能适应北亚热带南京地区的气候，正常生长发育。其种子发芽出土、形成幼苗需要较高积温，在塑料薄膜棚内，约需４０ ｄ。苗期生长呈单峰“∧”字形，４～６ 月生长缓慢，生长量占全年１４－４ ％ ；７ ～９ 月速生，生长量占全年８１－６ ％ ；８ 月生长量呈现峰值，占全年３９－９ ％ ；１０ ～１１ 月生长趋于停滞。１ ａ 生苗高１１－５ ～２９－０ ｃｍ ，平均高２３－４ ｃｍ ；２ ａ生苗高６５ ～１０６ ｃｍ ，平均高９４－０ ｃｍ 。苗木不耐寒，在－ ４ ℃自然低温时，１ ａ 生苗寒害率达３０％ ，需采取防寒措施。叶面喷施硼、锌、锰、镁等微量元素和磷钾肥液，能显著促进生长，减轻寒害。苗木高生长与气温、日照、蒸发量关系密切，适当减少日照，降低蒸发，增温保湿是保障引种的关键。

深山含笑叶挥发油的化学成分及生物活性测定

[目的]研究深山含笑叶挥发油的化学成分,进行体外抑菌是固体试验和抗肿瘤试验研究。[方法]深山含笑鲜叶经过水蒸汽蒸馏得1种淡黄色精油,采用气-质联用法对深山含笑水提物的化学成分进行了研究,用杯碟法和AlamarBlue法进行生物活性研究。[结果]经毛细管色谱分析分离,共确认出其中34种成分,所鉴定出化学成分的质量占总量的90.10%以上,应用色谱峰面积归一法分析各成分的质量分数,其主要化学成分是莰烯(10.030%)、(-)-β-蒎烯(8.826%)、柠檬油(7.935%)、丁子香烯(12.457%);并发现其化学成分对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,对大肠杆菌、红酵母无明显作用。在浓度为100μg/ml对肺癌细胞有较强的抑制作用,抑制率为98.91%±7.90%。[结论]该研究为深山含笑作为优良生态保健树种和药源研究提供了科学依据。

深山含笑叶挥发油的化学成分研究

深山含笑为我国的珍贵稀有树种.深山含笑鲜叶经过用水蒸汽蒸馏得到一种淡黄色精油,得率为1.00％～1.13％.本文用经典方法测定了该挥发油的理化性质,并用毛细管气相色谱、红外光谱、核磁共振波谱和色谱-质谱-计算机联用技术等对该挥发油进行了系统的成分分析.在分出的62个色谱峰中,共鉴定出49个化合物,占精油总量的99.31％.其主要化学成分是α-(艹守)烯(17.03％),3,6.6-三甲基-2-降蒎烯(43.80％),6,6-二甲基-3-亚甲基降蒎烷(17.18％),α-龙脑烯(9.35％),芳樟醇(1.30％),β-石竹烯(2.87％)等.本研究为合理开发这一资源提供了科学评价和依据.

木兰科四种植物种子油的提取及脂肪酸成分分析

采用超声波辅助提取法和微波辅助提取法同时提取白玉兰、凹叶厚朴、深山含笑和醉香含笑四种木兰科植物的种子油,种子油甲酯化后,运用气相色谱—质谱联用技术测定其脂肪酸成分。结果表明:四种植物种子油的提取率不同,白玉兰平均为27.35%、凹叶厚朴23.34%、深山含笑31.66%,醉香含笑9.27%。不同提取方法所得到的种子油脂肪酸成分和相对含量不同,但四种种子油的主要脂肪酸成分相同,包括油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸。

深山含笑叶片总酚超声波提取工艺的优化

采用单因素实验方法研究了超声波辅助提取过程中乙醇浓度、料液比、提取温度和提取时间对深山含笑(Michelia maudiae Dunn)叶片总酚提取率的影响,并采用正交实验方法确定了最佳提取工艺条件。结果表明,深山含笑叶片总酚超声波辅助提取的最佳提取工艺为:按1∶30(质量-体积比)的料液比加入体积分数70%的乙醇,于65℃条件下用超声波辅助提取30 min。采用最佳的超声波提取工艺,深山含笑叶片的总酚提取率可达到11.41%。定性分析结果显示,深山含笑叶片的总酚提取物具有典型的酚类化合物特性,并显示出鞣质类成分、黄酮类成分和香豆素类成分的定性反应特征。

三种含笑属植物花挥发物的原位显微拉曼光谱检测

用油细胞原位拉曼光谱检测方法,直接获得了白兰花、深山含笑、黄花含笑油细胞的拉曼光谱,通过分析研究得出其主要挥发物。白兰花盛花油细胞中的主要挥发物为:芳樟醇、β-蒎烯、没药醇、香芹酮、α-松油烯、β-榄香烯。深山含笑盛花、花蕾油细胞中的主要挥发物为:甲氧基肉桂酸乙酯、对伞花烃、香茅醇。黄花含笑小花蕾、花蕾、盛花油细胞中的主要挥发物为:香芹酮、α-蒎烯、β-蒎烯、反式-反式-金合欢醇;对伞花烃、甲氧基肉桂酸乙酯、反式-反式-金合欢醇;甲氧基肉桂酸乙酯、反式-反式-金合欢醇。

我国木兰科含笑属一新变种

本文发表了我国木兰科含笑属一新变种,它被命名为M ichelia maudiaeDunn var.rubicundaY i et J.C.Fan。

深山含笑对酸雨胁迫的适应性研究

应用模拟酸雨溶液喷洒法和石蜡切片技术,研究了深山含笑幼苗在不同pH值(2.0,3.0,4.0,5.6(对照))的酸雨溶液胁迫下的生长情况(叶面积、苗高、根长等)和叶片解剖结构变化。结果表明:pH<3.0的酸雨溶液严重抑制幼苗的生长,植株出现明显的伤害症状,大量的苗木出现死亡;显微结构观察显示,叶表皮及叶肉细胞结构均受损或坏死。与对照相比,pH≥3.0的酸雨溶液处理对苗木的伤害较轻,可见性伤害症状不明显,显微观察结果显示仅表皮细胞受损。从生长指标来看,pH≥3.0的酸雨溶液对苗木生长有促进作用,呈正生物效应。

深山含笑嫁接技术研究

对深山含笑苗圃嫁接时期、嫁接方法进行了研究。结果表明 :在用白玉兰作砧木嫁接深山含笑时 ,在各个时期进行嵌芽接的嫁接成活率均很低 ;枝接以 3月中下旬最理想。其中 :带顶芽切接成活率在 95 8% ,其次是不带顶芽包头切接 ,成活率达 85 0 % 。

深山含笑在惠州的引种试验

深山含笑在惠州的引种试验,结果表明深山含笑在惠州生长适宜,在惠州值得推广种植.

深山含笑大、小孢子发生和雌、雄配子体发育研究

采用石蜡切片技术对深山含笑大、小孢子的发生和雌、雄配子体发育进行观察:深山含笑花药4室,花药囊壁由5-7层细胞构成,腺质绒毡层,小孢子胞质分裂为修饰性同时型,四分体有四面体型、对称型,偶有交叉型,成熟花粉为2细胞型;胚珠倒生、双珠被、厚珠心,大孢子四分体直线型排列,合点端为功能大孢子、雌配子体发育方式为蓼型。从雌、雄配子体发育时间的先后来看,深山含笑春季雌、雄配子体能正常发育,雄蕊先熟,雄蕊和花瓣凋谢后雌蕊大孢子母细胞才形成。而秋季开花的深山含笑,花药中小孢子在孢原细胞或初生造孢细胞期停止发育,花粉败育;雌蕊胚珠珠心组织也未见大孢子母细胞发育,开花后雌蕊随花柄凋落。该研究为深山含笑生殖发育和杂交育种积累了资料。

深山含笑1年生播种苗生长发育规律及育苗技术研究

[目的]找出深山含笑1年生播种苗的年生长发育规律,培育出优质健壮的深山含笑苗木。[方法]通过深山含笑播种育苗试验,应用有序样本聚类分析法将深山含笑1年生播种苗苗高生长过程分为出苗期、生长期、速生期和生长后期4个时期,分析各生长期生长情况。[结果]从种子发芽出土到6月期间生长慢,7月生长速度中等,11～12月生长较慢甚至停止生长。[结论]根据深山含笑速生期的生长特点,应在速生期的前1个月追肥,并加强水肥管理及病虫害防治。

深山含笑叶过氧化物酶对双酚A清除效应研究

深山含笑是一种常绿乔木,具有较好的园林观赏价值,其叶片在每年春天新旧叶交替时,会陆续凋落而不能实现其经济价值;我们前期研究发现深山含笑成熟叶片具有较高的过氧化物酶活性,而过氧化物酶在内分泌干扰物生物酶法降解途径中发挥着重要作用。为充分开发深山含笑叶的经济价值,提高资源的利用效率,我们对深山含笑叶过氧化物酶进行了纯化并初步研究了其性质;在此基础上,进一步研究了深山含笑叶过氧化物酶在降解环境污染物双酚A上的特性。结果显示,经过非离子表面活性剂(吐温-80)抽提、双水相萃取、DEAE-Sepharose离子交换层析,首次从深山含笑叶片中快速分离提纯结合态过氧化物酶,相对可溶性过氧化物酶纯化倍数为55. 2倍,回收率为19%。该酶的比活力为18 999 U/mg蛋白,以愈创木酚为反应底物的最佳pH值为4. 5,最适温度为50℃;具有较宽的pH稳定范围,热稳定性较好,60℃以下不易失活。深山含笑叶过氧化物酶对BPA具有良好的清除能力,在pH4～7,温度30～40℃,H2O2/BPA摩尔浓度之比达0. 8条件下,经过3 h,10 000 U/L POD对0. 2 mmol/L BPA清除率达90%以上,深山含笑过氧化物酶在酚类物质生物酶法催化降解途径中具有潜在的重大利用价值。

中国特有观赏树种深山含笑的花部变异

为了更好地掌握中国特有观赏树种深山含笑（Michelia maudiae Dunn）的花部变异情况,探讨其遗传育种学意义,试验对昆明树木园内栽培的10株深山含笑的65朵花花部的花器数量、大小及形态性状变异进行了观测和统计分析。结果表明,深山含笑花部花器的数量、大小及形态性状均有变异。花短枝具佛焰苞状鳞片3～5枚、花被片8～12片、雄蕊47～97枚、心皮15～42枚、每心皮胚珠2～13粒;花短枝节间长0.09～2.23 cm,花梗长0～0.34 cm,花被片长4.33～8.72 cm、宽1.27～5.49 cm,雄蕊长1.00～2.34 cm、药室长0.47～1.82 cm、药隔长0.06～0.35 cm,心皮长0.36～0.77 cm、柱头长0.2～0.5 cm;花托淡绿色、黄白色或紫红色,花被片倒卵圆形、匙形、卵圆形、披针形,白色或微黄,有时有黄或紫红晕,花柱顶部红色或紫红色。花部数量性状的变异系数为7.24%～792.39%,其中叶状鳞片数（244.23%）、第四轮花被片数（792.39%）变异颇大;花部大小性状的变异系数为13.99%～72.28%,花梗长（72.28%）的变异较大;形态性状的变异系数为20.01%～55.64%,变异主要发生在花朵晕色（48.79%）、花被片晕色（50.60%）和花被片形状（55.64%）等。经方差分析表明,深山含笑的花部变异主要存在于株间,并且形态多样性较为丰富,为观赏优良单株或新品种的选育提供了可能和宝贵的基础数据。

深山含笑幼苗生长节律研究

对深山含笑一年生幼苗苗高和地径生长过程进行定期观察研究,应用有序聚类分析法将苗高生长分为4个时期:出苗期3月8日～5月8日;生长初期5月8日～7月9日;速生期7月9日～9月17日;生长后期9月17日～11月30日。